課題1菊花的組織培養(yǎng).ppt_第1頁
課題1菊花的組織培養(yǎng).ppt_第2頁
課題1菊花的組織培養(yǎng).ppt_第3頁
課題1菊花的組織培養(yǎng).ppt_第4頁
課題1菊花的組織培養(yǎng).ppt_第5頁
已閱讀5頁,還剩45頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、椒草的葉片長成新植株,大自然中存在著許多有趣的植物無性生殖現(xiàn)象。,導(dǎo)入新課,馬鈴薯塊莖發(fā)芽生根,這些現(xiàn)象引起了科學(xué)家的興趣,促使他們?nèi)ニ伎?、解釋?1902年,一位德國的植物學(xué)家大膽地預(yù)言:“植物的體細(xì)胞在一定條件下,可以如同受精卵一樣,具有潛在的發(fā)育成植株的能力?!?1958年, 美國科學(xué)家斯圖爾德將胡蘿卜韌皮部的一些細(xì)胞進行培養(yǎng),由于細(xì)胞分化而最終發(fā)育成完整的新植株。,這個實驗結(jié)果在生物學(xué)界引起了很大的轟動,它表明已經(jīng)高度分化的植物細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的能力。 已經(jīng)分化的細(xì)胞所具有的這種潛在發(fā)育能力稱作細(xì)胞全能性。,這個科學(xué)發(fā)現(xiàn)使得科學(xué)家開始思考:既然胡蘿卜的單個細(xì)胞能發(fā)育為完整植株

2、,小塊的植物組織就更不應(yīng)該有什么問題。,經(jīng)過很多年的研究,如今植物組織培養(yǎng)已經(jīng)不再神秘,而發(fā)展成為一項常規(guī)技術(shù)。,課題1 菊花的組織培養(yǎng),專題3 植物的組織培養(yǎng)技術(shù),課題內(nèi)容: (一) 基礎(chǔ)知識 (二) 實驗操作 (三) 結(jié)果與分析,知識與能力,說明植物組織培養(yǎng)的原理,熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過程,了解影響植物組織培養(yǎng)的各種因素,掌握植物組織培養(yǎng)的基本技術(shù)。,教學(xué)目標(biāo),過程與方法,進行菊花或其他植物的組織培養(yǎng)。,情感態(tài)度與價值觀,了解植物組織培養(yǎng)技術(shù)在生產(chǎn)中的應(yīng)用價值。,植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)。,重點與難點,一、 基礎(chǔ)知識,1、植物組織培養(yǎng)的基本過程,(1)細(xì)胞分化,概念: 在植物個體

3、發(fā)育的過程中,細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程叫做細(xì)胞分化。,特點: 已經(jīng)分化的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和功能上比較專一; 離體條件下很難發(fā)育成完整的植株。,愈傷組織: 離體的植物組織培養(yǎng)一段時間后,會通過細(xì)胞分裂形成愈傷組織。,愈傷組織,菊花葉片的愈傷組織,人參的愈傷組織,胡蘿卜的愈傷組織,愈傷組織:細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則,是高度液泡化的、成無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。,(2)植物細(xì)胞的脫分化,定義: 有高度分化的植物組織活細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱作植物細(xì)胞的脫分化或者去分化。,(3)植物細(xì)胞的再分化,定義: 脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個過程稱作再分化。,

4、離體的植物器官、組織、細(xì)胞,脫分化,愈傷組織,再分化,根、芽,植物體,植物組織培養(yǎng)過程示意圖,2、影響植物組織培養(yǎng)的因素,(1)植物材料的選擇,不同的植物組織培養(yǎng)的難易程度差別很大,菊花的組織培養(yǎng),一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。,未開花的菊花植株,(2)相對特殊的營養(yǎng)、環(huán)境等條件,適宜的培養(yǎng)基,MS培養(yǎng)基主要成分包括:,大量元素:N、P、K、Ca、Mg 、S等,微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等,有機物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等,植物激素,你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?,討論,答:微量元

