雞蛋花中黃酮類(lèi)化學(xué)成分研究

雞蛋花中黃酮類(lèi)化學(xué)成分研究摘要：雞蛋花（夾竹桃科）是雞蛋花屬的一種落葉灌木，由于其觀賞性，常被人們種植在家庭周?chē)?、公園和花園等地。傳統(tǒng)上，這種植物的不同部位可用于治療各種疾病和病癥，如麻風(fēng)病、炎癥、糖尿病、潰瘍、傷口、瘙癢、痤瘡、牙痛、耳痛、舌頭清潔、疼痛、哮喘、便秘和反生育等。黃酮類(lèi)化合物是其主要活性成分之一，由于黃酮類(lèi)化合物具有廣泛的生物活性，它們的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系備受科研學(xué)者的關(guān)注。本文對(duì)雞蛋花中的黃酮類(lèi)成分進(jìn)行了追蹤分離和鑒定，從中分離鑒定了4個(gè)黃酮類(lèi)化合物分別為：槲皮素(1)、楊梅素(2)、楊梅素苷(3)和繡線(xiàn)菊甙(4)。關(guān)鍵詞:雞蛋花屬；雞蛋花；黃酮目錄TOC\o"2-4"\h\z145131引言 4160771.1雞蛋花粗提物的藥理活性概括 474861.2雞蛋花中黃酮類(lèi)化學(xué)成分概況 6176151.3立題依據(jù) 615002實(shí)驗(yàn)部分 7230792.1儀器、材料與試劑 768842.2提取分離流程 7215033結(jié)果 7230803.1化合物結(jié)構(gòu)解析 822884結(jié)論 1230656參考文獻(xiàn) 1315626致謝 16

1引言雞蛋花(PlumeriarubraL.)是雞蛋花屬[夾竹桃科(Apocynaceae)]的一種落葉灌木[1]。雞蛋花樹(shù)的花朵有各種顏色和大小既美麗花香又迷人，極具觀賞性，常被人們種植在家庭周?chē)⒐珗@和花園等地。傳統(tǒng)上，這種植物的不同部位可用于治療各種疾病和病癥，如麻風(fēng)病、炎癥、糖尿病、潰瘍、傷口、瘙癢、痤瘡、牙痛、耳痛、舌頭清潔、疼痛、哮喘、便秘和反生育等[2-5]。黃酮類(lèi)化合物是其主要活性成分之一，由于黃酮類(lèi)化合物具有廣泛的生物活性，它們的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系備受科研學(xué)者的關(guān)注[6-8]。本文中，我們對(duì)雞蛋花的黃酮類(lèi)化學(xué)成分進(jìn)行了概述并對(duì)雞蛋花的藥理研究進(jìn)行了概述。1.1雞蛋花粗提物的藥理活性概括現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，紅色葡萄的不同提取物具有多種藥理活性，如抗病毒、抗菌、抗菌、解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗氧化和清除自由基、抗糖尿病和低血糖、抗癌、降脂、殺幼蟲(chóng)、細(xì)胞毒性、驅(qū)蟲(chóng)、保肝、抗生育、抗?jié)兊人幚砘钚?。抗病毒活性：在濃度?00μg/ml的條件下，雞蛋花的石油醚提取物對(duì)人類(lèi)免疫缺陷病毒I型逆轉(zhuǎn)錄酶（HIV-1RT）具有抑制活性抑制率為35%。其提取物經(jīng)硅膠柱色譜分離，并用CHCl3石油醚（1:1）洗脫可以得到其活性組分，該組分在200μg/ml時(shí)對(duì)HIV-1RT活性顯示出70%的抑制作用[9,10]。抗生育活性：從懷孕第11-15天起，以200mg/kgBW的劑量給懷孕的白化大鼠服用四種雞蛋花提取物，活胎數(shù)量顯著減少，吸收指數(shù)和植入后損失增加。酒精提取物處理動(dòng)物的吸收百分比指數(shù)從對(duì)照動(dòng)物的0增加到200mg/kg體重的100%，水性、氯仿和乙酸乙酯提取物分別顯示48.89%、51%和63.64%的活胎兒。200mg/kg劑量的雞蛋花乙醇提取物顯示出最高（100%）的流產(chǎn)率。在另一篇論文中，劑量為50、100和200mg/kgBW的雞蛋花乙醇提取物在雌性白化大鼠中表現(xiàn)出13.46–100%的墮胎活性。