結(jié)核菌素PPD試驗(yàn)驗(yàn)ppt課件

1、結(jié)核菌素(PPD)實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介 . 中文稱號(hào)：中文稱號(hào)： 結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn) 英文稱號(hào)：英文稱號(hào)： tuberculin test 定義：定義： 用于診斷結(jié)核菌感染所致用于診斷結(jié)核菌感染所致IV型超敏型超敏反響的皮膚實(shí)驗(yàn)。對(duì)診斷活動(dòng)性結(jié)核病反響的皮膚實(shí)驗(yàn)。對(duì)診斷活動(dòng)性結(jié)核病和測(cè)定機(jī)體細(xì)胞免疫功能有參考意義。和測(cè)定機(jī)體細(xì)胞免疫功能有參考意義。 運(yùn)用學(xué)科：運(yùn)用學(xué)科： 免疫學(xué)一級(jí)學(xué)科；免疫學(xué)一級(jí)學(xué)科；運(yùn)用免疫二級(jí)學(xué)科；免疫學(xué)檢測(cè)和運(yùn)用免疫二級(jí)學(xué)科；免疫學(xué)檢測(cè)和診斷二級(jí)學(xué)科診斷二級(jí)學(xué)科.結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)也稱為芒圖實(shí)驗(yàn)、PPD實(shí)驗(yàn)是一種診斷結(jié)核的工具。它是世界上兩個(gè)主要結(jié)核菌素皮膚實(shí)驗(yàn)之一，在很大程度上取

2、代了多種穿刺實(shí)驗(yàn)，如蒂內(nèi)測(cè)試Tine test。 直到2005年， 英國還在運(yùn)用霍夫測(cè)試Heaf test，但如今也改用了結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)。結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)還在澳大利亞、加拿大、匈牙利、荷蘭、葡萄牙、南非、美國等國家運(yùn)用，并且這還是美國胸腔學(xué)會(huì)和美國疾病控制與預(yù)防中心所引薦運(yùn)用的方法。它也被原蘇聯(lián)和現(xiàn)曾屬于蘇聯(lián)的國家運(yùn)用。.基于型變態(tài)反響見變態(tài)反響原理的一種皮膚實(shí)驗(yàn)，用來檢測(cè)機(jī)體有無感染過結(jié)核桿菌。凡感染過結(jié)核桿菌的機(jī)體，會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的致敏淋巴細(xì)胞，具有對(duì)結(jié)核桿菌的識(shí)別才干。當(dāng)再次遇到少量的結(jié)核桿菌或結(jié)核菌素時(shí)，致敏T淋巴細(xì)胞受一樣抗原再次刺激會(huì)釋放出多種可溶性淋巴因子，導(dǎo)致血管通透性添加，巨噬細(xì)胞在部

3、分集聚，導(dǎo)致浸潤。約在4872小時(shí)內(nèi)，部分出現(xiàn)紅腫硬節(jié)的陽性反響。假設(shè)受試者未感染過結(jié)核桿菌，那么注射部分無變態(tài)反響發(fā)生。. 結(jié)核菌素是結(jié)核桿菌的菌體成分，有兩種，舊結(jié)核菌素old tuberculin，OT是柯赫R.Koch首先發(fā)明的。而純蛋白衍生物purified protein derivative，PPD那么是由塞伯爾Seibert首先制備的。結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)方法很多，常用的是芒圖Mantoux氏法，即將OT或PPD用無菌生理鹽水稀釋成不同濃度，取0.1毫升注射于前臂掌側(cè)皮內(nèi)，4872小時(shí)后檢查反響情況，應(yīng)留意部分有無硬節(jié)，不可單獨(dú)以紅暈為規(guī)范。假設(shè)注射部位有針眼大的紅點(diǎn)或稍有紅腫，硬節(jié)直

4、徑小于0.5厘米，那么為陰性反響。假設(shè)注射部位硬節(jié)直徑超越0.5厘米，但在1.5厘米以下，為陽性反響。假設(shè)注射部位反響較劇烈或硬節(jié)直徑超越1.5厘米以上，為強(qiáng)陽性反響。陽性反響闡明機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌有變態(tài)反響，過去曾感染過結(jié)核，但不表示有病，因接種過卡介苗的人也呈陽性反響。強(qiáng)陽性反響那么闡明能夠有活動(dòng)性感染，應(yīng)進(jìn)一步檢查能否有結(jié)核病。陰性反響闡明無結(jié)核菌感染，但應(yīng)思索以下情況：如受試者處于原發(fā)感染早期，尚未產(chǎn)生變態(tài)反響，或正患嚴(yán)重結(jié)核病，機(jī)體已喪失反響才干，或受試者正患其他傳染病，在此類情況下，均可暫時(shí)出現(xiàn)陰性反響。結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)可為接種卡介苗及測(cè)定免疫效果提供根據(jù)。假設(shè)結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)陰性者應(yīng)接種卡介

