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1、實(shí)驗(yàn)五放線菌的插片培養(yǎng)和形態(tài)觀察,1 .理解放線菌的特征,觀察其形態(tài)特征2 .學(xué)習(xí)掌握放線菌觀察的基本方法,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模憾?、?shí)驗(yàn)原理、放線菌:由不同長度的細(xì)菌絲形成單細(xì)胞的菌絲體,克陽性細(xì)菌。 菌絲體可分為潛入培養(yǎng)基的營養(yǎng)菌絲(或也稱為基內(nèi)菌絲)和生長在培養(yǎng)基表面的氣生菌絲兩部分。 部分氣生菌絲分化為孢子絲,呈螺旋狀、波型或分枝狀等,其附生形式有群生、互生和輪生。 孢子多呈圓形、橢圓形、棒狀。 氣生菌絲及孢子的形狀和顏色常常作為分類的重要依據(jù),包括放線菌模式圖、孢子絲、菌絲、放線菌的菌落特征、三、實(shí)驗(yàn)材料、一、放線菌培養(yǎng)物紫色鏈霉菌和灰色鏈霉菌四天插入培養(yǎng)物。 2 .培養(yǎng)基:高氏合成1號培養(yǎng)
2、基3 .顯微鏡、無菌培養(yǎng)皿、無菌玻璃罩、顯微鏡、酒精燈、接種針、玻璃板等。 放線菌的插條培養(yǎng)、接種位置、四、實(shí)驗(yàn)步驟、插條并行接種的順序、嵌入培養(yǎng)法:逆平板(將熔化的高氏合成1號培養(yǎng)基無菌操作逆平板)嵌入(將無菌的玻璃罩以約45角插入培養(yǎng)基(9片/皿/組) 接種(無菌操作下將灰色鏈霉或紫色鏈霉孢子線接種嵌入物與培養(yǎng)基接觸處)培養(yǎng)(將嵌入物平板逆轉(zhuǎn),28,霉的載玻片培養(yǎng),1,培養(yǎng)池滅菌:在平皿底部鋪1張濾紙,再放一個(gè)u形玻璃棒,在其上放1張載玻片和罩子2、瓊脂塊的制作:取滅菌后的馬鈴薯或查可爾培養(yǎng)基6-7mL注入滅菌板,使其凝固成薄層(培養(yǎng)基不要太厚)。 用解剖刀切成邊長0.5-1cm的小塊,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)室的載玻片上(每片放2片)。 3、接種:取出少量孢子接種瓊脂塊的上緣,【接種量少,每次接種結(jié)束都會(huì)烤紅接種環(huán),注意不要讓細(xì)菌混入】用無菌鑷子將玻璃罩罩在瓊脂塊上,輕輕按壓。 4 .培養(yǎng):在平皿濾紙上滴下滅菌后的20%甘油(保濕)3mL以上(4滴下管),培養(yǎng)28小時(shí)。 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制了紫色鏈霉菌和灰色鏈霉菌基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和孢子絲。 生菌絲和p43、2酵母菌一般以出芽方式進(jìn)行無性繁殖。 酵母菌個(gè)體大小比細(xì)菌大數(shù)倍到十倍,可在高倍鏡下觀察。 一般細(xì)菌必須在油鏡下觀察。 在上次的實(shí)驗(yàn)練習(xí)問題中,如何區(qū)分酵母菌的營養(yǎng)細(xì)胞和子囊外的子囊孢子p 44,2,酵母菌的營養(yǎng)細(xì)胞呈紅色,
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