《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè) 膠體金免疫層析法》

Q/LB.□XXXXX-XXXX六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法范圍本文件界定了六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法的術(shù)語(yǔ)和定義，規(guī)定了原理、試劑耗材、儀器和設(shè)備、試驗(yàn)方法、測(cè)定、結(jié)果分析和性能指標(biāo)的技術(shù)內(nèi)容。本文件適用于六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法NY/T2102茶葉抽樣技術(shù)規(guī)范術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。原理采用競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析原理。樣品中殘留的噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合，抑制了抗體和檢測(cè)線(T線)上包被原的結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測(cè)線(T線)顏色變淺或消失，通過檢測(cè)線(T線)與控制線(C線)顏色深淺比較，對(duì)樣品中殘留的噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷進(jìn)行定性判定。試劑耗材除另有說明外，本文件使用分析純（含）以上試劑，用水符合GB/T6682要求的二級(jí)水。試劑噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷：純度≥99％，或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。甲醇(CH3OH)：ρ=0.79?g/cm3。氯化鈉(NaC1)：ρ=2.165?g/cm3，含量≥99.5％。氯化鉀(KC1)：ρ=1.98?g/cm3，含量≥99.0％。磷酸氫二鈉(Na2HPO4)：ρ=1.064?g/cm3，含量≥98.0％。磷酸氫二鉀(KH2PO4)：ρ=2.44?g/cm3，含量≥98.0％。水胺硫磷（C11H16NO4PS）：ρ=1.275?g/cm3，含量≥90.0％。啶蟲脒（CHClN4）：ρ=1.330?/cm3，含量≥98.0％。呋蟲胺（C7H14N4O3）：ρ=1.425?g/cm3，含量≥90.0％。噻蟲嗪（C8HClN5O3S）：ρ=1.7?g/cm3，含量≥97.0％。吡蟲啉（C9HClN5O2）：ρ=1.543?g/cm3，含量≥97.0％。溶液配制10％甲醇溶液吸取10?mL甲醇（5.1.2），用水定容至100?mL，混勻。稀釋液分別稱取8?g氯化鈉（5.1.3）、0.2?g氯化鉀（5.1.4）、1.44?g磷酸氫二鈉（5.1.5）、0.24?g磷酸二氫鉀（5.1.6）于1000?mL燒杯中，加水充分?jǐn)嚢枞芙夂蠖ㄈ葜?000?mL。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、中間液、工作液的制備水胺硫磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、中間液、工作液100?g/L?的水胺硫磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液準(zhǔn)確稱取1.0?g(精確至0.0001?g)水胺硫磷（5.1.7），用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。-20?℃冷凍避光保存，有效期12個(gè)月。1?g/L的水胺硫磷標(biāo)準(zhǔn)中間液準(zhǔn)確移取100?g/L的水胺硫磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（5.2.3.1.1）100?μL至10?mL，用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期3個(gè)月。0.01?g/L的水胺硫磷標(biāo)準(zhǔn)工作液準(zhǔn)確移取1?g/L的水胺硫磷標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.2.3.1.2）100μL至10?mL容量瓶中，用10％甲醇(5.2.1)溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期1個(gè)月。啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、中間液、工作液100?g/L?的啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液準(zhǔn)確稱取1.0?g(精確至0.0001?g)啶蟲脒（5.1.8），用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。-20?℃冷凍避光保存，有效期12個(gè)月。