生物自我小測：專題課題土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)

學必求其心得，業(yè)必貴于專精學必求其心得，業(yè)必貴于專精學必求其心得，業(yè)必貴于專精自我小測1．耐冷菌是生活在低溫環(huán)境下的一類微生物，在0~5℃可生長繁殖，最高生長溫度一般在30℃A．耐冷菌參與代謝的酶在低溫下仍具有較高的催化活性B．不同取樣地點相比較，北方寒冷地區(qū)水土中較易分離出耐冷菌C．探究耐冷菌生活的最適溫度，自變量應為溫度，無關變量應相同且適宜D．分離純化耐冷菌的過程中，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過消毒處理后才能丟棄2．用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設置的對照是(）A．未接種的選擇培養(yǎng)基 B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 D．接種了的選擇培養(yǎng)基3．用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù).原因是(）A．平板上的一個菌落就是一個細菌B．菌落中的細菌數(shù)是固定的C．此時的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌D．此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)一定與活菌的實際數(shù)相同4．在做分離分解尿素的細菌實驗時,A同學從對應106培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的結果產(chǎn)生原因不可能有（)A．土樣不同 B．培養(yǎng)基污染C．操作失誤 D．沒有設置對照5．統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法有（）①涂布平板法②重量法③直接計數(shù)法④比濁法⑤生理指標法⑥膜過濾法A．①②③⑥B．③④⑤⑥ C．① D．①③6．用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。在某稀釋濃度下某同學做了若干個平板并統(tǒng)計每個平板的菌落數(shù)，最接近樣品中菌株數(shù)真實值的是(）A．菌落數(shù)量最多的平板B．菌落數(shù)量最少的平板C．菌落數(shù)量適中的平板D．取若干個平板菌落數(shù)量的平均值7．下列關于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是（）A．利用稀釋涂布平板法只能分離微生物,不能對微生物進行計數(shù)B．接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C．以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量的變化是先增加后減少8．關于微生物的培養(yǎng)，下列敘述錯誤的是（)A．霉菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4B．不同種類的微生物，一般培養(yǎng)的溫度和時間不同C．測定真菌數(shù)量,一般選用103、104、105倍稀釋D．微生物培養(yǎng)要注意無菌操作9．下列有關微生物培養(yǎng)與應用的說法，正確的是（）A．天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基B．接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手等進行嚴格的滅菌處理C．大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段D．分離分解尿素的細菌時，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源10．本課題以土壤中的細菌為研究對象，要達到的目的是(）①從土壤中分離出能夠分解尿素的細菌②從土壤中分離出能夠分解氨的細菌③統(tǒng)計每克土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細菌④統(tǒng)計所取土壤樣品中究竟含有多少分解尿素的細菌A．①③ B．②④ C．①② D．③④11．分離土壤中分解尿素的細菌,對培養(yǎng)基的要求是(）A．加尿素、加瓊脂、不加葡萄糖、加硝酸鹽B．不加尿素、加瓊脂、加葡萄糖、加硝酸鹽C．加尿素、加瓊脂、加葡萄糖、不加硝酸鹽D．不加尿素、不加瓊脂、加葡萄糖、加硝酸鹽12．從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程.(1）本實驗所需培養(yǎng)基為________,碳源為________。(2）實驗原理是_________________________________________________________。(3）①→③重復培養(yǎng)的目的是________________________。（4）⑤的菌落中大部分是降解________的微生物。（5)⑥為________組，⑦為________組，設置⑥的目的是________________________。(6）⑤→⑥采用________法，接種到⑥的培養(yǎng)基中,在操作過程中為防止污染應注意的事項是________________________________________。13．分析下面培養(yǎng)基的配方,回答下面的問題。KH2PO41。4Na2HPO42。1MgSO4·7H2O0.2葡萄糖10.0尿素1.0瓊脂15。0用蒸餾水定容到1000mL（1)在該培養(yǎng)基的配方中,為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是______和________。（2)按物理性質劃分該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基,理由是培養(yǎng)基中含有________;該類培養(yǎng)基常用于微生物的純化、________和________。（3)由于培養(yǎng)基中只有尿素一種______源,所以該培養(yǎng)基只能用于能夠合成________的微生物的培養(yǎng)。用此培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤浸出液能夠從土壤中篩選出________細菌。（4)在微生物學中,將允許特定種類的微生物生長,并能抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱作________培養(yǎng)基。14．苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品.請回答下列問題。（1）②中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應加入________作為碳源，②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基________（A。影響；B。不影響）細菌的數(shù)量，如果要測定②中活細菌數(shù)量，常采用________法。（2)④為對照,微生物在④中不生長，在⑤中生長，④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于________；使用________法可以在⑥上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細菌時進行倒置培養(yǎng)的原因是________________________.(3）實驗過程中如何防止其他微生物的污染？________________________。15．為了探究土壤中的微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如下圖所示。