8.化驗(yàn)作業(yè)指導(dǎo)書

目 錄一、目的：1二、適用范圍：1三、作業(yè)流程：1四、作業(yè)內(nèi)容：2（一）、效價(jià)的測(cè)定：31、原理：32、方法：4（二）、總糖的測(cè)定：41、原理：42、測(cè)定：4（三）、還原糖的測(cè)定：51、原理：52、測(cè)定：5（四）、氨基氮的測(cè)定：71、原理：72、測(cè)定：7五、注意事項(xiàng)：8六、加強(qiáng)責(zé)任制及生產(chǎn)安全教育：8安全生產(chǎn)管理制度16職工安全生產(chǎn)公約.18化驗(yàn)工段作業(yè)指導(dǎo)書一、目的：為了規(guī)范化驗(yàn)人員的操作技能，保證化驗(yàn)人員的人身安全，要做到操作必須規(guī)范，數(shù)據(jù)必須真實(shí)、準(zhǔn)確。 二、適用范圍： 適用于化驗(yàn)工段全體員工。三、 作業(yè)流程：1. 按規(guī)定準(zhǔn)時(shí)到崗，換好工作服，做好交接班準(zhǔn)備，進(jìn)行交接班。2. 交接班時(shí)，當(dāng)場(chǎng)將工作交接清楚，將存在的問題找出來，看儀器是否正確（分光光度計(jì)、干燥箱、恒溫水浴鍋、電爐等），藥品試劑是否夠用，常用的玻璃儀器是否放入干燥箱，衛(wèi)生是否清潔，雙方交接無誤后接班人簽名，交接人方可離崗，接班人正常工作。3. 根據(jù)當(dāng)日無菌室發(fā)的生產(chǎn)調(diào)度單和補(bǔ)料單做好本班工作計(jì)劃。4. 根據(jù)化驗(yàn)原始記錄，看看各罐生長(zhǎng)情況，效價(jià)長(zhǎng)勢(shì)情況，總糖、氨基氮消耗情況，如果結(jié)果偏差大的重新取樣復(fù)樣，認(rèn)真尋找原因，將結(jié)果填入原始記錄，并注明復(fù)樣，如有特殊情況匯報(bào)工作。5. 按規(guī)定時(shí)間取樣，做樣前對(duì)所做樣的儀器和玻璃儀器做好充分的準(zhǔn)備，放在工作臺(tái)上，做效價(jià)和糖所用的試劑臨用時(shí)混合。6. 取樣后，進(jìn)行各項(xiàng)含量分析，完成后將結(jié)果隨時(shí)填入原始記錄，如有填錯(cuò)應(yīng)及時(shí)改正，并簽名，原始記錄填寫完整后，認(rèn)真核對(duì)確定無誤后簽字發(fā)出報(bào)告單。7. 隨時(shí)清理和洗滌玻璃儀器和工作臺(tái)，及時(shí)處理廢料殘液，始終保持現(xiàn)場(chǎng)的整潔有序，玻璃儀器輕拿輕放。8. 如有化驗(yàn)，結(jié)果偏差大，該復(fù)樣的重新取樣、復(fù)樣。9. 剩余時(shí)間，折疊濾液用的濾紙。10. 清理衛(wèi)生，做好交班準(zhǔn)備。四、作業(yè)內(nèi)容：發(fā)酵過程的中間分析是生產(chǎn)控制的眼睛，它顯示了發(fā)酵過程中微生物的主要代謝變化，供操作人員做好分析控制發(fā)酵工藝并處理異常發(fā)酵的重要依據(jù)。 化驗(yàn)項(xiàng)目（每8h取樣一次） 項(xiàng)目罐類 PH（無菌） 雜菌（無菌） 菌濃（無菌） 總糖（化驗(yàn)）還原糖（化驗(yàn)）氨基氮（化驗(yàn)） 效價(jià)（化驗(yàn)）種子罐消后接后30h移前發(fā)酵罐消后接后40h放罐糖罐（一）、效價(jià)的測(cè)定：1、原理：在培養(yǎng)過程中，產(chǎn)生菌體的生物合成能力和抗生素的積累程度，通常都以抗生素的效價(jià)單位表示。發(fā)酵過程中，定期測(cè)定發(fā)酵效價(jià)單位，可使我們及時(shí)了解發(fā)酵過程的趨勢(shì)，幫助我們選擇最合適的發(fā)酵條件，并控制最合適的發(fā)酵周期。效價(jià)單位測(cè)定一般采用化學(xué)測(cè)定和生物測(cè)定法?，F(xiàn)我們采用化學(xué)測(cè)定法，方法簡(jiǎn)速。2、方法：（1）、準(zhǔn)確吸取2.5ml發(fā)酵液于25ml的具塞比色管中，加無水乙醇將發(fā)酵液全部沖下（起步效價(jià)做3倍，加無水乙醇5ml；效價(jià)超過5500改做4倍，加7.5ml無水乙醇），充分搖勻后放入37恒溫水浴中30min，取出后搖勻過濾。