200mg/kg體重的提取物流產(chǎn)率最高（100%），而50mg/kg和100mg/kg體重的提取液流產(chǎn)率分別為13.46%和43.63%。提取物顯著增加了吸收指數(shù)和植入后損失，并減少了活胎兒的數(shù)量。在200mg/kgBW的劑量下，提取物在去卵巢的未成熟幼鼠中顯示出顯著的雌激素作用，即陰道角質(zhì)化、陰道開(kāi)放和子宮重量增加[11-13]?？?jié)兓钚裕涸趯?shí)驗(yàn)性白化病大鼠中，以250mg/kgP.o.的劑量給藥雞蛋花的氯仿和乙醇提取物導(dǎo)致潰瘍指數(shù)和胃液體積下降，而與潰瘍對(duì)照動(dòng)物相比，CAT、SOD和GSH水平升高，表明其在預(yù)防自由基誘導(dǎo)的損傷方面的功效。奧美拉唑（20mg/kg）作為標(biāo)準(zhǔn)藥物在幽門(mén)結(jié)扎誘導(dǎo)的模型中顯示出91.39%的保護(hù)作用，而乙醇和氯仿的提取物在250mg/kg的劑量下分別顯示出75.05%和63.13%的保護(hù)作用。兩種提取物都能顯著抑制腺胃病變的形成，降低胃酸分泌參數(shù)和胃分泌物量，并能顯著增加粘液分泌，但與氯仿提取物相比，乙醇提取物顯示出更有效的抗?jié)兓钚訹14,15]。保肝活性：在Wistar白化病大鼠和瑞士白化病小鼠身上分別治療3、7和35天后，在200和400mg/kgBWP.o.的兩種不同劑量雞蛋花提取物下，雞蛋花葉甲醇提取物有效地降低了由四氯化碳（CCl4）、撲熱息痛（PCM）和抗結(jié)核藥物中毒引起的酶水平升高。400mg/kg體重的劑量比200mg/kg體重的劑量顯示出更好和顯著的結(jié)果，并將結(jié)果與流行的護(hù)肝藥物水飛薊素進(jìn)行了比較，水飛薊堿的劑量根據(jù)所使用的方法而變化。肝細(xì)胞的組織病理學(xué)檢查也顯示出更好的結(jié)果，因?yàn)楫?dāng)用雞蛋花提取物處理時(shí)，損傷發(fā)生了改變。在雄性Wistar白化大鼠中，以100和200mg/kgBW的劑量給藥4天的雞蛋糊的乙醇提取物通過(guò)以劑量依賴(lài)的方式通過(guò)200mg/kg劑量的肝功能將標(biāo)志酶AST、ALT和ALP的升高水平降低66.30、45.67和40.15，引發(fā)對(duì)CCl4誘導(dǎo)的肝損傷的保護(hù)作用。與毒性對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)大鼠的最終體重也顯著增加，總血清蛋白和血清白蛋白水平也接近正常水平。200mg/kgBW的劑量顯示出與標(biāo)準(zhǔn)藥物水飛薊素（10mg/kgBWI.P.）相當(dāng)?shù)慕Y(jié)果[16,17]。驅(qū)蟲(chóng)活性：不同濃度的2、5、10、25和50mg/ml雞蛋花甲醇莖皮提取物可以縮短疫后假絲酵母蠕蟲(chóng)癱瘓和死亡的時(shí)間，顯示出顯著的劑量依賴(lài)性驅(qū)蟲(chóng)活性，并且發(fā)現(xiàn)50mg/ml濃度的提取物比標(biāo)準(zhǔn)藥物檸檬酸哌嗪（15mg/ml）更有效。不同濃度2.5、5、10、15、25和50mg/ml的植物甲醇葉提取物對(duì)死后瘧原蟲(chóng)也表現(xiàn)出劑量依賴(lài)性的驅(qū)蟲(chóng)活性，并與標(biāo)準(zhǔn)藥物檸檬酸哌嗪（15mg/ml）進(jìn)行了比較。25和50mg/ml濃度的提取物分別在58.16和38.26分鐘時(shí)顯示出實(shí)驗(yàn)蠕蟲(chóng)的死亡率，而檸檬酸哌嗪在49.6分鐘時(shí)顯示了死亡率。因此，25mg/ml的植物提取物顯示出與標(biāo)準(zhǔn)檸檬酸哌嗪（15mg/ml）產(chǎn)生的效果相當(dāng)?shù)慕Y(jié)果，而50mg/ml的濃度顯示出比枸櫞酸哌嗪更有效和更高的活性[18,19]。