血球計數(shù)板使用ppt課件.ppt

1、血球計數(shù)板使用,1,一、血球計數(shù)板的規(guī)格,人教版建議使用2mm2mm0.1mm方格 蘇教版推薦使用1mm1mm0.1mm方格,計數(shù)室,2,計數(shù)室兩種規(guī)格,11625型的計數(shù)板 將計數(shù)室放大，可見它含16中格，一般取四角：1、4、13、16四個中方格（100個小方格）計數(shù) 。 細胞個數(shù)1mL100個小方格細胞總數(shù)/ 100 40010000稀釋倍數(shù),3,22516型的計數(shù)板 中央大方格以雙線等分成25個中方格，每個中方格又分成16個小方格，供細胞計數(shù)用（見圖三）。一般計數(shù)四個角和中央的五個中方格（80個小方格）的細胞數(shù)。 細胞個數(shù)1mL80個小方格細胞總數(shù)/ 80 40010000稀釋倍數(shù),4,

2、二、血球計數(shù)板的使用方法步驟,1鏡檢計數(shù)室。在加樣前，先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進行計數(shù)； 2加樣品。將清潔干燥的血球計數(shù)板的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細胞懸液的量以不超過計數(shù)室臺面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去； 3計數(shù)。稍待片刻（約5min），待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部后，將計數(shù)板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄。,5,三、血球計數(shù)板的使用注意事項,1每天定時取樣計數(shù)，記錄數(shù)據(jù)。 2

3、從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻。 3如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應當對培養(yǎng)液進行稀釋以便于酵母菌的計數(shù)。 具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計數(shù)板計數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有45個酵母細胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計數(shù)。 4活酵母有芽殖現(xiàn)象，若芽體達到母細胞大小的一半時，即可作為兩個菌體計數(shù)，若芽體小于母細胞一半時為1個酵母細胞。,6,5對于壓在方格界線上的酵母菌應當計數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理，另兩邊不計數(shù)

4、。 6計數(shù)一個樣品要從兩個計數(shù)室中計得的平均數(shù)值來計算，對每個樣品可計數(shù)三次，再取其平均值。計數(shù)時應不時調(diào)節(jié)焦距，才能觀察到不同深度的菌體。按公式計算每1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌個數(shù)。 7血球計數(shù)板的清潔 血球計數(shù)板使用后，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風機吹干，或用95%的乙醇、無水乙醇、丙酮等有機溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內(nèi)是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復清洗直到干凈為止。,7,例題,例1：用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進行計數(shù)，若計數(shù)室為1mm1mm0.1mm方格，由400個小方格組成，如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計數(shù)，應先 后再計

5、數(shù)。若多次重復計數(shù)后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個。,稀釋,2108,解析 ：根據(jù)公式：540010000102108,8,例2：檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由2516400個小格組成，容納液體的總體積為01 mm3。 現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內(nèi)共有藍藻n個，則上述水樣中約有藍藻 個mL,解析 ：酵母細胞個數(shù)1mL 80個小方格細胞總數(shù)/ 80 40010000稀釋倍數(shù)n/

6、8040010000105n105,9,例3（2008江蘇高考31） （4）在整個實驗過程中，直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計數(shù)的做法是錯誤的，正確的方法是 _和 。 （5）實驗結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數(shù)板的做法是錯誤的，正確的方法是 。,搖勻培養(yǎng)液后再取樣,培養(yǎng)后期的樣液稀釋后再計數(shù),浸泡和沖洗,10,例4：（2009福建高考1 ） 下列對有關(guān)實驗的敘述，正確的是 ( ) A.在觀察洋蔥細胞有絲分裂實驗中，將已經(jīng)解離、漂洗、染色的根尖置于載玻片上，輕輕蓋上蓋玻片后即可鏡檢 B.對酵母菌計數(shù)時，用吸管吸取培養(yǎng)液滴滿血球計數(shù)板的計數(shù)室及其四周邊緣，輕輕蓋上蓋玻片后即可鏡檢 C.在葉綠體

7、色素提取實驗中，研磨綠葉時應加一些有機溶劑，如無水乙醇等 D.檢測試管中的梨汁是否有葡萄糖，可加入適量斐林試劑后，搖勻并觀察顏色變化,C,11,1（7分）酵母菌是探究細胞呼吸方式、種群數(shù)量變化的理想實驗材料。血球計數(shù)板是酵母菌計數(shù)的常用工具。結(jié)合所學知識，回答下列問題： （1）酵母菌與大腸桿菌相比，在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是酵母菌具有 。 （2）酵母菌常被用來探究細胞呼吸的方式，是因為它 。,以核膜為界限的細胞核,在有氧和無氧條件下都能生存（屬于兼性厭氧菌）,12,（3）血球計數(shù)板的計數(shù)室長和寬各為1mm，深度為0.1mm，其中2516型的血球計數(shù)板計數(shù)室以雙線等分成25個中方格，每個中方格又分成1

8、6個小方格。一般計數(shù)時選取的中方格位于計數(shù)室的 。下圖1表示的是其中一個中方格的情況，對該中方格中的酵母菌進行計數(shù)的結(jié)果是 個。如果計數(shù)的幾個中方格中的細胞平均數(shù)為20個，則1mL培養(yǎng)液中酵母菌的總數(shù)為 個。,四個角和中央的五個中方格,24,5106,13,（4）某同學為探究溫度對酵母菌種群數(shù)量變化的影響，得到上圖2所示結(jié)果，由此并不能得出酵母菌的最適培養(yǎng)溫度為25。為了確定培養(yǎng)酵母菌的最適溫度，需要進一步實驗，寫出實驗設(shè)計思路： 。,在25左右再設(shè)計以上的溫度梯度,14,2.在生態(tài)學中，通常要從種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)等三個層次開展研究。 在“探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動態(tài)變化”實驗中，用血球計數(shù)板進行抽樣檢測。下圖是血球計數(shù)板放大圖，第一次抽樣檢測結(jié)果是4個中方格中共有40個酵母菌，則每毫升菌液中含有酵母菌 個。所計算出的酵母菌是 （從以下選項中選擇）。 A.活的菌數(shù) B.死的菌數(shù) C.總菌數(shù) D.新增殖的菌,1.6106,C,15,“離離原上草，一歲一枯榮。野火燒不盡，春風吹又生。遠芳侵古道，晴翠接荒城?！痹娭锌审w現(xiàn)出群落的 現(xiàn)象。研究群落通常要研究其豐富度，探究土壤中小動物優(yōu)勢種的種類及豐富度，隨