濕熱滅菌柜驗(yàn)證實(shí)例

1、濕熱滅菌柜驗(yàn)證實(shí)例 實(shí)例1： 濕熱滅菌設(shè)備的溫度驗(yàn)證  1溫度驗(yàn)證程序設(shè)計(jì)基本要求    濕熱滅菌的基本程序設(shè)計(jì)基本要求源于US.FDA在上世紀(jì)70年代中期提出的，且在80年代施行的：“關(guān)于大容量注射劑GMP技術(shù)性原則”五個(gè)方面要求：    (1)在滅菌工序應(yīng)能確保產(chǎn)品達(dá)到F0 8；    (2)滅菌前，待實(shí)驗(yàn)的容器中有最高帶菌量，污染菌應(yīng)具有最強(qiáng)的耐熱性；    (3)每一個(gè)滅菌釜的每種裝載方式及每種規(guī)格容器的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)均至少使用10支熱電偶進(jìn)行

2、熱分布實(shí)驗(yàn)；    (4)用待實(shí)驗(yàn)容器灌注粘度相類似的產(chǎn)品進(jìn)行熱穿透實(shí)驗(yàn)，找出容器中升溫最慢點(diǎn)的位置，至少使用10個(gè)容器，每個(gè)均加入適當(dāng)?shù)纳镏甘緞┎⑶也逵袩犭娕肌．?dāng)滅菌釜的參數(shù)已經(jīng)達(dá)到熱分布實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)的可重現(xiàn)狀態(tài)，溫度達(dá)到設(shè)定的滅菌溫度時(shí)，開始測定F0  值，直到開始冷卻止；    (5)當(dāng)產(chǎn)品達(dá)到滅菌溫度直到開始冷卻的過程，溫度變化必須保持在 ±0.5以內(nèi)。 2溫度驗(yàn)證的功能測試步驟    由此技術(shù)設(shè)計(jì)要求出發(fā)，演化成為目前國內(nèi)廣泛采用的濕熱溫度驗(yàn)證的大容量注射劑實(shí)驗(yàn)方

3、法和實(shí)驗(yàn)器具,也是溫度驗(yàn)證程序設(shè)計(jì)的基本要求。使用其作功能測試步驟及參考設(shè)備如下：    前提： 濕熱滅菌設(shè)備的安裝測試合格，現(xiàn)場和公用工程外接條件完備。即通常講（DQ， IQ）已經(jīng)結(jié)束后，位置在OQ運(yùn)行確認(rèn)。2.1熱分布測試       目的：找出最冷點(diǎn)位置，檢驗(yàn)重現(xiàn)性。步驟：(1)設(shè)備儀器校正；(2)熱電偶分布圖；(3)空載熱分布實(shí)驗(yàn)，3次以上；(4)熱電偶插入圖；(5)裝載（模擬生產(chǎn)裝載最大，最小量）熱分布實(shí)驗(yàn)，各3次以上。2.2熱穿透測試      目的：肯定滅菌過程

4、中被測試各點(diǎn)獲得無菌保證值，特別是最冷點(diǎn)位置的F0 值,監(jiān)測檢驗(yàn)重現(xiàn)性。步驟：(1)設(shè)備校正；(2)模擬生產(chǎn)滅菌裝載；(3)熱電偶裝載圖；(4)同品同規(guī)產(chǎn)品最大與最小裝載熱穿透實(shí)驗(yàn)，每狀態(tài)3次以上。2.3 生物指示劑測試     目的： 挑戰(zhàn)性模擬生產(chǎn)可能因素造成的微生物污染程度來檢驗(yàn)滅菌可靠性，對驗(yàn)證設(shè)計(jì)進(jìn)行檢驗(yàn)。步驟：(1)方案的設(shè)計(jì)制定；(2)生物指示劑菌株的選擇，測定D值；(3)標(biāo)定濃度和制定樣品；(4)接種，裝載；(5)低限滅菌(每產(chǎn)品，每規(guī)格每種滅菌程序至少3次以上）；(6)樣品的培養(yǎng)與鑒別；(7)評價(jià)結(jié)論（數(shù)據(jù)，樣品分析）。2.4 偏差與調(diào)整

