醫(yī)學微生物學課件：10 厭氧菌

1、厭 氧 性 細 菌,概 述,必須在無氧環(huán)境下，才能生長繁殖。 根據(jù)能否形成芽胞，可分為： 厭氧芽胞梭菌屬 無芽胞厭氧菌,共同特征 在無氧條件下生長 G+大桿菌，有芽胞，因芽胞直徑多大于菌體寬度，使菌體膨脹呈梭形。 侵襲力不強，僅在局部繁殖；產(chǎn)生強烈的外毒素，引起特定的癥狀。 分布廣泛，土壤、人和動物腸道。,厭氧芽胞梭菌,一、破傷風梭菌,生物學性狀,形態(tài)與染色 G+，菌體細長。 芽胞正圓形，大于菌體，位于菌體頂端，使細菌呈鼓槌狀，為本菌典型特征。 有周身鞭毛。,生物學性狀,培養(yǎng)特性 嚴格厭氧，普通培養(yǎng)基上即能生長。在血瓊脂平板上呈擴散生長，菌落扁平、灰白色、邊緣不齊、周邊疏松似“羽毛狀”，有狹窄

2、溶血環(huán)，不易見到單個菌落。 遷徙生長。,抵抗力 芽胞抵抗力很強 100 1.5小時可完全被破壞 在干燥的土壤和塵埃中可存活數(shù)年,致病條件,傷口需形成厭氧微環(huán)境 傷口窄而深（如刺傷），伴有泥土或異物污染。 傷口有組織缺血和壞死 傷口混有需氧菌或兼性厭氧菌感染,致病性與免疫性,致病物質(zhì),破傷風溶血毒素 破傷風痙攣毒素 引起破傷風的主要致病物質(zhì) 屬神經(jīng)毒素，毒性極強，僅次于肉毒毒素。 為蛋白質(zhì)，不耐熱；亦可被腸道中存在的蛋白酶所破壞。,局部傷口中產(chǎn)生的破傷風痙攣毒素，經(jīng)淋巴、血流或外周神經(jīng)末稍沿軸索逆行向上，到達脊髓前角和腦干。,破傷風痙攣毒素,破傷風痙攣毒素,-氨基丁酸 甘氨酸,破傷風痙攣毒素,結(jié)

3、構(gòu) 菌體內(nèi)：一條多肽鏈 釋出菌體：輕鏈（A鏈）與重鏈（B鏈） A鏈：毒性作用 B鏈：神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合的單位,A鏈（鋅內(nèi)肽酶）可分解抑制性神經(jīng)介質(zhì)（-氨基丁酸、甘氨酸）并阻止其釋放。,肌纖維收縮,肌纖維松弛,正常,抑制性神經(jīng)元,破傷風痙攣毒素作用機制,屈肌運動神經(jīng)元興奮,屈肌抑制性神經(jīng)元,抑制性神經(jīng)介質(zhì),結(jié)果：屈、伸肌同時強烈收縮。 （苦笑面容；牙關(guān)緊閉；角弓反張。）,破傷風痙攣毒素,伸肌抑制性神經(jīng)元,+,伸肌松弛,破傷風痙攣毒素,屈肌收縮,抑制性神經(jīng)介質(zhì),+,+,-,-,-,-,所致疾病,1. 破傷風：潛伏期可從幾天至幾周。 典型的癥狀是咀嚼肌痙攣造成的苦笑面容、牙關(guān)緊閉及持續(xù)性背部痙攣（角弓反

4、張）。肌肉痙攣常伴以相當劇烈的疼痛，使患者十分痛苦和驚恐；發(fā)作后大量出汗，導致體力的極大消耗。,所致疾病,2. 新生兒破傷風： 潛伏期為57天，故俗稱“臍帶風”、“四六風”、“五日風”、“七日風”等，其臨床表現(xiàn)與成人破傷風相似。,免 疫 性,由于破傷風痙攣毒素毒性極強，微量毒素即可致病，而此微量毒素尚不足以引起機體的免疫應(yīng)答，故病愈后免疫力不強。仍應(yīng)進行類毒素注射，使其獲得有效免疫力。,微生物學檢查法,一般不進行涂片鏡檢和分離培養(yǎng) 典型的癥狀和病史即可作出診斷,防治原則 （一） 一般性預防 1.正確處理傷口及清創(chuàng)擴創(chuàng)，防止創(chuàng)口厭氧微環(huán)境的形成。 2.無菌接生，消毒臍帶斷端。,（二）特異性預防

