2025年浙教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、下列有關(guān)腐乳制作過程的敘述，正確的是（）A.選擇含水量超過90%的豆腐并利用蒸煮法滅菌B.實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳可直接食用C.將長滿毛霉的豆腐直接投入到裝有鹵湯的瓶中密封D.控制鹵湯中酒的含量以防止腐乳成熟過慢或腐敗變質(zhì)2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如圖所示，a、b；c表示現(xiàn)代工程技術(shù)；①、②、③表示其結(jié)果，下列說法正確的是（）

A.若a是核移植技術(shù)，①反映了動(dòng)物細(xì)胞也具有全能性B.若b是試管動(dòng)物技術(shù)，則②為良種家畜快速大量繁殖提供了可能C.①②③中作為受體的動(dòng)物品種是珍稀的或存量少的雌牲動(dòng)物D.c可以表示單克隆抗體的制備，③為獲得的單克隆抗體3、下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中，不正確的是（）A.培養(yǎng)貼附性細(xì)胞時(shí)要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附B.需將培養(yǎng)細(xì)胞的松蓋培養(yǎng)瓶置于95%CO2和5%O2的混合氣體培養(yǎng)箱中C.傳代培養(yǎng)時(shí)，少數(shù)細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限，其遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變D.培養(yǎng)正常的或病變的細(xì)胞，可用于生理、病理、藥理等方面的研究4、從紅豆杉屬植物中提取分離出的紫杉醇是一種有效的抗癌藥物；自然狀態(tài)下紅豆杉生長慢，紫杉醇含量低，通過植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)可獲得大量紫杉醇。植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是指將游離的單細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)按照一定的細(xì)胞密度懸浮在液體培養(yǎng)基中，用搖床或轉(zhuǎn)床進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)的方法。通過不斷的繼代培養(yǎng)篩選出疏松性均勻一致；分散性良好、大小大致相同的細(xì)胞和細(xì)胞團(tuán)，建立懸浮培養(yǎng)細(xì)胞系。據(jù)圖敘述正確的是（）

A.離體的紅豆杉組織細(xì)胞通過果膠酶分散處理后直接進(jìn)行懸浮培養(yǎng)B.懸浮培養(yǎng)液中大多數(shù)細(xì)胞在形態(tài)上呈等徑形，核-質(zhì)比率大，胞質(zhì)濃厚，液泡化程度高C.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)培養(yǎng)液中一般細(xì)胞分裂素與生長素含量比值大于1D.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長沒有接觸抑制，因此只要空間足夠大，就可以擴(kuò)大培養(yǎng)5、如圖為某種質(zhì)粒簡圖；如圖表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI；BamHI、HindⅢ的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是。

A.如果用EcoRI對(duì)外源DNA和質(zhì)粒進(jìn)行酶切，將多個(gè)含有目的基因的DNA片段與多個(gè)質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，兩兩連接所形成的產(chǎn)物有三種B.如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoRI酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRI酶切點(diǎn)有1個(gè)C.為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時(shí)應(yīng)使用BamHI和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理D.—個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRI切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)6、如圖為哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育的過程；下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.Ⅰ時(shí)期為桑椹胚，該時(shí)期的細(xì)胞具有發(fā)育的全能性B.過程a和b比卵裂期胚胎，細(xì)胞數(shù)目增多，有機(jī)物的含量增多C.胚胎移植選擇處于Ⅰ或Ⅱ時(shí)期的胚胎最易成功D.細(xì)胞分化從Ⅱ時(shí)期開始貫穿于動(dòng)物的整個(gè)生命歷程7、下列有關(guān)哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.在桑葚胚階段，胚胎的內(nèi)部開始出現(xiàn)含有液體的腔B.卵裂期的細(xì)胞一般都具有全能性，囊胚期的細(xì)胞逐漸分化C.胚胎干細(xì)胞具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞的潛能D.受精卵早期分裂時(shí)，胚胎中細(xì)胞數(shù)目不斷增加，但胚胎的總體積并不增加評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)8、如圖為蘋果酒的發(fā)酵裝置示意圖；下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.發(fā)酵過程中酒精的產(chǎn)生速率越來越快B.集氣管中的氣體是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的CO2C.發(fā)酵過程中酵母種群呈“J”型增長D.若發(fā)酵液表面出現(xiàn)菌膜，最可能原因是發(fā)酵瓶漏氣9、下列關(guān)于生物技術(shù)的敘述，不正確的是（）A.煙草葉片可離體培養(yǎng)產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒C.目的基因必須位于重組質(zhì)粒的起始密碼和終止密碼之間，才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄D.目的基因與熒光標(biāo)記的DNA探針進(jìn)行分子雜交，能形成磷酸二酯鍵10、熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸檢測。其原理是：先由病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，然后對(duì)得到的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時(shí)，加入與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接受到熒光信號(hào)，即每個(gè)DNA分子擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成（如圖）。Ct值（循環(huán)閾值）的含義為：每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。下列說法錯(cuò)誤的是（）