5、0;      重新設(shè)計(jì)后，重復(fù)上面步驟。2.5 填寫驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)報(bào)告書            3濕熱滅菌溫度驗(yàn)證對驗(yàn)證儀器的基本要求    按前所述溫度驗(yàn)證程序設(shè)計(jì)要求的技術(shù)原則的五方面內(nèi)容，驗(yàn)證設(shè)備可包括三部分：(1)測溫元件；(2)測溫編輯記錄儀器；(3)輔助校正儀器。3.1測溫元件    測溫元件采用敏感的多枝精密鉑電阻或電偶組成，原理如圖1。接線較長可以獨(dú)立的擺放在滅菌設(shè)備中選定位

6、置，每支的誤差在±0.5以下的測試精度范圍。             校正時(shí)，發(fā)生誤差越程件應(yīng)篩選。這是因?yàn)檎`差越程后在后面的計(jì)算中將導(dǎo)致 F0 偏離，容易帶來誤判結(jié)果。    電偶是溫度到勢能的變換器，而電阻是溫度到阻值的變換器，兩者在輸出的信號上是不同的。從輸出特性靈敏度看精密鉑電阻（RTD）  為優(yōu)。從測溫范圍上比較（-1802000），價(jià)性比上熱電偶較優(yōu)。    所以，經(jīng)典教科書上和專家針對生產(chǎn)企業(yè)

7、設(shè)備溫度驗(yàn)證仍推薦熱電偶。它是驗(yàn)證的溫度信號采集器（精密的多只眼睛）。目前開發(fā)先進(jìn)的儀器采用無線信號傳送作為測溫元件。測溫記錄儀就近接收發(fā)來的每一個(gè)信號，自動完成轉(zhuǎn)換和記錄、存儲，但造價(jià)昂貴，特別小氣，保管有特別的要求, 目前針對旋轉(zhuǎn)釜國內(nèi)已有使用。在滅菌釜的實(shí)際溫度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)儀器上，國內(nèi)外已經(jīng)開發(fā)和生產(chǎn)出成熟的部件和比較先進(jìn)的儀器，如GE.Kaye（US） 、raytek（US）、 Sakura 、multi(Japen) 、Schlumbergez(England) 、  Goodwill(臺灣固緯)、Validator2000(北京祥鴻) 等溫度驗(yàn)證儀。3.2測溫編輯記錄儀器&#

8、160;   測溫記錄儀器是整個(gè)實(shí)驗(yàn)的大腦。國內(nèi)外諸多公司直接采用PC機(jī)開發(fā)，在Windows 系統(tǒng)平臺基礎(chǔ)上開發(fā)自己的多點(diǎn)數(shù)據(jù)記錄、整理、計(jì)算、存儲及I/O的接口軟件，其集多功能軟件為一體裝配在計(jì)算機(jī)中，既便攜帶，又圖文齊備，直觀可靠。3.3輔助校正儀器    設(shè)計(jì)為一臺高精度的恒溫油槽（又稱干井，見圖2），采用溫控PID調(diào)節(jié)控溫精度高，溫度波動范圍設(shè)計(jì)在±0.05。其有斷偶保護(hù)功能，上限設(shè)計(jì)超溫報(bào)警功能。升降溫快速、穩(wěn)定、可靠。在設(shè)定溫度和測量溫度數(shù)字上，分別3又1/2精確顯示。    在低溫段檢校采

9、取冰點(diǎn)槽（低溫干井）設(shè)施，高低溫干井分別檢測電偶的特殊點(diǎn)溫度值誤差和能否用于實(shí)驗(yàn)的合格性進(jìn)行甄別篩選。它即是本實(shí)驗(yàn)的檢測校正部件，也是實(shí)驗(yàn)室的常備精密溫度源。通常交國家法定技術(shù)監(jiān)督部門定期檢校確認(rèn)合格,在有效期內(nèi)使用。                 4電偶的布置及被滅菌物裝載    從國內(nèi)許多溫度驗(yàn)證工作開展與企業(yè)參觀的實(shí)踐中，專家都肯定被滅菌物裝載及電偶的布置對溫度驗(yàn)證結(jié)論有一定的影響。集中反映的問題有