5、1.基礎(chǔ)免疫接種：破傷風類毒素 3月7歲兒童（白、百、破三聯(lián)疫苗) 免疫程序：3、4、5月 3次 2、7歲加強 2次 軍人（類毒素注射及時強化） 2.緊急預防： TAT （tetanus antitoxin ） + 接種類毒素聯(lián)合免疫,（三）特異性治療 對已發(fā)病者，特異性治療包括早期、足量使用抗毒素及抗生素兩方面。 緊急治療：TAT ，皮試 ！ 抗破傷風人免疫球蛋白,二、產(chǎn)氣莢膜梭菌,形態(tài)與染色,兩端幾乎平切的G+粗大桿菌 在宿主機體內(nèi)有明顯的莢膜 芽胞位于次極端，呈橢圓形，不大于菌體。,生物學性狀,培養(yǎng)特性,厭氧，但不十分嚴格。其最適生長溫度42 。 血瓊脂平板上，雙層溶血環(huán)（內(nèi)環(huán)由毒素引起

6、的完全溶血，外環(huán)由毒素引起的不完全溶血）。 蛋黃瓊脂平板上，菌落周圍出現(xiàn)乳白色渾濁圈（毒素分解蛋黃中的卵磷脂所致）。 牛乳培養(yǎng)基中，可出現(xiàn)“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象。,雙層溶血環(huán),乳白色渾濁圈,牛乳培養(yǎng)基中“洶涌發(fā)酵”現(xiàn)象,分解牛乳培養(yǎng)基中乳糖: 產(chǎn)酸酪蛋白凝固 產(chǎn)氣凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀，并將液面上的凡士林向上推擠，氣勢洶猛。,分 型,根據(jù)4種主要毒素（、）的產(chǎn)生情況，可分為A、B、C、D、E 5個毒素型。對人致病的主要是A型，可引起氣性壞疽和食物中毒；C型則引起壞死性腸炎。,致病物質(zhì),產(chǎn)氣莢膜梭菌能產(chǎn)生10余種外毒素，有些外毒素即為胞外酶。,致 病 性,毒素,卵磷脂酶,破壞細胞膜，溶解紅、白細胞和血

7、管內(nèi)皮細胞。,毒素,膠原酶,能分肌肉及皮下膠原纖維，使組織崩解。,毒素,透明質(zhì)酸酶,分解細胞間質(zhì)中的透明質(zhì)酸，有利于細菌擴散。,毒素,DNA酶,分解DNA，降低壞死組織的粘稠度。,腸毒素,莢膜,致食物中毒。,抵抗吞噬細胞吞噬。,1. A型產(chǎn)氣莢膜梭菌的致病因素及作用,A型產(chǎn)氣莢膜梭菌的致病因素及作用,2. A型產(chǎn)氣莢膜梭菌所致疾病,（1）氣性壞疽 該病多見于戰(zhàn)傷，但也見于平時的工傷、車禍等。致病條件與破傷風梭菌類似。 主要致病物質(zhì)有卵磷脂酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、DNA酶等 分解破壞作用，造成氣腫、水腫及組織壞死。,氣性壞疽 表現(xiàn)為組織脹痛劇烈，水氣夾雜，觸摸有捻發(fā)感，最后產(chǎn)生大塊組織壞死，并有