A.擴(kuò)增過程中引物先于探針結(jié)合到模板DNA上B.若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來的一個(gè)DNA分子，經(jīng)n次循環(huán)后，需要消耗熒光探針2n-1個(gè)C.C值越大表示被檢測樣本中病毒數(shù)目越多D.若樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解，檢測結(jié)果可能為陰性11、關(guān)于胚胎工程的敘述，不正確的是（）A.胚胎工程的理論基礎(chǔ)是體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育B.胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取卵子C.受精的標(biāo)志為雌原核和雄原核融合D.胚胎移植時(shí)對(duì)所有供體牛和受體牛都要進(jìn)行同期發(fā)情處理12、驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對(duì)人體無害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，優(yōu)點(diǎn)是克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B.驅(qū)蚊草培育過程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或電刺激等方法C.驅(qū)蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)，無細(xì)胞脫分化和再分化的過程D.驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，育種原理是基因突變13、2019年12月以來，新型冠狀病毒導(dǎo)致的肺炎在世界范圍爆發(fā)，造成多人死亡。科學(xué)工作者經(jīng)研究，發(fā)現(xiàn)了數(shù)種快速檢驗(yàn)新冠肺炎病原體的方法，以正確診斷。下列與新型冠狀病毒研究、診斷有關(guān)的說法中正確的是（）A.鏡檢法：在光學(xué)顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液，以發(fā)現(xiàn)病原體B.PCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)，可把病原體的基因逆轉(zhuǎn)錄后在幾十分鐘內(nèi)擴(kuò)增到數(shù)百萬倍C.抗原—抗體法：用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合，發(fā)現(xiàn)病原體D.DNA探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標(biāo)記的DNA分子做探針，利用DNA分子雜交原理來檢測病原體14、全球首個(gè)鼻噴新冠肺炎疫苗已獲準(zhǔn)臨床試驗(yàn)，該疫苗是在流感病毒載體上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒載體疫苗，模擬呼吸道病毒天然感染途徑，激活局部免疫應(yīng)答和全身性免疫應(yīng)答，從而發(fā)揮保護(hù)作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.疫苗制備過程中，對(duì)流感病毒進(jìn)行改造利用的原理是基因突變B.從接種方式來看，該疫苗的優(yōu)點(diǎn)是通過鼻噴接種，無針、無痛C.該疫苗需侵入人體細(xì)胞中經(jīng)基因表達(dá)后才能發(fā)揮作用D.該疫苗可通過激活淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫評(píng)卷人得分三、填空題(共9題，共18分)15、哺乳動(dòng)物核移植可以分為______核移植（比較容易）和______核移植（比較難）。16、雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有_____________、___________________(提供碳元素的物質(zhì))、_________________(提供氮元素的物質(zhì))和__________________。17、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。18、基因工程操作一般經(jīng)歷如下四個(gè)步驟：_____。19、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。20、通過____________的方式，來控制NaCL溶液的濃度，使DNA在鹽溶液中溶解或析出。21、植物繁殖的新途徑。

微型繁殖：可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。

作物脫毒：采用______組織培養(yǎng)來除去病毒（因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒______）

人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的______、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)_____包裝得到的種子。優(yōu)點(diǎn)：完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，______；方便儲(chǔ)藏和運(yùn)輸。

人工種子的結(jié)構(gòu)包括：______、_____和______。22、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請(qǐng)教或通過互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____23、應(yīng)用分析與比較的方法，對(duì)生殖性克隆與治療性克隆進(jìn)行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項(xiàng)目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評(píng)卷人得分四、判斷題(共2題，共14分)24、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽之任之，不管不問（______）A.正確B.錯(cuò)誤25、胚胎發(fā)育早期，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共8分)26、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥；但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)的過程如圖1所示，圖2是乙中的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)回答下列問題：

（1）為了獲得尿素分解菌；可在__________取樣；經(jīng)系列處理后如圖2所示培養(yǎng)基，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是___________；__________。

（2）甲中培養(yǎng)基與乙中培養(yǎng)基的成分相比；唯一的區(qū)別是___________。

（3）在涂平板前需要對(duì)甲中的菌液進(jìn)行稀釋；稀釋涂布后能得到菌落數(shù)目在___________________的平板，則說明稀釋操作比較成功。

（4）對(duì)分離得到的尿素分解菌作進(jìn)一步鑒定時(shí)；可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅的原因是尿素分解菌_____________________，再結(jié)合菌落的特征等進(jìn)行確定。

（5）統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_________，除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。27、鐵皮石斛是我國名貴中藥；生物堿是其有效成分之一，應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖（簡稱PLBs，類似愈傷組織）生產(chǎn)生物堿的實(shí)驗(yàn)流程如下：

在固體培養(yǎng)基上；PLBs的重量；生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時(shí)間的變化如圖所示，請(qǐng)回答下列問題：

⑴選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是_____，誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過程稱______。

⑵與黑暗條件下相比，PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在_______，_______，____。

⑶脫落酸（ABA）能提高生物堿含量；但會(huì)抑制PLBs的生長。若采用液體培養(yǎng)，推測添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開展探究實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該推測，在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案是探討了以下問題：

①ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式：設(shè)4個(gè)ABA處理組，1個(gè)空白對(duì)照組，3次重復(fù)。因ABA受熱易分解，故一定濃度的無菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基______后按比例加入。②實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和取樣：實(shí)驗(yàn)50天完成，每10天取樣，將樣品（PLBs）稱重（g/瓶）后再測定生物堿含量。如初始（第0天）數(shù)據(jù)已知，實(shí)驗(yàn)過程中還需測定的樣品數(shù)為______。