1.2雞蛋花中黃酮類(lèi)化學(xué)成分概況黃酮是苯并吡喃類(lèi)的天然產(chǎn)物，具有一組重要的氧雜環(huán)，作為次生代謝產(chǎn)物廣泛分布在植物界。它們能保護(hù)植物免受紫外線(xiàn)輻射，也可以吸引昆蟲(chóng)授粉并參與與土壤微生物的相互作用。從植物中分離出來(lái)的黃酮具有多種類(lèi)型比如黃酮、異黃酮、二氫黃酮、黃烷等。正是這種結(jié)構(gòu)的多樣性賦予了它們廣泛的生物活性。黃酮是雞蛋花的主要活性成分之一，其結(jié)構(gòu)以黃酮為主還有一些是以黃酮苷的形式存在。目前從雞蛋花中報(bào)道的黃酮類(lèi)化合物約有18個(gè)[20-22]分別為：槲皮素、槲皮苷、水仙苷、cyanidin-3-O-β-(2-glucopyranosyl-O-β-galactopyranoside,cyanidin-3-O-β-galactopyranoside,rubranonoside,plumerubroside,kaempferol-3-O-glucoside,kaempferol-3-rutinoside,kaempferol,quercetin3-O-α-L-arabinopyranoside,rutin:lauryldiglucoside,stearyldixylosylmethoxygallicacid,vanillicacid-4-O-tetraarabinosylstearate,vanillicacid-4-O-hexaarabinosylstearate,β-D-hexaglucoside和β-D-heptaglucosyl-β-D-rhamnoside。1.3立題依據(jù)據(jù)課題組前期研究發(fā)現(xiàn)雞蛋花中含有豐富的黃酮類(lèi)化學(xué)成分、而目前關(guān)于雞蛋花中的黃酮類(lèi)成分研究不多，關(guān)于其活性的報(bào)道更加少見(jiàn)。因此，本研究擬采用HPLC-MS結(jié)合活性指導(dǎo)的方法對(duì)雞蛋花乙醇提取物中的黃酮類(lèi)化合物進(jìn)行分析、純化、分離以及鑒定。

2實(shí)驗(yàn)部分2.1儀器、材料與試劑植物材料雞蛋花的花于2022年9月采集于海南省海口市桂林洋大學(xué)城海南師范大學(xué)校園中的雞蛋花樹(shù)。試劑本論文涉及的有機(jī)化學(xué)試劑包括分析純石油醚、分析純乙醇、分析純乙腈、分析純乙酸乙酯、分析純氯仿以及分析純乙酸均夠自與麥克林試劑公司；所用的填料包括100-200目、200-300目和300-400目的硅膠，ODS硅膠，凝膠等均于淘寶網(wǎng)上購(gòu)買(mǎi)。儀器本論文中涉及的大型儀器包日本電子600M核磁共振儀，島津的高效液相以及東京理化的全套旋蒸系統(tǒng)。此外還有一些玻璃柱子、旋蒸瓶、量筒、錐形瓶等均購(gòu)買(mǎi)于欣維爾公司。2.2提取分離流程按照天然產(chǎn)物浸提流程將采集的新鮮雞蛋花用75%的乙醇進(jìn)行浸泡（5天*5次），合并濃縮浸提液回收乙醇并得到雞蛋花乙醇浸膏。將得到的乙醇浸膏進(jìn)行硅膠柱層析，以100-200目的硅膠作為固定相，以石油醚與乙酸乙酯的混合物作為流動(dòng)相，進(jìn)行洗脫，洗脫液按照1L一次進(jìn)濃縮轉(zhuǎn)移。最終通過(guò)薄層色譜（TLC）分析合瓶得到6個(gè)組分，對(duì)其中組分2通過(guò)ODS和凝聚進(jìn)行反復(fù)純化去除雜質(zhì)和色素后通過(guò)半制備高效液相（HPLC）進(jìn)行制備純化得到了4個(gè)化合物。3結(jié)果對(duì)上述雞蛋花乙醇提取物中分離純化得到的4個(gè)化合物進(jìn)行核磁以及質(zhì)譜表征并結(jié)合文獻(xiàn)調(diào)研確定4個(gè)化合物均為黃酮類(lèi)化合物名稱(chēng)分別為：槲皮素(1)、楊梅素(2)、楊梅素苷(3)和繡線(xiàn)菊甙(4)（圖1）。圖1.