10?g/L的啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)中間液準(zhǔn)確移取100?g/L?的啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（5.2.3.2.1）1000?μL至10?mL，用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期3個(gè)月。1?g/L的啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)工作液準(zhǔn)確移取10g/L?的啶蟲脒標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.2.3.2.1）1000?μL至10?mL容量瓶中，用10％甲醇(5.2.1)溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期1個(gè)月。呋蟲胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、中間液、工作液100?g/L的呋蟲胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液準(zhǔn)確稱取1.0?g(精確至0.0001?g)呋蟲胺（5.1.9），用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。-20?℃冷凍避光保存，有效期12個(gè)月。10?g/L的呋蟲胺標(biāo)準(zhǔn)中間液準(zhǔn)確移取100g/L的呋蟲胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（5.2.3.3.1）1000?μL至10?mL，用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期3個(gè)月。2?g/L的呋蟲胺標(biāo)準(zhǔn)工作液準(zhǔn)確移取呋蟲胺10?g/L的水胺硫磷標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.2.3.3.2）2000?μL至10?mL容量瓶中，用10％甲醇(5.2.1)溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期1個(gè)月。噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、中間液、工作液100?g/L?的噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液準(zhǔn)確稱取1.0?g(精確至0.0001?g)噻蟲嗪（5.1.10），用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。-20?℃冷凍避光保存，有效期12個(gè)月。10?g/L的噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)中間液準(zhǔn)確移取100?g/L?的噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（5.2.3.4.1）1000?μL至10?mL，用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期3個(gè)月。1?g/L?的噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)工作液準(zhǔn)確移取噻蟲嗪10?g/L的噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.2.3.4.2）1000?μL至10?mL容量瓶中，用10％甲醇(5.2.1)溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期1個(gè)月。吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、中間液、工作液100?g/L的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液準(zhǔn)確稱取1.0?g(精確至0.0001?g)吡蟲啉（5.1.11），用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。-20?℃冷凍避光保存，有效期12個(gè)月。1?g/L的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)中間液準(zhǔn)確移取100?g/L的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（5.2.3.5.1）100?μL至10?mL，用甲醇（5.1.2）溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期3個(gè)月。0.1?g/L?的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)工作液準(zhǔn)確移取吡蟲啉1g/L?的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)中間液（5.2.3.5.2）1000?