（2）、精確吸取1ml于盛有10ml硼緩溶液和8ml正丁醇溶液的25ml的比色管中，充分搖勻再次放入37恒溫水浴中20min。（3）、吸取上清液4ml，加4ml無水乙醇搖勻，在波長(zhǎng)408nm的722分光光度計(jì)上進(jìn)行比色。討論：（1）、測(cè)定樣品時(shí)，應(yīng)力求與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線和條件相同。（2）、正丁醇和硼緩在臨用時(shí)混合，混合時(shí)不能快。（3）、空白，樣品所用之比色皿，應(yīng)分別固定使用。（4）、比色前15min，打開分光光度計(jì)預(yù)熱。（二）、總糖的測(cè)定：1、原理：淀粉系多糖類，經(jīng)酸水解后生產(chǎn)單糖，利用其分子中的醛基在堿性溶液中將高價(jià)銅還原成低價(jià)銅，剩余銅在酸性溶液中與碘化鉀作用析出游離碘，可用硫代硫酸鈉滴定，根據(jù)空白與樣品之差推出糖含量。2、測(cè)定：（1）、發(fā)酵液過濾后，精吸濾液2.5ml于盛有5ml（6mol/L）的HCl的25ml刻度試管中，在沸水中加熱15min，冷卻，用蒸餾水稀釋至刻度。（2）、正確吸取上述水解溶液5ml，斐林A10ml、斐林B10ml于150ml的三角瓶中，稍震搖，在電爐上加熱，煮沸3min，同時(shí)以A、B液各10ml、水5ml做空白。（3）、冷卻至室溫，加KI5ml、加6mol/L的HCl 10ml，立即以0.1mol/L的Na2S2O3，滴定至淡黃色，加淀粉指示劑2ml，繼續(xù)滴至藍(lán)色消失。樣品消耗的Na2S2O3毫升數(shù)為A，空白消耗的毫升數(shù)為B，（B-A）計(jì)算得。（三）、還原糖的測(cè)定：1、原理： 測(cè)還原糖是看玉米淀粉的轉(zhuǎn)化率，還原糖是培養(yǎng)液內(nèi)含自由醛基的單糖，通常指葡萄糖，葡萄糖可以直接被微生物吸收利用，因而還原糖這個(gè)數(shù)值是反映產(chǎn)生菌體直接利用糖的情況與發(fā)酵關(guān)系的較為密切。2、測(cè)定：發(fā)酵液經(jīng)過濾，吸濾液1ml，不經(jīng)酸水解，其它按總糖的方法測(cè)定。注意：1、 煮沸時(shí)間應(yīng)以沸騰開始起嚴(yán)格控制3min。2、 A液B液必須準(zhǔn)確加入，因?yàn)?1價(jià)銅離子是計(jì)算得依據(jù)。3、 淀粉指示劑不能過早的加入，因?yàn)樯a(chǎn)大量的淀粉吸附物達(dá)到終點(diǎn)時(shí)仍不易褪色，造成誤差。4、 滴定至終點(diǎn)后放置一下，又呈藍(lán)色，這是因?yàn)檫^量的碘。碘化鉀在酸化情況下，被空氣氧化而析出的碘遇淀粉重顯藍(lán)色。糖曲線表：（本表以葡萄糖計(jì)）查 糖 濃 度 表滴定值00.10.20.30.40.50.60.70.80.900.060.130.2010.270.340.400.470.540.610.680.750.820.8920.951.021.091.161.231.301.371.441.501.5731.641.711.781.851.921.992.062.122.192.2642.332.402.472.542.612.672.742.812.882.9553.023.093.163.223.293.363.433.503.573.6463.713.773.843.913.984.054.124.194.264.3274.394.464.534.604.674.744.814.874.945.0185.085.155.225.295.365.435.495.565.635.7095.775.845.915.986.046.116.186.256.326.39106.466.536.596.666.736.806.876.947.017.08注：還原糖查表除以2，即得；超出范圍值用公式計(jì)算： C%=滴定差值0.612/1.454（四）、氨基氮的測(cè)定：1、原理：生產(chǎn)上通常僅測(cè)定氨基氮和氨氮，測(cè)定氨基氮和氨氮都可以用甲醛法，簡(jiǎn)便迅速，氨基氮測(cè)定數(shù)據(jù)作為中間補(bǔ)料和代謝控制的主要依據(jù)（含量：以mg/100ml）。