血液凝固和影響血液凝固的因素#內容充實

1、凝血及影響凝血的因素一、實驗目的通過測量一定條件下的凝血時間，我們可以加深對影響凝血因素的理解。二、實驗儀器和材料兔子；石蠟油、冰塊、肝素、草酸鉀溶液、肺組織輸液(將兔肺切開，清洗血液，在3-4倍的生理鹽水中浸泡過夜，過濾，收集濾液，得到肺組織輸液，保存在冰箱中備用)。氯化鈣、氨基甲酸乙酯、生理鹽水；兔手術臺、常規(guī)手術器械、注射器、小燒杯、試管架、試管、動脈夾、動脈插管、恒溫水浴、秒表、竹簽。三、實驗方法和步驟1.麻醉固定稱重后，在耳緣靜脈注射200克/升氨基甲酸乙酯，劑量為1克/千克體重。麻醉兔子后，它們仰臥，依次固定四肢和兔子頭。2.頸部手術剪去頸部前部的外套，在頸部前部中間切開6 7厘米

2、的皮膚，直至達到下頜角以上1.5厘米，用止血鉗被動分離軟組織和頸部肌肉，露出左右頸總動脈鞘。用玻璃分針分離兩側鞘中的頸總動脈，結扎一根頸總動脈的遠端，用動脈夾夾住近端，預先在動脈下放一根細線，以備后用。用眼用剪刀在結扎點附近的動脈壁上切開一個V形切口，將動脈插管向心方向插入頸總動脈，并結扎導管進行采血。3.取8個試管，根據(jù)下表準備不同的實驗條件試管編號試驗條件凝固時間每支試管添加2ml1控制管(不添加)2放一點棉花3石蠟涂油管內壁4肝素1毫升50.1毫升草酸鉀6肺組織0.1毫升72ml生理鹽水8冰在一個小燒杯中流出20毫升出血時，用竹簽不斷攪拌。23分鐘后，用水沖洗竹簽并觀察表1-1凝血加速和

3、抗凝試驗4.抽血打開動脈夾，向每支試管中加入2ml血液。將多余的血液放入一個小燒杯中約20毫升，用竹簽攪拌。5.記錄凝血時間在向每個試管中加入2ml血液后，立即開始計時，每15秒傾斜一次，觀察血液是否凝固，并記錄血液變成凝膠且不再流動的時間。將血液加入4號、5號和6號試管后，用拇指蓋住試管口，將試管倒置兩次，使血液與藥物混合。四.實驗結果促凝和抗凝試驗管號試驗條件凝結時間/分鐘平均值x標準偏差sp值1控件，空管5.555.755.4170.3822棉花44.253.53.9170.3820.0373肝素6060604固體石臘6060605草酸鉀一水合物6060606肺組織提取物0.2510.5

4、0.5830.3120.0047生理鹽水7.2589.258.1670.8250.0158冰浴606060V.實驗討論凝血是一種酶促反應，涉及許多凝血因子。根據(jù)凝血過程中凝血酶原的不同激活途徑，凝血過程可分為內源性激活途徑和外源性激活途徑。內源性凝血是指所有參與血液凝固的凝血因子都存在于血漿中；外源性凝血是指有組織因素參與的凝血過程。在這個實驗中，動物從頸動脈出血，并且血液幾乎不與組織因子接觸。因此，凝血過程主要是內源性凝血系統(tǒng)的功能。肺組織提取物富含組織因子，通過添加試管觀察外源性凝血系統(tǒng)的作用。血液凝固指的是血液從流動的液態(tài)變成不動的凝膠狀態(tài)的過程。其本質是將血漿中的可溶性纖維蛋白轉化為不

5、溶性纖維蛋白的過程。纖維蛋白交織成網(wǎng)，捕獲血細胞和其他血液成分，從而形成血凝塊。凝血是一系列復雜的酶促反應過程，需要各種凝血因子的參與。血漿和組織中直接參與血液凝固的物質統(tǒng)稱為凝固因子。目前已知的凝血因子有14種，即凝血因子 (簡稱F F )。此外，還有前激肽釋放酶、聚合物激肽原等。在這些凝血因子中，除F 是Ca2外，其他凝血因子是蛋白質，F(xiàn) 、F 、F 、F 、F 、f和前激肽釋放酶是絲氨酸蛋白酶，它們可以有限地水解特定的肽鏈。然而，在正常情況下，這些蛋白酶以非活性酶原的形式存在，并且它們只有在暴露或通過其他酶的有限水解形成活性中心后才具有酶活性。這個過程被稱為凝血因子的激活。血液凝固是這樣

6、一個過程，在這個過程中，凝血因子按一定的順序依次激活，產(chǎn)生凝血酶，最后纖維蛋白原變成纖維蛋白。因此，凝血過程可分為三個基本步驟：凝血酶原復合物的形成、凝血酶的活化和纖維蛋白的生成。凝血酶原復合物的形成可由內源性凝血途徑和外源性凝血途徑產(chǎn)生。兩種途徑的主要區(qū)別在于不同的啟動方式和涉及的凝血因素。然而，這兩種途徑中的一些凝血因子可以相互激活，因此它們彼此密切相關，而不是完全相互獨立。(1)內源性凝血途徑：內源性凝血途徑是指所有參與凝血的因素均來自血液，通常由血液與帶負電的異物(如玻璃、高嶺土、硫酸鹽、膠原蛋白等)接觸而引發(fā)。)。當血液與帶負電的異物表面接觸時，f首先與異物表面結合并被激活為f .

