2025年人教五四新版選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教五四新版選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列關(guān)于如下圖所示DNA分子片段的說法；正確的是（）

A.限制酶可作用于①部位，解旋酶作用于③部位B.限制酶可作用于④部位，解旋酶作用于①部位C.作用于①部位的限制酶同時也可以作用于④部位D.作用于①部位的限制酶與作用于⑤部位的限制酶的堿基識別序列相反2、如圖表示基因工程中獲取目的基因的示意圖；不正確的是（）

A.①過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶B.②過程用到的限制性核酸內(nèi)切酶在從基因組文庫中獲取目的基因時也要用到C.③表示PCR技術(shù)，用來擴增目的基因D.若獲取的目的基因相同，則圖中基因組文庫小于cDNA文庫3、某小鼠生活過程中被多種病原體感染過，科學家以該小鼠為實驗材料，利用單克隆抗體技術(shù)，獲得了抗某種病原體的髙純度單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.被多種病原體感染過的小鼠體內(nèi)會產(chǎn)生多種漿細胞B.經(jīng)細胞融合后形成的單個雜交瘤細胞可分泌多種特異性抗體C.單克隆抗體特異性強是因為它純度高，只能與特定的抗原結(jié)合D.單克隆抗體的制備過程中應用了動物細胞培養(yǎng)和細胞融合技術(shù)4、下列有關(guān)酶制劑應用的敘述，正確的是（）A.加酶洗衣粉因為添加了酶制劑，所以比普通洗衣粉更易污染環(huán)境B.固定化葡萄糖異構(gòu)酶只能催化一種化學反應C.加酶洗衣粉的洗滌效果總比普通洗衣粉的好D.腐乳發(fā)酵前期主要依賴毛霉產(chǎn)生的淀粉酶5、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的倫理問題的敘述，不正確的是A.人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人B.設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾病，不會出現(xiàn)負面影響C.進行基因檢測時，可通過測定基因的表達產(chǎn)物——蛋白質(zhì)來進行D.對于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學知識傳播、倫理道德教育和立法解決6、某生物興趣小組的同學測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性，準備對小鼠的肝腫瘤細胞（甲）和正常肝細胞（乙）進行培養(yǎng)。下列說法正確的是A.利用胃蛋白酶處理兩種肝組織塊后可得到肝細胞懸液B.細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是刺激細胞的呼吸C.甲、乙細胞在持續(xù)的原代培養(yǎng)過程中，乙會出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象D.該試驗中用到的培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒7、利用重疊延伸PCR技術(shù)進行定點突變可以實現(xiàn)對纖維素酶基因進行合理性改造；其過程如下圖所示。下列分析錯誤的是（）

A.PCR1過程中的產(chǎn)物AB是依賴引物a和引物b擴增的結(jié)果B.引物c和引物b上均含有與模板鏈不能互補的堿基C.①過程需要先加熱至90～95℃后再冷卻至50～60℃D.②過程需要利用引物a和引物d獲得突變產(chǎn)物AD8、下表為常用的限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）及其識別序列和切割位點，由此推斷的以下說法中，正確的是（）。限制酶名稱識別序列和切割位點|限制酶名稱識別序列和切割位點BarmHIG↓GATCCKpnIGGTAC↓CEcoRIG↓AATTCSau3AI↓GATCHindIGTY↓RACSmaICCC↓GGG

（注：Y＝C或T，R＝A或G）A.一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列B.限制酶切割后一定形成黏性末端C.不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端D.限制酶的切割位點在識別序列內(nèi)部9、苯丙酮尿癥（PKU）是一種由致病基因決定的氨基酸代謝病，常造成新生兒神經(jīng)系統(tǒng)損害而智力低下，下圖1是某家族中該病的遺傳系譜圖。為避免再生下患兒，該家族成員去醫(yī)院進行了基因檢測，已知被檢測的PKU基因為142bp（bp表示堿基對）．檢測人員用特定限制酶酶切部分家庭成員（I1、II2、III3）的PKU基因；產(chǎn)生了大小不同的幾種片段．結(jié)果如圖2所示。下列敘述正確的是（）

A.苯丙酮尿癥是單基因遺傳病由一個基因決定B.若III2與III3近親結(jié)婚，生－個患病孩子的概率是C.III1的每個PKU基因中共有2個該特定限制酶的酶切位點D.可以在患者家系中調(diào)查該遺傳病的發(fā)病率評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)10、下圖表示形成cDNA并進行PCR擴增的過程。據(jù)圖分析；下列敘述錯誤的是（）