10、以下幾方面：    (1)電偶前端部分不要接觸周邊介質(zhì)（被滅菌裝載物，籠架，柜壁）。汽流和高溫水流對其沖擊不會發(fā)生碰撞接觸和位移；    (2)釜（膽）體噴淋板孔堵塞或加工飛邊毛刺將影響水流及安置的設(shè)備平行度，也將影響水量分布和流向；    (3)預(yù)測高溫點(diǎn)（蒸汽入口）、低溫點(diǎn)（凝結(jié)排放或循環(huán)水出口）與同步點(diǎn)（電偶位置與本柜設(shè)計(jì)檢測探頭處相同位置）的接線、編號與擺放方式有誤。    裝載物（模擬滅菌生產(chǎn)類似物）的擺放模擬方式越接近實(shí)際生產(chǎn)，和影響熱傳遞的模擬產(chǎn)品的液體粘度越接

11、近滅菌藥品粘度，擺放的電偶數(shù)量（10<N<20）越多越均勻，那么實(shí)驗(yàn)的可信度越大，真實(shí)誤差越小，越逼真。< DIV>     在2.4(3)所涉及點(diǎn)外，其余點(diǎn)選擇視設(shè)備有所不同。如噴淋式滅菌柜，過熱水是由上至下流動傳遞熱量，驗(yàn)證技師強(qiáng)調(diào)堆碼底層和堆碼中心是考核重點(diǎn)，建議擺放在底層均布為重；又如SVP脈動滅菌釜，則強(qiáng)調(diào)堆碼底層接近排氣口周圍的布置是考核重點(diǎn)；再如噴淋旋轉(zhuǎn)式滅菌柜，過熱水是由外至里流動傳遞熱量，驗(yàn)證技師強(qiáng)調(diào)中剖面四角和中心是考核重點(diǎn)，建議擺放呈軸向中部層為重。而某些專家特別研究后，提出仍以可靠性和準(zhǔn)確性為布置意圖的核心思想。然而

12、，需要對不同釜形作具體分析和實(shí)驗(yàn)注重均布性，取弱點(diǎn)代表。    值得注意的是在設(shè)定滅菌程序一定（如121 /15分， 115/35分等）后，溫度實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證采取的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)參數(shù)，其裝載方式和生產(chǎn)滅菌的正常采用方式是相同的、固定的，否則會造成檢測偏差。特別強(qiáng)求的是，模擬生產(chǎn)現(xiàn)場條件的相似性和一致性是相當(dāng)重要的條件因素。    實(shí)際的LVP設(shè)備均為多籠車和大產(chǎn)量（有上萬瓶/柜）的高效型。對冷點(diǎn)與次冷點(diǎn)的檢測和判斷必須是多次數(shù)據(jù)的綜合結(jié)論。然而，使用過程存在冷點(diǎn)、次冷的漂移和改變屬再驗(yàn)證確認(rèn)。    高溫點(diǎn)的控制判斷

13、也是必須監(jiān)測的參數(shù)，這將涉及到藥品的高溫藥效評價(jià)。探頭不足的情況下，可以固定裝載形式后，經(jīng)單籠車多次測試與對比，步步逼近搜尋冷點(diǎn)、次冷點(diǎn)、高溫點(diǎn)等參數(shù)。同時(shí)，應(yīng)和實(shí)際的生產(chǎn)裝載形式一致，不得改變裝載形式以保證應(yīng)用偏差的最小化和數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。    當(dāng)然，按照生產(chǎn)現(xiàn)場的模擬情況步驟上應(yīng)有最小裝量和最大裝量，每品每規(guī)至少3次（如設(shè)備太大，探頭不夠而分段測試，則數(shù)據(jù)將更多），至少3組穩(wěn)定數(shù)據(jù)來考核設(shè)備的重現(xiàn)性和篩選熱分布參數(shù)的準(zhǔn)確性。    加上校正、布置、輔助裝載、檢測、紀(jì)錄分析等是驗(yàn)證班技工好幾周的工作量?？梢?，試驗(yàn)的艱苦和細(xì)致要求，如