μL至10?mL容量瓶中，用10％甲醇(5.2.1)溶解，定容至10?mL。4?℃冷凍避光保存，有效期1個(gè)月。儀器和設(shè)備電子天平：分別精確至0.01?g、0.0001?g和0.01?mg。移液器：20?μL～200?μL，100?μL～1000?μL，1?μL～10?mL。旋渦混合器。離心管：1.5?mL、2?mL、5?mL、50?mL。膠體金免疫層析檢測(cè)卡試驗(yàn)方法樣品采集茶葉鮮葉采集按照NY/T2102的規(guī)定執(zhí)行。鮮茶樣品前處理樣品混合液制備選取一定量的有代表性樣本，剪成1?cm左右見方碎片；準(zhǔn)確稱取1?g±0.1?g樣品于15?mL或50?mL離心管中；加入3?mL稀釋液（5.2.2），劇烈振蕩2?min～3?min即為樣品混合液。樣品待測(cè)液的制備水胺硫磷項(xiàng)目測(cè)定的樣品待測(cè)液按照7.2.1的要求執(zhí)行。啶蟲脒項(xiàng)目測(cè)定的樣品待測(cè)液吸取5?μL樣品混合液（7.2）于5?mL離心管中，加入3495?μL稀釋液（5.2.2），混勻后即為待測(cè)液。呋蟲胺項(xiàng)目測(cè)定的樣品待測(cè)液吸取10?μL樣品混合液（7.2）于2?mL離心管中，加入1000?μL稀釋液（5.2.2），混勻后即為待測(cè)液。噻蟲嗪項(xiàng)目測(cè)定的樣品待測(cè)液吸取50?μL樣品混合液（7.2）于2?mL離心管中，加入950?μL稀釋液（5.2.2），混勻后即為待測(cè)液。吡蟲啉項(xiàng)目測(cè)定的樣品待測(cè)液吸取50?μL樣品混合液（7.2）于2?mL離心管中，加入700?μL稀釋液（5.2.2），混勻后即為待測(cè)液。空白樣品前處理稱取空白試樣，按照7.2的要求執(zhí)行?？瞻自嚇樱翰缓?種農(nóng)藥的鮮茶葉。加標(biāo)質(zhì)控樣品前處理分別準(zhǔn)確稱取6個(gè)空白試樣1.0?g(精確至0.01?g)置于15?mL或50?mL離心管中，加入適量水胺硫磷（5.2.3.1.3）、啶蟲脒（5.2.3.2.3）、呋蟲胺（5.2.3.3.3）、噻蟲嗪（5.2.3.4.3）、吡蟲啉（5.2.3.5.3）標(biāo)準(zhǔn)工作液，使待測(cè)液中的終濃度分別為0.05?mg/kg水胺硫磷、10?mg/kg啶蟲脒、20?mg/kg呋蟲胺、10?mg/kg噻蟲嗪、0.5?mg/kg吡蟲啉。再加入3?mL稀釋液（5.2.2），劇烈振蕩2?min～3?min即為樣品混合液,按照7.2.2的要求執(zhí)行。測(cè)定所有操作需在室溫下(20?℃±5?℃)進(jìn)行。鮮茶樣品待測(cè)液測(cè)定水胺硫磷、吡蟲啉項(xiàng)目測(cè)定分別吸取7.2.2.1和7.2.2.5的樣品待測(cè)液體100?μL（滴管約3～4滴）于微孔中，緩慢抽吸多次至待測(cè)液與微孔試劑充分混勻；孵育3?min后將微孔內(nèi)所有液體轉(zhuǎn)移至檢測(cè)卡的加樣孔中，加樣同時(shí)開始計(jì)時(shí)；反應(yīng)5min后判讀結(jié)果。啶蟲脒、呋蟲胺、噻蟲嗪項(xiàng)目測(cè)定分別吸取7.2.2.2、7.2.2.3和7.2.2.4的樣品待測(cè)液100?μL（滴管約3～4滴）于加樣孔中，加樣同時(shí)開始計(jì)時(shí)，反應(yīng)5min后判讀結(jié)果?？瞻讟悠窚y(cè)定按照8的要求執(zhí)行。加標(biāo)質(zhì)控樣品測(cè)定按照8的要求執(zhí)行。結(jié)果分析結(jié)果判定陽(yáng)性檢測(cè)線(T線)不顯色或檢測(cè)線(T線)顏色比控制線(C線)顏色淺，表明樣品中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷殘留的含量高于方法檢測(cè)限，判定為陽(yáng)性。判定示意圖見圖1。目視判定示意圖陰性檢測(cè)線（T線）顏色比控制線（C線）顏色深或者檢測(cè)線（T線）顏色與控制線（C線）顏色相當(dāng)，表明樣品中腐霉利殘留低于方法檢測(cè)限，判定為陰性。判定示意圖見圖1。無效控制線(C線)不顯色，表明操作不正確或試劑條無效。判定示意圖見圖1。質(zhì)控試驗(yàn)要求空白試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果應(yīng)為陰性，加標(biāo)質(zhì)控試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性。否則表示不滿足質(zhì)控試驗(yàn)要求，此批樣品結(jié)果無效。性能指標(biāo)靈敏度靈敏度應(yīng)≥95％。特異性特異性應(yīng)≥95％。假陰性率假陰性率應(yīng)≤5％。假陽(yáng)性率假陽(yáng)性率應(yīng)≤5％。性能指標(biāo)計(jì)算方法見附錄A。

（資料性）

