支原體及衣原體.ppt

1、支原體及衣原體,王悅,支原體（mycoplasma）,柔膜體綱,支原體目,肺炎支原體，人型支原體，生殖支原體，穿透支原體，發(fā)酵支原體，梨支原體,解脲尿原體,支原體科,無膽甾原體科,螺原體科,支原體屬,脲原體屬,3.生物學(xué)性狀,3.2 結(jié)構(gòu) 內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類，中層為脂類（膽固醇為主），凡作用于膽固醇的物質(zhì)，如皂素、二性霉素B等均能破壞細胞膜致其死亡。細胞膜外有莢膜。 特殊的頂端結(jié)構(gòu)： 粘附宿主上皮 細胞表面，與支 原體的致病有關(guān)。,3.生物學(xué)性狀,3.2 培養(yǎng)特性 培養(yǎng)基中需加入1020%人或動物血清以提供膽固醇和其他長鏈脂肪酸。多數(shù)還需添加酵母浸液、組織浸液、核酸提取物和輔酶。 最適pH

2、7.88.0之間，低于7.0則死亡，但解脲脲原體最適 pH6.06.5。 兼性厭氧，多數(shù)在37微氧環(huán)境生長良好。 固體培養(yǎng)基上，37培養(yǎng)310天可生長直徑10600m的 “油煎蛋”樣菌落，低倍鏡觀察菌落呈圓形，中央致密隆起，外 周有顆粒包繞。 繁殖方式除了二分裂外，還有分節(jié)、出芽、斷裂和分枝等 方式。,3.生物學(xué)特性,3.生物學(xué)性狀,3.生物學(xué)性狀,3.生物學(xué)性狀,3.3 生化反應(yīng),3.4 抗原結(jié)構(gòu) 支原體的抗原主要來自細胞膜外層蛋白、構(gòu)成莢膜的肽聚糖和中層 脂類組成。其外層蛋白是型特異性抗原，具有免疫原性。 生長抑制試驗（GIT）和代謝抑制試驗（MIT）利用針對此抗原的型 特異性血清來抑制支

3、原體在培養(yǎng)基上生長，可將支原體分成若干血 清型。3.5 抵抗力 支原體無細胞壁，對理化因素抵抗力弱： 不耐干燥、不耐熱，耐寒。 對化學(xué)消毒劑敏感，但對堿、醋酸鉈、結(jié)晶紫有抵抗力。 對作用于細胞壁的青霉素類天然耐受，對干擾蛋白質(zhì)合成和 作用于DNA螺旋酶阻礙DNA合成的抗生素敏感。,3.生物學(xué)特性,4.1 致病物質(zhì) 粘附素：粘附到尿道和生殖道上皮細胞 莢膜或者微莢膜：具有抗吞噬作用 毒性代謝產(chǎn)物：神經(jīng)毒素、磷脂酶C、核酸酶、過氧化氫和 超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細胞或紅細胞的病理損傷 超抗原：免疫調(diào)節(jié) 其它：如穿透支原體粘附侵入CD4 T細胞引起損傷,4.致病性,4.3 免疫性 體液免疫：抗

4、膜蛋白的抗體包括IgM、IgG和SIgA 細胞免疫：主要是特異性CD4Th1 細胞分泌細胞因子,4.致病性, 肺炎支原體是目前所能確定引起人類呼吸道感染性疾病的唯一支原體，主要引起人類支原體肺炎。,肺炎支原體,0.20.3m，高度多形性，如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀； 初次分離應(yīng)在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中，一般10天左右長出菌落；多次傳代后生長加快，菌落呈“油煎蛋”狀； 能發(fā)酵葡萄糖，不能利用精氨酸與尿素，對豚鼠紅細胞產(chǎn)生溶血環(huán)； 對美藍、醋酸鉈、青霉素不敏感。,1.生物學(xué)性狀, 2.1 主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏末秋初，115歲人群發(fā)病率較高，嬰兒發(fā)病率最高。 2.2 含

5、特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170 kDa）和P30（32 kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。 肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-、IL-1、IL-6）引起組織損傷。 莢膜 毒性代謝產(chǎn)物,2.致病性, 原發(fā)性非典型性肺炎（primary atypical pneumonia）（間質(zhì)性肺炎），臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主，有時并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。還可引起咽喉炎、鼻炎、中耳炎和氣管炎等,3.所致疾病, 血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細胞； 呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對防止再感

6、染有較強保護作用； 出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作,4.免疫性,標本采集 咽拭子去患者咽部分泌物或痰標本于培養(yǎng)基培養(yǎng) 分離鑒定 12w取菌落生化鑒定（分離陽性率低） （形態(tài)、糖發(fā)酵、溶血性、紅細胞吸附試驗） 生長抑制試驗GIT 代謝抑制試驗MIT 冷凝集試驗 PCR：從痰標本中檢測支原體核酸16S rRNA或 P1蛋白基因 ELISA: 抗體檢測 抗原檢測,4.微生物學(xué)檢查, 大環(huán)內(nèi)酯類藥物 喹諾酮類藥物,5.治療, 脲原體屬中只有解脲脲原體是致病支原體，主要引起人類生殖道感染。,解脲脲原體, 形態(tài)：0.50.3 m，單個或成雙排列 固體培養(yǎng)：48 h后長出直徑1530 m

