診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)課件：實(shí)驗(yàn)三 紅細(xì)胞壓積

1、1,實(shí)驗(yàn)三,紅細(xì)胞壓積測(cè)定 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 紅細(xì)胞沉降率（血沉）的測(cè)定,2,一、紅細(xì)胞壓積測(cè)定,3,概念,一定量的抗凝全血，經(jīng)規(guī)定速度和時(shí)間離心沉淀，沉下的紅細(xì)胞體積與全血體積之比，即為紅細(xì)胞壓積。,4,器材,紅細(xì)胞壓積管（溫氏管） 為平底厚壁玻璃管。管上刻有0-10cm刻度，其讀數(shù)一邊由下而上供測(cè)紅細(xì)胞壓積用；另一邊由上而下，供紅細(xì)胞沉降率測(cè)定用。,5,靜脈血采集方法,抽取病人靜脈血2ml，于EDTA二鉀抗凝的真空采血管中（1.5mgEDTA-K2ML）24小時(shí)室溫保存。,6,操作步驟,用細(xì)長(zhǎng)毛細(xì)滴管吸取混均的抗凝血，插入溫氏管底部，然后將血液緩慢注入至刻度“10”處，注意防止氣泡產(chǎn)生。 用

2、水平離心機(jī)以3000r/min離心30min，讀取暗紅細(xì)胞層，再離心10分鐘。,7,判讀結(jié)果,可見(jiàn)血液被分離成五個(gè)層次，自上至下為： 淡黃色（血漿層） 乳白層（血小板層） 灰紅層（有核細(xì)胞層，含白細(xì)胞及有核紅細(xì)胞） 暗紅層（含二氧化碳血紅蛋白的紅細(xì)胞） 最底層為鮮紅層（含氧合血紅蛋白的紅細(xì)胞層）。 讀取紅細(xì)胞層的柱高的毫米數(shù)，乘以1，即為每升血液中紅細(xì)胞體積的升數(shù)。,8,正常參考范圍,男：0.400.50L/L（4050 vol %) 女：0.370.48L/L (3748vol %),9,臨床意義,脫水、燒傷、大手術(shù)后，通過(guò)測(cè)定壓積以決定是否靜脈輸液及輸液量。 血細(xì)胞比容增高： 見(jiàn)于各種原因

3、引起的血液濃縮；及各種原因所致的紅細(xì)胞絕對(duì)性增多，如真性紅細(xì)胞增多癥。 血細(xì)胞比容降低： 見(jiàn)于各種貧血，但必須結(jié)合紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白量。,10,二、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù),11,概念,網(wǎng)織紅細(xì)胞是未完全成熟的紅細(xì)胞。 紅細(xì)胞由骨髓進(jìn)入外周血，需24-48h合成最后20的血紅蛋白，殘余的嗜堿性物質(zhì)才能完全消失，成為成熟的紅細(xì)胞。將其分為五型：花冠型、絲球型、網(wǎng)型、破網(wǎng)型、點(diǎn)粒型。,12,靜脈血采血方法,抽取病人靜脈血2ml，于EDTA二鉀抗凝的真空采血管中（1.5mgEDTA-K2ML）24小時(shí)室溫保存。,13,細(xì)胞受色原理,網(wǎng)織紅細(xì)胞較成熟的紅細(xì)胞稍大，胞漿中殘存多少不等的嗜堿性物質(zhì)，經(jīng)煌焦油藍(lán)活體染

