中老年食蟹猴一般生理和血液生化學(xué)指標(biāo)研究

1、中老年食蟹猴一般生理和血液生化學(xué)指標(biāo)研究非人靈長類動物在親緣關(guān)系上和人最接近，與人類的遺傳物質(zhì)有 75% 98. 5% 的同源性1,在組織結(jié)構(gòu)、免疫、生理和代謝等方面與人類高度近似，是極其珍貴的實(shí)驗(yàn)動物，其應(yīng)用價值遠(yuǎn)超過其他種屬的實(shí)驗(yàn)動物2.近年來，國外對非人靈長類實(shí)驗(yàn)動物的需求量逐年增加，國內(nèi)非人靈長類實(shí)驗(yàn)動物養(yǎng)殖企業(yè)每年出口實(shí)驗(yàn)猴約 2 萬只，約占美國市場份額的 62%以上，歐洲市場份額的 100%.此外，每年面向國內(nèi)銷售約 1 萬只。與此同時，我國的實(shí)驗(yàn)猴養(yǎng)殖事業(yè)有了長足的發(fā)展，據(jù)中國實(shí)驗(yàn)靈長類養(yǎng)殖開發(fā)協(xié)會（ CLPA） 2012 年底統(tǒng)計(jì)顯示全國實(shí)驗(yàn)獼猴和食蟹猴的總存欄量已超過 29

2、萬只，其中食蟹猴高達(dá)25 萬多只3.伴隨著時間的推移，必將有大量的食蟹猴邁入中老年階段（ 年齡≥10 歲為中年猴；年齡 15 歲為老年猴）4,這就為人類慢性疾病研究所亟需的自發(fā)性靈長類動物疾病模型的篩選提供了豐富的資源基礎(chǔ)。因而，建立中老年食蟹猴常規(guī)的臨床血液生理和生化指標(biāo)不僅對其應(yīng)用提供重要的參考意義，也為標(biāo)準(zhǔn)化的生產(chǎn)管理和日常疾病的診斷發(fā)揮著日益重要的作用。本研究對 119 只 11 16 歲的食蟹猴的一般生理指標(biāo)（ 體重、體長和腰圍） 、血液學(xué)和血液生化學(xué)指標(biāo)進(jìn)行了全面系統(tǒng)的測定，并進(jìn)行了性別間的比較，為食蟹猴在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用提供參考信息。1 材料和方法1. 1 實(shí)驗(yàn)動物食蟹猴

3、119 只，雄性80 只，雌性39 只。級別： 普通級； 年齡： 11 16 歲； 動物生產(chǎn)單位： 海南金港生物技術(shù)股份有限公司。實(shí)驗(yàn)于海南金港生物技術(shù)股份有限公司的普通級非人靈長類動物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。飼養(yǎng)條件： 單籠飼料，飼喂膨化飼料，動物自由飲水。1. 2 測定方法1. 2. 1 一般生理指標(biāo) （ 體重 / body weight、體長 /crown-rump length 和腰圍 / waist circumference） 測定：動物空腹時間 16 h,上午 8: 00 11: 00 稱重，稱重前肌注舒泰 50（ 0. 1 mL/kg BW） 進(jìn)行麻醉，采用嬰兒秤進(jìn)行稱量； 體長和腰圍測定

4、均采用皮尺，測定時把已麻醉好的動物側(cè)躺，自然伸直，體長測量是自頭頂部順著背部中線自然延伸至尾根部，腰圍測量是皮尺自肚臍處環(huán)繞一周，松緊適中即可。1. 2. 2 血液生理指標(biāo)測定： 如 1. 2. 1 所述進(jìn)行動物的空腹、麻醉和采集靜脈血 2 mL.應(yīng)用邁瑞 BC-5500 全自動血細(xì)胞分析儀及配套試劑進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測，檢測項(xiàng)目為： 白細(xì)胞數(shù)（ WBC） 、中性粒細(xì)胞數(shù)目（ NEUT#） 、淋巴細(xì)胞數(shù)目（ LYMPH#） 、單核細(xì)胞數(shù)目（ MONO#） 、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目（ EO#） 、嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)目 （ BASO #） 、中性粒細(xì)胞百分比（ NEUT%） 、淋巴細(xì)胞百分比（ LYMPH%）

5、 、單核細(xì)胞百 分 比 （ MONO%） 、嗜 酸 性 粒 細(xì) 胞 百 分 比（ EO%） 、嗜堿性粒細(xì)胞百分比（ BASO%） 、紅細(xì)胞數(shù)（ RBC） 、血紅蛋白（ HGB） 、紅細(xì)胞壓積（ HCT） 、RBC 平均體積 （ MCV） 、RBC 平均血紅蛋白含量（ MCH） 、RBC 平均血紅蛋白濃度（ MCHC） 、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)（ RDW-CV） 、紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（ RDW-SD） 、血小板總數(shù)（ PLT） 、平均血小板體積（ MPV） 、血小板分布寬度（ PDW） 、血小板壓積（ PCT） .1. 2. 3 血液生化指標(biāo)測定： 如 1. 2. 1 所述進(jìn)行動物的空腹、麻醉