14、此勞神費(fèi)力是因?yàn)樗臏?zhǔn)確性對后面工作有十分重要的指導(dǎo)性意義。 5熱穿透試驗(yàn)及標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0    熱量在物理學(xué)中有傳導(dǎo)、對流和輻射三種基本傳遞形式，其綜合產(chǎn)生了強(qiáng)大的熱穿透效果，人們關(guān)心的是熱穿透效果，故取名為熱穿透試驗(yàn)。早些書籍上有稱它為帶產(chǎn)品負(fù)荷的熱分布試驗(yàn)，目前仍然以熱穿透試驗(yàn)的稱謂居多。目的是為了用前述實(shí)驗(yàn)的極值點(diǎn)來考核其F0值，對已經(jīng)滅菌的產(chǎn)品是否被賦予設(shè)計(jì)的滅菌保證值進(jìn)行具體數(shù)據(jù)檢測考核。    本實(shí)驗(yàn)的步驟和方法與裝載和前述的熱分布試驗(yàn)大體相同，差別在于溫度探頭的布置是插在產(chǎn)品中，不接觸藥品容器周邊和底部。擺

15、放在下列位置，并一一對應(yīng)作好編號：    (1)熱分布試驗(yàn)確定的最冷點(diǎn)和次冷點(diǎn)；    (2)熱分布試驗(yàn)確定的最熱點(diǎn)和次熱點(diǎn)；    (3)和滅菌柜溫度控制設(shè)計(jì)探頭并列（又稱同步點(diǎn)）；    (4)紀(jì)錄腔室溫度探頭（不插入產(chǎn)品中），其余和熱分布位置相當(dāng)，均勻布置。    每點(diǎn)的溫度紀(jì)錄后按照時(shí)間間隔（30秒或1分）詳細(xì)紀(jì)錄打印，并計(jì)算每點(diǎn)從升溫到降溫過程中100上的F0值、各點(diǎn)總的F0均值、最大與最小值關(guān)鍵數(shù)據(jù)。   

16、; 探頭使用前后都要在冰點(diǎn)槽和油浴槽中仔細(xì)的校正，剔除超差件。在保證重現(xiàn)性非常好的情況下，穩(wěn)定試驗(yàn)數(shù)據(jù)不得低于3組。也就是本試驗(yàn)在某品種規(guī)格和對應(yīng)某裝載固定不變的工況下至少需穩(wěn)定狀態(tài)下作3次實(shí)驗(yàn)?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)是：    (1)滅菌設(shè)計(jì)程序下各點(diǎn)熱穿透試驗(yàn)獲得的F0值基本一致；    (2)最冷點(diǎn)F0值和產(chǎn)品的F0  均值之間差值小于2.5(參數(shù)的參考解釋見藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南1996版，221)；    (3)整體的F0值監(jiān)察分析，其沒有在設(shè)計(jì)的F0值允許波動的公差上下限外數(shù)據(jù)； 

17、0;  (4)具備良好的重現(xiàn)性，連續(xù)三次以上重現(xiàn)性）。    以F0值作為監(jiān)察分析的歷史由來已久，從經(jīng)典的資料查閱可以找到，濕熱滅菌中微生物殺滅的對數(shù)規(guī)則始于1921年Bigeow和Rahn等科學(xué)家的研究。他們論文的主要成果是：    滅菌時(shí)微生物死亡遵循對數(shù)規(guī)則，過程可以用阿侖烏斯（Arrhenius）的一級反應(yīng)式來描述。根據(jù)質(zhì)量作用定律，在恒定溫度及保持其它條件不改變的情況下，單位時(shí)間內(nèi)被殺滅的微生物數(shù)正比于初始的原有數(shù)目，可以表示為以下的線性式：    dN/dt = K (No-N k