③依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時(shí)間：當(dāng)某3個(gè)樣品（重復(fù)樣）的_____時(shí)，其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度，對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間是適宜培養(yǎng)時(shí)間。28、Hela細(xì)胞系是人工培養(yǎng)具有無限增殖能力的水生瘤細(xì)胞系；在世界各地的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室中為研究者提供了相同的研究對(duì)象?；卮鹣铝袉栴}：

（1）Hela細(xì)胞源自一位美國婦女的宮頸癌細(xì)胞，目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)步研究Hela細(xì)胞，需進(jìn)行___________(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng)。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小組為研究葡萄糖饑餓對(duì)Hela細(xì)胞生長的抑制情況，其他營養(yǎng)條件適宜，用不同葡萄糖濃度的培養(yǎng)基，培養(yǎng)Hela細(xì)胞24h，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示：。葡萄糖濃度（mmol:L-1）Hela細(xì)胞生長抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

該實(shí)驗(yàn)_____________(填“需要”或“不需要”)另設(shè)對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長抑制率的關(guān)系是____________________。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可_________________癌細(xì)胞的增殖，為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。Hela細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，例如，它幫助科學(xué)家首次實(shí)現(xiàn)了人源細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合。細(xì)胞融合技術(shù)的意義是__________________________________________。29、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚；與人類基因同源性高達(dá)87%，并有相似的器官；生理功能和信號(hào)通路。由于發(fā)育周期短、費(fèi)用低、體外受精、透明等優(yōu)點(diǎn)，斑馬魚現(xiàn)在越來越廣泛地應(yīng)用于毒性檢測、疾病模型創(chuàng)制、藥物篩選等領(lǐng)域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達(dá)受阻從而構(gòu)建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑；通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關(guān)基因的表達(dá)。針對(duì)其作用原理，現(xiàn)有兩種假說：

假說1：嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對(duì)應(yīng)序列不能被剪切。

假說2：嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對(duì)應(yīng)序列同時(shí)被剪切。

為了驗(yàn)證上述假說；研究人員進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：

(1)從受精卵發(fā)育了3天的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的細(xì)胞中提取總RNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。若假說1成立，選擇上圖所示引物2和引物3進(jìn)行PCR后的結(jié)果為______（填字母）。A．實(shí)驗(yàn)組有雜交帶B．實(shí)驗(yàn)組無雜交帶C．對(duì)照組有雜交帶D．對(duì)照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立，進(jìn)行PCR時(shí)，需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細(xì)胞用于藥物篩選，可加入__________________，用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行______培養(yǎng)，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為______細(xì)胞，以提高斑馬魚胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。評(píng)卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)30、研究人員利用小鼠的單倍體ES細(xì)胞(只有一個(gè)染色體組)；成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術(shù)流程如圖所示，請(qǐng)分析回答下列問題：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶。箭頭指向的位置為限制酶的切割位點(diǎn)：Ampr是氨芐青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。

（1）利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增目的基因，PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物外，還應(yīng)含有_____________酶；引物應(yīng)選用下圖中的_______(填圖中字母)。

（2）在基因工程操作步驟中，過程①②稱為__________________。已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細(xì)胞。結(jié)合上圖推測，過程①選用的2種限制酶是________(填圖中的編號(hào))，③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加________(填“氨芐青霉素”或“G418”)。

（3）細(xì)胞乙與__________類似，圖中桑椹胚需通過__________技術(shù)移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，進(jìn)行該操作前需對(duì)受體小鼠進(jìn)行__________處理。31、無氮培養(yǎng)基是一種缺乏結(jié)合態(tài)無機(jī)或有機(jī)氮源的培養(yǎng)基，可使自生固氮菌在保證有有機(jī)碳源和無機(jī)營養(yǎng)供應(yīng)的情況下正常生存繁殖，從而達(dá)到富集分離的效果。配制該培養(yǎng)基所用的材料包括：水、甘露醇、KH2PO4、NaCl、CaSO4·2H2O、CaCO3；蒸餾水；瓊脂粉。現(xiàn)用該培養(yǎng)基對(duì)固氮微生物進(jìn)行分離提純并計(jì)數(shù)，回答下列問題：

(1)固氮微生物可利用空氣中的_____________合成自身需要的含氮有機(jī)物，從功能上看，該無氮培養(yǎng)基是一種___________培養(yǎng)基，從物理性質(zhì)上看，該培養(yǎng)基為____________培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的碳源為____________。

(2)上述培養(yǎng)過程用______________法進(jìn)行菌種純化，以分離菌種并計(jì)數(shù)。用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板倒置，其目的是___________（答出2點(diǎn)）。

(3)培養(yǎng)一段時(shí)間后可根據(jù)____________（答出2項(xiàng)）等菌落特征判斷是否得到了固氮菌，原因是___________。32、葉盤轉(zhuǎn)化法是Horsch等人于1985年發(fā)展起來的一種轉(zhuǎn)化法；以培育轉(zhuǎn)基因耐鹽毛白楊為例，操作程序是先將毛白楊葉子表面進(jìn)行消毒，再用消毒過的打孔器從葉子上取下圓形小片，即葉盤。然后進(jìn)行下列操作，請(qǐng)回答：