2、測(cè)定：、發(fā)酵液過濾。、吸取濾液5ml于250ml三角瓶中，加蒸餾水20ml，甲基紅3滴，以0.5mol/LH2SO4調(diào)至紅色，放置5min，再用0.075mol/L的NaOH調(diào)至黃色，加18%的中性甲醛5ml搖勻，放置5min，加酚酞3滴，以0.075mol/L的NaOH滴定至為紅色為終點(diǎn)。滴定毫升數(shù)200即為氨基氮的含量。討論、注意：1、 在加甲醛前，酸性應(yīng)調(diào)節(jié)好，第一步調(diào)節(jié)，H2SO4可適當(dāng)多一點(diǎn)，因?yàn)榘l(fā)酵液中含有CO3+消耗HCl。2、 中性甲醛隨用隨時(shí)中和。3、 操作周圍應(yīng)避免有氨氣和HCl氣體，否則影響結(jié)果的正確性。五、注意事項(xiàng)：1、 化驗(yàn)員必須穿戴好潔凈的工作服，在進(jìn)行有毒、有刺激性、有腐蝕性藥品的工作時(shí)，必須戴好防護(hù)鏡、口罩。2、 電器設(shè)備發(fā)現(xiàn)有故障、損壞、漏電等情況時(shí)，應(yīng)立即切斷電源，通知電工修理。3、 電器設(shè)備不得用濕手或手拿金屬工具操作，開關(guān)按鈕。4、 有機(jī)溶媒應(yīng)放在固定地點(diǎn)，不得放在高溫爐或電爐旁。5、 當(dāng)有人觸電時(shí)，用木棒將觸電者和電源切斷，進(jìn)行急救。6、 有毒或有刺激性的藥物，不能直接嗅之，必須用手扇動(dòng)，在旁嗅之。7、 不能用玻璃儀器喝水，以免發(fā)生意外。六、加強(qiáng)責(zé)任制及生產(chǎn)安全教育：參見【化驗(yàn)安全操作規(guī)程】，【化驗(yàn)崗位工作職責(zé)】?；?yàn)安全操作規(guī)程一、化驗(yàn)員必須穿戴好潔凈的工作服，在進(jìn)行有毒、有刺激、有腐蝕性藥品的工作時(shí)必須戴好防護(hù)鏡、口罩。二、對(duì)有揮發(fā)性和易燃性有機(jī)溶劑加熱排除時(shí)，必須在水份鍋中或電熱板上緩慢進(jìn)行，禁止用火焰式電爐直接加熱。三、當(dāng)加熱蒸餾及有關(guān)用火或點(diǎn)加熱操作時(shí)，要有人看護(hù)，以防意外。四、可燃性溶劑，不可存放在電源，水源處，以免發(fā)生火災(zāi)。五、電源開關(guān)要安裝牢固的外罩，開合電源時(shí)要精力集中，手濕不得操作。六、電熱設(shè)備及導(dǎo)線要經(jīng)常檢查，電熱器械是否有安全可靠墊板。七、化驗(yàn)室附近要配有滅火器材，以備急用?；?yàn)崗位工作職責(zé)一、負(fù)責(zé)檢查發(fā)酵的含量，總糖，還原糖，效價(jià)，氨基氮等，為生產(chǎn)提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。二、負(fù)責(zé)化驗(yàn)所需各種標(biāo)準(zhǔn)溶液，清液的配制，做好各種曲線的繪制。三、根據(jù)生產(chǎn)工藝要求，隨時(shí)作出所需項(xiàng)目的檢驗(yàn)結(jié)果，為生產(chǎn)提供可靠的依據(jù)。四、負(fù)責(zé)儀器室的使用和管理，做好稱量操作記錄，嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行操作，愛護(hù)室內(nèi)所有儀器。五、按工藝要求嚴(yán)格取樣程序。六、負(fù)責(zé)化驗(yàn)室所用各種試劑，標(biāo)準(zhǔn)品的管理，避免由于管理不當(dāng)造成化驗(yàn)結(jié)果誤差。七、保證計(jì)量器具的準(zhǔn)確性及可靠性。72230G可見分光光度計(jì)使用方法一、使用準(zhǔn)備工作：方式（一）1、 開機(jī)前，要檢查電源插座是否按規(guī)定L接火線，N接零線，接大地。儀器使用時(shí)，應(yīng)避免強(qiáng)光照射。