A.①過程所需的原料是脫氧核苷酸B.②過程所需的酶必須耐高溫C.③過程需要解旋酶破壞氫鍵D.④過程的引物對之間不能互補配對11、研究發(fā)現(xiàn)；某些致病菌生長繁殖需要外界提供相應的生長因子。將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時，金黃色葡萄球菌周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，越遠則菌落越小，稱為衛(wèi)星現(xiàn)象（圖甲）為進一步探究流感嗜血桿菌所需生長因子的種類，把其菌懸液與不含生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分成四個區(qū)域，將從血液中提取的V；X兩種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是（）

A.圖甲中的不同菌落可以通過觀察菌落特征進行鑒別B.衛(wèi)星現(xiàn)象可能是金黃色葡萄球菌合成相關(guān)生長因子或引起溶血所致C.可用加熱（破壞血細胞）血瓊脂平板進行流感嗜血桿菌的純培養(yǎng)D.圖乙結(jié)果表明流感嗜血桿菌生長需要生長因子V或X12、2016年初；首位由“三合一”胚胎人工授精技術(shù)培育的嬰兒出生，其培有過程如下圖所示。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.“三親嬰兒”孕育過程中使用了動物細胞培養(yǎng)、核移植等技術(shù)B.融合激活后的卵母細胞要培養(yǎng)到MII中期才能完成受精作用C.卵母細胞A的捐獻者攜帶的血友病基因能遺傳給“三親嬰兒”D.“三親嬰兒”培育技術(shù)可以用來避免細胞質(zhì)遺傳病的遺傳13、擴展青霉常見于腐爛蘋果中，其分泌的展青霉素（Pat）是一種具有致突變作用的毒素。為研究腐爛蘋果中Pat的分布，進行了如圖實驗，其中“病健交界處”為病斑與正常部位的交界處，依據(jù)與病斑的距離不同將蘋果劃分為①~⑤號部位，其中⑤為剩余部分。測定病斑直徑為1、2、3cm的蘋果中①~⑤號部位的Pat含量，結(jié)果如下。下列說法正確的是（）

A.該實驗自變量是腐爛蘋果中的病斑大小和離病斑距離大小B.可向擴展青霉培養(yǎng)液中加入青霉素以防止雜菌污染C.病斑越大，靠近腐爛部位的果肉中Pat含量越高D.由實驗結(jié)果可知，蘋果去除腐爛部位后可放心食用14、利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細胞中，然后通過核移植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程，下列敘述不正確的是（）

A.對1號豬使用促性腺激素處理，可使其超數(shù)排卵B.采集到的卵母細胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期才能用于核移植C.產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自2號與3號豬D.為檢測病毒外殼蛋白基因是否被導入4號豬并正常表達，可采用DNA測序的方法15、茯磚茶的制作包括發(fā)酵與發(fā)花等工序，發(fā)酵前要下“誘水”，下“誘水”就是將原有老茶煮水后噴灑在料堆之上。發(fā)花可使磚茶原料在加工過程中形成“金花”，學名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是國家茶業(yè)界二級機密保護菌種。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.茯磚茶的制作需利用酵母菌等多種細菌進行發(fā)酵B.下“誘水”相當于微生物培養(yǎng)過程中的“接種”，推測相關(guān)菌種可耐熱C.發(fā)酵過程涉及多種酶催化，發(fā)酵后飲用有利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收D.茯磚茶發(fā)酵完成后要滅菌并密封，有利于長期保存16、如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是（）

A.某一稀釋度下至少涂3個平板，該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果常會比實際活菌數(shù)目少B.3號試管中的樣品溶液稀釋倍數(shù)為104倍C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個D.該實驗需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，用以判斷選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用17、甲流試劑盒中的抗血凝素單克隆抗體能與甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特異性結(jié)合，發(fā)揮診斷作用。利用小鼠制備抗HA單克隆抗體的流程如圖，下列敘述正確的是（）

A.制備抗HA單克隆抗體使用的B淋巴細胞取自注射過HA的小鼠脾臟B.在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡C.放入96孔板的細胞為多種雜交瘤細胞，均能產(chǎn)生所需抗體D.將圖中細胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體18、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計品種乙組織培養(yǎng)實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導形成愈傷組織α1b1II誘導形成幼芽α2b2Ⅲ誘導生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)19、一般包括______、______等技術(shù)20、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？____________________________21、統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_____________。這是因為______________________。因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。22、______——“分子縫合針”23、_________℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在_______________℃。24、胚胎工程。

胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術(shù)，由______、______、______、胚胎冷凍保存技術(shù)和______技術(shù)等組成的現(xiàn)代生物技術(shù)。25、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細胞融合前需用______和______除去細胞壁評卷人得分四、判斷題(共1題，共4分)26、動物細胞核移植技術(shù)是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)，體現(xiàn)了動物細胞的全能性。（選擇性必修3P52）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共12分)27、研究表明生物制劑W對不同種類動物細胞的分裂均有促進作用。有同學設(shè)計相關(guān)實驗來驗證這個觀點。請根據(jù)以下提供的實驗材料；完善該實驗步驟，并預測實驗結(jié)果。

實驗材料：培養(yǎng)液；正常肝組織、肝癌組織、W、胰蛋白酶。

（要求與說明：答題時不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細胞均具有分裂能力；只進行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜）

（1）實驗步驟：

①用_________分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細胞。將兩種分散的細胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細胞懸液。培養(yǎng)液需要中加入__________等營養(yǎng)物質(zhì)和__________用以滅菌。

②在顯微鏡下用_____________直接計數(shù)兩種細胞懸液中細胞的數(shù)量；并進行記錄。

③取滅菌后的培養(yǎng)瓶若干個均分為A、B兩組，A組加入正常肝細胞懸液；B組加入_________。從A、B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組，分別加入_________。放入動物細胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，每組取部分樣品，加入_____________后搖勻；在顯微鏡下計數(shù)并記錄細胞數(shù)量。

⑤重復④若干次。

⑥統(tǒng)計并分析所得數(shù)據(jù)。

（2）預測實驗結(jié)果（用坐標系和曲線示意圖表示）_____________28、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫?。换颊哐逯写嬖诙喾N抗體，其中以SSB抗體特異性最強。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對小鼠進行免疫的過程。回答下列問題：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。為了針對性獲得cDNA，應如何設(shè)計逆轉(zhuǎn)錄第一步時的DNA引物______，設(shè)計引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時，應在相應引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點。

(3)③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實驗內(nèi)容應為抽取小鼠血液_______。評卷人得分六、綜合題(共3題，共12分)29、心臟移植是挽救終末期心臟病患者生命唯一有效的手段；然而心臟移植過程中會發(fā)生缺血再灌注損傷（IRI），可能導致心臟壞死。研究發(fā)現(xiàn)，IRI通過促進Caspase8等一系列凋亡基因的表達，導致細胞凋亡壞死最終引起器官損傷。根據(jù)Caspase8基因合成的小干擾RNA（siRNA）可以使Caspase8基因沉默，有效抑制IRI所致的器官損傷。圖是利用豬的心肌細胞開展siRNA作用研究的示意圖。回答下列問題：

(1)圖中步驟②構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用___________等工具酶。與直接將siRNA導入豬的心肌細胞相比，通過重組質(zhì)粒將siRNA對應的DNA序列導入心肌細胞，其優(yōu)點是____________（答出一點）。

(2)siRNA對應DNA序列在心肌細胞中表達產(chǎn)生的siRNA，與RISC組裝形成基因沉默復合物，通過抑制基因表達的___________過程；使Caspase8基因沉默，從而降低IRI引起的細胞凋亡。

(3)研究人員根據(jù)Caspase8基因的堿基序列，設(shè)計了三種序列分別導入豬的心肌細胞，通過測定靶基因Caspase8的mRNA含量來確定最優(yōu)序列。測定mRNA含量時，需提取心肌細胞的總RNA，經(jīng)過________過程得到cDNA，再進行PCR擴增，測定PCR產(chǎn)物量，結(jié)果如圖所示。據(jù)此判斷最優(yōu)序列是___________。

(4)選用豬的心肌細胞做受體細胞是因為豬在基因、解剖結(jié)構(gòu)、生理生化和免疫反應等方面與人類極為相似。為了解決心臟移植供體短缺問題，許多科學家正在研究用豬心臟代替人的心臟。你認為將豬心臟移植到人體面臨的最大挑戰(zhàn)是免疫排斥反應，這是因為免疫系統(tǒng)會把外來器官當作抗原（“非己”）成分進行攻擊。請說出一種解決這一問題的思路：___________（利用基因工程的方法）。30、科研工作者將蘇云金桿菌的Bt抗蟲基因?qū)肫胀ㄆ废得藁?，獲得了三個純合抗蟲品系甲、乙和丙。將三個抗蟲品系與普通品系棉花雜交，F(xiàn)1均表現(xiàn)為抗蟲，且F1自交所得F2的表型及比例為抗蟲：不抗蟲=3：1?；卮鹣铝袉栴}：

