富硒金針菇栽培及成分分析研究

1、.富硒金針菇栽培及成分分析研究-農(nóng)學論文富硒金針菇栽培及成分分析研究 何炎炘1，李能樹2（1安徽大學江淮學院，合肥230039；2安徽大學生命科學學院，合肥230603）摘要：為研究富硒金針菇對人體健康的影響，采用富硒栽培、全自動氨基酸分析儀、苯酚-硫酸法對金針菇子實體總糖、氨基酸的種類和含量進行測定研究。結(jié)果表明：金針菇子實體均含有總糖、總氨基酸和游離氨基酸17 種，其中人體必需氨基酸7 種。確定硒糖的最佳浸提溫度80、浸提時間3 h、提取3 次合并濾液；總糖菌蓋、菌柄含量分別為40.31%、48.99%，硒含量為34.2355 g/g。關(guān)鍵詞：富硒；金針菇；子實體；氨基酸中圖分類號：S64

2、6.1+5 文獻標志碼：A 論文編號：2014-02330 引言金針菇(Flammulina velutipes)又名樸菇、冬菇，是一種秋、冬初栽培的食用菌1，其肉質(zhì)細、味鮮、營養(yǎng)豐富，食用價值高，并能防治多種疾病，還具有提高兒童體質(zhì)和智力的作用。富含蛋白質(zhì)、碳水化合物、礦質(zhì)元素、維生素和粗纖維，含脂肪較低，是一種不可多得的高營養(yǎng)食品。金針菇含有各種人體必需的氨基酸，是最早進行人工栽培的食用菌之一。在國際市場上已經(jīng)發(fā)展為僅次于蘑菇、香菇而列第3 位的食用菌。金針菇菌蓋小而粘滑，菌形如銅線，色澤金黃間白，菌柄細長脆嫩，形美，味鮮，因其具有多種藥效作用而被廣泛用于藥膳，是世界上著名的食藥兩用菌和觀

3、賞菌。隨著人們對均衡營養(yǎng)的追求和科學研究的深入，金針菇已經(jīng)成為營養(yǎng)學家們的新寵。硒是人體必需的微量元素之一，是多種酶的激活劑，具有保護胸腺、維持淋巴細胞活性和促進抗體產(chǎn)生的作用，可提高人體免疫機能，對重金屬汞和砷具有解毒作用。富硒金針菇具有清除自由基、消炎、抗腫瘤、抗衰老和抗脂質(zhì)過氧化的作用。筆者對富硒金針菇子實體中硒糖、硒含量和氨基酸進行測定分析，為富硒金針菇的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。1 材料與方法1.1 試驗時間、地點研究田間試驗于2013 年在安徽鑫農(nóng)食用菌有限公司進行，室內(nèi)試驗在安徽大學生命科學學院生物實驗教學中心進行。1.2 試驗材料與儀器金針菇菌種（安徽鑫農(nóng)食用菌有限公司提供）；80

4、目分樣篩、葡萄糖、亞硒酸鈉、苯酚、濃硫酸、濃鹽酸（國藥、分析純）。電子天平、恒溫干燥箱、ZK-82A型真空干燥箱、日立835-50 型氨基酸自動分析儀。1.3 試驗步驟1.3.1 富硒金針菇栽培栽培料配方：棉籽殼78%、麥麩20%、石膏1%、白糖1%，攪拌均勻，pH自然；準確稱取105烘干至恒重的亞硒酸鈉2.19 g，定容至1000 mL，得溶液為1 g/L 的標準液加入。栽培管理按常規(guī)方法進行。1.3.2 硒含量測定（1）樣品處理。將子實體在60烘箱中烘干至恒重，在干燥器中冷卻，然后用碾缽將樣品粉碎，過80目篩。（2）硒含量測定。準確稱取處理好的樣品0.02 g于250 mL 三角瓶中，加3

5、:4(V/V)硫酸高氯酸消解液6 mL，在室溫下放置，至瓶中內(nèi)容物為糊狀時，加入1.5 mL鉬酸鈉溶液，搖勻，置于水浴鍋上，加熱至激烈反應(yīng)后，繼續(xù)加熱至逐漸變成淡黃色為止，取下冷卻，加蒸餾水18 mL，加分析純NaOH 4.8 g，然后滴加8 mol/L NaOH溶液至pH 為中性，加1 mL 40%鹽酸羥胺溶液，0.5 mL 0.2 mol/L EDTA溶液，1 mL1:1(V/V) 磷酸溶液，搖勻，加1 mL 0.2%鄰苯二胺溶液，搖勻后靜置2 h，加5 mL甲苯，搖動1 min，靜置10 min，取上清液于紫外波長335 nm處測其A值。處理樣品的同時，用空白做對照。1.3.3 氨基酸含