2、 啟動(dòng)電源開關(guān)，儀器顯示“F7230”。3、 按“CLEAR”鍵，儀器顯示“YEA”進(jìn)入年份設(shè)置。4、 年份設(shè)置，按數(shù)字鍵，輸入對(duì)應(yīng)的年份，再按“MODE”鍵，輸入成功，儀器顯示“MON”表示進(jìn)入月份設(shè)置。5、 月份設(shè)置，按數(shù)字鍵，輸入對(duì)應(yīng)的月份，再按“MODE”鍵，輸入成功，儀器顯示“DA”表示進(jìn)入日期設(shè)置。6、 日期設(shè)置，按數(shù)字鍵，輸入對(duì)應(yīng)的月份，再按“MODE”鍵，輸入成功，儀器顯示“HOU”表示進(jìn)入日期設(shè)置。7、 小時(shí)設(shè)置，按數(shù)字鍵，輸入對(duì)應(yīng)的月份，再按“MODE”鍵，輸入成功，儀器顯示“MIN”表示進(jìn)入日期設(shè)置。8、 分鐘設(shè)置，按數(shù)字鍵，輸入對(duì)應(yīng)的月份，再按“MODE”鍵，輸入成功，儀器進(jìn)入時(shí)間顯示模式。9、 過20min，待機(jī)器熱平衡后，載進(jìn)行試樣測(cè)定可得到準(zhǔn)確的數(shù)值。方式（二）：若不需要設(shè)置年，月，日，時(shí)，分，即進(jìn)入工作狀態(tài)，可采用方式（二）。1、 開機(jī)，儀器顯示“F7230”。2、 按“CLEAR”鍵，儀器顯示“YEA”。3、 按“0%”鍵，儀器顯示“00-00”，表示儀器進(jìn)入及時(shí)狀態(tài)，時(shí)間從88年1月1日0時(shí)0分開始。4、 按“MODE”鍵，儀器顯示（T）狀態(tài)。注意在時(shí)間輸入中，年份范圍在00-99，月份在01-12，時(shí)期01-31.小時(shí)00-23，分鐘00-59。不在這些數(shù)字的范圍，輸入無效，需再次輸入。數(shù)值輸入的過程中，如果按錯(cuò)數(shù)字，可按“CLEAR”鍵，然后再次輸入。時(shí)間一經(jīng)輸入不可更改，除非關(guān)機(jī)再開機(jī)重新開始。二、儀器基本使用方法：1、調(diào)節(jié)波長(zhǎng)旋鈕使波長(zhǎng)移到所需這處。2、四個(gè)比色皿，其中一個(gè)放入?yún)⒈仍嚇?，其?個(gè)放入待測(cè)試樣。將比色皿放入樣品池內(nèi)的比色皿架中，夾子夾緊，蓋上樣品池蓋。3、將參比試樣推入光路，按“MODE”鍵，使顯示（T）狀態(tài)或A狀態(tài)。4、按“100%鍵”，至顯示“T 100.0”或“A 0.000”。5、打開樣品池蓋，按“0%”鍵，顯示“T 0.0”或“A E 1”。6、蓋上樣品池蓋，按“100%”鍵，至顯示“T 100.0”。7、然后將待測(cè)試樣推入光路，顯示試樣的（T）值或A值。8、如要想將待測(cè)試樣的數(shù)據(jù)記錄下來，只要按“PRINT”鍵即可。硫代硫酸鈉滴定液的配制和標(biāo)定1、 配制：、 0.1N Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取26g Na2S2O3及0.2g Na2CO3，加適量新煮沸過的冷水使之溶解，并稀釋至1000ml，混勻，放置一個(gè)月后過濾備用。、 0.5%淀粉指示劑。、 4N H2SO4：量取H2SO4 10ml，慢慢加入80ml水中。2、 標(biāo)定：精密稱取在120干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約0.15g，置于500ml碘瓶中，加水50ml使之溶解，加KI 2g，輕輕振搖使之溶解，再加入4N H2SO4 20ml，蓋塞，搖勻，放置暗處10分鐘后加水250ml，用Na2S2O3溶液滴定至呈淺黃綠色，再加0.5%淀粉指示劑3ml，繼續(xù)滴定藍(lán)色消失而顯亮綠色。反應(yīng)液及稀釋用水的溫度不應(yīng)高于20 。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。