4、色呈淺藍(lán)或深藍(lán)色的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。,14,試劑,10g/L煌焦油藍(lán)等滲鹽水溶液： 煌焦油藍(lán)1g 枸櫞酸鈉0.4g 氯化鈉0.85g 蒸餾水加至100ml,15,操作步驟,于玻片的一端加10g/L煌焦油藍(lán)等滲鹽水溶液一滴，任其自然干燥備用。 取末梢血一滴于干燥染料上，用推片攪動(dòng)混勻后，將兩玻片蓋合，待3min以上時(shí)間，才推制血片。 油鏡下，計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織細(xì)胞數(shù)。,16,正常參考值,成人： 0.51.5 絕對(duì)值：24x 109/L84 x109/L 兒童： 36,17,18,臨床意義,網(wǎng)織紅細(xì)胞顯著增加:表示骨髓紅細(xì)胞生成旺盛， 常見(jiàn)于溶血性貧血（可高達(dá)70）。 其次急性失血性貧血，急性失

5、血后 5-10天達(dá)到高峰，2周后恢復(fù)正常。 營(yíng)養(yǎng)性巨幼紅細(xì)胞性貧血和缺鐵性貧血可因缺乏造血物質(zhì)，僅輕度增加（也可正?；驕p少）。 網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)量持續(xù)上升，常提出慢性失血，如消化道潰瘍等。 網(wǎng)織紅細(xì)胞顯著降低，表示骨髓增生低下，見(jiàn)于再生障礙性貧血。,19,貧血治療效果觀察，如缺鐵性貧血和營(yíng)養(yǎng)性巨幼紅細(xì)胞性貧血，經(jīng)相應(yīng)治療后1-2日開(kāi)始增多，1周左右達(dá)到最高峰，因此觀察網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)量的反應(yīng)，是貧血療效的評(píng)價(jià)指標(biāo)。 骨髓受白血病、腫瘤等浸潤(rùn)時(shí)，血中網(wǎng)織紅細(xì)胞也可呈不規(guī)則的病理性輕度增多，此系病理刺激所至，它不反應(yīng)造血旺盛。,臨床意義,20,三、紅細(xì)胞沉降率的測(cè)定,21,目的,了解紅細(xì)胞沉降率及掌握其測(cè)

6、定方法。 掌握血沉測(cè)定的正常值及臨床意義。,22,原理,將加有抗凝劑的血液置于一特制的具有刻度的玻管內(nèi)，置于血沉架上，紅細(xì)胞因重力作用而逐漸下沉，上層留下一層黃色透明的血漿。 經(jīng)一定時(shí)間，沉降的紅細(xì)胞上面的血漿柱的高度，既表示紅細(xì)胞的沉降率。,23,材料及用具,血沉管 血沉管架 肝素溶液 注射器等。,24,方法及步驟,取0.13mol/L枸櫞酸鈉0.4ml放入試管中； 抽取病人靜脈血1.6ml，注入枸櫞酸鈉液中充分混勻； 用魏氏血沉管吸血到0刻度，并直立于血沉架上1小時(shí)，觀察紅細(xì)胞下沉的毫米數(shù)，即為紅細(xì)胞沉降率。,25,注意事項(xiàng),采血后實(shí)驗(yàn)應(yīng)在3小時(shí)內(nèi)完畢，否則血液放置過(guò)久，會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 沉降管應(yīng)垂直豎立，不能有傾斜。 沉降率隨溫度升高而加快，故應(yīng)在室溫22-27時(shí)進(jìn)行。 在吸血之前，須將血液充分搖均（但不可過(guò)分震蕩以免紅細(xì)胞破壞）。 吸血時(shí)，要絕對(duì)避免產(chǎn)生氣泡。,26,方法及參考值,魏氏自然沉降法： 男性15mm /h 女性20mm /h,27,臨床意義,1.增快見(jiàn)于： (1)生理性：運(yùn)動(dòng)、月經(jīng)期、妊娠3月以上直至分娩后3周、60歲以上高齡者及年幼小兒。,28,臨床意義,(2)病理性： 各種炎癥：急性細(xì)菌性炎癥后23天，血沉可增快；風(fēng)濕熱活動(dòng)期、結(jié)核活動(dòng)期，血沉亦可增快。 組織損傷及壞死持續(xù)23周，心肌梗死發(fā)病1周左右血沉增快。 惡性腫瘤。 其他各種高球蛋白血癥