(1)將蘇云金桿菌的Bt抗蟲基因?qū)肫胀ㄆ废得藁梢圆捎胈______法。若將Bt抗蟲基因插入某種細菌Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再讓其侵染普通品系棉花細胞，該過程主要利用了細菌Ti質(zhì)粒_______的特點；成功將Bt抗蟲基因?qū)朊藁毎?/p>

(2)以上實驗結(jié)果表明，甲、乙、丙三個品系中Bt抗蟲基因的遺傳都遵循_______定律。

(3)將上述過程獲得的甲；乙、丙三個純合品系相互雜交；得到的結(jié)果如下：

甲×乙→F1抗蟲→F2抗蟲：不抗蟲=15：1

乙×丙→F1抗蟲→F2抗蟲：不抗蟲=15：1

丙×甲→F1抗蟲→F2全表現(xiàn)為抗蟲。

①若依次用A/a、B/b、C/c表示甲、乙、丙三個品系染色體上的Bt抗蟲基因，由雜交實驗結(jié)果判斷，甲、乙、丙三個品系中Bt抗蟲基因所在染色體的位置關(guān)系是什么？請在下圖細胞中畫出相關(guān)基因在染色體上的位置_______。

②將甲、乙雜交的F1與乙、丙雜交的F1雜交，所得F2的表型及比例為抗蟲：不抗蟲等于_____。

(4)通過基因工程另獲得一對純合抗蟲基因的品系丁，若要通過雜交實驗來確定丁品系中的Bt抗蟲基因插入新的染色體上，還是和乙的Bt抗蟲基因位于同源染色體上，請寫出該實驗的設(shè)計思路：___。預期實驗結(jié)果和結(jié)論：_______。31、下圖為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程流程圖；其中質(zhì)粒上的PstⅠ；SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶的識別序列及切割位點見表。請據(jù)圖回答下列問題：

。限制酶ApalEcoRIPstISmaI識別序列及切割位點

（1）圖中質(zhì)粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同時切割后可得到________個DNA片段，________個黏性末端。

（2）形成重組質(zhì)粒A時，應選用限制酶____________，對____________________進行切割。

（3）圖中①②分別表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的____________________。該技術(shù)表明，當植物細胞處于__________狀態(tài)時，在一定的營養(yǎng)物質(zhì)、____________和其他外界條件的作用下；可表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整植株。

（4）培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使重組質(zhì)粒A中含有____________。經(jīng)過②后得到的叢芽或胚狀體加上人工薄膜后就制成了____________。

（5）為了確定轉(zhuǎn)基因抗病香蕉是否培育成功，可用____________方法從個體水平鑒定轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的抗病性。

（6）在轉(zhuǎn)基因抗病香蕉培育過程中，受體細胞如果采用形成層組織細胞，與采用葉肉組織細胞相比較，其優(yōu)點是____________________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

重組DNA技術(shù)中切割DNA分子的工具是限制性內(nèi)切酶；這類酶主要是從原核生物中分離純化出來的，它們能識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。分析圖示可知，①②④⑤為磷酸二酯鍵，③為氫鍵。

【詳解】

AB；限制酶可切開特定位置的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵；即可作用于①②④⑤部位（磷酸二酯鍵），而解旋酶能將DNA雙螺旋的兩條鏈解開，即作用于③部位（氫鍵），A正確，B錯誤；

C；由圖示DNA片段的堿基序列可知；作用于①部位的限制酶同時也可以作用于⑤部位，在G與A之間切割，C錯誤；

D；作用于①部位的限制酶與作用于⑤部位的限制酶的堿基識別序列相同；它們識別的序列都為—GAATTC—，D錯誤。

故選A。2、D【分析】【分析】

基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（如cDNA文庫）。將含有某種生物不同基因的許多DNA片段；導入受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為基因文庫。如果這個文庫包含了某種生物的所有基因，那么，這種基因文庫叫做基因組文庫。如果這個文庫只包含了某種生物的一部分基因，這種基因文庫叫做部分基因文庫，例如cDNA文庫，首先得到mRNA，再反轉(zhuǎn)錄得cDNA，形成文庫。cDNA文庫與基因組文庫的區(qū)別在于cDNA文庫在mRNA拼接過程中已經(jīng)除去了內(nèi)含子等成分，便于DNA重組時直接使用。

