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文檔簡介
1、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查,蚌埠醫(yī)學(xué)院診斷學(xué)教研室,一、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查的臨床應(yīng)用 1、確定診斷某些造血系統(tǒng)或非造血系統(tǒng)疾?。?2、輔助診斷某些造血系統(tǒng)疾病 ; 3、作為鑒別診斷的應(yīng)用 。 注:由于凝血因子缺乏而有嚴重出血者如血友病、骨髓穿刺檢查應(yīng)列為禁忌。,二、血細胞的生成、發(fā)育規(guī)律及正常形態(tài)學(xué)特征,(一)血細胞的生成 目前認為,所有血細胞均起源于共同的造血干細胞。造血干細胞是造血組織中一類目前尚無形態(tài)學(xué)特征描述的功能細胞。其功能特點為:具有高度自我更新的能力;具有多向分化的能力。 血細胞的生成過程可劃分為三個連續(xù)的階段,即造血干細胞、造血祖細胞和形態(tài)學(xué)上可辨認的各系原始幼稚細胞階段,然后進一步成
2、熟為具有特定功能的各系血細胞。,(二)血細胞發(fā)育過程中形態(tài)學(xué)演變的一般規(guī)律,1、細胞大小及外形 (1)大?。簭脑技毎匠墒旒毎?,胞體由大逐漸變小。但巨核細胞則與此相反。 (2)外形:紅細胞系始終呈圓形,粒細胞和淋巴細胞系保持圓形或橢圓形不變;單核細胞系和巨核細胞系則均由圓形或橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。 2、核質(zhì)比例(N/C)胞核逐漸縮小(巨核細胞例外),胞質(zhì)量逐漸增多,由核大質(zhì)少變?yōu)楹诵≠|(zhì)多。,3、細胞核 (1)大?。河纱笞冃。藓思毎陌藙t由小明顯變大。 (2)核形:幼紅細胞胞核始終呈圓形,核逐漸縮小,核染質(zhì)固縮,最后脫核而消失,成熟紅細胞無細胞核;粒細胞系原始及早幼粒細胞階段呈圓形或橢圓形,
3、隨著細胞成熟,胞核的一側(cè)逐漸凹陷,最后形成分葉狀。 (3)核位置:居中,常偏位,側(cè)著邊。 (4)核染色質(zhì):結(jié)構(gòu)由細致疏松逐漸凝集變?yōu)榫o密粗糙,著色則由淺變深。 (5)核膜:由不明顯到明顯。 (6)核仁:由清晰可見到消失。,4、細胞質(zhì) (1)胞質(zhì)量:一般由少逐漸增多,淋巴細胞例外。 (2)著色。 (3)顆粒:多從無到有,從非特異性顆粒到特異性顆粒。 (4)空泡:正常情況下,漿細胞胞質(zhì)中可見小空泡,其他細胞系列中一般無空泡,出現(xiàn)空泡多由于細胞退行性變。,三、骨髓細胞形態(tài)學(xué)檢查的內(nèi)容和方法,(一)低倍鏡檢查 1、確定骨髓標本的取材和涂片制作是否滿意 2、判斷骨髓增生生程度:一般常直接在低倍鏡下觀察有
4、核細胞與成熟紅細胞之間的比例,骨髓增生程度通常采用五級法分級。,3、觀察巨核細胞 先在低倍鏡下觀察巨核細胞的數(shù)量,低倍鏡下見到巨核細胞后,即轉(zhuǎn)換油浸鏡觀察,進行分類計數(shù),并注意觀察巨核細胞及血小板的形態(tài)有無異常,至少觀察30個以上的巨核細胞。 4、注意有無異常細胞 尤其應(yīng)在涂片尾部、邊緣及骨髓小粒周圍注意觀察,發(fā)現(xiàn)這些可疑異常細胞,然后再在油浸鏡下觀察加以確認。,(二)油浸鏡檢查 1、有核細胞分類計數(shù) 在油浸鏡下連續(xù)分類計數(shù)200個或500個有核細胞,按細胞的不同系列和不同的發(fā)育階段分別計數(shù)。其不同發(fā)育階段細胞分別占有核細胞總數(shù)的百分數(shù),再累計粒細胞系總數(shù)和幼紅細胞總數(shù),計算粒紅比例(G:E)