(1)毛白楊葉盤與重組農(nóng)桿菌共培養(yǎng)以進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化：農(nóng)桿菌能夠介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的原因是_________。

(2)脫分化和篩選培養(yǎng)：葉盤接種在含卡那霉素的培養(yǎng)基上，卡那霉素的作用是_______，作為運(yùn)載體的Ti質(zhì)粒應(yīng)含有_____________基因，運(yùn)載體上的__________是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。

(3)獲得抗性植株：葉盤周圍長出愈傷組織后分別轉(zhuǎn)移到誘導(dǎo)“生芽”和“生根”的培養(yǎng)基中，此過程培養(yǎng)基中加入的植物激素主要是________。

(4)耐鹽基因的檢測與鑒定：

①分子水平：可采用______的方法來檢測轉(zhuǎn)基因毛白楊提取液中有無相應(yīng)的耐鹽蛋白。

②個(gè)體水平：請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)個(gè)體水平檢測方案______________________________。33、我國科學(xué)家黃三文團(tuán)隊(duì)通過基因編輯技術(shù)培育出二倍體自交系和雜交優(yōu)勢顯著的雜交馬鈴薯品系“優(yōu)薯1號(hào)”；突破了百年來馬鈴薯自交不親和薯塊只能無性繁殖的難題。如圖是科學(xué)家用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)定點(diǎn)敲除二倍體馬鈴薯的自交不親和基因的示意圖。

(1)據(jù)圖分析CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能對(duì)基因進(jìn)行定點(diǎn)編輯，其原理是由一條單鏈向?qū)NA引導(dǎo)Cas9蛋白到_____進(jìn)行切割。已知CRISPR/Cas9僅存在于原核生物，故需借助_____技術(shù)才能在馬鈴薯細(xì)胞中發(fā)揮作用。Cas9蛋白和向?qū)NA結(jié)合形成的復(fù)合物結(jié)合后能切割DNA，從功能上來看該復(fù)合物相當(dāng)于基因工程中的限制酶，CRISPR/Cas9打破了限制酶_____的局限性。所以在使用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對(duì)不同基因進(jìn)行編輯時(shí)，應(yīng)使用_____（填“相同”或“不同”）的向?qū)NA。

(2)敲除二倍體馬鈴薯的自交不親和基因后可讓該植株自交觀察是否產(chǎn)生種子來檢測其作用效果，這屬于_____水平的鑒定。

(3)基因編輯技術(shù)比傳統(tǒng)的基因工程技術(shù)更準(zhǔn)確，目的性更強(qiáng)。通過上述材料，推測利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)進(jìn)行基因敲除的應(yīng)用價(jià)值可能有_____（答出一點(diǎn)即可）。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、D【分析】【分析】

腐乳制作中注意的問題。

（1）腐乳發(fā)酵中雜菌的控制：①事先用饅頭放在溫暖潮濕處培養(yǎng)毛霉；當(dāng)饅頭上長出青點(diǎn)（青霉菌落）；黃點(diǎn)（黃曲霉菌落）、紅點(diǎn)（紅曲霉菌落）時(shí)，及時(shí)用鑷子和解剖針剔除，保留白毛讓其生長黑色孢子。②消毒：將豆腐塊加熱，殺死表面的微生物，防止其他微生物的干擾。③接種：將上述饅頭上的孢子彈在豆腐塊上，并用滅菌后的食品袋罩上，放在適宜的溫度下培養(yǎng)。

（2）腐乳制作所需豆腐的含水量控制豆腐含水量以70%為宜。毛霉為異養(yǎng)需氧型真菌；若含水量過高，影響毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成塊；若含水量過少，則不利于毛霉的生長，毛霉的代謝也離不開水。

（3）配制鹵湯時(shí)酒量的控制加酒的目的之一是殺死微生物。如果過少；達(dá)不到殺死微生物的目的，導(dǎo)致豆腐腐?。蝗暨^多，不但殺死了微生物，而且會(huì)因酒精度過高抑制了酶的活性，從而影響腐乳的成熟，同時(shí)還會(huì)因酒精含量過高而影響腐乳的風(fēng)味。一般應(yīng)控制在12%左右。

【詳解】

A；選擇的豆腐含水量不能超過70%；并且不能用蒸煮法滅菌，A錯(cuò)誤；

B；實(shí)驗(yàn)室制作的腐乳不宜直接食用；避免危害健康，B錯(cuò)誤；

C；將長滿毛霉的豆腐塊加鹽腌制一段時(shí)間后再加鹵湯密封；C錯(cuò)誤；

D；結(jié)合分析可知；鹵湯中酒精的含量一般控制在12%左右，以防止腐乳成熟過慢或腐敗變質(zhì)，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】2、B【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)表面動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。

2；體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、體外受精；該技術(shù)產(chǎn)生的動(dòng)物稱為試管動(dòng)物。

3；胚胎分割的特點(diǎn)：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；胚胎分割可以看做動(dòng)物無性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞通過a核移植技術(shù)獲得①動(dòng)物個(gè)體；只能證明動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，A錯(cuò)誤；

