基因診斷與治療ppt課件

1、.,1,膀胱癌組織中TERE1/UBIAD1表達及Ras-MAPK信號通路分析,殷享亮、劉文彬、韓學超、 許小兵、劉長濤,.,2,膀胱癌介紹,據(jù)國際癌癥組織機構(gòu)統(tǒng)計，膀胱腫瘤作為泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，是目前導致人類因腫瘤死亡的第四大原因。,在中國，膀胱癌是排列第十位的常見腫瘤。 膀胱癌具有多發(fā)性、復發(fā)性的特點。,.,3,TERE1/UBIAD1簡介,移行上皮反應基因(Tansitional epithelial response gene，TERE1)是人類一類新的直接與前列腺癌、膀胱癌有關(guān)的基因。該基因編碼一個含338個氨基酸，分子量約為36.skDa的蛋白質(zhì)，廣泛表達于人類各種正常

2、組織的基因，特別是泌尿系統(tǒng)上皮如前列腺、膀胱、腎臟等,TERE1具有多個疏水結(jié)構(gòu)域，因其編碼UbiA類異戊系轉(zhuǎn)移酶，又稱之為UBIAD1,.,4,研究表明在前列腺癌、腎癌及癌細胞系中，TERE1基因和蛋白表達水平顯著下降，而通過基因轉(zhuǎn)染在前列腺癌細胞中過表達TEREI，能顯著減少腫瘤的增殖和維持基因組的穩(wěn)定,推測TERE1/UBIAD1基因可能是一類新的抑癌基因,.,5,目的,檢測分析臨床膀胱癌組織和正常膀胱組織TERE1/UBIAD1表達及Ras-MAPK信號通路的變化。,.,6,方法,采用免疫組化檢測分析人正常膀胱組織及膀胱癌組織中TERE1和端粒逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)的蛋白表達水平:用R

3、T-PCR及 westemblotting檢測膀胱癌組織中TEREI和hTERT的表達水平及Ras-MAPK信號通路關(guān)鍵分子的變化,hTERT作為端粒酶活化的限速酶，在正常組織的增生和腫瘤的發(fā)生中起著至關(guān)重要的作用。研究表明人類多種腫瘤組織中均可檢測到hTERT的活性表達，而在正常膀胱組織中卻未檢測到。,.,7,膀胱癌及正常膀胱組織標本中TEREI與hTERT免疫組化結(jié)果,.,8,結(jié)果-免疫組織化學染色分析 HE染色,Normal bladder Bladder carcinoma,9,.,TERE1(正常膀胱組織) （膀胱癌組織）,10,.,hTERT正常膀胱組織 膀胱癌組織,11,.,膀胱

4、癌及正常膀胱組織標本中TERE1與 hTERTmRNA水平,Lanel:200bpMarker: Lane2:正常膀胱TERE1(500bp)mRNA水平; Lane3:膀胱癌標本中TERE1mRNA水平; Lane4:正常膀胱組織hTERT(182bP)mRNA水平; Lane5:膀胱癌標本中hTETmRNA水平。下方膠圖:對應組織中內(nèi)參 GAPDHmRNA水平。,12,.,膀胱癌組織中TERE1表達水平相對于正常膀胱組織明顯降低， TEREI表達水平與癌組織的分級分期密切相關(guān)，隨著腫瘤惡性程度增加，癌組織TEREI表達下降越明顯。 膀胱癌組織中檢測到hTERT明顯表達，而正常膀胱組織未檢測

5、到hTERT表達。,13,.,膀胱癌及正常膀胱標本中TERE1與hTERT蛋白表達,14,.,相對正常組織，膀胱癌中TERE1蛋白表達明顯下降，統(tǒng)計分析具有顯著性差異，P0.01，高惡性度膀胱組織中未檢測到TERE1蛋白表達。 正常膀胱組織沒有檢測到hTERT蛋白表達水平，而膀胱癌組織中hTERT明顯高表達。,15,.,Ras-MAPK信號通路中關(guān)鍵分子在組織中蛋白表達水平,16,.,與正常膀胱組織相對比，膀胱癌組織中磷酸化ERK、磷酸化MEK(1/2)、磷酸化B-Raf(Ser455)及磷酸化C-Raf(Ser338)蛋白表達水平明顯增加，有顯著性差異(P0.05); 而膀胱癌組織與正常膀胱

6、組織中總的ERK、MEK(1/2)、A一Raf、B一Raf、C一Raf及磷酸化A一Raf(Ser299)蛋白表達水平?jīng)]有明顯差異。 未檢測到膀胱癌組織中磷酸化的C-Raf(Ser259)和磷酸化的C-Raf(Ser289/296)蛋白表達。,17,.,討論,為探討TEREI與膀胱癌的關(guān)系， 我們的免疫組化實驗結(jié)果顯示:膀胱癌T2、T3一4期TEREI染色陽性率與Ta、TI期陽性率相比，具有顯著性差異。 根據(jù)組織學分級，G3一4期TEREI染色陽性率與G2期TEREI相比具有顯著性，與GI期陽性率相比差異具有極顯著性。,18,.,討論,根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄PCR和免疫印跡結(jié)果顯示：膀胱癌組織中TEREI核

7、酸轉(zhuǎn)錄與蛋白翻譯水平與正常膀胱組織相比明顯下降。 提示TERE1與膀胱癌相關(guān)。隨著腫瘤惡性程度增加，癌組織TERE1表達下降越明顯，呈負相關(guān)。,19,.,TERE1與膀胱癌的關(guān)系,我們采用免疫印跡分析了膀胱癌組織中Ras-MAPK信號通路中一系列關(guān)鍵分子的變化。發(fā)現(xiàn): 膀胱癌組織中磷酸化ERK、磷酸化MEK(1/2)、磷酸化B-Raf(Ser455)及磷酸化e-Raf(Ser338)蛋白表達水平明顯增加，有顯著性差(P0.05);,20,.,TERE1與膀胱癌的關(guān)系,而膀胱癌組織與正常膀胱組織中總的ERK、MEK(1/2)、A-Raf、B-Raf、e-Raf及磷酸化A-Raf(Ser299)蛋白表達沒有明顯差異，提示膀胱癌中Ras-MAPK信號通路明顯被激活,.,21,Thank you,22,.,后面內(nèi)容直接刪除就行 資料可以編輯修改使用 資料可以編輯修改使用,23,.,主要經(jīng)營：網(wǎng)絡軟件設計、圖文設計制作、發(fā)布廣告等 公司秉著以優(yōu)質(zhì)的服務對待每一位客戶，做到讓客戶滿意！,24,.,致力于數(shù)據(jù)挖掘，合同簡歷、論文寫作、PPT設計、計劃書、策劃案、學習課件、各類模板等方方面面，打造全網(wǎng)一站式需求,25,.,感謝您的觀看和下載,The user