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備案號(hào):47705-2015DB32AjaponicaRiceVarietyNanjing9108江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:姚姝、陳濤、趙春芳、趙慶勇、周麗慧、趙凌、朱鎮(zhèn)、張亞東、王才1水稻品種南粳9108機(jī)插稻每畝有效穗(21~22)萬,每穗總粒數(shù)(130~140)粒,結(jié)實(shí)率>90%,千粒重(25~2手栽秧(149~154)d,機(jī)插秧(145~21234(40.1~50.0)cm5(1.5~2.0)cm6直立15°78(25.1~35.0)cm9(1.5~2.0)cm直立15°(0.7~1.0)cm),1234無5678931>85%2>75%3>70%4567891234感56抗稻谷的暗胚乳基因和香米基因的分子檢測方法4MgCl?)2.0μL,dNTP(2.5mmol/L)0.4μL,Taq酶(5U/uL)0.5μL和ddH?O13.1μL。PCR反應(yīng)在MJResearchPTC-200熱循環(huán)儀上進(jìn)行,反應(yīng)程序如下:94℃下預(yù)變性5min,每個(gè)循環(huán)94℃下變性30292bp和200bp的DNA條帶。5將稻谷進(jìn)行幼苗DNA提取,利用InDel標(biāo)記進(jìn)行分子檢測。正向引物(InDel-E2-F)序列為5'-GGGAGGCGCTGAAGAGGA-3',反向引物序列(InDel-E2-R)序列為5'-GGGTAGTCACCACCCTACCTTG-3'。20μLPCR反應(yīng)體系包括:DNA(10ng/μL)2.0μL,Primer(4pmol/μL)2.0μL,10×PCRBuffer(含MgCl?)2.0μL,dNTP(2.5mmol/L)0.4μL,Taq酶(5UResearchPTC-200熱循環(huán)儀上進(jìn)行,反應(yīng)程序如下:94℃下預(yù)變性5min,每個(gè)循環(huán)94℃下變性30反應(yīng)產(chǎn)物在8%的非變性聚丙烯酰胺凝膠上電泳,經(jīng)硝酸銀染色并于凝膠成像系統(tǒng)下觀察分析。利用fgr基因InDel分子標(biāo)記擴(kuò)增水稻品種的基因組DNA,南粳9108標(biāo)準(zhǔn)稻谷能擴(kuò)增出100bp的DNA條帶,而非南粳9108標(biāo)準(zhǔn)稻谷則擴(kuò)增出107bp或同時(shí)具有100bp和107bp的帶型。
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