[經(jīng)典]黔產(chǎn)野生和栽培鉤藤藥材的顯微鑒別研究

1、經(jīng)典黔產(chǎn)野生和栽培鉤藤藥材的顯微鑒別研究黔產(chǎn)野生和栽培鉤藤藥材的顯微鑒別研究摘要目的：為了更安全、準(zhǔn)確地使用鉤藤類藥材。方法：觀 察其原植物形態(tài)、藥材性狀和顯微特征。結(jié)果：不同來源鉤藤藥材在 組織構(gòu)造等方血有不同特征，表皮細(xì)胞可分為有表皮毛及無表皮毛兩 類；表皮毛為非腺毛，又分單細(xì)胞和多細(xì)胞兩種非腺毛；單細(xì)胞非腺 毛有短角狀、長(zhǎng)錐狀，多細(xì)胞非腺毛有平直的和彎曲的兩種；莖表皮 角質(zhì)層層紋不同，有的平滑，有的具條狀紋理；角質(zhì)層表血觀凹凸各 異，有的呈內(nèi)凹的方格形，有的在細(xì)胞外側(cè)中部略隆起成四邊形等等。 結(jié)論：上述特征可作為鉤藤類藥材的鑒別依據(jù)。關(guān)鍵詞鉤藤顯微鑒別1材料和儀器1. 1材料 鉤藤、華鉤

2、藤、毛鉤藤和攀枝鉤藤采自貴州省的貴陽 市、劍河縣、三都縣等地，經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系生藥教研室劉教 授鑒定。1. 2儀器yd-202c型旋轉(zhuǎn)切片機(jī)（浙江金華益迪醫(yī)療設(shè)備廠）、 xsz-8d4a型生物顯微鏡及數(shù)碼圖像分析系統(tǒng)（梧州光學(xué)儀器廠），實(shí) 驗(yàn)所用的試劑均為分析純。2橫切面顯微特征2. 1野生鉤藤莖（23mm）的橫切面橫切面觀類圓形。表皮細(xì) 胞1列，具角質(zhì)層，無表皮毛。皮層薄壁細(xì)胞數(shù)列，排列較疏松，形 狀各異，含棕色內(nèi)含物。中柱鞘纖維斷續(xù)排列成環(huán)，壁厚。韌皮薄壁 細(xì)胞數(shù)列，排列較疏松，形狀各異，含棕色物質(zhì)，韌皮部?jī)?nèi)纖維單個(gè) 或成群散在，較中柱鞘纖維細(xì)小，微木化。木質(zhì)部導(dǎo)管常數(shù)個(gè)徑向相 連，木

3、纖維多數(shù)。形成層明顯成環(huán)。中央髓部寬廣，約占橫切面直徑 的一半，四周有12列環(huán)髓厚壁細(xì)胞，偶見棕色小團(tuán)塊狀物質(zhì)。薄 壁細(xì)胞含草酸鈣砂晶（見圖1）。1 表皮2.皮層3韌皮部4木質(zhì)部5髓部6中柱鞘纖維2. 2野生鉤藤鉤（11. 5mm）的橫切面橫切面觀長(zhǎng)橢圓形。 木質(zhì)部由木化細(xì)胞、木纖維等組成，導(dǎo)管散在，木射線徑向排列。髓 部較寬，扁橢圓形。細(xì)胞排列較緊密。其余和莖橫切面相同（見圖2）。1 表皮2皮層3中柱鞘纖維4韌皮部5形成層6木質(zhì)部7. 髓部2. 3野生毛鉤藤莖（23mm）的橫切面 橫切面方形。復(fù)表皮2 5層細(xì)胞，外層表皮具單細(xì)胞及多細(xì)胞非腺毛。角質(zhì)層表面觀呈內(nèi)凹 的方格形。皮層、韌皮部薄壁細(xì)

4、胞數(shù)列，排列較緊密，細(xì)胞形狀各異， 呈類圓形、類四邊形和不規(guī)則形等，且含少量棕色物質(zhì)及草酸鈣砂晶。 中柱鞘纖維斷續(xù)成環(huán)。形成層明顯成環(huán)。木質(zhì)部導(dǎo)管類圓形，多單個(gè) 散在，偶有25個(gè)成群，木射線徑向排列。中央髓部寬廣，四周徜 見12列環(huán)髓厚壁細(xì)胞。髓薄壁細(xì)胞內(nèi)含有較多淀粉粒及棕色物質(zhì) （見圖3）o1非腺毛2表皮3皮層4中柱鞘纖維5韌皮部6木質(zhì)部7. 髓部2. 4野生毛鉤藤鉤（11. 5mni）的橫切面 橫切面扁長(zhǎng)條形。 木質(zhì)部由木化細(xì)胞、木纖維等組成，導(dǎo)管放射狀排列。韌皮部、髓部 較寬，髓部可見淀粉粒及棕色團(tuán)塊狀物質(zhì)。組織排列緊密。其余與莖 橫切面相同（見圖4）。1. 非腺毛2.表皮3.皮層4.中