化合物1-4的結(jié)構(gòu)3.1化合物結(jié)構(gòu)解析化合物1化合物1為黃色針狀晶體，香草醛顯色劑顯橙紅色，根據(jù)MS和氫譜碳譜推斷該化合物分子式為C15H10O7；氫譜中該化合物顯示有一對(duì)間位耦合的芳香質(zhì)子信號(hào)δH6.41(1H,d,J=1.6Hz,H-8)以及6.19(1H,d,J=1.6Hz,H-6)，三個(gè)特征的1,3,4-三取代的苯環(huán)氫信號(hào)δH7.68(1H,d,J=2.0Hz,H-2’)，7.54(1H,dd,J=8.4,2.0Hz,H-6’)和6.88(1H,d,J=8.4Hz,H-5’)；該化合物碳譜中共顯示十五個(gè)碳信號(hào)，包括一個(gè)特征的共軛羰基碳，十四個(gè)sp2雜化的碳信號(hào)。這些信號(hào)表明該化合物為五取代的黃酮類(lèi)化合物且取代基均為羥基。從氫譜的耦合常數(shù)可初步判斷五個(gè)羥基的取代位分別位于2、5、7、3’和4’位，因此該化合物可鑒定為槲皮素。進(jìn)一步將該化合物數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中已報(bào)道的槲皮素?cái)?shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)該化合物與槲皮素的數(shù)據(jù)基本一致因此鑒定該化合物為槲皮素[23]。表1化合物1的氫譜和碳譜數(shù)據(jù)position1(inDMSO-d6)文獻(xiàn)值(inDMSO-d6)δH(mult.,JinHz)δCδH(mult.,JinHz)δC2-146.8-146.33-135.8-135.74-175.9-175.85-156.2-156.266.19(d,1.6)98.26.17,brs98.27-163.9-164.186.41(d,1.6)93.46.39,brs93.49-160.8-160.710-103.1-102.91’-122.0-122.02’7.68(d,2.0)115.17.88(d,2.0)115.13’-145.1-145.14’-147.8-147.75’6.88(d,8.4)115.76.88(d,8.8)115.66’7.54(dd,8.4,2.0)120.07.53(dd,8.4,6.0)120.0化合物2化合物2為黃色粉末狀物，根據(jù)低分辨質(zhì)譜和氫譜碳譜推斷該化合物分子式為C15H10O8。氫譜中該化合物顯示有一對(duì)間位耦合的芳香質(zhì)子信號(hào)δH6.38(1H,d,J=1.6Hz,H-6)以及6.20(1H,d,J=1.6Hz,H-8)，兩個(gè)磁等同的芳香質(zhì)子信號(hào)7.26(1H,s,H-8)；該化合物碳譜中顯示十三個(gè)碳信號(hào)，其中有兩個(gè)碳信號(hào)非常高是其他碳信號(hào)的兩倍結(jié)合分子式可以知道該化合物包含一個(gè)對(duì)稱(chēng)的四取代苯環(huán)；碳信號(hào)包括一個(gè)特征的共軛羰基碳，十二個(gè)sp2雜化的碳信號(hào)。這些信號(hào)表明該化合物為六取代的黃酮類(lèi)化合物且取代基均為羥基。從氫譜的耦合常數(shù)可初步判斷六個(gè)羥基的取代位分別位于2、5、7、3’、4’和5’位，其中C環(huán)為對(duì)稱(chēng)的苯環(huán)，因此該化合物可鑒定為楊梅素。進(jìn)一步將該化合物數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中已報(bào)道的楊梅素?cái)?shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)該化合物與楊梅素的數(shù)據(jù)基本一致因此鑒定該化合物為楊梅素[24]。