5、苗，接種后假設(shè)反響轉(zhuǎn)為陽性，即表示接種已產(chǎn)生免疫效果。結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)還可作為嬰幼兒結(jié)核病診斷的參考，測(cè)定腫瘤患者的非特異性細(xì)胞免疫功能及在未接觸過卡介苗的人群中調(diào)查結(jié)核病的流行情況。. 結(jié)核菌素是經(jīng)過甘油提取出的結(jié)核桿菌。PPD菌素是一種從濾液中消毒得到的沉淀的非種屬特異性分子。它是由羅伯特科赫在1890年第一次描畫的。 在1939年，原蘇聯(lián)的MA林尼科娃創(chuàng)建了一種修正版的PPD，PPD-L。在1954年，原蘇聯(lián)開場(chǎng)批量消費(fèi)PPD-L。. 規(guī)范劑量是規(guī)范劑量是5結(jié)核菌素單位結(jié)核菌素單位0.1毫升毫升 ，進(jìn)展皮內(nèi)注射，并在進(jìn)展皮內(nèi)注射，并在48至至72小時(shí)后察看小時(shí)后察看結(jié)果。一個(gè)曾經(jīng)暴露在病菌的

6、人會(huì)顯示結(jié)果。一個(gè)曾經(jīng)暴露在病菌的人會(huì)顯示出免疫反響。出免疫反響。 這個(gè)測(cè)試的結(jié)果經(jīng)過硬結(jié)明顯突起的這個(gè)測(cè)試的結(jié)果經(jīng)過硬結(jié)明顯突起的硬化區(qū)的直徑垂直于手臂來反映。硬化區(qū)的直徑垂直于手臂來反映。假設(shè)不存在任何硬結(jié)，結(jié)果應(yīng)記錄為假設(shè)不存在任何硬結(jié)，結(jié)果應(yīng)記錄為0 mm。皮膚的紅斑不應(yīng)加以丈量。皮膚的紅斑不應(yīng)加以丈量。 假設(shè)一個(gè)人有陽性的測(cè)試史，其他的測(cè)假設(shè)一個(gè)人有陽性的測(cè)試史，其他的測(cè)試是不需求的。試是不需求的。. 測(cè)試結(jié)果的解釋應(yīng)慎重。一個(gè)陽性的結(jié)果反響了結(jié)核的接觸史。 表1.結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)的陽性規(guī)范前臂部分紅腫硬塊直徑前臂部分紅腫硬塊直徑反反 應(yīng)應(yīng)符符 號(hào)號(hào)5mm陰性510mm陽性1120mm陽

7、性20mm強(qiáng)陽性部分發(fā)生水泡或壞死強(qiáng)陽性.5 mm5 mm或更大：或更大： 1. 1.結(jié)核菌素呈陽性反響結(jié)核菌素呈陽性反響 2. 2.潑尼松潑尼松15mg/d15mg/d 3. 3.胸片顯示陳舊性結(jié)核最近曾接觸過胸片顯示陳舊性結(jié)核最近曾接觸過結(jié)核感染者結(jié)核感染者 4. 4.器官移植的患者和其他免疫抑制患者器官移植的患者和其他免疫抑制患者.10 mm10 mm或更大：或更大： 1 1、近、近5 5年中曾經(jīng)從高發(fā)病率國家前往年中曾經(jīng)從高發(fā)病率國家前往 2 2、靜脈吸毒、靜脈吸毒 3 3、低收入人群、低收入人群 4 4、慢性病患者、慢性病患者 5 5、矽肺病患者、矽肺病患者 6 6、高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)的居民和