8、惡臭。 毒素和組織壞死的毒性產(chǎn)物被吸收入血，引起毒血癥、休克，死亡率高達40100%。 氣性壞疽潛伏期短，發(fā)展迅速，病情險惡。,（2）食物中毒 是食入大量（108109）A型產(chǎn)氣莢膜梭菌繁殖體污染的食物（主要為肉類食品，在色味上并不一定發(fā)現(xiàn)明顯的變化。）所引起，較多見。 潛伏期約10小時，臨床表現(xiàn)為劇烈腹痛、腹瀉，較少嘔吐。一般不發(fā)熱，12日內(nèi)可自愈。 如不進行細菌學檢查常難確診 從患者的糞便檢出產(chǎn)氣莢膜梭菌腸毒素，或從患者的糞便與可疑毒食品中檢出A型產(chǎn)氣莢膜梭菌。,氣性壞疽發(fā)病急劇，后果嚴重，及早診斷甚為重要。由于本菌分布廣泛，所以單憑創(chuàng)口發(fā)現(xiàn)此菌還不足以診斷。尚需結(jié)合臨床表現(xiàn)，才能確診。

9、1直接涂片鏡檢 從傷口深部取材涂片，革蘭染色鏡檢，可見G+大桿菌，常伴有其他雜菌，白細胞少且形態(tài)不規(guī)則。,微生物學檢查法,2分離培養(yǎng)與鑒定 取壞死組織制成懸液，接種于血平板上或皰肉培養(yǎng)基中，厭氧培養(yǎng)，觀察生長情況。取細菌培養(yǎng)物涂片鏡檢，并進一步用生化反應(yīng)鑒定。,3. 動物實驗 取培養(yǎng)液0.51ml給小鼠靜脈注射，10分鐘后處死動物，置3758小時。如動物軀體膨脹，即行解剖，可見臟器和肌肉內(nèi)有大量氣泡，尤以肝臟最為明顯，稱“泡沫肝” （肝臟呈海綿狀或泡沫狀）。取內(nèi)臟或心血涂片鏡檢，可見G+大桿菌，并有明顯莢膜。,防治原則,預防 及時處理傷口，破壞和消除厭氧微環(huán)境。 預防性的使用抗生素 治療 局部

10、感染控制 抗生素 多價抗毒素 高壓氧艙法,三、肉毒梭菌,生物學特性,G+粗短桿菌 芽胞呈橢圓形，大于菌體，位于次極端，使細菌呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀。 有鞭毛 嚴格厭氧，營養(yǎng)要求不高。 本菌芽胞抵抗力很強，但肉毒毒素不耐熱，煮沸1min既被破壞。,致病性致病物質(zhì),致病物質(zhì)肉毒毒素屬神經(jīng)毒素，是已知最強的毒素。 根據(jù)神經(jīng)毒素的抗原性分AG 7個型，各型毒素只能被同型抗毒素中和。引起人類疾病的主要是A、B型。,作用機制,肉毒毒素作用于外周膽堿能神經(jīng)，抑制神經(jīng)肌肉接點處神經(jīng)介質(zhì)乙酰膽堿的釋放，導致弛緩性麻痹。,乙酰膽堿,所致疾病,食物中毒 單純性毒素性中毒，而非細菌感染。 臨床表現(xiàn)與其它食物中毒不同，主要

11、為神經(jīng)末稍麻痹，呈下行性發(fā)展。 潛伏期可短至數(shù)小時，先有一般不典型的乏力、頭痛等癥狀，接著出現(xiàn)眼瞼下垂、眼球肌肉麻痹、斜視、吞咽困難、呼吸肌和心肌麻痹而死亡。死亡率較高。,所致疾病,嬰兒肉毒病 感染者以6個月以內(nèi)的小嬰兒居多，食入 被肉毒桿菌污染的食品（如蜂蜜）后， 芽胞發(fā)芽，產(chǎn)生毒素被吸收而致病。 癥狀與肉毒毒素食物中毒類似，最先引 人注意的癥狀是便秘 ，吸乳、啼哭無力。 嬰兒肉毒病死亡率不高（12%）。,肉毒毒素的治療作用,美國FDA于1989年12月正式批準A型肉毒毒素，商品名為BOTOX用于治療眼瞼痙攣、面肌痙攣、斜視等眼科、神經(jīng)科和耳鼻喉科肌肉痙攣疾病，這是美國FDA第一次批準用于作注射的微生物毒素制劑可美容的劇毒物。 我國也于1993年研制成功，試用于臨床。1997年正式被國家批準“注射用A型肉毒毒素”投放市場（97衛(wèi)藥 準字（蘭）S-01號），商品名為“衡力