表2化合物2的氫譜和碳譜數(shù)據(jù)position2(inDMSO-d6)文獻(xiàn)值(inDMSO-d6)δH(mult.,JinHz)δCδH(mult.,JinHz)δC2-147.5-147.33-136.3-136.34-176.1-176.25-161.3-161.266.38(d,2.0)98.66.37(d,2.0)98.67-164.2-164.486.20(d,2.0)93.76.18(d,2.0)93.79-156.4-156.610-103.4-103.41’-121.3-121.32’7.26,s107.87.25,s107.73’-146.3-146.24’-136.3-136.35’-146.3-146.26’7.26,s107.87.25,s107.7化合物3化合物3為黃色粉末狀物，根據(jù)低分辨質(zhì)譜MS和氫譜碳譜推斷該化合物分子式為C21H20O12?；衔?和化合物2數(shù)據(jù)極為相似，只是3中多了一個(gè)糖苷的信號(hào)。從該糖的末端甲基信號(hào)（0.81/18.0）可推斷該糖為鼠李糖。對(duì)化合物2化合物3的2位碳向低場(chǎng)區(qū)移動(dòng)（從147.5至158.2）從而可推斷該糖連在楊梅素的2位。因此可以鑒定該化合物為楊梅素苷。進(jìn)一步將該化合物數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中已報(bào)道的楊梅素苷數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)該化合物與楊梅素苷的數(shù)據(jù)基本一致因此鑒定該化合物為楊梅素苷[25]。表3化合物3的氫譜和碳譜數(shù)據(jù)position3(inDMSO-d6)文獻(xiàn)值(inDMSO-d6)δH(mult.,JinHz)δCδH(mult.,JinHz)δC2-158.2-157.53-134.9-134.34-178.3-177.75-161.8-161.366.37,brs99.46.37(d,2.1)98.67-164.8-164.086.18,brs94.36.20(d,2.1)93.59-157.1-156.410-104.6-104.01’-120.3-119.62’6.87,s108.66.89,s107.93’-146.2-145.64’-137.1-136.35’-146.2-145.66’6.87,s108.66.89,s107.91’’5.18,brs102.45.20,brs101.92’’4.00,brs71.03.78,brs70.33’’3.56(dd,9.2,2.8)71.23.55(dd,9.4,2.9)70.54’’3.17(dd,9.2)71.83.16(d,9.4)71.25’’3.14(d,6.0)70.63.99,brs70.06’’0.81(d,6.0)18.00.84(d,6.2)17.5化合物4化合物4為黃色粉末狀物，根據(jù)低分辨質(zhì)譜MS和氫譜碳譜推斷該化合物分子式為C21H20O12?；衔?和化合物1數(shù)據(jù)極為相似，只是4中多了一個(gè)糖苷的信號(hào)。從該糖的端基信號(hào)（4.85/101.5）可推斷該糖為β-葡萄糖。對(duì)化合物1化合物4的3’位碳向低場(chǎng)區(qū)移動(dòng)（從145.1至145.9）從而可推斷該糖連在槲皮素的3’位。因此可以鑒定該化合物為繡線(xiàn)菊甙。進(jìn)一步將該化合物數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中已報(bào)道的繡線(xiàn)菊甙數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)該化合物與繡線(xiàn)菊甙的數(shù)據(jù)基本一致因此鑒定該化合物為繡線(xiàn)菊甙[26]。