DB50T 1692-2024 玉簪組培快繁技術(shù)規(guī)程

ICS65.020CCSB62DB502024—10—08發(fā)布重慶市市場監(jiān)督管理局發(fā)布IDB50/T1692—2024本文件按照GB/T1.1―2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由重慶市農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出。本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會(huì)歸口并組織實(shí)施。本文件起草單位：重慶市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、重慶市巴南區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣站。本文件主要起草人：韓垚、王忠偉、秦小婷、王紅娟、謝樹章、楊小艷、吳紅。DB50/T1692—2024玉簪組培快繁技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了玉簪組培快繁所需主要設(shè)施設(shè)備、組培快繁操作流程、煉苗、組培苗移栽、養(yǎng)護(hù)管理、生產(chǎn)記錄及檔案管理等技術(shù)要求。本文件適用于玉簪種苗組培快繁。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則NY/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義NY/T2306確立的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1玉簪Hostaplantaginea天門冬科玉簪屬植物統(tǒng)稱，多年生草本。3.2組織培養(yǎng)Tissueculture又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織。器官或細(xì)胞，原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。3.3煉苗Acclimatization在保護(hù)地育苗的情況下，采取放風(fēng)、降溫、適當(dāng)控水等措施對幼苗強(qiáng)行鍛煉的過程。4縮略語下列縮略語適用于本文件。6-BA：6-芐基腺嘌呤（6-benzylaminopurine）IBA：吲哚丁酸（3-indolebutyricacid）MS：一種常用基本培養(yǎng)基（Murashige和Skoog（1962））NAA：萘乙酸（naphthyleneaceticacid）2DB50/T1692—2024Tween-20：聚氧乙烯失水山梨醇單月桂酸酯（Polyoxyethy-lene(20)SorbaitanMonolaurate）5主要設(shè)施設(shè)備5.1設(shè)施包括準(zhǔn)備室、滅菌室、更衣室、風(fēng)淋室、接種室、培養(yǎng)室、馴化室等。5.2儀器設(shè)備包括實(shí)驗(yàn)設(shè)備、滅菌設(shè)備、接種設(shè)備、培養(yǎng)設(shè)備等。6組培快繁操作流程6.1接種前準(zhǔn)備6.1.1培養(yǎng)基配制實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682的要求。培養(yǎng)基配制按照NY/T2306的要求執(zhí)行，所用培養(yǎng)基配方如下：a）芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.5mg/L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂，pH值為5.6～5.8；b）增殖培養(yǎng)基：MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂，pH值為5.6～5.8；c）生根培養(yǎng)基：1/2MS+0.5mg/LIBA+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂，pH值為5.6～5.8。6.1.2接種人員準(zhǔn)備穿戴實(shí)驗(yàn)服、醫(yī)用手套和口罩，經(jīng)風(fēng)淋室后進(jìn)入接種室，在操作前和操作中使用75%酒精棉球消毒。6.1.3超凈工作臺(tái)消毒打開超凈工作臺(tái)紫外燈照射30min，啟動(dòng)風(fēng)機(jī)，打開接種用電熱滅菌器，用75%酒精擦拭超凈工作臺(tái)臺(tái)面。6.2外植體預(yù)處理6.2.1外植體的選擇選擇長勢健壯、無病蟲害的優(yōu)良植株，取其新長出的1cm～2cm嫩芽為外植體。6.2.2外植體消毒消毒處理過程如下：a）切除暴露在外的葉片，用洗衣粉水將外植體表面清洗干凈，流水沖洗30min～60min；b）用75%酒精浸泡消毒30s～60s；c）無菌水沖洗2遍；d）0.1%HgCl2溶液加1～2滴Tween-20消毒10min～15min，期間不斷搖動(dòng)；e）無菌水沖洗5～6次，無菌濾紙吸干水分。6.3組培快繁育苗6.3.1初代培養(yǎng)DB50/T1692—2024用解剖刀將消毒處理后的外植體外層葉片剝掉，接種到芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，初代培養(yǎng)外植體每瓶宜接種2～3個(gè)。培養(yǎng)室溫度保持在（25±1）℃,光照強(qiáng)度2000lx～3000lx，光暗交替12h，誘導(dǎo)時(shí)間為40d～60d。6.3.2繼代增殖用解剖刀將叢生芽的黃葉和原有的培養(yǎng)基去除干凈，分割并接種到繼代增殖培養(yǎng)基上，繼代增殖每瓶宜接種6～8株。培養(yǎng)室環(huán)境同初代培養(yǎng)，30d繼代1次。6.3.3生根培養(yǎng)將叢生芽分割成單芽，接種在生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根，每瓶宜接種8～10株。培養(yǎng)室環(huán)境同初代培養(yǎng)。7煉苗7.1組培苗質(zhì)量要求植株應(yīng)健壯挺拔、形態(tài)完整，株高2.5cm～5.0cm，葉數(shù)3～5片，幼苗基部長出3條以上、長1cm~3cm的新根，根系粗壯有活力。7.2煉苗方法將符合7.1要求的瓶苗移出培養(yǎng)室，瓶中加入少量水，松蓋煉苗2d～3d，馴化室溫度保持在20℃~28℃,光照強(qiáng)度在3000lx～5000lx之間。8組培苗移栽8.1基質(zhì)準(zhǔn)備宜采用泥炭土和珍珠巖（或蛭石）按4:1比例配制。8.2移栽方法將組培苗根部培養(yǎng)基清洗干凈，用0.2%的多菌靈+0.1%生根粉混合溶液浸泡2min～5min，栽至裝有基質(zhì)的穴盤中，用0.2%的多菌靈+0.1%生根粉溶液澆透基質(zhì)。9養(yǎng)護(hù)管理9.1溫度培養(yǎng)室溫度控制在20℃~25℃。9.2濕度移栽后，宜用薄膜和遮陽網(wǎng)保濕遮光，保持空氣濕度在70%～80%。9.3光照培養(yǎng)室光照強(qiáng)度保持在3000lx～5000lx之間。移栽14d后，逐漸打開薄膜和遮陽網(wǎng)。9.4肥水管理4DB50/T1692—2024移栽14d內(nèi)，采用噴霧補(bǔ)水，以后采用噴淋澆水