7、“油煎蛋”狀菌落。 最適pH為5.56.5。 生化反應(yīng)：分解尿素，不分解糖類和精氨 酸，液體培養(yǎng)基中分解尿素產(chǎn)生氨 抵抗力：對1:2000醋酸鉈不敏感 抗原：MB抗原是其主要膜抗原，將解脲脲 原體分為A、B兩大群。 14個血清型。,1.生物學(xué)性狀, -粘附于宿主細胞表面，引起細胞膜損傷； -產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對宿主細胞有急性毒性作用； -磷脂酶損傷宿主的細胞膜。,2. 致病機制, 通常寄居在人的泌尿生殖道粘膜，引起非淋菌性尿道炎，也能引起盆腔等部位的感染。 還可通過胎盤感染胎兒，出現(xiàn)早產(chǎn)和死胎。也能引起婦女不孕不育癥。 常與衣原體、淋球菌合并感染 可通過兩性傳播，是引起性傳播疾病的病原

8、體之一。,3.所致疾病,接種液體培養(yǎng)基，分解尿素產(chǎn)堿，酚紅指示劑由橘黃色變?yōu)榧t色；再取0.2 ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于固體培養(yǎng)基，在5%CO2和90%N2的環(huán)境中經(jīng)37培養(yǎng)2448 h，用低倍鏡觀察菌落，進一步鑒定需用特異抗血清做GIT與MIT。 PCR,4.微生物學(xué)檢查,加強宣傳教育，注意性衛(wèi)生，切斷傳播途徑。 四環(huán)素類（紅霉素、多西環(huán)素、阿奇霉素等）、 喹諾酮類藥物治療，但有耐藥株產(chǎn)生。,5.防治,衣原體,沙眼衣原體,肺炎衣原體,衣原體（chlamydia）, G-，圓形或橢圓形體 具有細胞壁，其組成與G-菌相似 有獨特的發(fā)育周期，二分裂方式繁殖 獨立的酶系統(tǒng)，但不能產(chǎn)生代謝能量，嚴格細胞內(nèi)寄生

9、對多種抗生素敏感 有核糖體，基因組有DNA和RNA,共同特征, 3.1獨特的發(fā)育周期 原體（elementary body，EB）小而致密，成熟型，高度易感性； 網(wǎng)狀體（reticulate body，RB）大而疏松，繁殖型，不具感染性。,3.生物學(xué)性狀,包涵體（inclusion)：是衣原體在細胞空泡內(nèi)繁殖過程中所形成的集團形態(tài)，內(nèi)含無數(shù)子代原體和正在分裂的網(wǎng)狀體。,3.生物學(xué)性狀, 3.2培養(yǎng)特性 專性細胞內(nèi)寄生，可在雞胚卵黃囊中以及Hela細胞、HL等細胞中 繁殖生長。 3.3抗原結(jié)構(gòu) 根據(jù)細胞壁的成分不同分為： 屬特異性抗原 脂多糖 種特異性抗原 外膜蛋白 型特異性抗原 外膜蛋白可變區(qū)

10、氨基酸序列不同 3.4抵抗力 對熱敏感，耐寒耐干燥 對甲醛、酒精等常用消毒劑敏感，紫外線可迅速滅活 多種抗生素可抑制繁殖,3.生物學(xué)性狀, 4.1 致病物質(zhì) 內(nèi)毒素樣物質(zhì)抑制細胞代謝，破壞細胞 主要外膜蛋白與吸附、侵入宿主細胞及阻止吞噬體 和溶酶體融合有關(guān) 熱休克蛋白肉芽腫性炎癥、瘢痕形成,4.致病性與免疫性,4.致病性與免疫性, 4.2所致疾病, 4.3免疫性 細胞免疫與體液免疫，細胞免疫為主,直接涂片鏡檢 采用Giemsa、碘液或熒光抗體染色鏡檢，檢查上皮細胞內(nèi)有無包涵體。 分離培養(yǎng) 接種雞胚卵黃囊、小鼠或傳代細胞 核酸檢測,5.微生物學(xué)檢查,沙眼衣原體 Chlamydia trachomatis,傳染源：人 沙眼生物型、LGV性病淋巴肉芽腫生物型、鼠生物型,沙眼生物型 湯飛凡，1955，雞胚卵黃囊接種法 首次分離,對人不致病,沙眼,眼-眼，眼-手-眼:,沙眼生物型 A、B、Ba和C血清型,感染眼結(jié)膜上皮細胞,增殖，包涵體,局部炎癥,早期流淚、有粘液膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生,后期結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫 以及角膜血管翳引起的角膜損害,影響視力或致盲,包涵體結(jié)膜炎( 成人、嬰兒） 由沙眼生物型D-K血清型引起 嬰兒產(chǎn)道傳染 成人癥狀類似沙眼，病變較輕 泌尿生殖道感染 性接觸 血清型與包涵體結(jié)膜炎相同,性病淋巴肉芽腫生物型,血清型（L1、L2、L2a及L3） 致