B、若b是試管動(dòng)物技術(shù)；則通過體外受精和胚胎移植為②良種家畜快速大量繁殖提供了可能，B正確；

C；珍稀的或存量少的雌性動(dòng)物屬于保護(hù)動(dòng)物；不能作為生物工程的受體，應(yīng)該用本地中數(shù)量較多的雌性動(dòng)物，C錯(cuò)誤；

D；單克隆抗體的制備過程不需要進(jìn)行胚胎移植；D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】3、B【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上；稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。

【詳解】

A；細(xì)胞會(huì)貼壁生長；培養(yǎng)貼附性細(xì)胞時(shí)要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附，A正確；

B、需將培養(yǎng)細(xì)胞的松蓋培養(yǎng)瓶置于95%空氣和5%O2的混合氣體培養(yǎng)箱中；B錯(cuò)誤；

C；隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多；絕大部分細(xì)胞分裂停止，但極少數(shù)細(xì)胞克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，與正常細(xì)胞相比，其遺傳物質(zhì)已發(fā)生突變，C正確；

D；科學(xué)家培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變的細(xì)胞；用于生理、病理、藥理等方面的研究，如用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)防癌癥及其他疾病提供理論依據(jù)，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性；其過程是：離體的植物組織；器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）。

【詳解】

A；離體的紅豆杉組織細(xì)胞通過纖維素酶和果膠酶分散處理后直接進(jìn)行懸浮培養(yǎng)；A錯(cuò)誤；

B；懸浮培養(yǎng)液中細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；大多數(shù)細(xì)胞在形態(tài)上大小相差不大，細(xì)胞的核-質(zhì)比率大，胞質(zhì)濃厚，液泡化程度高，B正確；

C；脫分化過程一般細(xì)胞分裂素與生長素含量比值小于1；C錯(cuò)誤；

D；植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中植物細(xì)胞生長沒有接觸抑制；但是受營養(yǎng)物質(zhì)的影響，不可能無限擴(kuò)大培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

故選B。5、B【分析】【分析】

圖1可以看出；質(zhì)粒上只含有一個(gè)EcoRⅠ的切點(diǎn)，因此被改酶切割后，質(zhì)粒變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，因此切割后含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。

由圖2可知；標(biāo)記基因和外源DNA目的基因中均含有EcoRⅠ酶切位點(diǎn)，都可以被EcoRⅠ破壞，故能使用該酶剪切含有目的基因的DNA，只使用EcoRI，則質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用連接酶連接時(shí)，會(huì)產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切時(shí)，質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端不同，用DNA連接酶連接時(shí)，不會(huì)產(chǎn)生自身連接產(chǎn)物。

【詳解】

A、如果用EcoRⅠ對(duì)外源DNA和質(zhì)粒進(jìn)行酶切，將多個(gè)含有目的基因的DNA片段與多個(gè)質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，兩兩連接所形成的產(chǎn)物有目的基因和載體連接物、載體和載體連接物、目的基因和目的基因連接物三種，A正確；

B、如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA，目的基因兩端應(yīng)各含1個(gè)EcoRⅠ酶切位點(diǎn)，即重組DNA中EcoRⅠ酶切點(diǎn)有2個(gè)，B錯(cuò)誤；

C、為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時(shí)應(yīng)使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理，C正確；

D、從圖1可以看出，質(zhì)粒上只含有一個(gè)EcoRⅠ的切點(diǎn)，因此被改酶切割后，質(zhì)粒變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，因此圖1所示的質(zhì)粒分子切割后含有兩個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，D正確。

故選B。6、B【分析】1；胚胎發(fā)育的過程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。①卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加。②桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎（之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞）。③囊胚：細(xì)胞開始分化，其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔（注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化）。④原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層，下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。（細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度）

2；分析題圖：Ⅰ表示桑椹胚；Ⅱ表示囊胚，Ⅲ表示原腸胚。

【詳解】

A；Ⅰ時(shí)期為桑椹胚；含有的所有細(xì)胞都是全能細(xì)胞，該時(shí)期的細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，A正確；

B、過程a表示卵裂形成桑椹胚，過程b表示桑椹胚形成囊胚；這兩個(gè)過程細(xì)胞均需要消耗能量，故胚胎中有機(jī)物的含量均減少，B錯(cuò)誤；

C；胎移植選擇處于Ⅰ桑椹胚或Ⅱ囊胚時(shí)期的胚胎最易成功；C正確；

D；細(xì)胞分化從Ⅱ囊胚時(shí)期開始貫穿于動(dòng)物的整個(gè)生命歷程；D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】7、A【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過程：

（1）卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；

（2）桑葚胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎；之前所有細(xì)胞都有發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞；

（3）囊胚：細(xì)胞開始分化；其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔。注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化；

（4）原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層；下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

【詳解】

A；囊胚期胚胎出現(xiàn)分化；內(nèi)部出現(xiàn)含有液體的腔，A錯(cuò)誤；

B；卵裂期的細(xì)胞一般都具有全能性；囊胚期細(xì)胞出現(xiàn)分化，分化為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層，B正確；

C；胚胎干細(xì)胞分化程度低；胚胎干細(xì)胞具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞的潛能，C正確；