定性方法性能指標(biāo)計(jì)算方法性能指標(biāo)計(jì)算表見表A.1。性能指標(biāo)計(jì)算表樣品情況a監(jiān)測(cè)結(jié)果b總數(shù)陽(yáng)性陰性陽(yáng)性NNN1.=N11陰性NNN2.=N21總數(shù)N.1=N11N.2=N12N=N1.+N2顯著性差異(X2)χ自由度（df）=1靈敏度（P+,％P+=特異性（P?,％P?=假陰性率（Pf?,％Pf?=假陽(yáng)性率（Pf+,％Pf+=N相對(duì)準(zhǔn)確度（,％）c(a由參比方法檢驗(yàn)得到的結(jié)果或者樣品中實(shí)際的公議值結(jié)果；b由待確認(rèn)方法檢驗(yàn)得到的結(jié)果。靈敏度的計(jì)算使用確認(rèn)后的結(jié)果；c為方法的檢測(cè)結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確性的結(jié)果，與一致性分析和濃度檢測(cè)趨勢(shì)情況綜合評(píng)價(jià)。N：任何特定單元的結(jié)果數(shù)，第一個(gè)下標(biāo)指行，第二個(gè)下標(biāo)指列。示例：N11表示第一行，第一列，N1.表示所有的第一行，N2.表示所有的第二列；N12廣西農(nóng)業(yè)農(nóng)村產(chǎn)業(yè)振興促進(jìn)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》編制說明（征求意見稿）一、項(xiàng)目來源根據(jù)《廣西農(nóng)業(yè)農(nóng)村產(chǎn)業(yè)振興促進(jìn)會(huì)關(guān)于<六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法>團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)的通知》要求，本標(biāo)準(zhǔn)由梧州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全綜合檢測(cè)中心提出，梧州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全綜合檢測(cè)中心、山東美正生物科技有限公司、廣西益譜檢測(cè)技術(shù)公司、廣西-東盟食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心、蒼梧縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心、蒼梧縣六堡鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心、藤縣漾江鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村中心、蒼梧縣六堡茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司、蒼梧縣六堡鎮(zhèn)官營(yíng)坪六堡茶專業(yè)合作社、蒼梧縣不倚恭州茶業(yè)有限公司、蒼梧縣心怡六堡茶業(yè)有限公司負(fù)責(zé)起草。二、項(xiàng)目目的意義及必要性（一）目的意義本標(biāo)準(zhǔn)主要針對(duì)當(dāng)前六堡茶原料鮮葉農(nóng)殘現(xiàn)場(chǎng)快檢利用酶抑制法準(zhǔn)確性較低、而實(shí)驗(yàn)室色譜法定量檢測(cè)則存在投入成本高、檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)等問題，結(jié)合廣西六堡茶產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的現(xiàn)實(shí)需要，通過應(yīng)用免疫學(xué)快速檢測(cè)方法（膠體金免疫層析技術(shù)），充分利用抗原抗體的高特異性親和作用機(jī)制，建立高靈敏度、高特異性、高通量、低成本，適合于茶園基地源頭農(nóng)殘監(jiān)測(cè)的技術(shù)方法，實(shí)現(xiàn)廣西六堡茶園基地現(xiàn)場(chǎng)農(nóng)殘快速準(zhǔn)確檢測(cè)，確保政府、茶企對(duì)生產(chǎn)源頭的茶葉原料進(jìn)行準(zhǔn)確、有效監(jiān)控和安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，切實(shí)保障六堡茶產(chǎn)品安全優(yōu)質(zhì)，為廣西六堡茶產(chǎn)業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展保駕護(hù)航，因此具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。（二）必要性茶葉質(zhì)量衛(wèi)生安全是影響六堡茶產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的關(guān)鍵因素，廣西六堡茶產(chǎn)業(yè)要做大做強(qiáng)，品質(zhì)提升和生態(tài)可持續(xù)的高質(zhì)量發(fā)展，這一切的基礎(chǔ)和關(guān)鍵就是首先要確保茶葉原料的質(zhì)量安全。影響茶葉原料質(zhì)量衛(wèi)生安全風(fēng)險(xiǎn)的重點(diǎn)為農(nóng)藥殘留等污染物，目前六堡茶茶葉中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的常用的檢測(cè)方法為酶抑制法快檢及色譜定量檢測(cè)方法，但酶抑制法等快檢方法存在準(zhǔn)確性較低、檢測(cè)范圍小，而色譜法雖準(zhǔn)確性高，可以精確測(cè)量樣品中農(nóng)藥殘留量，但存在檢測(cè)相對(duì)費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、費(fèi)用較為昂貴，需要在大型分析設(shè)備實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，而且需要進(jìn)行多個(gè)環(huán)節(jié)、大量的樣品前處理工作，不適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等這些局限性。