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核酸樣本的質(zhì)量保證,檢測(cè)前,采血后,關(guān)鍵點(diǎn)是什么?,第一步:標(biāo)本的采集-采血管 需考慮的因素: 1. 試劑要求: EDTA會(huì)螯合部分二價(jià)離子,PCR反應(yīng)中需Mn2+或Mg2+ 2. 混樣設(shè)備/檢測(cè)設(shè)備適用 3. 運(yùn)輸要求 有分離膠更適合運(yùn)輸 4.使用前必須評(píng)估 結(jié)果重復(fù)性:PPT,防污染、防溶血,第二步:標(biāo)本的采集-離心 離心條件 800-1600g 20min 離心分離的時(shí)間要求HCV RNA 和HIV RNA 研究方式不同(樣本、檢測(cè))結(jié)論差異大 2hr 2(RT) 4hr 16(RT) 6hr 6(RT) 24hr 下降 2(RT) 穩(wěn)定4(RT) ,及時(shí)離心,第三步:標(biāo)本的運(yùn)送 2-8C穩(wěn)定48hr 第四步:標(biāo)本的接收、保存 確認(rèn)標(biāo)本數(shù)量 運(yùn)輸狀態(tài) 標(biāo)本狀態(tài):溶血、脂血 保存: 用于檢測(cè)的樣本管:檢測(cè)前保存 用于留樣備查的樣本:樣本量 第五步:檢測(cè)前核對(duì) 狀態(tài) 標(biāo)識(shí) 接收時(shí)間 離心后至檢測(cè)前2-8C保存不超過48小時(shí),2-8C穩(wěn)定盡量-70保存檢測(cè)前恢復(fù)至常溫檢測(cè) 優(yōu)點(diǎn):提高HCV、HIV檢出率 缺點(diǎn):給實(shí)際工作帶來困難,很難按時(shí)完成工作 () 思考,專門的留樣設(shè)備可大大增加存儲(chǔ)空間, 理論上-80 C 保存量:核酸檢測(cè)樣本量及酶免確認(rèn)實(shí)驗(yàn)量大 長(zhǎng)期保存:保存管
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