實(shí)訓(xùn)總膽固醇TC檢測試劑盒酶法操作步驟結(jié)果計(jì)算講解

實(shí)訓(xùn)總膽固醇(TC)檢測試劑盒(酶法)【操作步驟】：加入物空白（B）標(biāo)準(zhǔn)（S）標(biāo)本（U）工作液（ml）2.72.72.7蒸餾水(μl)60--校準(zhǔn)液（μl）-60-待測標(biāo)本（μl）--60混勻，37℃孵育10分鐘，于波長540nm處讀取各管的吸光度△A值?！窘Y(jié)果計(jì)算】：

樣品中TRIG濃度（mmol/L）=△AU/△AS×CS(mmol/L)問題一、什么是總膽固醇(TC)總膽固醇=膽固醇+膽固醇酯

膽固醇是雙親性分子，其極性的羥基與非極性的脂肪酸鏈間有固醇環(huán)相連；3

膽固醇酯是親脂性（既疏水性）分子問題二、酶法的測定原理？CEH-COD-PAP法——最普遍膽固醇酯+H2O膽固醇+游離脂肪酸CEH（膽固醇酯酶）膽固醇+O2△4-膽甾烯酮+H2O2COD(膽固醇氧化酶）H2O2+4-氨基安基比林+酚醌亞胺染料+2H2OPOD（過氧化物酶）Trinder反應(yīng)測定原理酶測定法特點(diǎn)：

常規(guī)測定中現(xiàn)已廣泛應(yīng)用酶法，酶法具有特異性好，精密度和靈敏度都能很好地滿足臨床實(shí)驗(yàn)室的要求，既可以手工操作，也適合自動分析，但酶法測定中出現(xiàn)了不同程度的基質(zhì)效應(yīng)。

采用酶反應(yīng)原理的干化學(xué)法頗為實(shí)用，其缺點(diǎn)是價(jià)格高，精密度差。膽固醇的酶測定法始于70年代。由于操作簡便，試劑無腐蝕性，特別適用于自動生化分析，目前已成為測定膽固醇的主要方法。

膽固醇酶測定法的試劑中，除了上述三種酶、酚和4-氨基安替比林外，還有維持pH恒定的緩沖液、膽酸鈉、表面活性劑以及穩(wěn)定劑等。膽酸鈉是為了提高膽固醇酯酶的活性表面活性劑的作用是促進(jìn)膽固醇從脂蛋白中釋放出來評價(jià)：主要缺點(diǎn)是：優(yōu)點(diǎn)：本法靈敏度高、準(zhǔn)確度高、精密度好，線性范圍寬。①某些膽固醇酯酶對膽固醇酯的水解不完全，不能用純膽固醇結(jié)晶以有機(jī)溶劑配制的溶液作為TC分析的校準(zhǔn)液，而應(yīng)以準(zhǔn)確定值的血清作為標(biāo)準(zhǔn)，此校準(zhǔn)液（品）相當(dāng)于三級標(biāo)準(zhǔn)。②表面活性劑，如吐溫-40可以干擾膽固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000可使結(jié)果提高1％～2％；③本法具有氧化酶反應(yīng)途徑的共同缺陷，易受到一些還原性物質(zhì)如尿酸、膽紅素、維生素C和谷胱甘肽等的干擾?！緟⒖贾怠繂栴}三、TC測定的臨床意義？

血清總膽固醇合適范圍：≤5.20mmol/L(200mg/dl)，邊緣升高：5.23～5.69mmol/L(201～219mg/dl)，升高：≥5.72mmol/L(220mg/dl)。影響TC水平的因素①年齡與性別；②長期的高膽固醇、高飽和脂肪酸和高熱量飲食可使TC增高；③遺傳因素；④其它：如缺少運(yùn)動、腦力勞動、精神緊張等可能使TC升高。TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標(biāo)之外，不能作為其它任何疾病的診斷指標(biāo)，對于動脈粥樣硬化和冠心病而言，TC是一