由于受上述大型儀器檢測(cè)的存在的缺點(diǎn)及限制，導(dǎo)致在茶廠（企業(yè)）中對(duì)于茶葉鮮葉原料農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)的把關(guān)就較為困難，到了成品茶階段檢測(cè)存在殘留超標(biāo)問題時(shí)則就造成較大損失。因此，建立適合廣西六堡茶鮮葉高特異性、高通量、低成本的免疫學(xué)快速檢測(cè)方法為農(nóng)殘類污染物的檢測(cè)提供了新的途徑。該方法操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快、靈敏度和特異性高，同時(shí)檢測(cè)費(fèi)用低廉、易攜帶到現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，對(duì)于廣西六堡茶產(chǎn)業(yè)整體質(zhì)量衛(wèi)生安全的管控與提升十分必要。（三）緊迫性六堡茶是國(guó)家地理標(biāo)志農(nóng)產(chǎn)品，作為中國(guó)歷史名茶和廣西特色優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)，2022年全區(qū)適制六堡茶種植面積已達(dá)61.2萬畝，綜合產(chǎn)值達(dá)到252.9億元。2019年以來，自治區(qū)政府、自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳、梧州市分別出臺(tái)《關(guān)于促進(jìn)廣西茶業(yè)產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的若干意見》（桂政辦發(fā)〔2019〕117號(hào)）、《加快推進(jìn)廣西六堡茶及特色優(yōu)勢(shì)茶產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展實(shí)施方案》（桂農(nóng)廳發(fā)〔2022〕13號(hào)）、《梧州六堡茶產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展三年提升行動(dòng)方案(2019-2021年)》（梧發(fā)〔2021〕20號(hào)）等文件，大力推動(dòng)六堡茶產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展，努力把廣西打造成全國(guó)最重要的六堡茶產(chǎn)區(qū)，實(shí)現(xiàn)到2025年，適制六堡茶茶園面積140萬畝，綜合產(chǎn)值達(dá)到550億元目標(biāo)。為確保產(chǎn)業(yè)安全，制訂《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)，可實(shí)現(xiàn)六堡茶原料茶葉農(nóng)殘含量現(xiàn)場(chǎng)快速準(zhǔn)確檢測(cè)，確保能對(duì)生產(chǎn)源頭的茶葉原料進(jìn)行有效監(jiān)控和安全評(píng)估，避免和減少因產(chǎn)品質(zhì)量安全問題而造成的損失，保障產(chǎn)品質(zhì)量安全水平，提升產(chǎn)品市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，拓寬產(chǎn)品國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)銷售，有力地促進(jìn)茶農(nóng)茶企增效增收致富，推動(dòng)廣西六堡茶產(chǎn)業(yè)的生態(tài)綠色和高質(zhì)量發(fā)展。三、項(xiàng)目編制過程（一）成立標(biāo)準(zhǔn)編制工作組團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》項(xiàng)目任務(wù)下達(dá)后，桂林市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究中心成立了標(biāo)準(zhǔn)編制工作組，制定了起草編寫方案與進(jìn)度安排，明確任務(wù)職責(zé)，確定工作技術(shù)路線，開展標(biāo)準(zhǔn)研制工作。編制工作組下設(shè)三個(gè)組，分別是資料收集組、草案編寫組、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施組。資料收集組負(fù)責(zé)國(guó)內(nèi)外與六堡茶農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法技術(shù)有關(guān)的文獻(xiàn)資料的查詢、收集和整理工作，對(duì)六堡茶農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法技術(shù)研究成果進(jìn)行系統(tǒng)總結(jié)，查閱目前科學(xué)界對(duì)六堡茶農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法技術(shù)的研究進(jìn)展。