8、雇員例如監(jiān)獄、高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)的居民和雇員例如監(jiān)獄、養(yǎng)老院、醫(yī)院、收容所等養(yǎng)老院、醫(yī)院、收容所等 7 7、分枝桿菌實(shí)驗(yàn)室人員、分枝桿菌實(shí)驗(yàn)室人員 8 8、不到、不到4 4歲的孩子，或暴露在成年人歲的孩子，或暴露在成年人中的高風(fēng)險(xiǎn)的兒童和青少年中的高風(fēng)險(xiǎn)的兒童和青少年 .15 mm15 mm或更大：或更大： 1 1、無危險(xiǎn)的結(jié)核桿菌接觸者、無危險(xiǎn)的結(jié)核桿菌接觸者 2 2、結(jié)核菌素測(cè)試轉(zhuǎn)換：指在、結(jié)核菌素測(cè)試轉(zhuǎn)換：指在2 2年期間年期間添加了添加了1010毫米或以上不論其年齡毫米或以上不論其年齡 3 3、卡介苗免疫接種后，、卡介苗免疫接種后，PPDPPD實(shí)驗(yàn)呈陽實(shí)驗(yàn)呈陽性，普通硬結(jié)大小：性，普通硬結(jié)大?。?/p>

9、5mm5mm，15mm15mm。. 1為接種卡介苗提供根據(jù)，如結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)陽性時(shí)，闡明體內(nèi)已感染過結(jié)核菌，無需再接種卡介苗。陰性者是卡介苗的接種對(duì)象。 2為測(cè)定免疫效果提供根據(jù)：普通在接種卡介苗3個(gè)月以后，應(yīng)做結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)，了解機(jī)體對(duì)卡介苗能否產(chǎn)生免疫力。假設(shè)結(jié)核菌素陽性，表示卡介苗接種勝利，反之需重新再進(jìn)展卡介苗接種。 3用于診斷與鑒別診斷：結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)對(duì)青少年兒童及老年人的結(jié)核病的診斷和鑒別有重要作用，是普遍運(yùn)用的輔助檢查手段。. 結(jié)核菌素皮膚反響是遲發(fā)型細(xì)胞超敏反響。它是抗原(結(jié)核菌或卡介苗)進(jìn)入機(jī)體使機(jī)體的免疫T淋巴細(xì)胞致敏，并大量分化增殖。當(dāng)已致敏的機(jī)體再次遭遭到抗原入侵時(shí)，致敏淋巴

10、細(xì)胞就會(huì)與之結(jié)合，引起變態(tài)反響性炎癥。表如今結(jié)核菌素注射部位構(gòu)成硬結(jié)甚至發(fā)生水泡、壞死。結(jié)素實(shí)驗(yàn)陽性闡明機(jī)體曾經(jīng)遭到結(jié)核菌感染或接種過卡介苗，也表示機(jī)體對(duì)結(jié)核菌有一定免疫力。但也有少數(shù)免疫力低下的人約5%呈陰性或因技術(shù)緣由而呈現(xiàn)假陰性。通常接種卡介苗后，假設(shè)PPD皮試陰性，闡明接種失敗。.1、舊結(jié)素old tuberculin，OT是從生長過結(jié)核菌的液體培育基中提煉出來的結(jié)核菌代謝產(chǎn)物，主要含有結(jié)核蛋白。在人群中作普查時(shí)，可用1：2000的OT稀釋液0.1ml5IU，在左前臂屈側(cè)作皮內(nèi)注射，經(jīng)4872h丈量皮膚硬結(jié)直徑，如小于5mm為陰性，59mm為弱陽性提示結(jié)核菌感染或非結(jié)核性分支桿菌感染，

11、1019mm為陽性反響，20mm以上或部分發(fā)生水泡與壞死者為強(qiáng)陽性反響。2、結(jié)素的純蛋白衍化物purified protein derivative，PPD為純結(jié)素，不產(chǎn)生非特異性反響。PPD-RT23是由丹麥制造供應(yīng)世界許多國家運(yùn)用，曾經(jīng)取代OT。我國從人型結(jié)核菌制成PPDPPD-C，又從卡介苗制成BCG-PPD，0.1ml為5IU，用于臨床診斷，硬結(jié)平均直徑5mm為陽性反響。3、結(jié)素實(shí)驗(yàn)除引起部分皮膚反響外，還可引起原有結(jié)核病灶和全身反響。臨床診斷普通運(yùn)用5IU，如無反響，可在一周后再用5IU皮試產(chǎn)生結(jié)素加強(qiáng)效應(yīng)，假設(shè)仍為陰性，大多可除外結(jié)核感染。. 我國規(guī)定以72小時(shí)為察看反響時(shí)間，48