5、柱鞘纖維5韌皮部6.形成層7. 木質(zhì)部8.髓部2. 5野生攀枝鉤藤莖（45mm）的橫切面 橫切面方形，兩側(cè)略 凹。表皮具眾多非腺毛及毛脫落后凸起的痕跡，表皮細(xì)胞平周壁略呈 半圓形。皮層及韌皮部薄壁細(xì)胞數(shù)列，排列較緊密，呈類圓形、類方 形等，且含草酸鈣砂晶；皮層薄壁細(xì)胞中含有棕色內(nèi)含物。形成層明 顯成環(huán)。木質(zhì)部導(dǎo)管類圓形，多單個(gè)散在，偶有34個(gè)并列，木射 線徑向排列。中央髓部寬廣，約占切面直徑的2/3,四周可見12 列環(huán)髓厚壁細(xì)胞（見圖5）。1非腺毛2表皮3皮層4中柱鞘纖維5韌皮部6木質(zhì)部7. 髓部2. 6野生攀枝鉤藤鉤（2mm）的橫切面橫切面長(zhǎng)紡錘形。韌皮 部較寬。木質(zhì)部由木化細(xì)胞、木纖維等組

6、成，導(dǎo)管呈輻射狀排列。髓 部偶見淀粉粒及棕色團(tuán)塊狀物質(zhì)。組織排列甚密。其余與莖橫切面相 同（見圖6）o1非腺毛2表皮3皮層4中柱鞘纖維5韌皮部6形成層7. 木質(zhì)部8髓部2. 7野生華鉤藤莖（45mm）的橫切面 橫切面觀四方形，四角 具棱。表皮細(xì)胞1列，外側(cè)具光亮角質(zhì)層，角質(zhì)層在每表皮細(xì)胞外側(cè) 中部略隆起，無表皮毛。外皮層較明顯；皮層薄壁細(xì)胞數(shù)列，排列較 疏松，形狀不一，呈類圓形、類方形、多邊形和不規(guī)則形等，冃含棕 色內(nèi)含物；皮層內(nèi)方可見連接成環(huán)的中柱鞘纖維。韌皮部篩管散在， 韌皮射線細(xì)胞寬1列，徑向排列，韌皮部?jī)?nèi)纖維較少，含有少量棕色 內(nèi)含物及草酸鈣砂晶o形成層明顯成環(huán)o木質(zhì)部導(dǎo)管常數(shù)個(gè)徑向排

7、列， 類圓形，木射線細(xì)胞1列。中央髓部寬廣，約占切面直徑的2/3,四 周有23列環(huán)髓厚壁細(xì)胞（見圖7）。2. 8野生華鉤藤鉤（12mm）的橫切面 橫切面觀橢圓形。木質(zhì) 部中木纖維、木射線明顯，導(dǎo)管放射狀排列。髓部較寬，扁長(zhǎng)圓形。 組織排列致密。其余與莖橫切面和同（見圖8）。1. 表皮2.皮層3中柱鞘纖維4.韌皮部5.木質(zhì)部6.髓部2. 9栽培華鉤藤莖（45mm）的橫切面橫切面四方形。表皮細(xì) 胞1列，外被角質(zhì)層。皮層薄壁細(xì)胞數(shù)列，排列較疏松，呈類圓形、 類方形等，且含棕色內(nèi)含物及草酸鈣砂晶。中柱鞘纖維連接成環(huán)。韌 皮薄壁細(xì)胞數(shù)列，排列疏松，呈類圓形、類四邊形等，且含草酸鈣砂 晶，韌皮部?jī)?nèi)纖維較多