3、 計(jì)算： N8=m/（v1-v2）0.04903式中：N8 Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度，N；m基準(zhǔn)重鉻酸鉀的質(zhì)量，g；v1Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液用量，ml；v2試劑空白試驗(yàn)中Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液用量，ml；0.04903每mg當(dāng)量重鉻酸鉀的克數(shù)。4、 貯藏：貯于棕色瓶中，密閉低溫保存。試劑的配制：1、 正丁醇溶液：量取正丁醇500ml，加300ml水充分搖勻后靜置至完全分層，取上清液備用。2、 硼緩溶液：準(zhǔn)確稱取四硼酸鈉95.35g，定容至5000ml，調(diào)PH至9.2后加50ml硼酸即可。3、 斐林A：稱取CuSO45H2O 300g定容至5000ml。4、 斐林B：稱取酒石酸鈉900g，NaOH660g定容至5000ml。5、 硫代硫酸鈉：取1mol/L硫代硫酸鈉稀釋至0.1mol/L即成，待標(biāo)定。6、 0.1mol/LNaOH：取1mol/LNaOH1000ml加水稀釋至1000ml使其濃度為0.1mol/L，待標(biāo)定。7、 甲醛：（中性甲醛）取500ml甲醛溶液，加500ml水搖勻，加酚酞3滴，用濃NaOH調(diào)至微紅色即可。8、 酚酞：1%的乙醇溶液。9、 甲基紅：0.05%的75%的乙醇溶液。安全生產(chǎn)管理制度一、“安全生產(chǎn)、人人有責(zé)”，所有職工都必須加強(qiáng)法制觀念，認(rèn)真執(zhí)行黨和國(guó)家的有關(guān)安全生產(chǎn)，勞動(dòng)保護(hù)政策及法令規(guī)定，嚴(yán)格遵守安全技術(shù)操作規(guī)程和各項(xiàng)安全生產(chǎn)規(guī)章制度。二、凡不符合安全生產(chǎn)要求，有嚴(yán)重危險(xiǎn)的廠房，設(shè)備及生產(chǎn)線，職工有權(quán)向上級(jí)報(bào)告，遇有嚴(yán)重危及生產(chǎn)安全的情況，職工有權(quán)停止操作并及時(shí)報(bào)告領(lǐng)導(dǎo)處理。三、進(jìn)廠新員工，臨時(shí)參加勞動(dòng)及變換工種的人員，未經(jīng)安全教育及跟班的師傅同意，不準(zhǔn)單獨(dú)操作。四、生產(chǎn)工人上班時(shí)，必須嚴(yán)格按規(guī)定穿戴防護(hù)用品。女工要把辮子放在帽內(nèi)，操作前要檢查設(shè)備和工作場(chǎng)地，及時(shí)排除故障和隱患；保持設(shè)備潤(rùn)滑及通風(fēng)良好，運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)器嚴(yán)禁戴手套操作；不準(zhǔn)帶小孩進(jìn)入工作場(chǎng)地，不準(zhǔn)穿拖鞋，赤腳、敞衣，戴頭巾、圍巾工作，上班前不準(zhǔn)喝酒。五、工作中應(yīng)堅(jiān)守崗位，不準(zhǔn)擅自把自己的工作交給他人，不準(zhǔn)打鬧、睡覺以及做與本職工作無關(guān)的事情。凡運(yùn)轉(zhuǎn)設(shè)備，不準(zhǔn)跨越、調(diào)整檢查設(shè)備，要先停電關(guān)車，中途停電應(yīng)關(guān)閉電源。六、嚴(yán)格執(zhí)行交接班制度，本班生產(chǎn)工人下班前必須切斷電源、氣源、熄滅火種及照明電燈，清理場(chǎng)地。七、操作工必須熟悉其設(shè)備性能，工藝要求和設(shè)備操作規(guī)程。設(shè)備要定人操作，不得任意開動(dòng)本工種以外的設(shè)備，當(dāng)工作需要時(shí)須經(jīng)有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)的同意后方可操作。八、檢查，修理機(jī)械、電氣設(shè)備時(shí)，必須先停電，設(shè)人監(jiān)護(hù)，非工作人員嚴(yán)禁合閘、開關(guān)。在合閘要前細(xì)心檢查確認(rèn)無人檢修時(shí)