18、) (1)             整理后lg N t = lg No ( K/2.303) t     取其斜率的負(fù)倒數(shù)定義為D值，D= 2.303/K= t/ (lg No - lg N t )，取(lg No - lg N t )=1，D= t， 則為微生物被殺滅90%的時(shí)間。也稱謂微生物九成殺滅時(shí)間,單位為分，D為正值。在USP中，D值則表示滅菌的程度。D值區(qū)分不同的微生物，在不同的溫度和介質(zhì)情況下數(shù)值不同，具體的數(shù)據(jù)是可以查閱的，其值越大表明微生

19、物越難殺滅。隨著滅菌溫度升高，殺滅耗用的時(shí)間越短。試驗(yàn)在（100138）范圍lg D與溫度有線性關(guān)系，取其斜率的付倒數(shù)定義為Z值：    Z  =  （T2 T1 ）/ lgD 1- lg D2 -（2）    Z值代表微生物被殺滅減低一個(gè)lg D數(shù)量單位所需升高的溫度數(shù)值,代表微生物對熱敏感系數(shù)，其值越大對熱越不敏感。單位為 ，Z 為正值。實(shí)驗(yàn)選取強(qiáng)耐熱菌株（嗜熱脂肪桿菌B.Stearothermophilus）為代表的Z值在多種介質(zhì)中為9.4 ，考慮Z值選取10，從安全角度既留有安全余地且對數(shù)計(jì)算應(yīng)用上十分簡便

20、。    D2 / D 1  =  10 (T1 T2) / Z    帶入測試時(shí)間間隔t和效果時(shí)間多項(xiàng)累計(jì)求和,將T2設(shè)為參比溫度T0，在變溫情況下的滅菌等效式求F值計(jì)算整理，F(xiàn)值的數(shù)學(xué)表達(dá)式是一個(gè)多項(xiàng)和結(jié)果，也有直接以積分形式寫出的代表式。數(shù)學(xué)多項(xiàng)表達(dá)式對物理特性表達(dá)較為直觀：          t 為測量被滅菌物溫度的時(shí)間間隔（一般采用1分或0.5分），分為單位；    T為每個(gè)t時(shí)間間隔測得的被滅菌物溫度值，

21、為單位；    T0是參比溫度值，為單位；    Z為微生物數(shù)降低一個(gè)對數(shù)lgD值所需要升高的溫度數(shù)，為單位；    F ，分為單位。    它的物理含義是在變溫條件下t分鐘滅菌效果與溫度T0 （參比溫度）時(shí)F分鐘的滅菌效果相同等效。這是很有意義和具有非常適用價(jià)值的表達(dá)式，因?yàn)楣I(yè)生產(chǎn)滅菌是不可能在一瞬間完成，長時(shí)間溫度恒定不變的絕對理想狀態(tài)也是不存在的，因而在實(shí)際的生產(chǎn)操作中將廣泛涉及該式。    當(dāng)Z值取10時(shí)，這個(gè)數(shù)學(xué)表達(dá)式就剩下實(shí)測溫度T

22、和間隔時(shí)間t兩個(gè)變量，代表各個(gè)溫度值下的滅菌效果轉(zhuǎn)化為121 標(biāo)準(zhǔn)溫度下Z值10下的滅菌時(shí)間效果，并記為F0值        上式直接由溫度T和時(shí)間t兩個(gè)物理量決定，某些書籍又稱物理F0  （標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間）。物理F0目前僅限于濕熱滅菌，在試驗(yàn)中需要注意不能與干熱、輻射等滅菌標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)相混淆。    它包括滅菌過程的升、保、降溫過程三皆段熱能對微生物總致死量效果，其是以時(shí)間為單位表示在滅菌溫度121時(shí)等效的量值（以時(shí)間的量值來表示的代用值）。    F0代用值能代表無菌