草案編寫組負(fù)責(zé)起草標(biāo)準(zhǔn)草案、征求意見稿、送審稿及編制說明的編寫工作，包括后期召開征求意見會(huì)、網(wǎng)上征求意見、定向征求意見等，以及標(biāo)準(zhǔn)的不斷修改和完善。標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施組負(fù)責(zé)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》發(fā)布后，組織相關(guān)單位、企業(yè)和農(nóng)民開展標(biāo)準(zhǔn)宣貫培訓(xùn)會(huì)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行詳細(xì)解讀，讓相關(guān)的工作人員了解標(biāo)準(zhǔn)，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》進(jìn)行操作，保證六堡茶的產(chǎn)量和質(zhì)量，并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施情況進(jìn)行總結(jié)分析，不斷對(duì)該團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)提出修正意見。（二）收集整理文獻(xiàn)資料標(biāo)準(zhǔn)編制工作組查詢收集國(guó)內(nèi)與“六堡茶鮮茶”、“農(nóng)藥殘留”和“膠體金免疫層析法”相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)及文獻(xiàn)。分別如下：GB/T28974—2012《馬鈴薯A病毒檢疫鑒定方法納米顆粒增敏膠體金免疫層析法》GB/T28975—2012《萵苣花葉病毒檢疫鑒定方法納米顆粒增敏膠體金免疫層析法》GB/T28973—2012《番茄環(huán)斑病毒檢疫鑒定方法納米顆粒增敏膠體金免疫層析法》GB/T18990—2008《促黃體生成素檢測(cè)試紙（膠體金免疫層析法）》YY/T1713—2020《膠體金免疫層析法檢測(cè)試劑盒》GA/T1668—2019《法庭科學(xué)可卡因尿液檢測(cè)試劑盒(膠體金免疫層析法)通用技術(shù)要求》SN/T5122—2019《進(jìn)出口食用動(dòng)物、飼料喹諾酮類篩選檢測(cè)膠體金免疫層析法》SB/T10778—2012《動(dòng)物飼料中萊克多巴胺的快速篩查膠體金免疫層析法》SB/T10777—2012《動(dòng)物尿液中萊克多巴胺的快速篩查膠體金免疫層析法》SB/T10779—2012《動(dòng)物肌肉中鹽酸克倫特羅的快速篩查膠體金免疫層析法》DB45/T2438—2022《六堡茶鮮葉采摘技術(shù)規(guī)程》DB34/T3891—2021《蔬菜中腐霉利快速檢測(cè)膠體金免疫層析法》DB34/T818—2020《飼料中鹽酸克倫特羅的測(cè)定膠體金免疫層析法》DB45/T752—2011《尿液中鹽酸克侖特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇的測(cè)定膠體金免疫層析法》DB34/T824—2020《動(dòng)物組織中鹽酸克倫特羅的殘留測(cè)定膠體金免疫層析法》。目前未發(fā)布有六堡茶農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)。因此，制定團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》具備一定程度的實(shí)用性和可操作性。（三）研討確定標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編制工作組在對(duì)收集的資料進(jìn)行整理研究之后，標(biāo)準(zhǔn)編制工作組召開了標(biāo)準(zhǔn)編制會(huì)議，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的整體框架結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵性內(nèi)容進(jìn)行了初步探討。經(jīng)過研究，標(biāo)準(zhǔn)的主體內(nèi)容確定為術(shù)語(yǔ)和定義、原理、試劑耗材、儀器和設(shè)備、試驗(yàn)方法、測(cè)定、結(jié)果分析和性能指標(biāo)。（四）調(diào)研、形成征求意見稿2024年2月-2024年3月，標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組進(jìn)行了廣泛實(shí)地調(diào)研工作，查閱大量國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)資料，對(duì)六堡茶農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法技術(shù)的研究成果進(jìn)行系統(tǒng)總結(jié)。