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文檔簡介
1、,免疫學(xué)檢驗(yàn),第二十七章免疫增殖病及檢驗(yàn),免疫增殖病的概念和分類 單克隆丙種球蛋白病的概念 常見的單克隆丙種球蛋白病 本周蛋白、M蛋白的概念 單克隆丙種球蛋白病的檢測,本章要點(diǎn),目錄,免疫增殖?。╥mmunoproliferative disease)是免疫系統(tǒng)異常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重要臨床表現(xiàn)包括免疫球蛋白數(shù)量和功能的異常,因此通過異常免疫球蛋白的檢測,可以為該類疾病的診斷提供重要依據(jù),檢測異常免疫球蛋白已經(jīng)成為臨床免疫檢驗(yàn)的重要檢測內(nèi)容。,前 言,第一節(jié) 概述,免疫增殖病的概念 免疫器官、免疫組織或免疫細(xì)胞異常增生(包括良性或惡性)所致的一組疾病。,免疫增殖病的分類,免疫增殖病
2、的分類,免疫球蛋白病的概念 由于B細(xì)胞或漿細(xì)胞異常增殖所引起的免疫球蛋白的異常增加,從而導(dǎo)致機(jī)體病理損傷的免疫增殖病。,分類,單克隆免疫球蛋白?。▎我豢寺?、惡性),多克隆免疫球蛋白病(全面、良性或繼發(fā)),第二節(jié) 單克隆丙種球蛋白病的臨床免疫學(xué)特征,突出特點(diǎn):患者血清存在異常增多的單克隆免疫球蛋白 M蛋白(monoclonal protein):單克隆免疫球蛋白理化性質(zhì)十分均一,但是多無免疫活性,可以是IgG、IgM、IgA、IgE或IgD,也可以是或輕鏈中的任何一型。 本周蛋白(Bence-Jone protein):M蛋白的輕鏈分子量較小,容易從尿中排出,最早由Bence-Jones測知。,
3、一、多發(fā)性骨髓瘤,多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma)是漿細(xì)胞異常增生的惡性腫瘤,也稱漿細(xì)胞瘤,因其引起骨破壞而得名?;颊叱0橛胸氀⒛I功損害和免疫功能障礙。近年發(fā)病有增高趨勢,男性多發(fā),男女比約為2:1,平均發(fā)病年齡是46.5歲。,臨床表現(xiàn): 骨痛 貧血 感染 高黏血癥表現(xiàn) 腎功能損害,患者骨破壞所致頭顱腫物及眼球突出,特點(diǎn): 血清中有大量單克隆M蛋白或尿中有大量本周蛋白 免疫球蛋白含量明顯降低 骨髓發(fā)現(xiàn)大量漿細(xì)胞或組織活檢證實(shí)有漿細(xì)胞瘤 原發(fā)性的溶骨性損害或廣泛骨質(zhì)疏松,不同類型的多發(fā)性骨髓瘤特點(diǎn),二、原發(fā)性巨球蛋白血癥,原發(fā)性巨球蛋白血癥(macroglobulinemia)
4、是以分泌IgM的漿細(xì)胞惡性增殖為病理基礎(chǔ)的疾病,好發(fā)于老年男性。 主要表現(xiàn)骨髓外浸潤,以淋巴結(jié)、肝和脾腫大等為主要體征并伴有血黏滯過高綜合征。,實(shí)驗(yàn)室檢查: 血清中患者血清IgM水平往往超過300mg/dl 血清分離不出或呈膠凍狀,電泳時(shí)血清有時(shí)難以泳動,集中于原點(diǎn)是該病的電泳特征 骨髓象可見淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和介乎兩者之間的漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞明顯增多 有些IgM分子具有冷球蛋白的特征 有約40的病人可出現(xiàn)本周蛋白尿,三、良性單克隆丙種球蛋白病,良性單克隆丙種球蛋白?。╞enign monoclonal gammopathy)是指血清中出現(xiàn)高水平免疫球蛋白,但并無漿細(xì)胞惡性增殖的疾病。一般無臨床癥
5、狀,往往因其它疾病就診時(shí)發(fā)現(xiàn)血中有M蛋白,但其并不呈進(jìn)行性增加,在少部分正常老年人群中也可出現(xiàn)上述情況。,三、惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別診斷,惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別,四、冷球蛋白血癥,冷球蛋白(cryoglobulin):指溫度低于30 時(shí)易自發(fā)形成沉淀,加溫后又可溶解的免疫球蛋白 冷球蛋白血癥:當(dāng)血中含有冷球蛋白時(shí)稱為冷球蛋白血癥,特點(diǎn): 多見于某些原發(fā)性疾病,例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖病 患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度、紅細(xì)胞凝集、血栓形成等病理表現(xiàn)。 常見癥狀有雷諾現(xiàn)象(即寒冷性肢端紫紺)、皮膚紫癜、壞死、潰瘍、寒冷性蕁麻疹、關(guān)節(jié)痛、腎損害、神經(jīng)系統(tǒng)病