12、-96小時(shí)內(nèi)皆可丈量反響，記錄方法是將測(cè)得的硬結(jié)橫徑毫米數(shù)縱徑毫米數(shù)表示，如有水泡、硬結(jié)、壞死和淋巴結(jié)炎時(shí)，應(yīng)作記錄。. 無硬結(jié)或硬結(jié)平均直徑5mm者。. 硬結(jié)平均直徑在5mm或5mm以上者為陽性，5-9mm為普通陽性，10-19mm為中度陽性，20mm以上部分有水泡，出血、壞死及淋巴管炎者均為強(qiáng)陽性。. 結(jié)素實(shí)驗(yàn)陽性反響僅表示結(jié)核感染，并不一定患病。我國城市成年居民的結(jié)核感染率在60%以上，故用5IU結(jié)素進(jìn)展檢查，其普通陽性結(jié)果意義不大。但如用高稀釋度1IU作皮試呈強(qiáng)陽性者，常提示體內(nèi)有活動(dòng)性結(jié)核灶。結(jié)素實(shí)驗(yàn)對(duì)嬰幼兒的診斷價(jià)值比成年人大，由于年齡越小，自然感染率越低；3歲以下強(qiáng)陽性反響者，應(yīng)

13、視為有新近感染的活動(dòng)性結(jié)核病，須給予治療。. 結(jié)素實(shí)驗(yàn)陰性反響除提示沒有結(jié)核菌感染外，還見于以下情況：結(jié)核菌感染后需48周有變態(tài)反響充分建立；在這變態(tài)反響前期，結(jié)素實(shí)驗(yàn)可為陰性。在運(yùn)用糖皮質(zhì)激素等免疫抑制劑者，或營養(yǎng)不良及麻疹、百日咳等病人，結(jié)素反響也可暫時(shí)消逝。嚴(yán)重結(jié)核病和各種危重病人對(duì)結(jié)素?zé)o反響，或僅為弱陽性，這都是由于人體免疫力連同變態(tài)反響暫時(shí)遭到抑制的結(jié)果；待病情好轉(zhuǎn)，又會(huì)轉(zhuǎn)為陽性反響。其他如淋巴細(xì)胞免疫系統(tǒng)缺陷如淋巴瘤、白血病、結(jié)節(jié)病、艾滋病等病人和老年人的結(jié)素反響也常為陰性。.臨床常用的結(jié)核菌素主要有兩種：一種稱“舊結(jié)素0.T，它是一種結(jié)核菌培育濾液，除含 結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)結(jié)核蛋白外，

14、還有菌體自溶成分，結(jié)核菌代謝產(chǎn)物及培育基成分。另一種稱“純結(jié)素P.P.D主要含結(jié)核蛋白，它的特異性和純度較舊結(jié)素為好。人體受結(jié)核菌的自然感染或人工感染卡介苗接種后48周就產(chǎn)生對(duì)結(jié)核菌素的特殊的免疫力，當(dāng)部分注射結(jié)核菌素時(shí)，機(jī)體內(nèi)已被激活的免疫細(xì)胞就會(huì)從血液內(nèi)集聚和停留在注射部位，使部分皮膚產(chǎn)生紅暈、硬結(jié)和水泡，即結(jié)素反響陽性，而無此反響者為陰性。察看此反響以72小時(shí)為準(zhǔn)。對(duì)于免疫功能健全的人來說，只需有一個(gè)結(jié)核菌進(jìn)入肺泡內(nèi)呵斥感染，那么結(jié)素反響可呈陽性。反之，沒有被結(jié)核菌感染的人幾乎對(duì)結(jié)核菌沒有抵抗才干，結(jié)素反響也就呈陰性。 . 結(jié)素實(shí)驗(yàn)是一種敏感性很高，特異性很強(qiáng)的檢查方法，實(shí)驗(yàn)反響陽性對(duì)診

