實(shí)訓(xùn)一 顯微鏡的使用和微生物測(cè)微技術(shù)ppt課件.ppt

1、實(shí)訓(xùn)一 顯微鏡的使用和微生物測(cè)微技術(shù),食品微生物學(xué),1,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1. 練習(xí)和掌握顯微鏡的使用方法（低倍鏡、高倍鏡、油鏡）。 2. 掌握使用測(cè)微尺測(cè)定微生物大小的方法，熟悉微生物大小的一般概念。,2,二、實(shí)驗(yàn)原理,（一）顯微鏡的結(jié)構(gòu)、光學(xué)原理和操作方法 1.顯微鏡分機(jī)械系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)兩部分 機(jī)械系統(tǒng)包括：鏡筒、轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)、鏡臂、鏡座、粗準(zhǔn)焦螺旋、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。 光學(xué)系統(tǒng)包括：目鏡、物鏡、聚光器、光源、濾光片、虹彩光圈。,3,雙目光學(xué)顯微鏡,二、實(shí)驗(yàn)原理,4,（二）顯微鏡的光學(xué)原理,1.成像原理 光路：光源虹彩光圈聚光鏡通光孔標(biāo)本（一定要透明）物鏡鏡筒目鏡眼。,二、實(shí)驗(yàn)原理,5,(三)油鏡

2、工作原理,香柏油的折光率（1.51-1.52）與玻璃 片折光率（1.52）相近似，因此在物鏡（玻璃）與標(biāo)本載片（玻璃）之間加入香柏油可以使光線不致因從一個(gè)介質(zhì)（玻璃）進(jìn)入到另一折光率不同的介質(zhì)即空氣（折光率為1.0）而引起部分散射，造成亮度不夠而觀察不清，這對(duì)透鏡彎曲度較大，直徑較?。ㄍㄟ^(guò)光線亦較?。┑挠顽R頭是特別重要的。 做法是在用油鏡觀察時(shí)要把油鏡頭（100）浸入香柏油中。,二、實(shí)驗(yàn)原理,6,1.物測(cè)微尺 物測(cè)微尺是一厚玻片，中央有一圓形蓋玻片，中央刻有1mm長(zhǎng)的標(biāo)尺，等分為100格，每格100m，用以標(biāo)定目測(cè)微尺，在不同放大倍數(shù)下每格的實(shí)際長(zhǎng)度。,二、實(shí)驗(yàn)原理,(四)測(cè)微技術(shù),7,二、實(shí)

3、驗(yàn)原理,8,2.目測(cè)微尺的標(biāo)定,將目測(cè)微尺裝入目鏡的隔板上，使刻度朝下；把物測(cè)微尺放在載物臺(tái)上使刻度朝上。用低倍鏡找到目測(cè)微尺的刻度，移動(dòng)物測(cè)微尺和目測(cè)微尺，使兩者的第一條刻度線重合，順著刻度找到另一條重合刻度線。計(jì)算在該放大倍數(shù)下目測(cè)微尺每個(gè)小格的實(shí)際長(zhǎng)度。 目測(cè)微尺每小格長(zhǎng)度(m)=,二、實(shí)驗(yàn)原理,9,用物測(cè)微尺標(biāo)定目測(cè)微尺,二、實(shí)驗(yàn)原理,10,1.材料 枯草芽孢染色涂片。 金黃色葡萄球菌涂片。 酵母菌染色涂片。 2.用具：顯微鏡、二甲苯、香柏油、鏡頭紙、物測(cè)微尺、目測(cè)微尺。,三、實(shí)驗(yàn)材料和用具,11,（一）顯微鏡的使用 1.取鏡和安放 右手握住鏡臂，左手托住鏡座。 把顯微鏡放在水平的實(shí)驗(yàn)

4、臺(tái)上，略偏左（顯微鏡放在距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊緣7厘米左右處）。,四、實(shí)驗(yàn)方法,12,2.低倍鏡的操作 置顯微鏡于固定的桌上，接通電源，打開(kāi)光源。 將標(biāo)本片放在載物臺(tái)上，是觀察的目的物處于圓孔的正中央。 將粗準(zhǔn)焦螺旋向下旋轉(zhuǎn)，眼睛在測(cè)向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。 張開(kāi)雙眼向物鏡里觀察，如果見(jiàn)到目的物，但不十分清楚，可用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，至目的物清晰為止。注意觀察時(shí)兩眼應(yīng)同時(shí)睜開(kāi)。使用單筒顯微鏡，應(yīng)習(xí)慣用左眼觀察，以便繪圖。,四、實(shí)驗(yàn)方法,13,3.高倍鏡的操作 使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目的物后將它移至視野正中處。 旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻片立即停止旋動(dòng)，這說(shuō)明原來(lái)低倍鏡并沒(méi)有調(diào)

5、準(zhǔn)，目的物并沒(méi)有真正找到，必須用低倍鏡重新調(diào)節(jié)。如果高倍鏡下觀察目的物有點(diǎn)模糊，調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，直到視野清晰。調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)要注意旋轉(zhuǎn)方向與載物臺(tái)上升或下降的關(guān)系，防止鏡頭與載玻片強(qiáng)力接觸，損壞鏡頭或載玻片。,四、實(shí)驗(yàn)方法,14,4.油鏡的操作 如果用高倍鏡目的物未能看清，可用油鏡。先用低倍鏡和高倍鏡檢查標(biāo)本片，將目的物移到視野正中。 在載玻片上滴一滴香柏油（或液體石蠟），將油鏡移至正中使油鏡頭浸沒(méi)在油中，剛好貼近載玻片。用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋微微向上調(diào)（切忌不用粗準(zhǔn)焦螺旋）即可。 油鏡觀察完畢，用油鏡紙將鏡頭上的油揩凈，另用擦鏡紙蘸少許二甲苯揩拭鏡頭，再用擦鏡紙揩干。,四、實(shí)驗(yàn)方法,15,5.顯微鏡