請分析回答問題。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂1.42。10.211015將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1000mL(1）簡述土壤中可分解尿素的細菌的鑒定方法及原理:____________________________。（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(3）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________，實驗中需要振蕩培養(yǎng)，原因是________________。(4)轉入固體培養(yǎng)基時，常采用________接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。（5）在進行分離分解尿素的細菌的實驗時，A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落,而其他同學只篩選出大約50個菌落。A同學的實驗結果產(chǎn)生的原因可能有________。（填序號）①土樣不同②培養(yǎng)基污染③操作失誤④沒有設置對照(6）實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行________處理后，才能倒掉.參考答案1．解析：使用過的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后再丟棄,僅經(jīng)過消毒還會存在微生物的孢子。答案：D2．解析：將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此,應選擇牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照.對照遵循的原則是單一變量，所以牛肉膏蛋白胨要與選擇培養(yǎng)基一樣接種、培養(yǎng)。答案:C3．解析：用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)時，平板上的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌，但偶爾也能來自兩個或多個活菌，所以此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)可能比活菌的實際數(shù)偏小.答案：C4．解析:實驗結論是否正確與是否設置對照有直接關系，但實驗結果與是否設計對照無關。答案:D5．解析：各種方法均可反映細菌數(shù)目的多少，但能形成菌落的只有涂布平板法。答案:C6．解析：用稀釋涂布平板法對樣品中活菌數(shù)目進行統(tǒng)計，只是一種估測，根據(jù)此方法的實驗過程可知，在某一稀釋度下涂布的平板菌株數(shù)具有一定的偶然性，并不是絕對均勻的，所以取若干個平板菌落數(shù)量的平均值比較接近樣品中菌株數(shù)的真實值。答案：D7．解析：利用稀釋涂布平板法不僅能分離微生物,也可對微生物進行計數(shù)。答案：A8．解析:測定真菌數(shù)量，一般選用102、103、104倍稀釋。答案:C9．解析：天然培養(yǎng)基是成分不明確的培養(yǎng)基，并不是不需加工配制的培養(yǎng)基；實驗者的雙手需進行消毒處理；分離分解尿素的細菌時,尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。答案：C10．解析：從土壤中分離分解尿素的細菌并對其計數(shù)，統(tǒng)計的是每克土壤樣品中含多少分解尿素的細菌,用公式“每克樣品中菌落數(shù)＝(C/V)×M”進行推測,其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。答案:A11．解析:土壤中分解尿素的細菌能夠合成脲酶，將尿素分解生成氨，利用尿素中的氮合成自身有機物.培養(yǎng)基中只加尿素，分解尿素的細菌能生長，其他微生物不能生長;分離微生物要用固體培養(yǎng)基，加瓊脂；土壤中分解尿素的細菌屬于異養(yǎng)微生物，需要加葡萄糖作為碳源。答案：C12．解析：選擇培養(yǎng)又稱為增殖培養(yǎng)，主要是利用不同微生物的生長繁殖對環(huán)境和培養(yǎng)基的特殊要求進行富集培養(yǎng)和分離。要從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物，必須根據(jù)該微生物的特點，采用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)。設置對照實驗的目的是說明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標微生物。答案:（1)選擇培養(yǎng)基對羥基苯甲酸（2)利用以對羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，經(jīng)富集培養(yǎng)，選擇出能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物(3）增大分解對羥基苯甲酸微生物的濃度（4）對羥基苯甲酸(5)對照實驗說明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標微生物（6)單細胞挑取接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌，燒紅的接種環(huán)在火焰旁冷卻，同時打開皿蓋挑取菌落接種到試管中，并塞好棉塞,接種環(huán)在火焰上灼燒，殺滅殘留物13．解析:（1)碳源是提供碳元素的物質,氮源是提供氮元素的物質。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。(2)根據(jù)物理性質可以將培養(yǎng)基分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中添加了瓊脂作凝固劑，常用于微生物的純化、分離和計數(shù)。（3）絕大多數(shù)生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以此培養(yǎng)基對微生物有選擇作用，選擇對象是能夠利用尿素的微生物。（4）該培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。答案:(1）葡萄糖尿素（2）固體凝固劑瓊脂分離計數(shù)（3）氮脲酶分解尿素的（4)選擇14．解析：根據(jù)微生物對營養(yǎng)的需求，在培養(yǎng)基中加入或不加某些物質以達到促進目的菌生長,抑制或阻止其他雜菌生長的目的,然后再用涂布平板法、平板劃線法或其他方法篩選出單個目的菌落，再接種培養(yǎng)即可獲得純目的菌。為防止培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)形成的水珠落入培養(yǎng)基中影響菌體生長，要將培養(yǎng)皿倒置。在設計實驗中要注意單一變量原則和對照原則，操作中要嚴格進行無菌操作。答案：（1）苯酚A稀釋涂布平板（2）④的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源，⑤的培養(yǎng)基加入苯酚作為碳源稀釋涂布平板法或平板劃線以防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基（3）培養(yǎng)基滅菌，接種環(huán)境滅菌，接種過程無菌操作15．解析：尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源，因此原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠在此培養(yǎng)基上生長。由于細菌合成的脲酶將尿素分解為氨,pH升高，故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑將變成