23、嗎？以  F08為題展開，牽扯到一個(gè)容易和無菌概念混淆問題，在1995年前世界上許多從事無菌和滅菌產(chǎn)品的人們把F08視為（當(dāng)成）產(chǎn)品滅菌標(biāo)準(zhǔn)，好像F08就等同達(dá)到產(chǎn)品無菌要求，而忽視其具體工藝污染控制手段問題。這是不對的，這對無菌要求在概念上屬認(rèn)識性的錯(cuò)誤。    F是指特定控制情況下被滅菌產(chǎn)品被污染的概率低于某值概念，賦予了產(chǎn)品一定的安全性而言，其是在制造過程（工藝）其他的染菌因素必須嚴(yán)格控制的特定情況下的。F08在本設(shè)計(jì)程序下能殺滅到何種程度？是針對不同的產(chǎn)品和帶有不同染菌數(shù)而設(shè)計(jì)的。不同染菌數(shù)樣本可以在F08狀況下滅菌結(jié)束采取驗(yàn)算確認(rèn)殘存數(shù)或者輔之

24、采樣培養(yǎng)予以確認(rèn)。在微生物失控情況下，根本不能稱無菌。由此可見：    沒有嚴(yán)格的工藝制造過程染菌控制，即使F08 也不能達(dá)到無菌要求，反之一樣。所以，USP23（1211）不再提出將F08即符合無菌要求的條款寫入。因而，此概念也不能簡單套用到其他無菌概念，也不能講F0 達(dá)到多少后就達(dá)到無菌要求，這本不是同一概念。    當(dāng)然，在設(shè)計(jì)滅菌程序參數(shù)時(shí)應(yīng)充分考慮增大被滅菌物的安全性，一般放大F0需作多次謹(jǐn)慎驗(yàn)證試驗(yàn)后才遞出工藝修正報(bào)告。不能輕易放大F0，因?yàn)樗撬且话央p刃劍，過度（過熱）滅菌后果對藥品來說很容易藥效報(bào)廢，并析出難以控制的

25、雜質(zhì)或（毒）副產(chǎn)物，毀壞藥品質(zhì)量，而造成一系列精心操作過程的前功盡棄，過度滅菌產(chǎn)品同樣對病員無益。    現(xiàn)在回頭檢查熱穿透多次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。如已經(jīng)達(dá)到可接受的標(biāo)準(zhǔn)了，則表明在滅菌柜最冷點(diǎn)（次冷點(diǎn)）以及最高溫點(diǎn)（次高溫點(diǎn)）的達(dá)到設(shè)計(jì)要求，極限點(diǎn)的數(shù)據(jù)表明滅菌是在設(shè)計(jì)操作程序可控制范圍。既可保證腔內(nèi)藥品被賦予設(shè)計(jì)的足夠安全性，又不在影響藥效的過度滅菌溫度范圍。同時(shí)，同步點(diǎn)檢測合格意味設(shè)備本身儀表反映的參數(shù)也是真實(shí)可靠，設(shè)備設(shè)計(jì)、制造與安裝調(diào)試是合格的。這樣為設(shè)備驗(yàn)證合格奠定了很好的基礎(chǔ)，也為產(chǎn)品滅菌質(zhì)量保證鎖上了“第一把鎖”。 6生物指示劑試驗(yàn)（也稱為挑戰(zhàn)性

26、試驗(yàn)）   涉及濕熱滅菌的生物指示劑試驗(yàn)指將一定量的已知D值微生物耐熱孢子接種到待滅菌的產(chǎn)品中，在設(shè)定的滅菌程序條件下限滅菌，以驗(yàn)證設(shè)定的滅菌工藝程序是否確實(shí)賦予產(chǎn)品所設(shè)定的F0值 ，由此進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)和評價(jià)過程也稱為挑戰(zhàn)性試驗(yàn)。操作步驟如下：6.1驗(yàn)證方案制定的重點(diǎn)在產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性、產(chǎn)品的污染水平與污染菌的耐熱數(shù)據(jù)。    (1)產(chǎn)品分析（接種模擬污染水平生產(chǎn)污染水平）；    (2)確定菌種孢子，選擇強(qiáng)于產(chǎn)品常見污染菌的熱耐受菌種孢子（菌種孢子含量的準(zhǔn)確性，質(zhì)量資料具備可追溯性，在有效期內(nèi)）；  