8、。形成層明顯成環(huán)。木質(zhì)部導(dǎo)管散在，類圓形， 木射線徑向排列。中央髓部寬廣，約占切面直徑的2/3,四周有12 列環(huán)髓厚壁細(xì)胞且髓薄壁細(xì)胞含有棕色物質(zhì)及草酸鈣砂晶（見圖9）。1 表皮2皮層3中柱鞘纖維4韌皮部5形成層6木質(zhì)部7. 髓部1. 表皮2.皮層3中柱鞘纖維4.韌皮部5.木質(zhì)部6.髓部2. 10栽培華鉤藤鉤（23mm）的橫切面橫切面觀長(zhǎng)橢圓形。 木質(zhì)部中木纖維、木射線明顯，導(dǎo)管散在。髓部相對(duì)較寬，扁長(zhǎng)橢圓 形，可見草酸鈣砂晶及棕色物質(zhì)。組織排列緊密。其余與莖橫切面相 同（見圖10）o1 表皮2皮層3中柱鞘纖維4韌皮部5形成層6木質(zhì)部7. 髓部3粉末顯微特征3. 1野生鉤藤粉末 淡紅棕色。韌型

9、纖維大多成束，甚長(zhǎng)，直 徑15-25 um,壁稍厚，木化，具明顯單斜孔。韌皮纖維大多成束， 直徑1642 u m,非木化或微木化，孔溝不明顯。表皮細(xì)胞棕黃色， 類方形、多角形或稍延長(zhǎng)，直徑長(zhǎng)達(dá)32 um,壁稍增厚，細(xì)胞內(nèi)有油 滴狀物，有的可見較厚角質(zhì)層。微木化的薄壁細(xì)胞眾多，呈類方形、 類圓形、不規(guī)則形或細(xì)長(zhǎng)方形，直徑16-74 um,壁稍增厚，具多數(shù) 橢圓形或圓形單紋孔。韌皮部薄壁細(xì)胞延長(zhǎng)，呈螺旋狀或扭曲，間 有草酸鈣砂晶細(xì)胞。草酸鈣砂晶細(xì)胞散在，有的較密集或排成縱行。 纖維管胞少見，大多與韌性纖維成束存在，有具緣紋孔（見圖ll）o1木化薄壁細(xì)胞2表皮細(xì)胞3韌皮部薄壁細(xì)胞4草酸鈣砂晶5.纖維

10、管胞6.韌型纖維7.韌皮纖維3. 2野生毛鉤藤粉末淡黃棕色。韌型纖維大多 成束，較長(zhǎng)，直徑12-20 um,壁較厚，木化。韌皮纖維大多成束， 甚長(zhǎng)，直徑15-40 um,非木化或微木化。表皮細(xì)胞棕黃色，類圓 形、多邊形或不規(guī)則形，宜徑可達(dá)30 um,壁稍增厚，細(xì)胞內(nèi)可見油 滴狀物，有的可見較厚角質(zhì)層。木化薄壁細(xì)胞眾多，類方形或類圓 形，壁稍厚，具多數(shù)圓形或橢圓形單紋孔。韌皮部薄壁細(xì)胞延長(zhǎng), 次&壁自初生壁脫離，呈螺旋狀或扭曲，間有草酸鈣砂晶細(xì)胞。非 腺毛平直或僅頂端彎曲，多細(xì)胞毛多為銳長(zhǎng)錐形，單細(xì)胞毛為短角狀。 纖維管胞少見，有具緣紋孔（見圖12）。1 表皮細(xì)胞2木化薄壁細(xì)胞3非腺毛4

11、韌型纖維5纖維管 胞6.韌皮纖維7.韌皮部薄壁細(xì)胞3.3野生攀枝鉤藤粉末淡黃棕色。韌型纖維大多成束,較長(zhǎng)， 直徑10-20 um,壁較厚，木化。韌皮纖維大多成束，較長(zhǎng)，直徑 1238uni,非木化或微木化。表皮細(xì)胞棕黃色，類圓形或多角形, 直徑可達(dá)36 uni,壁稍增厚，細(xì)胞內(nèi)可見油滴狀物。微木化的薄壁 細(xì)胞較多，呈類圓形、類方形、不規(guī)則形等，多數(shù)具橢圓或圓形單紋 孔。韌皮部薄壁細(xì)胞延長(zhǎng)，呈螺旋狀或扭曲?？梢娐菁y、網(wǎng)紋及 具緣紋孔導(dǎo)管。非腺毛多彎曲，單細(xì)胞毛為長(zhǎng)條形。草酸鈣砂晶 散在（見圖13）o3. 4野生華鉤藤粉末 淡黃棕色。韌型纖維大多成束，較長(zhǎng), 直徑18-28 um,壁稍厚，木化，具