表4化合物4的氫譜和碳譜數(shù)據(jù)position4(inDMSO-d6)文獻(xiàn)值(inDMSO-d6)δH(mult.,JinHz)δCδH(mult.,JinHz)δC2-146.9-146.73-136.5-136.54-176.1-176.15-160.8-160.766.20,brs98.46.28(d,2.0)98.37-164.2-164.286.45,brs93.66.53(d,2.0)93.59-156.3-156.310-103.2-103.11’-125.2-125.22’7.69(d,2.0)115.27.79(d,2.0)115.13’-145.9-145.94’-146.4-146.45’7.24(d,8.4)116.07.33(d,8.6)115.86’7.63(dd,8.4,2.0)119.67.71(dd,8.6,2.0)119.51’’4.85(d,7.2)101.54.94(d,6.9)101.42’’overlap73.3overlap73.33’’overlap76.0overlap76.04’’overlap69.9overlap69.85’’overlap77.3overlap77.36’’overlap60.8overlap60.74結(jié)論通過(guò)本文的文獻(xiàn)歸納發(fā)現(xiàn)雞蛋花粗提物治療疾病的有效性為藥物研發(fā)提供了發(fā)現(xiàn)活性成分或先導(dǎo)化合物的可能性，也支持了雞蛋花在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的臨床應(yīng)用。然而關(guān)于雞蛋花的用途更多的是利用他的觀賞性來(lái)實(shí)訓(xùn)其經(jīng)濟(jì)價(jià)值，基于雞蛋花粗提物的療效關(guān)于雞蛋花的現(xiàn)代藥理學(xué)研究同樣就顯得非常重要。本論文通過(guò)在HPLC-DAD-MS的分析指導(dǎo)下對(duì)雞蛋花中的黃酮類(lèi)成分進(jìn)行系統(tǒng)的分離純化及鑒定，從雞蛋花的乙醇提取物中共分離鑒定了4個(gè)黃酮類(lèi)化合物，黃酮具有廣泛的生物活性如抗氧化、抗炎、保肝等，后續(xù)我們將繼續(xù)對(duì)這4個(gè)化合物進(jìn)行藥理活性研究，為開(kāi)發(fā)雞蛋花提供科學(xué)依據(jù)。參考文獻(xiàn)[1]鄧瑜林,朱志貞,胡敏燕,等.夾竹桃科雞蛋花亞科的植物化學(xué)分類(lèi)學(xué)研究[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)參考資料.藥學(xué)分冊(cè),1978,(04):199-200.[2]傅火帶.雞蛋花(Plumeriaacuminata)葉的藥理作用[J].中藥材科技,1983,(06):44-45.[3]NasirA,DawoodA,JehanB.AntimicrobialactivityofdifferentsolventextractedsamplesfromtheflowersofmedicinallyimportantPlumeriaobstusa[J].Pakistanjournalofpharmaceuticalsciences,2015,28(1):195-200.[4]DasB,FerdousT,MahmoodAQ,etal.Antinociceptiveandanti-inflammatoryactivityofthebarkextractofPlumeriarubraonlaboratoryanimals[J].EuropeanJournalofMedicinalPlants,2013,3(1):114-126.[5]黃曉辰,李妍,張思然,等.雞蛋花揮發(fā)油的提取及其抗氧化和抑菌活性研究[J].廣州化工,2017,45(12):31-33.[6]武愛(ài)龍,吳建陽(yáng),卓海容.雞蛋花的研究進(jìn)展[J].農(nóng)業(yè)科技通訊,2017,(07):55-58..[7]陸顯進(jìn),王紹麗,朱鼎慧,等.復(fù)合酶輔助超聲法提取雞蛋花總黃酮工藝優(yōu)化[J].中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng),2023,29(12):11-19.