6、變(如感覺麻木、運(yùn)動障礙等)以及肝、脾等器官損害。,五、淀粉樣變性,淀粉樣變性(amyloidosis)是組織器官中有淀粉樣物質(zhì)沉積的一種病理現(xiàn)象。該病比較少見,??衫奂案鞣N不同的組織和器官,但以小動脈、腎小球、肝、脾和腎上腺最為常見。,第三節(jié) 單克隆丙種球蛋白病的檢測方法,血清蛋白區(qū)帶電泳 免疫球蛋白定量檢測 免疫球蛋白的分類鑒定 本周蛋白檢測 冷球蛋白檢測,一、血清蛋白區(qū)帶電泳,血清區(qū)帶電泳是測定M蛋白的一種定性實(shí)驗(yàn),常采用醋酸纖維素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。 M蛋白在電泳時(shí)出現(xiàn)于區(qū)代中,不同類型的M蛋白的電泳后所處位置。,二、免疫球蛋白定量檢測,免疫球蛋白定量測定較常用的方法有單向擴(kuò)散法與
7、免疫比濁法,前者較為簡便,后者更為準(zhǔn)確迅速。 惡性單克隆丙種球蛋白病常呈現(xiàn)某一類丙種球蛋白的顯著增高。 在良性丙種球蛋白病的血清標(biāo)本中,M蛋白的升高幅度一般不象惡性丙種球蛋白病那么高,三、免疫球蛋白的分類鑒定,免疫電泳 免疫選擇電泳 免疫固定電泳,免疫電泳: 免疫電泳是將瓊脂糖電泳和免疫雙向擴(kuò)散相結(jié)合的一項(xiàng)技術(shù)。 血清標(biāo)本先行區(qū)帶電泳分成區(qū)帶,繼而用特定的抗血清進(jìn)行免疫擴(kuò)散,陽性樣本的M蛋白將在適當(dāng)?shù)牟课恍纬僧惓3恋砘?,根?jù)抗血清的種類、電泳位置及沉淀弧的形狀可以對M蛋白作出判定。,正常及某些患者免疫電泳圖譜,上孔中為血清,下孔中為尿液,槽中為抗血清,箭頭所指為骨髓瘤蛋白 a:抗正常人血清;b
8、:抗IgG血清;c:抗IgA血清;d:抗IgM血清 e:抗血清;f:抗血清A:IgA/型骨髓瘤; B:IgG/型骨髓瘤; C:IgG重鏈病,免疫選擇電泳: 制備含抗或血清的薄層瓊脂板,打孔并加入待測標(biāo)本進(jìn)行火箭電泳,待形成相應(yīng)的火箭樣沉淀峰后,于孔的兩側(cè)各挖一槽,加入抗某類免疫球蛋白血清或另一型抗輕鏈血清,溫育擴(kuò)散后,根據(jù)沉淀弧形成的情況,進(jìn)行分析鑒定。,免疫選擇電泳圖譜示意圖,瓊脂中含抗及抗抗血清,示例孔中為血清標(biāo)本, 槽中為抗IgA重鏈抗血清 A:正常人;B:重鏈??;C:IgA骨髓瘤,免疫固定電泳: 免疫固定電泳是血清區(qū)帶電泳與免疫沉淀反應(yīng)相結(jié)合的定性實(shí)驗(yàn)。 與免疫電泳比較免疫固定電泳具有
9、更高的靈敏性,M蛋白在免疫固定電泳中顯示狹窄而界限明確的區(qū)帶,而多克隆增殖或正常血清球蛋白區(qū)帶則比較彌散。,IgG/型多發(fā)性骨髓瘤的免疫固定電泳圖譜,四、本周蛋白檢測,3.直接定量分析,尿液透析濃縮50倍后進(jìn)行,2.免疫固定電泳,1.本周蛋白定性檢查(篩查),五、冷球蛋白檢測,冷球蛋白是血清中的一種特殊蛋白質(zhì),在4時(shí)自發(fā)沉淀,加溫至37時(shí)又可溶解,故常利用這種可逆性冷沉淀的特性對其進(jìn)行測定。,取患者外周血,分離出血清置4冰箱中,一般在24h72h出現(xiàn)沉淀,若1周仍不出現(xiàn)沉淀者方可判斷為陰性。 如形成沉淀,再置37溫育使其復(fù)溶,也可將冷沉淀物離心洗滌后做定性與定量分析,異常免疫球蛋白檢測的應(yīng)用原則 凡檢出無法解釋的免疫球蛋白異常增高,都應(yīng)建議做進(jìn)一步的檢查。 初篩實(shí)驗(yàn):區(qū)帶電泳分析、免疫球蛋白定量檢測或尿本-周蛋白定性。 確證實(shí)驗(yàn):免疫電泳、免疫固定電泳、免疫球蛋白亞型定量和血清及尿中輕鏈等檢測。,免疫增殖性疾病是指由于淋巴細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化所導(dǎo)致的一組疾病。免疫球蛋
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