D；早期卵裂時(shí)；胚胎細(xì)胞數(shù)目不斷增加，但總體積基本不變或略有減小，D正確。

故選A。二、多選題(共7題，共14分)8、A:B:C【分析】【分析】

【詳解】

A；酵母菌首先進(jìn)行有氧呼吸；而后進(jìn)行無氧呼吸，發(fā)酵過程中由于營養(yǎng)物質(zhì)的減少、有害代謝產(chǎn)物的積累，pH的改變，酒精的產(chǎn)生速率逐漸減慢，A錯(cuò)誤；

B、集氣管中的氣體是酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸產(chǎn)生的CO2；B錯(cuò)誤；

C；發(fā)酵過程中酵母種群呈“S”型增長；而后減少，C錯(cuò)誤；

D；若酵液表面出現(xiàn)菌膜；屬于醋酸菌，需氧型微生物，可能是發(fā)酵瓶漏氣引起的，D正確。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】9、C:D【分析】【分析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建（核心）；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與表達(dá)。細(xì)胞工程中用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體和用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織得到單個(gè)細(xì)胞都采用了酶的專一性原理。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合都采用了生物膜的流動(dòng)性原理；植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。

【詳解】

A；由細(xì)胞工程原理可知；植物細(xì)胞或組織離體培養(yǎng)可以得到植物個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞可以進(jìn)行培養(yǎng)而實(shí)現(xiàn)增殖，A正確；

B；細(xì)胞工程應(yīng)用非常廣泛；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒，B正確；

C；基因表達(dá)載體構(gòu)建必須使目的基因必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間；這樣才能有利于目的基因表達(dá)，C錯(cuò)誤；

D；DNA分子雜交的原理是堿基互補(bǔ)形成雜交帶；不能產(chǎn)生磷酸二酯鍵，D錯(cuò)誤。

故選CD。10、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

A；基因擴(kuò)增過程中需要特定的引物；該引物的作用是定位基因的位置，與模板鏈結(jié)合并為子鏈的延伸提供起點(diǎn)，擴(kuò)增過程中引物和探針應(yīng)同時(shí)結(jié)合到模板DNA上，A錯(cuò)誤；

B、若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來的一個(gè)DNA分子，每個(gè)DNA分子需要1個(gè)探針，擴(kuò)增n次，可得到2n個(gè)DNA分子，則共需要消耗2n-1個(gè)探針；B錯(cuò)誤；

C；由題可知C值越大；該反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定閾值經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越大，即每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號(hào)越少。每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號(hào)越少，代表被檢測樣本中的病毒數(shù)目越少，C錯(cuò)誤；

D；如果樣本內(nèi)的病毒RNA被降解；會(huì)導(dǎo)致無法檢測出樣本內(nèi)的正確病毒數(shù)目，D正確。

故選ABC。11、B:C:D【分析】【分析】

1；胚胎工程--指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)；如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。經(jīng)過處理后獲得的胚胎，還需移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生后代，以滿足人類的各種需求。理論基礎(chǔ)：哺乳動(dòng)物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律。

2；精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

3；胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

A；胚胎工程的理論基礎(chǔ)是哺乳動(dòng)物的體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育規(guī)律；A正確；

B；胚胎收集中沖卵指的是從母體輸卵管中沖取早期胚胎；B錯(cuò)誤；

C；受精的標(biāo)志為在卵黃膜和透明帶之間觀察到兩個(gè)極體；C錯(cuò)誤；

D；胚胎移植時(shí)對(duì)供體母牛和受體牛都要進(jìn)行同期發(fā)情處理；對(duì)供體公牛不需要進(jìn)行同期發(fā)情處理，D錯(cuò)誤。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】12、C:D【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí)需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)?？筛鶕?jù)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。植物體細(xì)胞雜交的意義：在克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙；培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的；采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，A正確；

B；要獲得天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體；需要采用酶解法（纖維素酶、果膠酶），誘導(dǎo)天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體的融合可采用化學(xué)法（PEG等試劑）或物理法（電刺激等），B正確；

C；驅(qū)蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)；但需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此有細(xì)胞脫分化和再分化的過程，C錯(cuò)誤；

D；驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；育種原理是染色體數(shù)目變異，D錯(cuò)誤。

故選CD。13、B:C:D【分析】【分析】

1；PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；原理：DNA復(fù)制。前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈；

2；基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

A；鏡檢法：在電子顯微鏡下直接觀察病人的痰液或血液；以發(fā)現(xiàn)病原體，但光學(xué)顯微鏡不能觀察到新冠病毒，A錯(cuò)誤；

B；PCR技術(shù)：體外基因復(fù)制技術(shù)；可在幾十分鐘內(nèi)把病原體的基因擴(kuò)增到數(shù)百萬倍，再經(jīng)過電泳與病毒樣本進(jìn)行對(duì)比，便能知道是否感染病毒，B正確；

C；病毒進(jìn)入人體后會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)；產(chǎn)生相應(yīng)抗體，由于抗體與抗原結(jié)合具有特異性，因此抗原通過用特殊制備的病原體蛋白質(zhì)與病人血清中的相關(guān)抗體特異性結(jié)合以發(fā)現(xiàn)病原體，C正確；