27、;  (3)選取非致病菌，且具有良好的重現(xiàn)性能；    (4)應(yīng)在接種同時(shí)留置多支陽性對照品，試驗(yàn)過程同步采樣培養(yǎng)。6.2充分采用熱分布及熱穿透的工作數(shù)據(jù)。    裝載和樣品按照熱穿透布置不變。特別關(guān)注滅菌釜的最冷點(diǎn)、次冷點(diǎn)以及同步點(diǎn)樣品編號。6.3設(shè)置試驗(yàn)溫度滅菌限（也稱低限滅菌）    既低于設(shè)計(jì)值， 比F0 低 3 %5%進(jìn)行滅菌。由此而設(shè)計(jì)滅菌程序時(shí)間，如滅菌值F0 產(chǎn)品計(jì)算下限為8.5，設(shè)計(jì)為8.3限。6.4按擬訂下限滅菌程序結(jié)束    (1)QC現(xiàn)場采樣

28、，試驗(yàn)編號數(shù)據(jù)和對照品編號數(shù)據(jù)同步收集；    (2)樣品按照確定菌種孢子培養(yǎng)要求（一般在特定溫度和有好氧與厭氧條件區(qū)分）；    (3)實(shí)驗(yàn)樣品和陽性品同條件分別培養(yǎng)觀測。如陽性品正常培養(yǎng)失敗，既可判試驗(yàn)無效而失敗。因盾之不存，矛的鋒利無從談起。  6.5為檢測試驗(yàn)的重現(xiàn)性    每一品種規(guī)格的滅菌程序至少應(yīng)進(jìn)行3次以上的試驗(yàn)，試驗(yàn)的數(shù)據(jù)必須穩(wěn)定一致，重現(xiàn)性良好。否則，查找原因，重新開始。    生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗(yàn)是一項(xiàng)典型的滅菌安全性評價(jià)驗(yàn)證，需要工藝人員試驗(yàn)

29、技師和QC方面密切的配合和精確的設(shè)計(jì)。達(dá)到2.6.4與2.6.5可接受的標(biāo)準(zhǔn)后，可以證實(shí)試驗(yàn)成功，它代表工藝設(shè)計(jì)的滅菌程序與參數(shù)是合理的，也賦予了產(chǎn)品足夠的安全性。另一方面，也證實(shí)前期設(shè)備的選擇是符合生產(chǎn)需要的硬件。    操作擬訂的SOP、SMP把生產(chǎn)技術(shù)操作過程置于可控范圍，至此本項(xiàng)驗(yàn)證工作可以告結(jié)束，轉(zhuǎn)入下一項(xiàng)定期再驗(yàn)證流程。這樣，為將來產(chǎn)品滅菌質(zhì)量保證鎖上了“第二把鎖” 。 實(shí)例2 2.滅菌柜的驗(yàn)證2.1評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和驗(yàn)證內(nèi)容    在1992年版世界衛(wèi)生組織的規(guī)范第17章，提到對注射劑的驗(yàn)證要求：&

30、#160;   (1)17.32條：所有設(shè)備如滅菌柜、空氣過濾系統(tǒng)、水處理系統(tǒng)（包括蒸餾水機(jī)）均應(yīng)按計(jì)劃進(jìn)行驗(yàn)證、維護(hù)和監(jiān)控。    (2)17.55條：任何滅菌方法在正式采用前，該方法對產(chǎn)品的適用性以及每一裝載方式下被滅菌品的所有部位是否達(dá)到規(guī)定滅菌要求都應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。應(yīng)定期進(jìn)行再驗(yàn)證，每當(dāng)設(shè)備有重大改變時(shí)，也須進(jìn)行再驗(yàn)證。    而在98版藥品GMP檢查指南中：    (1)3102條：滅菌柜的能力是否與生產(chǎn)相適應(yīng)，是否具有自動監(jiān)測及記錄裝置。    (

