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文檔簡(jiǎn)介
1、腎上腺素對(duì)內(nèi)毒素致雄性大鼠炎癥性肝損害的保護(hù)作用,柴敏、姚淵、徐蓉、謝珊珊,前言:,我國(guó)肝炎發(fā)病率不斷呈上升趨勢(shì),臨床上對(duì)于治療肝炎的新藥物的研究也在不斷發(fā)展,腎上腺素(EPI)作對(duì)于肝炎癥性損傷的保護(hù)作用在臨床上尚處于研發(fā)階段,有很大的臨床應(yīng)用前景。本實(shí)驗(yàn)利用內(nèi)毒素脂多糖(LPS)會(huì)造成小鼠肝臟炎癥性損傷,比較是否給予EPI的不同組小鼠間的肝臟是否形成炎癥性損傷及其損傷程度,不同劑量的EPI對(duì)肝臟的保護(hù)作用是否存在劑量關(guān)系。,實(shí)驗(yàn)材料與試劑,實(shí)驗(yàn)對(duì)象:50只SPF級(jí)SD大鼠(由實(shí)驗(yàn)室提供),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物介紹: SD大鼠:由美國(guó)的Sprague & Dawley農(nóng)場(chǎng)的R.W.Dawley用雜合的雄
2、性大鼠和Wistar雌性大鼠雜交后育成的一個(gè)白化封閉群大鼠。 SPF級(jí)動(dòng)物:機(jī)體內(nèi)無(wú)特定的微生物和寄生蟲(chóng)存在的動(dòng)物,但非特定的微生物和寄生蟲(chóng)是容許存在的。一般指無(wú)傳染病的健康動(dòng)物,是目前國(guó)外使用最廣泛的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 篩選標(biāo)準(zhǔn):體重為200g左右的雄性大鼠,實(shí)驗(yàn)儀器與試劑,實(shí)驗(yàn)儀器與器材:Beckman全自動(dòng)生化分析儀CX-5型,靜脈注射器,剪刀,鑷子,自動(dòng)分析天平,小試管,移液管 實(shí)驗(yàn)試劑:LPS(同一廠家生產(chǎn),同批號(hào)),EPI (同一廠家生產(chǎn),同批號(hào)),生理鹽水,標(biāo)記染料(苦味酸,品紅),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理方式,分組方法:分為5組,每組10只。采用完全隨機(jī)分組法。,1、編號(hào):按動(dòng)物體重從小到大
3、編號(hào)并標(biāo)記。 2、取隨機(jī)數(shù):給每個(gè)編號(hào)一個(gè)隨機(jī)數(shù)(查隨機(jī)數(shù)表或從計(jì)算機(jī)獲得)。 3、確定組別:根據(jù)受試對(duì)象獲得的隨機(jī)數(shù)決定受試對(duì)象的組別。,處理方式:,第一組:為空白對(duì)照組,先靜脈注射生理鹽水6mg/kg,再靜脈點(diǎn)滴生理鹽水2.4ml/kg/h,持續(xù)6小時(shí)。 第二組:為L(zhǎng)PS組,先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點(diǎn)滴生理鹽水2.4ml/kg/h,持續(xù)6小時(shí)。 第三組:為EPI低劑量組,先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點(diǎn)滴腎上腺素0.12g/kg/min,持續(xù)6小時(shí)。 第四組:為EPI中劑量組,先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點(diǎn)滴腎上腺素0.3g/kg/min,持續(xù)6小時(shí)。 第五
4、組:為EPI高劑量組,先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點(diǎn)滴腎上腺素0.6g/kg/min,持續(xù)6小時(shí)。 備注:對(duì)照組所用生理鹽水及其劑量為參考文獻(xiàn)所得。,實(shí)驗(yàn)相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)的取樣及觀察,1、于LPS注射前、注射后兩小時(shí)采用內(nèi)眥靜脈取血法分別取適量血,檢測(cè)血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 2、于LPS注射后六小時(shí)斷頭處死并取血,檢測(cè)血清ALT、AST、TNF、IL-1和IL-10水平。 3、對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行解剖,取肝臟,觀察其組織病理學(xué)改變。,結(jié)果的分析方法,1、比較第一組與第二組的各項(xiàng)指標(biāo):LPS是否對(duì)大鼠肝臟造成炎癥性損傷及其損傷程度。 2、比較第二組與第三、四、五的各項(xiàng)指標(biāo):EPI對(duì)LPS造成的大鼠肝臟炎癥性損傷是否具有一定的保護(hù)作用。 3、對(duì)第三、四、五組的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行比較:不同劑量的EPI對(duì)大鼠肝臟炎癥性損傷的保護(hù)作用是否存在劑量關(guān)系。 統(tǒng)計(jì)分析:采用SPSS軟件作各組間的方差分析比較其差異性。,參考文獻(xiàn):,1、楊文敏,曾其毅中國(guó)循證兒科雜志2007年2卷四期 2、Bozkurt S, Ersoy E, Tekyn HE. The cytoprotective effect of iloprost against carbon tetrachloride induc
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