5、。巨核細胞另行單獨計數(shù),故不計入;分裂型細胞、退化或破碎細胞在分類計數(shù)時也不計入。 2、觀察細胞形態(tài) 仔細觀察各系列細胞的形態(tài)有無異常,并注意有無特殊的異常細胞出現(xiàn)。,(三)檢查結(jié)果的分析 1、骨髓增生程度 (1)增生極度活躍(有核細胞量顯著增多):反映骨髓造血功能亢進,常見于白血病。 (2)增生明顯活躍(有核細胞量增多):反映骨髓造血功能旺盛,見于各種增生性貧血。 (3)增生活躍(有核細胞中等量):反映骨髓造血功能基本正常,見于正常人骨髓象。 (4)增生減低(有核細胞量減少):反映骨髓造血功能減低,見于再生障礙性貧血(慢性型)。 (5)增生明顯減低(有核細胞量顯著減少):反映骨髓造血功能衰竭
6、,見于再生障礙性貧血(急性型)。,2、骨髓中各系列細胞及其各發(fā)育階段細胞的比例 (1)粒細胞系統(tǒng):約占有核細胞的50%60%。 (2)紅細胞系統(tǒng):幼紅細胞約占有核細胞的20%。 粒紅比例(G/E):以粒細胞系的百分數(shù)除以紅細胞系的百分數(shù)即為粒紅比例。參考值為24:1。 (3)淋巴細胞系統(tǒng):約占有核細胞的20%,以成熟淋巴細胞為主。 (4)單核細胞系統(tǒng):一般4%,系成熟型單核細胞。 (5)漿細胞系統(tǒng):一般2%,以成熟階段的漿細胞為主。 (6)巨核細胞系統(tǒng):735個為正常值。 (7)其他細胞:可見到極少量網(wǎng)狀細胞、內(nèi)皮細胞、組織嗜堿細胞等非造血細胞成分。,四、血細胞的細胞化學(xué)染色,(一)過氧化物酶
7、染色 【原理】血細胞中的過氧化物酶(peroxidase,POX)能分解試劑中的底物H2O2,釋出新生態(tài)氧,使無色聯(lián)苯胺氧化為藍色聯(lián)苯胺,后者與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍黑色的顆粒,沉著于細胞質(zhì)中。 【結(jié)果】胞質(zhì)中無藍黑色顆粒者為陰性反應(yīng),出現(xiàn)細小顆粒、分布稀疏者為弱陽性反應(yīng),顆粒粗大而密集者為強陽性反應(yīng)。 【臨床意義】過氧化物酶染色主要用于急性白血病類型的鑒別。急性粒細胞白血病時,白血病細胞多呈強陽性反應(yīng);急性單核細胞白血病時呈弱陽性或陰性反應(yīng);急性淋巴細胞白血病則呈陰性反應(yīng)。因此,POX染色對急性粒細胞白血病與急性淋巴細胞白血病的鑒別最有價值。,(二)中性粒細胞堿性磷酸酶染色(NAP) 【原
8、理】偶氮偶聯(lián)法。染色原理是血細胞內(nèi)的堿性磷酸酶將基質(zhì)液中的-磷酸萘酚鈉水解,產(chǎn)生-萘酚與重氮鹽偶聯(lián)形成灰黑色沉淀,定位于細胞質(zhì)內(nèi)酶活性所在之處。 【結(jié)果】堿性磷酸酶主要存在于成熟階段的中性粒細胞(分葉核及桿狀核),其他血細胞均呈陰性反應(yīng)。 【參考值】成人NAP陽性率10%40%;積分值4080%(分)。,【臨床意義】 1、感染性疾病 急性化膿菌感染時NAP活性明顯增高,病毒性感染時其活性在正常范圍或略減低,可幫助細菌性感染與病毒性感染的鑒別。 2、慢性粒細胞白血病的NAP活性明顯減低,類白血病反應(yīng)的NAP活性極度增高,故可作為與慢性粒細胞白血病鑒別的一個重要指征。 3、急性粒細胞白血病時NAP