6、使用注意事項(xiàng),.顯微鏡應(yīng)置于平坦的桌面上。 .將標(biāo)本片夾在顯微鏡載物臺(tái)的十字夾中，注意要正面向上。 .先用低倍鏡再用高倍鏡觀察尋找目的物，此時(shí)要控制視野不能太亮，注意區(qū)別鏡頭上的灰塵和目的物。 .在標(biāo)本中央滴加一小滴香柏油，從鏡筒側(cè)面觀察，將油鏡（100）輕輕旋下，使它浸在香柏油內(nèi)。切勿猛烈的將鏡頭壓在標(biāo)本片上，防止損壞物鏡！,四、實(shí)驗(yàn)方法,16,.將眼睛移至目鏡，一邊觀察一邊慢慢旋動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，將載物臺(tái)上提。當(dāng)見(jiàn)到物象時(shí)，再用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)至圖像清晰。對(duì)于單目顯微鏡，使用油鏡時(shí)要將聚光器盡量上升，虹彩光圈放大。 .注意在旋動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，必須特別小心。決不能在觀察時(shí)將載物臺(tái)很快提升，以免損傷螺

7、旋。 .假如用油鏡時(shí)一再看不清目的物，可驗(yàn)看油中是否存在氣泡。如存在氣泡，可將鏡頭及標(biāo)本片上的油擦去，重新滴加。,四、實(shí)驗(yàn)方法,17,.觀察完畢后，下降載物臺(tái)，取下標(biāo)本片，用干凈的擦鏡紙蘸少量的二甲苯，輕揩去載玻片上的香柏油后，立即用干擦鏡紙揩干。 .收存顯微鏡時(shí)，應(yīng)將最短的鏡頭對(duì)準(zhǔn)透光孔，或?qū)⑽镧R的長(zhǎng)鏡頭轉(zhuǎn)成“八”字式，使兩個(gè)鏡頭同時(shí)擱在載物臺(tái)上。切勿將長(zhǎng)鏡頭對(duì)準(zhǔn)透光孔，以免與聚光器相碰而損壞。鏡臺(tái)、鏡身上占有水及污物，必須及時(shí)擦去。然后套上顯微鏡罩，對(duì)號(hào)放入顯微鏡箱中鎖好。,四、實(shí)驗(yàn)方法,18,（二）微生物測(cè)微,1.分別在低倍鏡、高倍鏡和油鏡下進(jìn)行目測(cè)微尺的標(biāo)定。 2.菌體大小的測(cè)量 將物

8、測(cè)微尺取下，換上標(biāo)本片，選擇適當(dāng)?shù)奈镧R測(cè)量目的物的大小，分別找出菌體的長(zhǎng)和寬占目測(cè)微尺的格數(shù)，再按照目測(cè)微尺1格的長(zhǎng)度算出菌體的長(zhǎng)度和寬度。用目測(cè)微尺測(cè)量微生物的大小。即可算出標(biāo)本（菌體）的大小。,四、實(shí)驗(yàn)方法,19,1.在低倍鏡、高倍鏡和油鏡下觀察標(biāo)本片 2.測(cè)量菌體的大小 在高倍鏡下測(cè)量酵母的大小(測(cè)1020個(gè)菌，求平均值)。 在油鏡下測(cè)枯草芽孢桿菌的長(zhǎng)與寬，測(cè)金黃色葡萄球菌的直徑(測(cè)量1020個(gè)菌體求平均值)。 在低倍鏡下求出目測(cè)微尺每格長(zhǎng)度后，再用同法求出在高倍鏡下和油鏡下(物測(cè)微尺上需加1滴香柏油)目測(cè)微尺每格的長(zhǎng)度。,五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,20,1.繪出油鏡下的枯草芽孢染色涂片、金黃色葡萄球菌涂片，高倍鏡下酵母菌染色涂片。 2.微生物大小的測(cè)量的結(jié)果填入下列空白 在低倍鏡下：目鏡測(cè)微尺（ ）格鏡臺(tái)測(cè)微尺（ ）格 目鏡測(cè)微尺每格（ ） m 在高倍鏡下：目鏡測(cè)微尺（ ）格鏡臺(tái)測(cè)微尺（ ）格 目鏡測(cè)微尺每格 （ ） m,六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告,21,在油鏡下：目鏡測(cè)微尺（ ）格鏡臺(tái)測(cè)微尺（ ）格 目鏡測(cè)微尺每格 （ ）m 枯草桿菌在油鏡下：長(zhǎng)目鏡測(cè)微尺（ ）格 （ ）m 寬目鏡測(cè)微尺（ ）格（ ）m 金黃色葡萄球菌在油鏡下： 直徑目鏡測(cè)微尺（ ）格= （ ）m 酵母菌在高倍鏡下：長(zhǎng)目鏡測(cè)微尺（ ）格 （ ） m 寬目鏡測(cè)