5、素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機鹽;蔗糖提供碳源,同時能夠維持細(xì)胞的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。 微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主,MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng),無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。,(3)植物激素,常用的植物激素:生長素、細(xì)胞分裂素和赤霉素等。 生長素類:2,4二氯苯氧乙酸(2,4D)、吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA) 細(xì)胞分裂素類:激動素(KT)、6芐基嘌呤( 6BA)、玉米素(ZT) 赤霉素類:赤霉酸(GA3)等。,生長素和細(xì)胞分裂素,作用: 啟動細(xì)

6、胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。,在生長素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢。,按不同順序使用這兩種激素,會得到不同的實驗結(jié)果,當(dāng)生長素和細(xì)胞分裂素同時使用時,兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。,有利于根的分化,有利于芽的分化,抑制根的形成,促進愈傷組織形成,(4)其他因素,菊花組織培養(yǎng): pH控制在5.8左右,溫度控制在1822 每日用日光燈照射12h,外植體的選取、消毒、培養(yǎng)、移栽和栽培等 pH、溫度、光照等,二、 實驗操作,1、制備MS固體培養(yǎng)基,配制各種母液 無機物中大量元素濃縮10倍,微量元素濃縮100倍,常溫保存;,激素類、維生素類以及用量較小的有機物一般可按1m

7、g/mL的質(zhì)量濃度單獨配制成母液; 用母液配制培養(yǎng)基時,需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計算用量。,配制培養(yǎng)基 配制MS培養(yǎng)基;調(diào)節(jié)pH;分裝。,由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易,因此不必添加植物激素。,滅菌,高壓蒸氣滅菌,2、外植體消毒,選取生長旺盛的菊花莖段嫩枝,刷洗,流水沖洗 20min,吸干表面水分,70的酒精消毒67s,無菌水清洗,吸干表面水分,0.1的氯化汞溶液 12min,無菌水清洗3次,3、接種,工作臺使用前用70%酒精消毒;每次使用器械后,都需要用火焰灼燒滅菌。,插入菊花莖段時應(yīng)注意方向,不要倒插。,每瓶接種68塊外植體,接種后,將封口膜重新扎好。,你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對

8、照實驗嗎?,答:每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對照實驗可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng),用以說明培養(yǎng)基制作合格,沒有被雜菌污染。,4、培養(yǎng),無菌箱定期消毒,培養(yǎng)溫度控制在18-22,每日光照12h。,5、移栽,移栽生根的菊花試管苗之前,應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜,讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日。,用流水清洗根部的培養(yǎng)基,將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間。,6、栽培,適時澆水、施肥,直至開花。,視頻一:,菊花的組織培養(yǎng)1,視頻二:,菊花的組織培養(yǎng)2,三、 結(jié)果分析與評價,1、對接種操作中污染情況的分析,接種3-4天后,在接種操作中被雜菌

9、污染的培養(yǎng)物會表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。 適時統(tǒng)計污染率,分析接種操作是否符合無菌要求。,2、是否完成了對植物組織的脫分化和再分化,觀察實驗結(jié)果,看是否培養(yǎng)出愈傷組織,記錄多長時間長出愈傷組織。 統(tǒng)計更換培養(yǎng)基后愈傷組織進一步分化成根和芽的比例和時間。,3、是否進行了統(tǒng)計、對照與記錄,4、生根苗的移栽是否合格,統(tǒng)計自己移栽的成活率,看移栽是否合格。,四、 課題延伸,一般來說,容易進行無性繁殖的植物,也容易進行組織培養(yǎng)。,如:蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季等。,月季,秋海棠,蘆薈,基礎(chǔ)知識,實驗操作,植物組織培養(yǎng)的基本過程,細(xì)胞分化,影響因素,外植體消毒,培養(yǎng),脫分化,植物材料,再分化,概念,培養(yǎng)基,制備MS培養(yǎng)基,移栽,菊花的組織培養(yǎng),其他因素,配制母液,接種,植物激素,結(jié)果分析與評價,課題延伸,特點,愈傷組織,配置培養(yǎng)基,滅菌,栽培,課堂小結(jié),1. 答:植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對培養(yǎng)條

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論