【詳解】

A；①過程是RNA逆轉(zhuǎn)錄形成DNA的過程；需要逆轉(zhuǎn)錄酶，A正確；

B；②過程將DNA切割成不同大小的片段；用到的限制性核酸內(nèi)切酶在從基因組文庫中獲取目的基因時也要用到，B正確；

C；③表示以DNA為模板進行的PCR技術(shù)；用來擴增目的基因，C正確；

D；若獲取的目的基因相同；則圖中基因組文庫大于cDNA文庫，D錯誤。

故選D。3、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；由于抗體具有特異性；一種抗體只能和相應的抗原結(jié)合，該小鼠被多種病原體感染過，所以體內(nèi)抗體種類多，每種抗體由相應的漿細胞產(chǎn)生，所以小鼠體內(nèi)有多種漿細胞，A正確；

B；經(jīng)細胞融合后形成的單個雜交瘤細胞最多只能分泌一種特異性抗體；B錯誤；

C；單克隆抗體是單一的B淋巴細胞克隆的細胞群分泌的；所以抗體純度高，特異性強，只能與特定的抗原結(jié)合，C正確；

D；由分析可知；單克隆抗體的制備采用了動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，D正確。

故選B。

【點睛】4、B【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉；目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶，其中，應用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

2；酶是活細胞產(chǎn)生的具有催化功能的有機物；具有高效性、專一性，酶的作用條件較溫和。酶對有機溶劑非常敏感，容易失活。

【詳解】

A；加酶洗衣粉中的酶制劑屬于有機物；易被分解，不會造成環(huán)境污染，A錯誤；

B；固定化葡萄糖異構(gòu)酶只能催化一種化學反應；固定化細胞可催化一系列化學反應，B正確；

C；酶發(fā)揮作用需要適宜的條件；因此加酶洗衣粉的洗滌效果不一定總比普通洗衣粉好，C錯誤；

D；腐乳前期發(fā)酵主要依賴毛霉產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)水解為小分子的多肽和氨基酸；D錯誤。

故選B。

【點睛】5、B【分析】【詳解】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人；設(shè)計試管嬰兒是為了治療疾病，但有可能被濫用，如用于設(shè)計嬰兒性別等，可能會出現(xiàn)負面影響；進行基因檢測時，可通過基因進行檢測，也可通過測定基因的表達產(chǎn)物——蛋白質(zhì)來進行檢測；對于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學知識傳播、倫理道德教育和立法解決。6、C【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上；稱為細胞貼壁．細胞數(shù)目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。

【詳解】

A、處理肝組織塊獲得到肝細胞懸液用胰蛋白酶，A錯誤；

B、細胞培養(yǎng)應在含5%CO2，CO2用于維持培養(yǎng)液的pH值，B錯誤；

C、正常細胞不具有無限增殖能力，培養(yǎng)一段時間后會停止分裂，C正確；

D；病毒只能寄生在活細胞中；不能用培養(yǎng)液直接培養(yǎng)，D錯誤。

故選C。7、D【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應過程是：變性→復性→延伸。

3；結(jié)果：上述三步反應完成后；一個DNA分子就變成了兩個DNA分子，隨著重復次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應過程都是在PCR擴增儀中完成的。

【詳解】

A、PCR技術(shù)中DNA單鏈延伸的方向是沿著引物的5'端向3'端延伸的，據(jù)此可分析，PCR1過程中的產(chǎn)物AB是依賴引物a和引物b擴增的結(jié)果；A正確；

B、根據(jù)突變位點的產(chǎn)生可推知，引物c和引物b上均含有與模板鏈不能互補的堿基；B正確；

C；①過程是雙螺旋解開的過程；即氫鍵斷裂可通過先加熱至90～95℃完成，而后再冷卻至55～60℃使氫鍵形成，為子鏈的延伸做準備，C正確；

D；②過程為子鏈延伸的過程；該過程需要利用AB上鏈和CD下鏈之間的互補配對實現(xiàn)子鏈的延伸過程，D錯誤。

故選D。8、C【分析】【分析】

限制酶的特點：識別特定的脫氧核苷酸序列；并在特定的位點進行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；由圖可知；由于Y＝C或T，R＝A或G，因此HindⅠ可以識別多種核苷酸序列，A錯誤；

B；限制酶切割后可能形成黏性末端或平末端；B錯誤；

C；不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端；如BamHⅠ和Sau3AⅠ，C正確；

D；限制酶的切割位點在識別序列內(nèi)部或外部；如Sau3AⅠ，D錯誤。

故選C。9、C【分析】【分析】

據(jù)圖分析，圖中Ⅱ1和Ⅱ2正常，而他們的兒子Ⅲ1有病，說明苯丙酮尿癥為隱性遺傳病；又因為Ⅰ1有病，而其兒子Ⅱ2正常；說明該病不可能在X染色體上，因此該病為常染色體隱性遺傳病。