31、2)*5703條：關(guān)鍵設(shè)備及無菌藥品的驗(yàn)證內(nèi)容是否包括滅菌設(shè)備、藥液濾過及灌裝（分裝）系統(tǒng)。    由上可見，滅菌工序?qū)τ谧⑸鋭┥a(chǎn)的重要作用以及藥政部門對滅菌柜驗(yàn)證的重視。而對于滅菌柜的驗(yàn)證，美國FDA和歐盟藥品衛(wèi)生組織對于不同的滅菌柜有具體的指引和要求（可以查閱有關(guān)的官方網(wǎng)頁），我國在這方面只有02年版的藥品驗(yàn)證指南大容量注射劑章節(jié)中給出對于滅菌柜驗(yàn)證的例子，同時(shí)05版的藥典中關(guān)于滅菌法部分也給出更詳細(xì)的要求。我們大多是參照它來制定評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的，筆者參考指南的例子把整個(gè)滅菌柜驗(yàn)證簡單歸納為以下幾個(gè)方面：    (1)預(yù)確認(rèn)，對滅菌柜

32、的基本功能是否達(dá)到公司的要求進(jìn)行確認(rèn)；    (2)安裝確認(rèn)，包括文件確認(rèn)、圖紙檢查、主要機(jī)械部件檢查、安全系統(tǒng)檢查、公用管道連接檢查、儀器儀表檢查和校正、控制系統(tǒng)硬件部分檢查、控制系統(tǒng)軟件功能實(shí)現(xiàn)檢查、備件備品的檢查等；    (3)運(yùn)行確認(rèn)，包括功能測試和基本性能參數(shù)的確認(rèn)，以及對上述安裝確認(rèn)內(nèi)容的運(yùn)行時(shí)動態(tài)確認(rèn)，同時(shí)根據(jù)實(shí)際情況修訂操作規(guī)程和對操作人員進(jìn)行實(shí)操培訓(xùn)；    (4)性能確認(rèn)，包括驗(yàn)證儀器的校驗(yàn)、空載熱分布(腔室平均溫度與冷點(diǎn)溫差小于1.5)、滿載熱分布(腔室平均溫度與冷點(diǎn)溫差小于1.5

33、)、滿載熱穿透的試驗(yàn)以及生物指示劑的挑戰(zhàn)性試驗(yàn)。其中，最主要的衡量標(biāo)準(zhǔn)是滅菌階段冷點(diǎn)和平均溫度之差小于0.5和最終F0值大于8。 2.2滅菌柜驗(yàn)證操作過程    關(guān)于預(yù)確認(rèn)和安裝與運(yùn)行確認(rèn)的內(nèi)容在此省略，因?yàn)檫@和其他制藥設(shè)備驗(yàn)證的基本準(zhǔn)則是一樣的。另需注意的是關(guān)于滅菌柜的安全部分和控制部分的確認(rèn)，因?yàn)闇缇袷菈毫θ萜?，安全防護(hù)的措施和設(shè)置是必不可少的，這些措施既有機(jī)械方面的也應(yīng)該有電器和PLC程序方面的，而滅菌效果如何則取決于控制程序和探頭的精度等因素，所以要把握重點(diǎn)。在完成了以上的三種確認(rèn)以后，就進(jìn)入性能確認(rèn)。    (1)驗(yàn)證用的儀器，主要由三部分組成：高精度的測溫探頭（進(jìn)口PT100熱電阻溫度探頭）、用微機(jī)制成的測溫和傳送集成系統(tǒng)以及手提電腦（主要是電腦上用VB編寫的和數(shù)據(jù)庫連接的驗(yàn)證儀記錄軟件）