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文檔簡介
1、.,1,膀胱癌組織中TERE1/UBIAD1表達(dá)及Ras-MAPK信號通路分析,殷享亮、劉文彬、韓學(xué)超、 許小兵、劉長濤,.,2,膀胱癌介紹,據(jù)國際癌癥組織機(jī)構(gòu)統(tǒng)計(jì),膀胱腫瘤作為泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,是目前導(dǎo)致人類因腫瘤死亡的第四大原因。,在中國,膀胱癌是排列第十位的常見腫瘤。 膀胱癌具有多發(fā)性、復(fù)發(fā)性的特點(diǎn)。,.,3,TERE1/UBIAD1簡介,移行上皮反應(yīng)基因(Tansitional epithelial response gene,TERE1)是人類一類新的直接與前列腺癌、膀胱癌有關(guān)的基因。該基因編碼一個含338個氨基酸,分子量約為36.skDa的蛋白質(zhì),廣泛表達(dá)于人類各種正常
2、組織的基因,特別是泌尿系統(tǒng)上皮如前列腺、膀胱、腎臟等,TERE1具有多個疏水結(jié)構(gòu)域,因其編碼UbiA類異戊系轉(zhuǎn)移酶,又稱之為UBIAD1,.,4,研究表明在前列腺癌、腎癌及癌細(xì)胞系中,TERE1基因和蛋白表達(dá)水平顯著下降,而通過基因轉(zhuǎn)染在前列腺癌細(xì)胞中過表達(dá)TEREI,能顯著減少腫瘤的增殖和維持基因組的穩(wěn)定,推測TERE1/UBIAD1基因可能是一類新的抑癌基因,.,5,目的,檢測分析臨床膀胱癌組織和正常膀胱組織TERE1/UBIAD1表達(dá)及Ras-MAPK信號通路的變化。,.,6,方法,采用免疫組化檢測分析人正常膀胱組織及膀胱癌組織中TERE1和端粒逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)的蛋白表達(dá)水平:用R
3、T-PCR及 westemblotting檢測膀胱癌組織中TEREI和hTERT的表達(dá)水平及Ras-MAPK信號通路關(guān)鍵分子的變化,hTERT作為端粒酶活化的限速酶,在正常組織的增生和腫瘤的發(fā)生中起著至關(guān)重要的作用。研究表明人類多種腫瘤組織中均可檢測到hTERT的活性表達(dá),而在正常膀胱組織中卻未檢測到。,.,7,膀胱癌及正常膀胱組織標(biāo)本中TEREI與hTERT免疫組化結(jié)果,.,8,結(jié)果-免疫組織化學(xué)染色分析 HE染色,Normal bladder Bladder carcinoma,9,.,TERE1(正常膀胱組織) (膀胱癌組織),10,.,hTERT正常膀胱組織 膀胱癌組織,11,.,膀胱
4、癌及正常膀胱組織標(biāo)本中TERE1與 hTERTmRNA水平,Lanel:200bpMarker: Lane2:正常膀胱TERE1(500bp)mRNA水平; Lane3:膀胱癌標(biāo)本中TERE1mRNA水平; Lane4:正常膀胱組織hTERT(182bP)mRNA水平; Lane5:膀胱癌標(biāo)本中hTETmRNA水平。下方膠圖:對應(yīng)組織中內(nèi)參 GAPDHmRNA水平。,12,.,膀胱癌組織中TERE1表達(dá)水平相對于正常膀胱組織明顯降低, TEREI表達(dá)水平與癌組織的分級分期密切相關(guān),隨著腫瘤惡性程度增加,癌組織TEREI表達(dá)下降越明顯。 膀胱癌組織中檢測到hTERT明顯表達(dá),而正常膀胱組織未檢測
5、到hTERT表達(dá)。,13,.,膀胱癌及正常膀胱標(biāo)本中TERE1與hTERT蛋白表達(dá),14,.,相對正常組織,膀胱癌中TERE1蛋白表達(dá)明顯下降,統(tǒng)計(jì)分析具有顯著性差異,P0.01,高惡性度膀胱組織中未檢測到TERE1蛋白表達(dá)。 正常膀胱組織沒有檢測到hTERT蛋白表達(dá)水平,而膀胱癌組織中hTERT明顯高表達(dá)。,15,.,Ras-MAPK信號通路中關(guān)鍵分子在組織中蛋白表達(dá)水平,16,.,與正常膀胱組織相對比,膀胱癌組織中磷酸化ERK、磷酸化MEK(1/2)、磷酸化B-Raf(Ser455)及磷酸化C-Raf(Ser338)蛋白表達(dá)水平明顯增加,有顯著性差異(P0.05); 而膀胱癌組織與正常膀胱
6、組織中總的ERK、MEK(1/2)、A一Raf、B一Raf、C一Raf及磷酸化A一Raf(Ser299)蛋白表達(dá)水平?jīng)]有明顯差異。 未檢測到膀胱癌組織中磷酸化的C-Raf(Ser259)和磷酸化的C-Raf(Ser289/296)蛋白表達(dá)。,17,.,討論,為探討TEREI與膀胱癌的關(guān)系, 我們的免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:膀胱癌T2、T3一4期TEREI染色陽性率與Ta、TI期陽性率相比,具有顯著性差異。 根據(jù)組織學(xué)分級,G3一4期TEREI染色陽性率與G2期TEREI相比具有顯著性,與GI期陽性率相比差異具有極顯著性。,18,.,討論,根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄PCR和免疫印跡結(jié)果顯示:膀胱癌組織中TEREI核
7、酸轉(zhuǎn)錄與蛋白翻譯水平與正常膀胱組織相比明顯下降。 提示TERE1與膀胱癌相關(guān)。隨著腫瘤惡性程度增加,癌組織TERE1表達(dá)下降越明顯,呈負(fù)相關(guān)。,19,.,TERE1與膀胱癌的關(guān)系,我們采用免疫印跡分析了膀胱癌組織中Ras-MAPK信號通路中一系列關(guān)鍵分子的變化。發(fā)現(xiàn): 膀胱癌組織中磷酸化ERK、磷酸化MEK(1/2)、磷酸化B-Raf(Ser455)及磷酸化e-Raf(Ser338)蛋白表達(dá)水平明顯增加,有顯著性差(P0.05);,20,.,TERE1與膀胱癌的關(guān)系,而膀胱癌組織與正常膀胱組織中總的ERK、MEK(1/2)、A-Raf、B-Raf、e-Raf及磷酸化A-Raf(Ser299)蛋白表達(dá)沒有明顯差異,提示膀胱癌中Ras-MAPK信號通路明顯被激活,.,21,Thank you,22,.,后面內(nèi)容直接刪除就行 資料可以編輯修改使用 資料可以編輯修改使用,23,.,主要經(jīng)營:網(wǎng)絡(luò)軟件設(shè)計(jì)、圖文設(shè)計(jì)制作、發(fā)布廣告等 公司秉著以優(yōu)質(zhì)的服務(wù)對待每一位客戶,做到讓客戶滿意!,24,.,致力于數(shù)據(jù)挖掘,合同簡歷、論文寫作、PPT設(shè)計(jì)、計(jì)劃書、策劃案、學(xué)習(xí)課件、各類模板等方方面面,打造全網(wǎng)一站式需求,25,.,感謝您的觀看和下載,The user
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