D；DNA探針技術(shù)：用放射性同位素、熒光因子等標(biāo)記的DNA分子做探針；利用核酸分子雜交原理來檢測病原體，鑒定被檢測標(biāo)本上的遺傳信息，達(dá)到檢測是否感染病毒的目的，D正確。

故選BCD。14、B:C:D【分析】【分析】

分析題文描述：題述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重組。疫苗屬于抗原，在抗原的刺激下，機(jī)體可以產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。特異性免疫包括體液免疫與細(xì)胞免疫。

【詳解】

A；該疫苗是在流感病毒載體上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是屬于基因重組，A錯(cuò)誤；

B；鼻噴疫苗都配有鼻噴裝置；以鼻噴接種方式外用，是一種無針、無痛的接種方式，B正確；

C；該疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)表達(dá)產(chǎn)生蛋白質(zhì)后，才能發(fā)揮作用，C正確；

D；該疫苗可以侵入到人體細(xì)胞中；使機(jī)體既能產(chǎn)生細(xì)胞免疫，又能產(chǎn)生體液免疫，D正確。

故選BCD。三、填空題(共9題，共18分)15、略

【解析】①.胚胎細(xì)胞②.體細(xì)胞16、略

【解析】①.水②.碳源③.氮源④.無機(jī)鹽17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個(gè)核苷酸兩個(gè)DNA片段18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學(xué)合成法20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】滴加蒸餾水逐漸稀釋2mol/L濃度的NaCL溶液21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】莖尖極少或沒有）胚狀體人工薄膜不受季節(jié)的限制人工種皮；胚狀體和人工胚乳。

（2）22、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥23、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復(fù)制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實(shí)現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會(huì)用到的技術(shù)有體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細(xì)胞后，根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細(xì)胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會(huì)應(yīng)用到的技術(shù)為干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)?！窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細(xì)胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療四、判斷題(共2題，共14分)24、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯(cuò)誤。25、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共8分)26、略

【分析】【分析】

自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要分離尿素細(xì)菌應(yīng)該使用只含有尿素為唯一氮源培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基其他細(xì)菌不能生存，存活下來的細(xì)菌則是可以分解尿素。

【詳解】

（1）自然界中目的菌株的篩選要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求；到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，要獲得分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)到含尿素較多的土壤中去取樣，圖2中培養(yǎng)基為微生物提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素；

（2）甲為液體培養(yǎng)基；乙為固體培養(yǎng)基，唯一的區(qū)別在于甲培養(yǎng)基內(nèi)無瓊脂；

（3）為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性；一般應(yīng)選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，在30-300范圍內(nèi)的菌落數(shù)說明稀釋比較成功；

（4）酚紅遇堿變紅；合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)；

（5）該小組采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)土壤溶液中活菌的數(shù)目時(shí)；統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低，是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌落連在一起時(shí)，只能統(tǒng)計(jì)一個(gè)菌落，細(xì)菌還可以使用顯微鏡直接計(jì)數(shù)。

【點(diǎn)睛】

熟記并理解微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與計(jì)數(shù)等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)，在此基礎(chǔ)上從題意中提取信息并進(jìn)行作答?！窘馕觥亢蛩剌^多的土壤中葡萄糖尿素甲中培養(yǎng)基無瓊脂30~300的平板（則說明稀釋操作比較成功）合成的脲酶將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)低顯微鏡直接計(jì)數(shù)27、略

【分析】【分析】

【詳解】

⑴新生營養(yǎng)芽分裂能力強(qiáng)；細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)形成PLBs；根據(jù)題干可知，PLBs，類似愈傷組織，外植體形成愈傷組織的過程是脫分化。⑵據(jù)圖分析，光照下PLBs的重量高于黑暗條件下，原因可能是生長起始較快，快速生長時(shí)間較長，PLBs產(chǎn)量較高。⑶①由于ABA受熱易分解，所以各種液體培養(yǎng)基滅菌后，冷卻，再加入不同濃度的ABA。②根據(jù)題干可知，實(shí)驗(yàn)50天完成，每10天取樣，需要取5次樣；空白組不需要重復(fù)，處理組，每組重復(fù)三次，因此每次取樣中，需要記錄15個(gè)樣品中的數(shù)據(jù)，取樣5次共需要測定的樣品數(shù)為75。③適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量，當(dāng)樣品的PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大時(shí)，其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度，對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間是適宜培養(yǎng)時(shí)間。

【考點(diǎn)】

本題主要考查植物組織培養(yǎng)和設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系、具有對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力和并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力。【解析】細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)形成PLBs細(xì)胞的脫分化生長起始較快快速生長時(shí)間較長PLBs產(chǎn)量較高滅菌、冷卻75PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大28、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；培養(yǎng)條件：

（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無毒--定期更換培養(yǎng)液；防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。

（2）營養(yǎng)：

成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）

（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜；多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】

（1）目前實(shí)驗(yàn)室中為了進(jìn)一步研究Hela細(xì)胞；需進(jìn)行傳代培養(yǎng)；由于是在多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液適宜的pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶（最適pH是強(qiáng)酸性）已失去活性，所以在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸液。