[8]張斌,史士強(qiáng),李宗莉,等.雞蛋花莖皮總黃酮提取工藝優(yōu)選[J].中國(guó)藥業(yè),2022,31(02):45-49..[9]Tan,G.T.,Pezzuto,J.M.,Kinghorn,A.D.,Hughes,S.H.,Evaluationofnaturalproductsasinhibitorsofhumanimmunodeficiencyvirustype1(HIV-1)reversetranscriptase[J].J.Nat.Prod.,1991,54(1):143-154..[10]Sulaiman,S.F.,Yaacob,S.S.,Tan,M.L.,Tengku,M.S.T.ChemicalcomponentsoftheessentialoilsfromthreespeciesofMalaysianPlumeriaL.andtheireffectsonthegrowthofselectedmicroorganisms[J].J.Biosci.,2008,19(2):1-7.[11]Dabhadkar,D.,Zade,V.AbortifacientactivityofPlumeriarubra(Linn)podextractinfemalealbinorats[J].IndianJ.Exp.Biol.,2012,50:702-707.[12]Gupta,R.S.,Sharma,D.ApragmaticantifertilityassessmentofmethanolicbarkextractofPlumeriarubra(L.)inmalealbinorats[J].WorldJ.Pharmaceut.Res.,2017.6(16):1315-1317.[13]Zade,V.,Dabhadkar,D.AntifertilityeffectofalcoholicextractofPlumeriarubraonestrouscycleoffemalealbinorat[J].Int.J.Pharmaceut.Sci.Rev.Res.,2012.12(2):75-79.[14]Alencar,N.M.N.,Pinheiro,R.S.P.,Figueiredo,I.S.T.,Luz,P.B.,Freitas,L.B.N.,Souza,T.F.G.,Carmo,L.D.,Marques,L.M.,Ramos,M.V.Thepreventiveeffectonethanol-inducedgastriclesionsofthemedicinalplantPlumeriarubra:involvementofthelatexproteinsintheNO/cGMP/KATPsignalingpathway[J].Evidence-BasedComplem.Alt.Med.,2015,706782.7.[15]Misra,V.,Yadav,G.,Uddin,S.M.,Srivastava,V.DeterminationofantiulceractivityofPlumeriarubraleavesextracts[J].Int.Res.J.Pharm.,2012,3(9):194-197.[16]Dawada,S.D.HepatoprotectiveactivityofpodextractofPlumeriarubraagainstcarbontetrachlorideinducedhepaticinjuryinrats(wistar)[J].Int.J.Pharm.Pharmaceut.Res.,2015,3(3):218-227.[17]Sangeetha,J.,Abbulu,K.,Sudhakar,M.StudyontheeffectofAganosmacymosaandPlumeriarubramethanolextractondifferentmodelsofinducedlivertoxicityinexperimentalrats[J].J.Pharm.Res.,2013,3(1):49-53.[18]Rastogi,S.,Rastogi,H.,Singh,V.An