6、和采集靜脈血 3 mL,離心取血清，應(yīng)用東芝 120 全自動生化儀及上海科華檢測試劑盒進(jìn)行血液生化學(xué)檢測，檢測項(xiàng)目為： 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ ALT） 、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ AST） 、總膽紅素（ TBIL） 、總蛋白（ TP） 、白蛋白（ ALB） 、球蛋白（ GLO） 、白球比（ A/G） 、堿性磷酸酶（ ALP） 、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（ GGT） 、葡萄糖（ GLU） 、尿素（ UREA） 、肌酐（ CREA） 、總膽固醇（ TCH） 、甘油三酯（ TG） 、肌酸激酶（ CK） 、乳酸脫氫酶（ LDH） .1. 3 結(jié)果處理應(yīng)用 SPSS 統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果以 Mean &plusm

7、n; SD 表示，采用 t 檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)方法，比較各測定指標(biāo)雌雄間差異，顯著性差異水平 α =0. 05.2 結(jié)果2. 1 一般生理指標(biāo)雌、雄性動物的體重、體長和腰圍指標(biāo)差異極顯著（ P2. 2 血液學(xué)指標(biāo)雄性動物的 NEUT#、LYMPH#、EO#、BASO#、NEUT% 、LYMPH% 、EO% 、BASO% 、MCV、MCH、RDW-CV、PCT 與雌性動物相比差異極顯著 （ P 0. 05） （ 表 2）2. 3 血液生化學(xué)指標(biāo)雄 性 動 物 的 TBIL、ALB、GLO、A/G、ALP、GLU、UREA、CREA、TCH、TG、CK 與雌性動物相比差異極顯著（ P 0. 05

8、 ）（ 表 3） .3 討論藥物的藥效學(xué)研究、臨床前安全性評價研究是新藥研發(fā)的核心內(nèi)容。積累動物的背景資料諸如體重及常規(guī)血液生理生化指標(biāo)等就顯得尤為重要，5歲以下的研究結(jié)果已發(fā)表5,但有關(guān)中老年食蟹猴（ 10 歲以上） 的相關(guān)背景資料卻鮮見報(bào)道。本研究測得的中老年食蟹猴（ 11 16 歲） 一般生理指標(biāo)（ 體重、腰圍、體長） 表現(xiàn)出極顯著的性別差異。結(jié)合李冰6的研究結(jié)果，我們可以得出，隨著年齡的增長食蟹猴雌雄間體重的差異性會越來越顯著。這就要求我們在做實(shí)驗(yàn)方案制定時注意不同年齡段雌雄間一般生理指標(biāo)的差異。本研究測得的中老年食蟹猴血液學(xué)以及血液生化學(xué)指標(biāo)結(jié)果表明雌雄間在 NEUT#、LYMPH#

9、、EO#、BASO #、NEUT% 、LYMPH% 、EO% 、BASO% 、MCV、MCH、RDW-CV、PCT、MONO% 、HGB、HCT、MCHC、RDW-SD、MPV 和 TBIL、ALB、GLO、A / G、ALP、GLU、UREA、CREA、TCH、TG、CK、ALT、GGT 等指標(biāo)方面存在顯著性差異。李巖7等研究顯示 4 7 歲食蟹猴在 WBC、ALP、CHO、CRE 和 GLU 指標(biāo)上有性別差異，唐賢麗8等研究顯示3 5 歲食蟹猴僅有 GLU 存在性別差異，石巧娟5等研究結(jié)果顯示UREA、CK 值與性別有密切關(guān)系，結(jié)合本研究可以得出伴隨著年齡的增長這種性別差異依然存在，并且存

10、在著如上所述更多血液生理生化指標(biāo)的性別差異。說明隨著食蟹猴年齡的增長，雌雄個體間血液生理生化指標(biāo)的差異更多且顯著。通過與已有報(bào)道相比較，發(fā)現(xiàn)在 RBC、PLT、GLU和 TP 等重要血液生理生化指標(biāo)上沒有年齡相關(guān)性，各年齡結(jié)果基本一致，而 WBC、HGB 和 TC 等指標(biāo)則出現(xiàn)中老年動物比青壯年的偏低，而中老年雌性動物 TG 高于其他年齡段的動物。進(jìn)一步與中老年人相關(guān)血液生理生化的關(guān)鍵指標(biāo)比較可知，人類的 GLU、TCH 和 TG 比中老年食蟹猴的偏高，WBC、RBC 和 PLT 則偏低，而 HGB 則基本一致9 -11.已有研究表明，伴隨著年齡的增長，猴自發(fā)性動物疾病模型的發(fā)生率就會增加12

11、,并且自發(fā)性動物模型在研究人類疾病時具有重要價值13,尤其是自然衰老靈長類動物模型在特征和發(fā)生機(jī)制方面能較全面的反映人類衰老基本情況14,這就為中老年食蟹猴動物疾病模型的篩選和開發(fā)利用提供了較為基礎(chǔ)的研究背景資料。參考文獻(xiàn)：1 季維智，鄒如金，商恩緣，等。 非人靈長類在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用及其保護(hù)J. 動物學(xué)研究，1996,17（ 4） : 509 -519.2 田朝陽，楊守凱。 非人靈長類動物在醫(yī)學(xué)科學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用J. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2009,19（ 6） : 74 -77.3 馬廣鵬。 我國非人靈長類實(shí)驗(yàn)動物產(chǎn)業(yè)發(fā)展的現(xiàn)狀、問題及對策J. 中國農(nóng)村科技，2013,8: 74 -75.4 花秀春，時彥勝，孫兆增，等。 人工飼養(yǎng)恒河猴、食蟹猴的繁殖性能初報(bào)J. 中國實(shí)驗(yàn)動物學(xué)報(bào)，2009,17（ 3） : 219 -221.5 石巧娟，初明明，田朝陽，等。 人工飼養(yǎng)食蟹猴血液常規(guī)和生化指標(biāo)測