（2）分析表格數(shù)據(jù)；該實(shí)驗(yàn)需要另設(shè)對(duì)照組，觀察在正常條件下細(xì)胞生長情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長抑制率的關(guān)系是葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長抑制率越高。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可抑制癌細(xì)胞的增殖；為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成的單核細(xì)胞叫做雜交細(xì)胞，細(xì)胞融合技術(shù)的意義是突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，重點(diǎn)考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和條件，相關(guān)知識(shí)點(diǎn)只需考生識(shí)記即可正確作答，屬于考綱識(shí)記層次的考查。對(duì)于此類試題，考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過程中，應(yīng)該注意構(gòu)建知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)?！窘馕觥總鞔诙鄶?shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長抑制率越高抑制突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能29、略

【分析】【分析】

根據(jù)題干信息分析；糖尿病模型斑馬魚的構(gòu)建的原理是使胰島素基因表達(dá)受阻，而使胰島素基因表達(dá)受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實(shí)線的；嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，其作用的機(jī)理有兩種假說：可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對(duì)應(yīng)序列不能被剪切，也可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對(duì)應(yīng)序列同時(shí)被剪切。

(1)

根據(jù)引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置；通過PCR擴(kuò)增能得到內(nèi)含子2的序列，若假說1成立，即嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對(duì)應(yīng)序列不能被剪切，故實(shí)驗(yàn)組中應(yīng)含有內(nèi)含子2的序列，而對(duì)照組的該片段被切除了，因此用引物2和引|物3進(jìn)行PCR反應(yīng)，其結(jié)果為實(shí)驗(yàn)組中有雜交帶，而對(duì)照組中無雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說2成立；即RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對(duì)應(yīng)序列同時(shí)被剪切下去，則可以選擇圖示引物5和引物2；引物5和引物6進(jìn)行PCR，觀察是否有雜交帶出現(xiàn)。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA；而只能從引物3′端延伸DNA鏈，因此DNA復(fù)制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；可以獲得分散的斑馬魚胚胎干細(xì)胞，然后對(duì)其進(jìn)行原代培養(yǎng)，接著分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞，以提高斑馬魚胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因的表達(dá)的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，明確基因轉(zhuǎn)錄出來的mRNA是要經(jīng)過加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的，并能夠根據(jù)題干提取有效信息進(jìn)行答題?！窘馕觥?1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA；只能從3′端延伸DNA鏈，因此DNA復(fù)制需要引物。（得分點(diǎn)：“只能從3′端延伸DNA鏈”）

(4)胰蛋白酶內(nèi)細(xì)胞團(tuán)原代飼養(yǎng)層六、綜合題(共4題，共24分)30、略

【分析】【分析】

1；PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)；該技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。步驟：變性→復(fù)性→延伸。

2；圖中用限制酶Ⅰ、Ⅱ切割質(zhì)粒會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因；保留G418抗性基因；用限制酶Ⅲ、Ⅳ切割質(zhì)粒會(huì)破壞G418抗性基因，保留氨芐青霉素抗性基因。不能用Ⅰ、Ⅳ或Ⅱ、Ⅲ同時(shí)切割，會(huì)同時(shí)破壞兩個(gè)抗性基因。

3；圖中2構(gòu)建基因表達(dá)載體；之后把目的基因?qū)胄∈髥伪扼wES細(xì)胞中，取其核與次級(jí)卵母細(xì)胞的進(jìn)行融合，類似于受精作用。

【詳解】

（1）利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增目的基因；PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液；模板DNA、四種脫氧核苷酸和引物以外，還應(yīng)含有熱穩(wěn)定性的DNA聚合酶(或Taq酶)；根據(jù)引物的延伸方向可知，應(yīng)該選擇引物A和D，可以擴(kuò)增2種引物之間的序列。

（2）過程①②即構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程。已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細(xì)胞。故應(yīng)保留G418抗性基因；過程1應(yīng)該選用Ⅰ；Ⅱ進(jìn)行切割，③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加G418，對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。

（3）細(xì)胞乙與受精卵類似；圖中桑椹胚需通過胚胎移植移入代孕小鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，進(jìn)行胚胎移植前需對(duì)受體小鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，讓供受體處于相同的生理狀態(tài)。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查PCR技術(shù)及基因工程的相關(guān)知識(shí)，解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記基因工程的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，掌握PCR技術(shù)的過程，理解構(gòu)建表達(dá)載體的條件?！窘馕觥繜岱€(wěn)定的DNA聚合酶(或Taq酶)A和D基因表達(dá)載體的構(gòu)建Ⅰ和ⅡG418受精卵胚胎移植同期發(fā)情31、略

【分析】【分析】

純化微生物常用的方法：①平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作；將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。②稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。

【詳解】

（1）固氮微生物可利用空氣中的氮?dú)夂铣勺陨硇枰暮袡C(jī)物；從功能上看，該無氮培養(yǎng)基由于只能讓自生固氮菌生存，而不能固氮的菌體會(huì)因缺乏氮源而不能生存，因此是一種選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中加有瓊脂粉，故從物理性質(zhì)上看，該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的碳源為含碳的甘露醇。

（2）稀釋涂布平板法可用于純化菌種并進(jìn)行計(jì)數(shù)。用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板倒置；其目的是防止皿