酶標(biāo)儀.ppt

1、酶標(biāo)儀器，第一，酶標(biāo)儀器的發(fā)展：20世紀(jì)80年代，酶標(biāo)儀器在世界范圍內(nèi)廣泛使用；2.它是在20世紀(jì)80年代中期引入中國(guó)的。雖然國(guó)內(nèi)有少數(shù)科研單位和廠家開(kāi)始生產(chǎn)簡(jiǎn)單的酶標(biāo)儀器，但其性能遠(yuǎn)不如進(jìn)口設(shè)備。3.在20世紀(jì)90年代之前，進(jìn)口的微孔板閱讀器是主要的。1.微孔板閱讀器的發(fā)展：4。1993年，第二航空航天研究所開(kāi)始研制和生產(chǎn)具有國(guó)際水平的新一代自動(dòng)平板微孔板閱讀器；5.1995年正式進(jìn)入市場(chǎng)；現(xiàn)在它已經(jīng)發(fā)展成為一系列微孔板閱讀器產(chǎn)品，從最初的ZS2型號(hào)開(kāi)始，現(xiàn)在它已經(jīng)推出了ZS-2A、ZS-2000、ZS-3000、ZS-4000、ZS-5000等型號(hào)。2.酶標(biāo)儀器1的應(yīng)用。酶標(biāo)儀是一種應(yīng)用廣

2、泛的生物和醫(yī)療儀器。它采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法，根據(jù)酶標(biāo)記原理，根據(jù)有無(wú)有色物質(zhì)和顏色深淺進(jìn)行定性或定量分析。它可用于單克隆抗體篩選、凝血分析、抗生素敏感性試驗(yàn)和其他需要比色法的分析工作。2.酶標(biāo)儀器的應(yīng)用：2 .該儀器適用于臨床檢驗(yàn)、微生物學(xué)、流行病學(xué)、免疫學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)、農(nóng)林科學(xué)等領(lǐng)域。廣泛用于醫(yī)院、血站、防疫站、生物制品等部門(mén)。3.衛(wèi)生部明確規(guī)定，多種常見(jiàn)肝炎疾病的診斷不能通過(guò)目視檢查進(jìn)行，必須使用酶標(biāo)儀進(jìn)行判斷。沒(méi)有酶標(biāo)儀或沒(méi)有酶標(biāo)儀的醫(yī)院不能分級(jí)，他們沒(méi)有資格和權(quán)利來(lái)判斷肝炎。對(duì)于艾滋病病毒的檢測(cè)和判斷，有必要建立一個(gè)專(zhuān)門(mén)的艾滋病實(shí)驗(yàn)室，并使用酶標(biāo)儀進(jìn)行判斷。二是酶標(biāo)儀器的使用；4.世界

3、上有數(shù)百種匹配試劑用于酶標(biāo)儀器常規(guī)檢測(cè)的疾病。中國(guó)有幾十種：如癌胚抗原試驗(yàn)、甲胎蛋白試驗(yàn)、前列腺試驗(yàn)等。用酶標(biāo)儀定量檢測(cè)可以判斷疾病的性質(zhì)和檢查治療效果。光源燈、彩色濾光片、光電探測(cè)器、模擬信號(hào)處理、微電腦單元、顯示器、鍵盤(pán)、打印機(jī)、微孔板、X向驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)、Y向驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)、控制電路、DC穩(wěn)定電源、單通道微孔板讀數(shù)器工作原理圖因此，其光學(xué)原理與分光光度計(jì)相同。酶標(biāo)儀用于測(cè)量酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)微孔板中每個(gè)孔的光吸收值。通過(guò)測(cè)量每個(gè)微孔的光吸收值，可以確定每個(gè)微孔中溶液的濃度，該濃度值可以解釋該測(cè)試反應(yīng)中抗原和抗體的結(jié)合反應(yīng)。第三，酶標(biāo)儀的檢測(cè)原理，由于結(jié)合使用微處理器，它不僅可以完成光譜數(shù)