9、積分值減低;急性淋巴細胞白血病的NAP積分值多增高;急性單核細胞白血病時一般正?;驕p低,故可作為急性白血病類型的鑒別方法之一。 4、再生障礙性貧血時NAP活性增高;陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿時活性減低。 5、其他血液病。 6、腺垂體或腎上腺皮質(zhì)功能亢進,NAP積分值可增高。,(三)鐵染色 【原理】人體內(nèi)的總鐵有一定量以鐵蛋白和含鐵血黃素的形式貯存在骨髓中的單核-吞噬細胞系統(tǒng)細胞的胞質(zhì)內(nèi),幼紅細胞胞質(zhì)的線粒體中也含有含鐵血黃素。這些鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應(yīng),生成藍色的鐵氰化鐵沉淀,定位于含鐵的部位。 【結(jié)果】 1、細胞外鐵 觀察骨髓小粒中貯存在單核-吞噬細胞系統(tǒng)內(nèi)的鐵。陽性反應(yīng)為在骨髓小粒上見
10、到呈淺藍綠色均勻的無形物質(zhì),或呈藍色或深藍色的小珠狀、粗顆粒狀或藍黑色的小塊狀物質(zhì)。 2、細胞內(nèi)鐵 觀察幼紅細胞內(nèi)的鐵。正常幼紅細胞(主要是晚幼紅細胞)的細胞核周圍可見到15個呈藍色細小的鐵顆粒。含有鐵顆粒的幼紅細胞稱為鐵粒幼細胞。如含粗大深染的鐵粒在10個以上,并環(huán)繞細胞核排列超過核周徑2/3以上者。,【參考值】 1、細胞外鐵 1+2+,大多為2+。 2、細胞內(nèi)鐵 20%90%,平均值為65%。 【臨床意義】 1、缺鐵性貧血時,早期骨髓中貯存鐵就已耗盡,細胞外鐵呈“”。因此,鐵染色是目前診斷缺鐵性貧血及指導(dǎo)鐵劑治療的一項可靠和切合臨床實用的檢驗方法。 2、非缺鐵性貧血如球蛋白生成障礙性貧血,
11、細胞外鐵多增加,常3+4+。 3、鐵粒幼細胞性貧血時,鐵粒幼細胞增多,并可見到環(huán)狀鐵粒幼細胞。,五、常見血液病的血學(xué)特征,1、缺鐵性貧血 是因體內(nèi)貯存鐵缺乏而使血紅蛋白合成不足所致。 【血象】 (1)紅細胞、血紅蛋白均減少,以血紅蛋白減少更為明顯。 (2)輕度貧血時成熟紅細胞的形態(tài)無明顯異常。中度以上貧血才顯示小細胞低色素性特征,紅細胞體積減小,淡染,中央蒼白區(qū)擴大。 (3)網(wǎng)織紅細胞輕度增多或正常。 (4)白細胞計數(shù)和分類計數(shù),以及血小板計數(shù)一般正常。 【骨髓象】 (1)骨髓增生明顯活躍。 (2)紅細胞系統(tǒng)增生活躍。 (3)貧血早期程度較輕時,幼紅細胞形態(tài)無明顯異常。中度以上貧血時,幼紅細胞
12、內(nèi)血紅蛋白合成不足,細胞體積減小,胞質(zhì)量少。 (4)粒細胞系相對減少。 (5)巨核細胞正常。,2、再生障礙性貧血(AA)簡稱再障,是由于多種原因所致骨髓造血干細胞減少和(或)功能異常及造血微環(huán)境損傷,導(dǎo)致紅細胞、粒細胞和血小板生成減少的一組綜合征。 (1)急性期:急性型再生障礙性貧血(AAA)又稱重型再障型(SAA-),起病急,發(fā)展迅速,常以嚴重出血和感染為主要表現(xiàn)。 【血象】呈全血細胞減少。紅細胞、血紅蛋白顯著減少,兩者平行性下降,呈正常細胞正常色素性貧血;網(wǎng)織紅細胞明顯減少,絕對值0.5109/L;白細胞明顯減少;血小板明顯減少,常2.0109/L。 【骨髓象】急性型再障的骨髓損害廣泛。骨