【詳解】

A；苯丙酮尿癥是單基因遺傳病；單基因遺傳病是由一對等位基因決定的，A錯誤；

B、Ⅲ2與Ⅲ3為堂兄妹（近親）；由遺傳系譜圖可知，兩者基因型分別為（1/3AA；2/3Aa）、Aa，若兩者結(jié)婚，結(jié)合酶切位點可知，III2基因型應為Aa，由于兩者均是Aa，則后代為一個患病男孩（aa）的概率=1/4×1/2＝1/8，B錯誤；

C、根據(jù)題意分析，已知被檢測的Ⅲ1的PKU基因為142bp，限制酶切割后產(chǎn)生50bp和42bp兩種長度的片段，142-50-42=50bp，說明50bp的片段有2個；即切割后產(chǎn)生了三個片段，因此其PKU基因中具有2個該特定限制酶的酶切位點，C正確；

D；調(diào)查遺傳病的發(fā)病率應在人群中隨機取樣；D錯誤。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)10、B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復制過程；其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。

PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構(gòu)成：

①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后；使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應作準備；

②模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后；溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；

③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在72℃；DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下；以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈，重復循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

【詳解】

A；①過程為逆轉(zhuǎn)錄；所需的原料是脫氧核苷酸，A正確；

B；②過程由DNA單鏈合成DNA雙鏈過程所需要的DNA聚合酶不需要耐高溫；B錯誤；

C；③過程為變性；溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈，不需要DNA解旋酶破壞氫鍵，C錯誤；

D；④過程為復性；溫度降到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條DNA單鏈結(jié)合，但引物對之間不能互補配對，D正確。

故選BC。11、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析可知；流感嗜血桿菌的菌落主要分布于添加了X和V的區(qū)域的交界處，說明該菌生長需要的生長因子是X和V。

菌落的特征：形狀；大小、顏色、隆起程度、質(zhì)地、邊緣等。

培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成：碳源；氮源、水、無機鹽、特殊生長因子。

【詳解】

A；鑒定不同種的菌落可以觀察菌落的特征；比如形態(tài)、顏色、隆起程度等，A正確；

B；流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時；金黃色葡萄球菌周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，越遠則菌落越小，由此推測衛(wèi)星現(xiàn)象可能是金黃色葡萄球菌合成相關(guān)生長因子或引起溶血所致，B正確；

C；分析題干信息可知；可用加熱（破壞血細胞）血瓊脂平板進行流感嗜血桿菌的純培養(yǎng)，C正確；

D、圖乙結(jié)果表明流感嗜血桿菌生長需要生長因子V和X，不是V或X，D錯誤。12、A:B:D【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。

【詳解】

A；由圖可知；“三親嬰兒”孕育過程中使用了動物細胞培養(yǎng)、體外受精、核移植等技術(shù)，A正確；

B；融合激活后的卵母細胞要培養(yǎng)到MⅡ中期才具備受精能力；從而完成受精作用，B正確；

C；卵母細胞A的捐獻者提供的是細胞質(zhì)；而其攜帶的血友病基因位于細胞核內(nèi)的染色體上，所以其攜帶的血友病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯誤；

D；“三親嬰兒”培育技術(shù)可以通過核移植來避免細胞質(zhì)遺傳病的遺傳；D正確。

故選ABD。13、A:B:C【分析】【分析】

1；據(jù)圖分析可知；①號部位為病斑區(qū)域，即腐爛部位，①與②交界處為“病鍵交界處”，是腐爛部位與未腐爛部位交界的地方，②③④⑤均為未腐爛部位，且距離腐爛部位依次變遠。

2；在曲線圖中；病班部位的Pat含量最高，而距離病班部位越來越遠，Pat含量就會越來越少。

【詳解】

A；由曲線圖可知；該實驗自變量是腐爛蘋果中的病斑大小和離病斑距離大小，A正確；

B；青霉素可以抑制細菌生長；可向擴展青霉培養(yǎng)液中加入青霉素以防止雜菌污染，B正確；

C；病斑越大；說明病斑中擴展青霉素的密度就越大，產(chǎn)生的Pat就越多，C正確；

D；如果只去除腐爛部位；那么未腐爛部位中的Pat仍然會對人體造成傷害，存在健康風險，故窩爛蘋果去除腐爛部位后不能食用，D錯誤。

故選ABC。14、C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)；核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將病毒外殼蛋白基因（目的基因）導入2號豬的體細胞核中，然后將2號豬的體細胞核移植到1號豬的去核卵母細胞中，再將重組細胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號豬的子宮中去，最后分娩產(chǎn)生了4號轉(zhuǎn)基因克隆豬。