12、明顯單紋孔。韌皮纖維大多成 束，甚長(zhǎng)，直徑20-45 n m,非木化或微木化，孔溝不明顯。表皮 細(xì)胞棕黃色，類圓形、類方形或多邊形，直徑長(zhǎng)達(dá)36 um,壁稍厚， 細(xì)胞內(nèi)可見油滴狀物。木化薄壁組織碎片極多，包括木射線、木薄 壁細(xì)胞等，細(xì)胞呈類方形或細(xì)長(zhǎng)方形，壁稍厚，具多數(shù)橢圓形或圓形 單紋孔。可見螺紋、具緣紋孔導(dǎo)管（見圖14）。1木化薄壁細(xì)胞2表皮細(xì)胞3導(dǎo)管4韌型纖維5韌皮纖維6非腺毛7韌皮部薄壁細(xì)胞1.木化薄壁細(xì)胞2.表皮細(xì)胞3.導(dǎo)管3. 5栽培華鉤藤粉末淡黃棕色。韌型纖維大多成束，較長(zhǎng), 直徑16-25 um,壁稍厚，木化，具明顯單紋孔。韌皮纖維大多成 束，甚長(zhǎng)，宜徑18-42 um,非木化

13、或微木化，孔溝不明顯。表皮 細(xì)胞棕黃色，類圓形、類方形或不規(guī)則形，直徑長(zhǎng)達(dá)34 um,壁稍厚， 細(xì)胞內(nèi)可見油滴狀物。木化薄壁細(xì)胞呈類方形或類圓形，壁稍厚, 具多數(shù)圓形單紋孔，孔溝明顯。可見具緣紋孔、螺紋、梯紋導(dǎo)管。 草酸鈣砂晶散在，有的含砂晶細(xì)胞密集排列成行（見圖15）o4討論4. 1不同種的鉤藤在性狀和組織構(gòu)造方面有基木相同之處，都 具鉤；在橫切面觀基本組織一致，為表皮、皮層、中柱鞘纖維、韌皮 部、木質(zhì)部及髓部所組成。大多數(shù)鉤藤的皮層、韌皮部及髓部薄壁細(xì) 胞中均含棕色內(nèi)含物和草酸鈣砂晶。但在各種z間乂有不同特征，表 皮細(xì)胞可分為有表皮毛及無表皮毛兩類；表皮毛為非腺毛，又分單細(xì) 胞和多細(xì)胞兩種

14、非腺毛；單細(xì)胞非腺毛有短角狀、長(zhǎng)錐狀，多細(xì)胞非 腺毛有平直的和彎曲的兩種；莖表皮角質(zhì)層層紋不同，有的平滑，有 的具條狀紋理；角質(zhì)層表面觀凹凸各異，有的呈內(nèi)凹的方格形，有的 在細(xì)胞外側(cè)中部略隆起成四邊形等等。以上特征均可作為鑒別依據(jù)。4. 2兒種鉤藤藥材的顯微特征檢索表（見表1）。1木化薄壁細(xì)胞2表皮細(xì)胞3導(dǎo)管4韌型纖維5韌皮纖維6木射線細(xì)胞4韌型纖維5韌皮纖維6草酸鈣砂晶表1幾種鉤藤藥材的顯微特征檢索表1.表皮有非腺毛2非腺毛多彎曲，單細(xì)胞，為長(zhǎng)條狀野生攀枝鉤藤2非腺毛平直或僅頂端彎曲，單細(xì)胞的為短角狀，多細(xì)胞的多為 銳長(zhǎng)錐形，角質(zhì)層表面觀呈內(nèi)凹的方格形，較厚野生毛鉤藤1.表皮無非腺毛3. 莖橫切面四方形4表面觀細(xì)胞類方形，莖橫切面具棱，角質(zhì)層屮間略隆起成四邊 形野生華鉤藤4砂晶細(xì)胞延長(zhǎng)，較多，散在，有的密集排列成行栽培華鉤藤3莖橫切面為類方形或圓形，角質(zhì)層成平直條紋野半鉤藤4. 3石蠟切片技術(shù)中，植物組織的染色方法有多種，最常用的 是番紅-|古i綠二重染色法，但此方法操作復(fù)雜，效果不易控制，而番 紅一固綠混合染色法5對(duì)各種植物組織染色均可取得良好效果， 選擇番紅與固綠染料進(jìn)行混合，染色吋一次性完成二重染色的要求, 分色清楚，色彩鮮艷，著色牢i古i,可簡(jiǎn)化操作，節(jié)省時(shí)間。參考文獻(xiàn)1國(guó)家藥典委員會(huì)