4、據(jù)的測(cè)量和計(jì)算，而且提高了儀器的自動(dòng)化程度。例如，自動(dòng)調(diào)零、自動(dòng)過(guò)濾和設(shè)置參數(shù)、設(shè)置上限和下限、自動(dòng)記錄和自動(dòng)打印等。微孔板讀數(shù)器的原理是檢測(cè)被測(cè)物體在特定波長(zhǎng)下的吸光度。酶標(biāo)儀光路系統(tǒng)示意圖，光源，光接收器，酶標(biāo)儀與分光光度計(jì)的區(qū)別：1。裝有比色溶液的容器不是比色皿，而是塑料微孔板；2.微孔板讀數(shù)器的光束垂直穿過(guò)待測(cè)溶液，即微孔板；3.酶標(biāo)儀通常用光密度代替吸光度來(lái)表示吸光度。酶標(biāo)儀垂直光束的特征是什么？1。樣品的吸光度受液體濃度和稀釋度的影響較??；2.受被測(cè)樣品的液位是否水平、酶標(biāo)板的透光率以及微孔板的孔底是否平整影響很大；三種酶標(biāo)板的原理、特點(diǎn)及應(yīng)用實(shí)例：4 .酶標(biāo)儀的技術(shù)性能，波長(zhǎng)范圍

5、：340納米、399納米、400納米和750納米；濾光器：最多可裝載8個(gè)濾光器(標(biāo)準(zhǔn)配置：4個(gè)濾光器，340納米、405納米、450納米和620納米)；讀取方式：?jiǎn)?、雙、多波長(zhǎng)檢測(cè)樣品形式：96孔微孔板或板條；測(cè)量范圍：0.0003.500外徑；精度：1%和0.005度，10度，405納米；四.微孔板讀數(shù)器的技術(shù)性能：線性度：0.5%和0.005 od，范圍為0.1OD至3OD重復(fù)性：0.5%和0.005 od分辨率：0.001 od溫度控制：30，37；打印機(jī)：外部標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算機(jī)打印機(jī)(并行接口)；通信接口：標(biāo)準(zhǔn)RS232串行接口(與計(jì)算機(jī)相連)；電源：電源140伏安，電壓90260伏，頻率47

6、63赫茲；5.微孔板讀數(shù)器的檢測(cè)單元：光通過(guò)被測(cè)物體前后的能量差是被測(cè)物體吸收的能量。在特定波長(zhǎng)下，同一被測(cè)物體的濃度與吸收的能量有定量關(guān)系。檢測(cè)單元：由OD值表示，OD是光密度的縮寫(xiě)，表示被檢測(cè)物體吸收的光密度，od10g(1 trans)，其中trans是被檢測(cè)物體的光透射值。根據(jù)布格-朗伯-比爾定律，OD值與光強(qiáng)有如下關(guān)系：EOD=log0/其中E代表吸收光密度，0代表入射光強(qiáng)度和透射光強(qiáng)度。OD值通過(guò)以下公式計(jì)算：EOD=鎘碳是測(cè)試物質(zhì)的濃度；d是被檢測(cè)物體的厚度；是摩爾因子，0，6。微孔板讀數(shù)器的波長(zhǎng)選擇。確定每種物質(zhì)在特定的波長(zhǎng)下都有其特定的波長(zhǎng)，并且在這個(gè)波長(zhǎng)下，這種物質(zhì)可以吸收

7、最多的光能。如果選擇其他波段，檢測(cè)結(jié)果將會(huì)不準(zhǔn)確。因此，在確定檢測(cè)對(duì)象時(shí)，我們選擇特定的波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè)，這就是所謂的測(cè)量波長(zhǎng)。6.酶標(biāo)簽機(jī)的波長(zhǎng)選擇：2。每種物質(zhì)對(duì)光能仍有一定的非特異性吸收。為了消除這種非特異性吸收，我們選擇另一個(gè)參考波長(zhǎng)來(lái)消除這種不準(zhǔn)確性。在參考波長(zhǎng)下，檢測(cè)對(duì)象的光吸收最小。檢測(cè)波長(zhǎng)和參考波長(zhǎng)的吸收值之間的差異可以消除非特異性吸收。第七章。Anthos酶標(biāo)儀檢測(cè)值的計(jì)算。儀器中的檢測(cè)器接收通過(guò)被檢測(cè)物體傳輸?shù)墓饽?，并將其轉(zhuǎn)換為二進(jìn)制數(shù)字信號(hào)，最大值為4095。儀器在沒(méi)有光源的情況下將透射率值定義為0，在沒(méi)有檢測(cè)對(duì)象的情況下定義為100。在實(shí)際檢測(cè)中，被檢測(cè)物體的透過(guò)率值都在0

