Tamoxifen作用后人乳腺癌-核基質(zhì)雌激素受體的變化特性---1盧漢平.ppt

1、Tamoxifen作用后人乳腺癌 核基質(zhì)雌激素受體的變化特性 1盧漢平 2龍浩 2張旭 1高錦輝1 梁昌盛1中山大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)核醫(yī)學(xué)教研室 5100892中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院胸科Email:廣東省自然科學(xué)基金資助（021877）,Tamoxifen（三苯氧胺）:乳腺癌內(nèi)分泌治療常用首選藥物，通過靶細(xì)胞的雌激素受體（estrogen receptor，ER）起作用。腫瘤組織雌激素受體陽性的患者有效率為65%左右。,核基質(zhì)雌激素受體（nuclear matrix ER， EmR ）：核基質(zhì)中與雌激素受體特異結(jié)合，調(diào)控靶細(xì)胞生物功能的接納體。 EmR含量尤其是相對(duì)含量（ EmR/EnR）對(duì)反映機(jī)體激

2、素狀態(tài)有重要參考價(jià)值。,研究目的：通過體外實(shí)驗(yàn)，觀察Tamoxifen對(duì)乳腺癌細(xì)胞EmR的影響，探討EmR在內(nèi)分泌治療中的作用,材料與方法標(biāo)本：新鮮手術(shù)切除標(biāo)本均取自中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院，離體后置液氮保存，病理證實(shí)。主要試劑：3H-雌二醇(2,4,6,7-3H-estradiol，3H-E2)，NEN產(chǎn)品,放化純度98%，SA為2.96 TBq/mmol)。tamoxifen,Sigma產(chǎn)品。,細(xì)胞培養(yǎng)：將組織剪碎至1mm3，0.05%膠原酶 37消化30min, 750g離心5min，細(xì)胞尼龍網(wǎng)過濾，RPMI-1640(含10%小牛血清)培養(yǎng)，細(xì)胞濃度為12105cell/ml.,Tamoxif

3、en體外作用：Tamoxifen作用的終濃度分別設(shè)0.2.、0.4.、1.0 ug/ml，培養(yǎng)24小時(shí).,胞核懸液制備及核基質(zhì)分離： 勻漿 離心 消化 提取,受體分析:采用放射配體結(jié)合分析法（單點(diǎn)飽和結(jié)合反應(yīng)）。 3H-E2終濃度為5.0nmol/L，濾膜法分離結(jié)合與游離部分。PackardTri-carb2900TR測(cè)量放射性計(jì)數(shù).,數(shù)據(jù)處理：受體含量以fmol/100ugDNA表示，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用t檢驗(yàn)。,結(jié) 果：,1.乳腺癌組織與癌周組織EnR、EmR含量,Tamoxifen不同劑量對(duì)EnR、EmR的影響,小 結(jié),Tamoxifen能影響核雌激素受體的表達(dá)，在低劑量時(shí)，EnR、EmR均有明顯升高，可能是和Tam