形成了標(biāo)準(zhǔn)的基本構(gòu)架，對(duì)主要內(nèi)容進(jìn)行了討論并對(duì)項(xiàng)目的工作進(jìn)行了部署和安排。并在前期工作的基礎(chǔ)之上，通過理清邏輯脈絡(luò)，整合已有的參考資料中有關(guān)六堡茶農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法技術(shù)的要點(diǎn)，并結(jié)合當(dāng)前實(shí)際應(yīng)用的需要，按照簡(jiǎn)化、統(tǒng)一等原則編制完成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》（草案）。2024年4月，向涉及相關(guān)領(lǐng)域的部門及專家征求團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》（草案）意見。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要點(diǎn)框架技術(shù)內(nèi)容，再次修改標(biāo)準(zhǔn)草案，形成團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法》（征求意見稿）及編制說明（征求意見稿）。四、標(biāo)準(zhǔn)制定原則（一）實(shí)用性原則本文件是在充分收集相關(guān)資料和文獻(xiàn)，調(diào)研分析六堡茶鮮茶葉農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法技術(shù)現(xiàn)狀，在現(xiàn)有國(guó)家、行業(yè)和地方標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)技術(shù)要求的基礎(chǔ)上，結(jié)合梧州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全綜合檢測(cè)中心等單位多年的實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)和推廣應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)而總結(jié)起草的。符合當(dāng)前六堡茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展需求，有利于產(chǎn)業(yè)的高質(zhì)量可持續(xù)長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展，具有較強(qiáng)的實(shí)用性和可操作性。（二）協(xié)調(diào)性原則本文件編寫過程中注意了與六堡茶鮮茶葉農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法技術(shù)相關(guān)的法律法規(guī)的協(xié)調(diào)問題，在內(nèi)容上與現(xiàn)行法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致。（三）規(guī)范性原則本文件嚴(yán)格按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求和規(guī)定編寫本標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容，保證標(biāo)準(zhǔn)的編寫質(zhì)量。（四）前瞻性原則本文件在兼顧當(dāng)前六堡茶鮮茶葉農(nóng)藥殘留膠體金免疫層析法的現(xiàn)實(shí)情況，并考慮農(nóng)業(yè)快速發(fā)展的趨勢(shì)和需要，在標(biāo)準(zhǔn)中體現(xiàn)了個(gè)別特色性、前瞻性和先進(jìn)性條款，作為對(duì)六堡茶產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的指導(dǎo)。五、標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容及依據(jù)來源（一）主要內(nèi)容本文件界定了六堡茶鮮葉中噻蟲嗪、啶蟲脒、吡蟲啉、呋蟲胺、水胺硫磷5種農(nóng)藥殘留檢測(cè)膠體金免疫層析法的術(shù)語(yǔ)和定義，規(guī)定了原理、試劑耗材、儀器和設(shè)備、試驗(yàn)方法、測(cè)定、結(jié)果分析和性能指標(biāo)的技術(shù)內(nèi)容。關(guān)鍵指標(biāo)依據(jù)來源1、膠體金技術(shù)原理膠體金免疫層析技術(shù)是基于免疫金標(biāo)記技術(shù)和抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)。待測(cè)液在吸水材料和NC膜的微孔作用下進(jìn)行層析，待測(cè)試液中的待檢藥物與NC膜上的測(cè)試線（T線）競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合金標(biāo)抗體，最終通過測(cè)試線（T線）顏色的深淺進(jìn)行待測(cè)樣本中藥物含量的定性判斷。2、表1六堡茶鮮葉簡(jiǎn)體金免疫層析法測(cè)試結(jié)果