8、到100之間。光透射值計(jì)算如下：最大值(最大值)；7.Anthos微孔板讀數(shù)器的檢測(cè)值計(jì)算如下：T(MeasMin)(MaxMin)，其中T為光透射值，MeasMin為被檢測(cè)物體的二進(jìn)制值，Min為0時(shí)檢測(cè)到的二進(jìn)制值，Max為100時(shí)檢測(cè)到的二進(jìn)制值，示例如下：max=3600min分鐘=20毫秒30T=(30-20)/3600-20)0.0028 od1克(1/T)=1克(1/0.0028)=2.5528.Anthos酶標(biāo)儀的中心定位，儀器會(huì)自動(dòng)進(jìn)行酶標(biāo)孔測(cè)試，測(cè)試每一個(gè)酶標(biāo)儀時(shí)，儀器實(shí)際應(yīng)測(cè)量35點(diǎn)，并選擇中間5點(diǎn)的平均值作為該孔的外徑值。光源的參考通道，用于校準(zhǔn)電壓不穩(wěn)定或燈泡磨損造成

9、的影響。10.測(cè)試結(jié)果說(shuō)明由于影響測(cè)試結(jié)果的因素很多，例如，不同的酶標(biāo)板和測(cè)試試劑的體積會(huì)導(dǎo)致不同的OD值，因此，只能使用與同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑對(duì)測(cè)試結(jié)果進(jìn)行比較和分析。應(yīng)根據(jù)試劑盒的說(shuō)明對(duì)結(jié)果進(jìn)行臨床解釋。11。微孔板讀數(shù)器的調(diào)試；1.微孔板讀數(shù)器由spectr組成2.許多微孔板讀數(shù)器都配有打印機(jī)或與打印機(jī)一起使用，因此可以直接打印各種測(cè)量數(shù)據(jù)。3.由于不同類(lèi)型的酶標(biāo)儀的操作程序和功能略有不同，因此在調(diào)試和使用前，有必要仔細(xì)閱讀該類(lèi)型酶標(biāo)儀的操作說(shuō)明。11、微孔板讀取器的調(diào)試，4)取決于所使用的電壓是否與微孔板讀取器所需的電壓一致。5)檢查各鍵的功能是否符合要求。6)按開(kāi)始按鈕啟動(dòng)閱讀板，按

10、停止按鈕停止閱讀板，按模式按鈕選擇不同的模式，包括單波長(zhǎng)、雙波長(zhǎng)、空白設(shè)置、極限設(shè)置等?？梢愿鶕?jù)需要選擇；還有回車(chē)鍵(回車(chē))、打印鍵(打印)等。查看在輸入并閱讀所需的報(bào)告格式后是否可以打印數(shù)據(jù)。7)如果所有功能鍵都符合手冊(cè)的要求，機(jī)器可以用來(lái)讀取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。十二、使用酶標(biāo)儀時(shí)，1)打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)；2)按MODE鍵選擇您需要的模式，如雙波長(zhǎng)和單波長(zhǎng)；3)按“報(bào)告”選擇您需要的格式，如原始數(shù)據(jù)或光吸收值。光吸收值報(bào)告是由空白校正的光吸收值，因?yàn)槲⑻幚砥骺梢云骄總€(gè)空白控制孔的吸收值，然后從每個(gè)孔的原始數(shù)據(jù)中減去平均空白控制值。這樣，獲得光吸收值報(bào)告。12、使用微孔板閱讀器，4)各種程序選擇好，

11、然后按回車(chē)鍵(ENTRE)，以便所有設(shè)置都固定。5)檢查所用濾光器的波長(zhǎng)是否正確；6)將待讀取的微孔板放在板閱讀室的板架上，并正確關(guān)閉門(mén)。7)按下開(kāi)始鍵。此時(shí)，閱讀進(jìn)度顯示在顯示屏上，并且在閱讀完成后數(shù)據(jù)可以自己打印。1.工作環(huán)境酶標(biāo)儀是一種精密光學(xué)儀器，良好的工作環(huán)境不僅能保證其精度和穩(wěn)定性，還能延長(zhǎng)其使用壽命。a、儀器應(yīng)放置在無(wú)強(qiáng)磁場(chǎng)和干擾電壓的位置。b、儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境中。c、為延緩光學(xué)元件的老化，應(yīng)避免陽(yáng)光直射。使用酶標(biāo)儀的注意事項(xiàng)：d .操作環(huán)境溫度應(yīng)在15至40之間，環(huán)境濕度應(yīng)在15%之間。運(yùn)行期間電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。f、清潔操作環(huán)境中的空氣，避免水蒸氣和煙霧。g .保持干燥、清潔、水平的工作面和足夠的操作空間。使用酶標(biāo)儀的注意事項(xiàng)：許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀前通過(guò)目測(cè)來(lái)判斷結(jié)果，操作過(guò)程是隨機(jī)的，所以使用酶標(biāo)儀后必須規(guī)范操作。使用移