【詳解】

A；對供體母豬使用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，A正確；

B；獲得的卵母細胞去核后；需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進行核移植，B正確；

C；染色體位于細胞核；則產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于2號豬，C錯誤；

D；為檢測病毒外殼蛋白基因是否正常表達；可采用的方法是抗原-抗體雜交，D錯誤。

故選CD。15、A:D【分析】【分析】

根據(jù)題意分析：茯磚茶的制作包括發(fā)酵與發(fā)花等工序；發(fā)酵過程涉及多種酶催化，發(fā)酵后飲用有利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。

【詳解】

A；酵母菌是真菌；不是細菌，A錯誤；

B；下“誘水”就是將原有老茶煮水后噴灑在料堆之上；相當于微生物培養(yǎng)過程中的“接種”，推測相關(guān)菌種可耐熱，B正確；

C；發(fā)酵過程涉及多種酶催化；發(fā)酵后富含多種小分子營養(yǎng)物質(zhì)，因此發(fā)酵后飲用有利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，C正確；

D；茯磚茶在儲藏過程中仍然繼續(xù)自然發(fā)酵；因此滅菌并密封處理，不利于長期保存，D錯誤。

故選AD。16、A:B:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中5支試管為梯度稀釋；最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進行計數(shù)。統(tǒng)計菌落數(shù)在30~300的平板，取其平均值，進行計數(shù)。計數(shù)公式為（C÷V）×M。（C為平均菌落數(shù)，V為涂布液體積，M為稀釋倍數(shù)）。

【詳解】

A；設(shè)置重復組；增強實驗的說服力與準確性，故某一稀釋度下至少涂3個平板。稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細菌細胞長成一個菌落，使該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要低，A正確；

B、據(jù)圖可知，將10g土樣加入到90mL無菌水中定容至100mL后，此時土樣稀釋倍數(shù)為10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號試管中的樣品，故3號試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍；B正確；

C、5號試管進行稀釋涂布平板法計數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109個；C錯誤；

D；要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用；需設(shè)置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基上的菌落種類數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落類型，則說明起到了選擇作用，D正確。

故選ABD。17、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗原與抗體的結(jié)合具有特異性；為制備抗HA單克隆抗體，則使用的B淋巴細胞應取自注射過HA的小鼠脾臟，A正確；

B；在特定的選擇培養(yǎng)基上；未融合的親本細胞（B淋巴細胞類型、骨髓瘤細胞類型）和融合的具有同種核的細胞（B淋巴細胞-B淋巴細胞型和骨髓瘤-骨髓瘤細胞型）都會死亡，B正確；

C；將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后；放入96孔板，不一定都能產(chǎn)生所需抗體，還需進行抗體陽性檢測，C錯誤；

D；據(jù)圖可知；圖中細胞群a在加入HA抗原后呈陽性，說明細胞群a產(chǎn)生了抗HA抗原的抗體，故將圖中細胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體，D正確。

故選ABD。18、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。三、填空題(共7題，共14分)19、略

【解析】①.動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動物細胞融合與單克隆抗體20、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落菌落數(shù)22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2018～2524、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)性別控制25、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細胞膜流動性植物細胞全能性纖維素酶果膠酶四、判斷題(共1題，共4分)26、B【分析】【詳解】

動物細胞核移植技術(shù)體現(xiàn)了動物細胞核的全能性，不能體現(xiàn)動物細胞的全能性，高度分化的動物細胞的全能性受到了限制，故錯誤。五、實驗題(共2題，共12分)27、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)的條件：

（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物；

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；

（3）適宜的溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

2；實驗操作步驟的安排一般如下：第一步：取材隨機均分為幾組；編號；第二步：不同組自變量的處理；第三步：把上述各組放在無關(guān)變量相同且適宜等條件下處理一段時間；第四步：觀察并記錄比較相應的因變量。根據(jù)題意可知，本實驗的目的是驗證生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用，則該實驗的自變量是細胞的種類及是否加入生物制劑W，因變量是細胞懸液中細胞的數(shù)目，對細胞直接計數(shù)可以采用血球板計數(shù)法。

【詳解】

（1）①動物細胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細胞。將兩種分散的細胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細胞懸液。動物細胞的培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖；氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清；為了保證無菌的條件，一般在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素。

②在顯微鏡下可以采用血球計數(shù)板直接計數(shù)兩種細胞懸液中細胞的數(shù)量；并進行記錄。

③本實驗的目的是驗證生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用；根據(jù)題干所給實驗材料可知，不同細胞是指正常肝細胞和癌細胞，因此該實驗應該設(shè)置四組，變量為細胞的種類及是否加入生物制劑W，具體如下：