7、a . f . a .的主要功能是激活f .進入f .a，從而啟動內源性凝血途徑。(2)外源性凝血途徑：由外周血液中的組織因子暴露于血液而引發(fā)的凝血過程成為外源性凝血途徑，也稱為組織因子途徑。組織因子是一種跨膜糖蛋白，存在于大多數(shù)組織細胞中。在生理條件下，與循環(huán)血液直接接觸的血細胞和內皮細胞不表達組織因子，但約0.5%的F 被激活(F a)。當血管受損時，組織因子暴露出來，與F a結合形成Fa-組織因子復合物，在磷脂和鈣的存在下，該復合物迅速激活F形成F a。內源性和外源性凝血途徑產(chǎn)生的F A在Ca2存在下，在磷脂膜表面與FVa形成FXA-FVa-Ca2-磷脂復合物，進而激活凝血酶原。凝血酶原

8、的活化和纖維蛋白原的產(chǎn)生在凝血酶原復合物的作用下被活化成凝血酶。1.棉花為血液凝固提供了粗糙的表面，這容易導致血小板粘附和聚集，然后分解，釋放許多凝固因子和血小板因子；此外，棉花含有許多帶負電荷的植物纖維，它們也能激活凝血因子X ，啟動內源性凝血途徑。因此，使用棉花的試管中的血液凝固加速。2.抗凝血酶和肝素是體內重要的抗凝劑。抗凝血酶與絲氨酸殘基結合，絲氨酸殘基是許多凝血因子如凝血酶的活性中心，這意味著這些凝血因子的活性被抑制或失活，從而實現(xiàn)抗凝血作用。肝素主要與血漿中的抗凝蛋白如抗凝血酶結合，以增強后者的抗凝作用。此外，肝素還可以從血管內壁的細胞中釋放凝血抑制劑和纖溶酶原激活劑，從而增強纖維

9、蛋白溶解。因此，當肝素被放入試管時，血液不會凝結。3.由于石蠟油表面光滑，很難引起血小板粘附，即血小板很難發(fā)揮促進血液凝固的作用。此外，石蠟油是一種絕緣體，它覆蓋著試管表面的負電荷，不利于凝血因子X 的活化。因此，血液凝固比棉試管慢，比正常對照組慢。4.Ca2是凝血過程中一個重要的凝血因子，參與血液凝固的許多環(huán)節(jié)。當血液中沒有鈣時，血液就不會凝結。當將草酸鉀加入試管時，因為草酸鉀與Ca2反應，草酸鈣沉淀，這意味著血液中沒有Ca2，所以血液不會凝結。5.肺組織浸出液富含凝血因子，易通過外源性途徑引起快速凝血反應。因此，在加入肺組織浸出液的試管中，凝血發(fā)生得最快。6.加入生理鹽水稀釋血液，降低凝血

10、酶濃度，延長凝血時間。7.血液凝固的過程涉及許多蛋白酶，因此當溫度降低時，酶的活性減弱，因此置于冰水中的試管血液不會長時間凝固，這意味著低溫會影響凝血酶的活性。8.無論是內源性凝血還是外源性凝血，凝血的最后階段都是在凝血酶的作用下，凝血酶將纖維蛋白原水解成纖維蛋白，形成的纖維蛋白不斷地交叉成網(wǎng)絡結構，在網(wǎng)絡結構中血液中的所有血細胞都形成網(wǎng)絡，從而導致血液凝固。上述凝固過程發(fā)生在靜止的燒杯中，形成的纖維蛋白沒有被破壞，因此燒杯中的血液凝固。在將血液與竹簽混合的過程中，雖然發(fā)生了凝固過程，但是纖維蛋白原被水解成纖維蛋白，但是形成的纖維蛋白被連續(xù)地纏繞在竹簽上。用水沖洗后，白色絲狀纖維蛋白留在竹簽上。攪拌后，杯中血液中的纖維蛋白原被完全耗盡，纖維蛋白不再形成以捕獲血細胞，因此血液不再凝固。六.實驗結論含有肝素和草酸鉀等抗凝劑的試管在規(guī)定時間內沒有凝結。溫度對血液凝固也有影響，放置在冰水中的試管中的血液凝固明顯減慢，在規(guī)定的時間內沒有發(fā)生凝固現(xiàn)象。用棉花和石蠟油觀察血液接觸面粗糙度對凝血的影響。結果表明，血液中的棉花使凝血時間明顯，而石蠟油潤滑使試