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文檔簡介
補體依賴的細胞毒實驗,Complement-dependent cytotoxicity,LOGO,實驗?zāi)康?LOGO,實驗原理,LOGO,實驗主要材料,LOGO,操作步驟,一、小鼠胸腺細胞懸液的制備 46周齡小鼠斷頸處死，取出胸腺放至含有3 mL RPMI 1640培養(yǎng)液的平皿中，以剪刀和鑷子將組織處理成單細胞懸液，利用移液器取出后放入試管內(nèi)備用。,胸腺,注意事項： 小鼠斷頸要迅速、徹底，以防小鼠掙扎過程中出血過多，也可事先摘眼球放血。,LOGO,操作步驟, 振蕩混勻，置37C水浴箱，10min , 振蕩混勻，置37C水浴箱，20min , 振蕩混勻，滴片加蓋玻片，鏡檢,Ag+Ab,+ complement,二、細胞毒實驗： 按下表加樣,PBS,LOGO,結(jié)果觀察,臺盼藍染色：如果細胞膜不完整、破裂，臺盼藍染料進入細胞，細胞變藍。 如果細胞膜完整，細胞不為臺盼藍染色，則為正常細胞或凋亡細胞。此方法對反映細胞膜的完整性，區(qū)別壞死細胞有意義。,A,B,A. 對照組 B. 實驗組,注意事項： 臺盼藍染色后放置時間不能太長，否則出現(xiàn)假陽性。,
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