13、髓增生明顯減低。粒、紅兩系細胞極度減少,淋巴細胞相對增高。巨核細胞顯著減少。漿細胞分類比值增高。,(2)慢性型:CAA起病和進展緩慢,以貧血和輕度皮膚、粘膜出血癥狀多見,嚴重出血和感染少見。 【血象】紅細胞、血紅蛋白平行性下降,血紅蛋白多為中度或重度減低,呈正常細胞正常色素性貧血。網(wǎng)織紅細胞減少,絕對值低于正常,常小于15109/L;白細胞減少,多在(2.03.0)109/L;血小板減少,多在(3050)109/L。 【骨髓象】慢性型再障的骨髓中可出現(xiàn)一些局灶性代償性造血灶,故不同部位骨髓穿刺的結(jié)果可有一定的差異。骨髓增生程度多為增生減低。巨核細胞、粒細胞、紅細胞三系細胞均不同程度減少。巨核細
14、胞減少常早期就出現(xiàn),治療有效時恢復(fù)也最慢,故在診斷上的意義較大。淋巴細胞相對增多。 如穿刺部位為代償性造血灶,則骨髓象呈增生活躍,粒系百分率可呈正?;驕p低,紅系細胞百分率常增高,但巨核細胞仍顯示減少或明顯減少。,(二)白血病 1、急性白血病 【血象】 (1)紅細胞及血紅蛋白中度或重度減少,呈正常細胞正常色素性貧血。 (2)白細胞計數(shù)不定:白細胞數(shù)增多者,多在(1050)109/L之間,也有白細胞計數(shù)在正常范圍或減少。白細胞分類計數(shù)可見一定數(shù)量的白血病性原始或幼稚細胞,所占百分率不定。 (3)血小板計數(shù)減少。 【骨髓象】 (1)骨髓增生明顯活躍或極度活躍。 (2)一系或二系原始細胞明顯增多,30
15、%ANC(all nucleated cell,所有有核細胞)。 (3)因白血病細胞類型的不同,其他系列血細胞均受抑制而減少。 (4)涂片中分裂型細胞和退化細胞增多。在急淋白血病中,“藍細胞”較其他類型白血病中多見;在急粒和急單白血病中,可見到Auer小體。,2、慢性白血病 (1)慢性粒細胞白血?。篊ML為起源于造血干細胞的克隆性增殖性疾病,以粒系細胞增生為主。多見于青壯年,起病緩慢,突出的臨床表現(xiàn)為脾明顯腫大和粒細胞顯著增高。細胞遺傳學(xué)的特征為具有特異性的Ph染色體。 【血象】紅細胞及血紅蛋白早期正?;蜉p度減少,隨病情發(fā)展貧血逐漸加重,急變期呈重度貧血。一般為正常細胞正常色素性貧血。白細胞顯
16、著增高為突出表現(xiàn)。疾病早期可在(2050)109/L,多數(shù)在(100300)109/L。分類計數(shù)粒細胞比例增高,可見各階段粒細胞,尤以中性晚幼粒細胞為多見,原粒細胞和早幼粒細胞10%。嗜堿性粒細胞增高為慢性的特征之一。血小板早期增多或正常,疾病加速期及急變期,血小板可進行性下降。 【骨髓象】骨髓增生極度活躍。粒細胞系顯著增生,原粒和早幼粒細胞10%,嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞也增多。幼紅細胞增生受抑制。巨核細胞早期增多,晚期減少。,(三)原發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP) 是一種自身免疫性疾病,也有稱為免疫性血小板減少性紫癜。其特點為患者體內(nèi)產(chǎn)生抗血小板抗體,致使血小板壽命縮短,破壞過多。而骨髓中巨核細胞增多,但巨核細胞的成熟及產(chǎn)血小板的功能
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