15、斷結(jié)核感染有重要價(jià)值，但它不能診斷肺部有沒有結(jié)核病或確定病變性質(zhì)。對(duì)3歲以下的嬰幼兒未接種過卡介苗而結(jié)素反響陽性者，應(yīng)思索有活動(dòng)性結(jié)核病，另外，結(jié)素反響陽性也是接種卡介苗后所產(chǎn)生變態(tài)反響的表現(xiàn)，在流行病學(xué)上常用來考核卡介苗的接種效果。結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)陽性并不一定是壞事，它雖闡明休內(nèi)已有結(jié)核菌，但也闡明機(jī)體對(duì)結(jié)核病已產(chǎn)生了一定免疫力，當(dāng)細(xì)菌再次感染，或體內(nèi)細(xì)菌繁衍構(gòu)成病灶時(shí)，體內(nèi)的特異性免疫細(xì)胞那么將細(xì)菌“包圍在部分，而使其不易播散到其它部位和臟器；假設(shè)結(jié)素實(shí)驗(yàn)陰性的話，應(yīng)予接種卡介苗，促使機(jī)體產(chǎn)生對(duì)結(jié)核病的抵抗才干，使結(jié)素實(shí)驗(yàn)陽轉(zhuǎn)。當(dāng)然結(jié)素實(shí)驗(yàn)也會(huì)出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果，這些都要醫(yī)生去全面思索。

16、. 有些人不能或暫時(shí)不能行結(jié)核菌素皮膚實(shí)驗(yàn)，如：各種傳染病的恢復(fù)期、發(fā)熱、器質(zhì)性心、肝、腎疾病的急性期；神經(jīng)及精神不正常者，本人及家族有過敏史者；其他預(yù)防接種不到兩周者；患有全身或部分皮膚病者。要想知道本人能否已被結(jié)核菌感染或本人能否對(duì)結(jié)核病有了抵抗力只需去專科醫(yī)院做一次結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)，72小時(shí)便可知曉。 有些以前感染結(jié)核病的人在感染后數(shù)年進(jìn)展測(cè)試時(shí)能夠呈陰性，由于免疫系統(tǒng)的反響能夠會(huì)逐漸減弱。這一初步皮膚實(shí)驗(yàn)，雖然是陰性的，但能夠刺激身體的免疫系統(tǒng)，使后來的測(cè)試結(jié)果呈陽性。 運(yùn)用兩個(gè)步驟進(jìn)展初步測(cè)試。這將確保今后假設(shè)實(shí)驗(yàn)呈陽性，可以解釋為一個(gè)新的感染，而不是一個(gè)古老的感染的簡(jiǎn)單的反響。.第一次

17、注射后第一次注射后48至至72小時(shí)檢查結(jié)果小時(shí)檢查結(jié)果 1、呈陽性，思索感染者、呈陽性，思索感染者 2、呈陰性，在、呈陰性，在1至至3周后給予第二次測(cè)試周后給予第二次測(cè)試 第二次注射后第二次注射后48至至72小時(shí)檢查結(jié)果小時(shí)檢查結(jié)果 1、呈陽性，思索以前的感染、呈陽性，思索以前的感染 2、呈陰性，思索未感染、呈陰性，思索未感染 一個(gè)經(jīng)過兩個(gè)步驟的測(cè)試被診斷為一個(gè)經(jīng)過兩個(gè)步驟的測(cè)試被診斷為“感感染的人被稱為染的人被稱為“結(jié)核菌素轉(zhuǎn)換。結(jié)核菌素轉(zhuǎn)換。.一、舊結(jié)核菌素一、舊結(jié)核菌素 是從生長過結(jié)核分枝桿菌的甘油肉湯培育是從生長過結(jié)核分枝桿菌的甘油肉湯培育基中提煉出來的結(jié)核菌代謝產(chǎn)物，經(jīng)過滅菌、基中提煉出來的結(jié)核菌代謝產(chǎn)物，經(jīng)過滅菌、濃縮構(gòu)成原液，運(yùn)用時(shí)再稀釋成一定倍數(shù)濃縮構(gòu)成原液，運(yùn)用時(shí)再稀釋成一定倍數(shù)通常是通常是2000倍，使每倍，使每0.1ml含含1U。主要。主要成分有：成分有：1舊結(jié)核菌素結(jié)核分枝桿菌舊結(jié)核菌素結(jié)核分枝桿菌蛋白；蛋白；2菌體自溶成分；菌體自溶成分；3菌體代菌體代謝產(chǎn)物；謝產(chǎn)物；4培育基成分。培育基成分。二、純蛋白衍生物二、純蛋白衍生物 結(jié)核菌素純蛋白衍生物結(jié)核菌素純蛋白衍生物