A組：培養(yǎng)液中加入正常肝細胞懸液；B組：培養(yǎng)液中加入與之等量癌細胞懸液；從A；B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組；C、D兩組：培養(yǎng)液中加入等量的生物制劑W。放入動物細胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④該實驗的因變量是計數(shù)細胞懸液中細胞的數(shù)量；因此各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，每組取部分樣品，加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶搖勻，將細胞分散成單個，然后在顯微鏡下計數(shù)。

（2）預測實驗結(jié)果；若較長時間培養(yǎng)，因為正常細胞的增殖次數(shù)有限，故A組中細胞數(shù)量最少，由于W促進細胞增殖的作用，因此C組細胞數(shù)量多于A組；而癌細胞可以無限增殖，且由于其細胞膜上的糖蛋白減少，易于擴散和轉(zhuǎn)移，同時失去接觸抑制，可大量培養(yǎng)增殖，故B；D兩組中細胞數(shù)量明顯更多，且由于W的促進作用，D組多于B組；由于此實驗是驗證實驗，所以實驗結(jié)果是加入生物制劑W的實驗組比對照組細胞數(shù)多，同時癌細胞分裂能力比正常細胞高，故繪制坐標曲線具體如下:

【點睛】

本題考查驗證實驗，要求學生明確實驗的目的，正確區(qū)分實驗的變量，能夠根據(jù)題意判斷自變量和因變量，然后根據(jù)設(shè)計實驗的單一變量和等量原則，同時結(jié)合題干所給的實驗材料完善實驗設(shè)計，并能預測實驗結(jié)果和繪制相關(guān)曲線圖表示實驗的結(jié)果?！窘馕觥恳鹊鞍酌福z原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清抗生素血球計數(shù)板等量肝癌細胞懸液等量生物制劑W胰蛋白酶（膠原蛋白酶）28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細胞，其中以大腸桿菌應用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細胞；使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達載體導入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過①過程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補配對，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。

（2）對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會破環(huán)SSB基因，故應在相應引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長，③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的菌落進一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會引起機體的免疫反應，產(chǎn)生相應抗體。則后續(xù)實驗內(nèi)容應為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體六、綜合題(共3題，共12分)29、略

【分析】【分析】

根據(jù)Caspase8基因合成的小干擾RNA（siRNA）；最終生成基因沉默復合物，該復合物Caspase8mRNA結(jié)合，影響其正常翻譯，從而有效抑制IRI所致的器官損傷。

【詳解】

（1）限制酶和DNA連接酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒需要的工具酶；與直接將siRNA導入豬的心肌細胞相比；通過重組質(zhì)粒將siRNA對應的DNA序列導入心肌細胞，siRNA可隨重組質(zhì)粒增殖持續(xù)產(chǎn)生，從而使靶基因長時間沉默。

（2）mRNA是翻譯的模板；據(jù)圖可知，基因沉默復合物作用于Caspase8mRNA，抑制了基因表達的翻譯過程，使Caspase8基因沉默。

（3）測定mRNA含量時；需提取細胞總RNA，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程得到cDNA，再進行PCR擴增，通過PCR擴增產(chǎn)物的量間接反映細胞中相關(guān)基因mRNA含量；據(jù)圖可知，在序列2作用下，PCR產(chǎn)物最少，推測Caspase8的mRNA含量最低，表明其抑制效果最好，是最優(yōu)序列。

（4）對于人體而言；豬的器官屬于外來物質(zhì)，免疫系統(tǒng)會把外來器官當作抗原成分進行攻擊；利用基因工程技術(shù)將免疫排斥有關(guān)豬的抗原基因敲除或轉(zhuǎn)入一些人類特有蛋白的基因，將豬細胞偽裝人的細胞。

【點睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求學生理解并識記有關(guān)的原理及操作步驟，掌握各種操作步驟中需要注意的細節(jié)，能將教材中的知識結(jié)合題中信息進行遷移應用?！窘馕觥?1)限制酶；DNA連接酶可持續(xù)產(chǎn)生siRNA；使靶基因長時間沉默。

(2)翻譯。

(3)逆轉(zhuǎn)錄序列2

(4)可以利用基因工程技術(shù)將免疫排斥有關(guān)豬的抗原基因敲除或轉(zhuǎn)入一些人類特有蛋白的基因，將豬細胞偽裝人的細胞30、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取方法有：從基因文庫中獲??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)