6、量測定將上述不同的試驗材料碾碎，過80目篩，準確稱取分析樣品100 mg（精確到0.0001 g），放入水解管。向管內(nèi)加6 mol/L 鹽酸1520 mL，抽真空，充2000 g/m2的高純度氮氣，如此重復(fù)3 次，在氮氣狀態(tài)下將管口封住并置于110水解22 h 后取出冷卻。水解液過濾，用去離子水沖洗，再全部轉(zhuǎn)移到100 mL容量瓶，定容，吸取濾液1 mL放到10 mL小燒杯中，在ZK-82A 型真空干燥箱內(nèi)，60、0.08 MPa 下干燥，用1 mL 0.1 mol/L鹽酸溶解上機檢測。1.3.4 游離氨基酸測定稱取樣品0.100 g，投入試管內(nèi)，用80%乙醇（無水乙醇稀釋而成）置于80水浴中

7、提取，目的是蒸餾去酒精，等樣品呈現(xiàn)糊狀，加乙醚5 mL，馬上塞試管塞，充分振蕩。用50 mL分液漏斗反復(fù)抽提2 次，收集，轉(zhuǎn)到50 mL 容量瓶中，定容至刻度，搖勻；取5 mL 提取液，冷凍離心干燥，加進0.02 mol/LHCl 1 mL，用日立835-50A 型氨基酸自動分析儀測定其含量。1.3.5 總糖的提取定量稱取樣品于水中浸泡24 h 后，80恒溫水浴浸提3 h，重復(fù)3 次，濃縮濾液加入95%乙醇，靜置、離心、去蛋白，定容得金針菇水溶性多糖溶液。水解后糖溶液冷卻20 min（樣品液呈棕色，絮狀），用大漏斗過濾，過濾后的樣品液呈棕色澄清溶液，以蒸餾水定容至250 mL備用，采用苯酚-硫

8、酸法測其糖含量。2 結(jié)果與分析2.1 金針菇子實體硒含量樣品經(jīng)消化和硒含量測定步驟后，得到其335 nm處的吸收值，以硒含量為橫坐標，吸收值為縱坐標作圖。以335 nm處的吸收值A(chǔ)對含量C進行回歸，得到回歸方程為：A=0.0242C+0.0414，R2=0.977。通過紫外分光光度計測A 值，測得金針菇子實體硒含量結(jié)果為34.2355 g/g。2.2 金針菇子實體氨基酸含量從表1 可以看出，金針菇子實體含有17種氨基酸，種類較齊全，菌蓋、菌柄總氨基酸含量分別為50.4、28.17 mg/g，其中含有人體7 種必需氨基酸，占氨基酸總量的56.45%。金針菇子實體菌蓋、菌柄游離氨基酸含量分別為56

9、.12、35.36 mg/g。 金針菇的菌柄與菌蓋均含17 種氨基酸、7 種必需氨基酸，以及嬰幼兒所需的組氨酸(His)和精氨酸(Arg)2 種。它們含有人體必需氨基酸成分較全，其中賴氨酸(Lys)和精氨酸(Arg)含量尤其豐富，對增強智力尤其是對兒童的身高和智力發(fā)育有良好的作用，人稱“增智菇”。中國人習慣以缺乏賴氨酸的稻米和小麥等谷物為主食。金針菇富含的賴氨酸，正好起互補賴氨酸的作用。在17 種氨基酸中，金針菇子實體的苯丙氨酸(Phe)含量為13.88 mg/g，在人體內(nèi)苯丙氨酸經(jīng)食物攝取后，部分用于合成蛋白質(zhì)，它的激活為前奏，沒有苯丙氨酸，體內(nèi)的蛋白質(zhì)合成就無法進行；其余部分經(jīng)肝臟苯丙氨酸

10、羥化酶的作用轉(zhuǎn)變?yōu)槔野彼?，進而轉(zhuǎn)化為其他生理活性物質(zhì)。大多數(shù)食品中，苯丙氨酸的含量很少，經(jīng)常食用金針菇，可以改進食物結(jié)構(gòu)，補充日常食物中氨基酸的不足。谷氨酸(Glu)是構(gòu)成鮮味的主要來源之一，它和天冬氨酸(Asp)影響味覺中鮮味的形成，這幾種呈現(xiàn)甜、鮮味的氨基酸同其他物質(zhì)共同形成復(fù)雜的味感含量相對較高，這也是其味道鮮美的原因。2.3 金針菇總糖的測定吸取2.0 mL樣品，然后加入6%苯酚1.0 mL及濃硫酸5.0 mL，搖勻冷卻室溫放置20 min 以后于485 nm測光密度。每次測定取雙樣對照。以標準曲線計算多糖含量。以葡萄糖質(zhì)量濃度(x，g/mL)為橫坐標，吸光度(y)為縱坐標，繪制吸光度

11、，葡萄糖質(zhì)量濃度的關(guān)系曲線，其線性回歸方程為y=0.9651x，相關(guān)系數(shù)r為0.9943。結(jié)果表明，葡萄糖在1070 g/mL 范圍內(nèi)其濃度與吸光度線性關(guān)系良好。金針菇子實體菌蓋、菌柄糖的含量分別為40.31%、48.99%。金針菇主要活性成分之一是糖，許多研究認為，金針菇多糖不但能提高人體免疫力，而且具有保肝、保濕、抗感染、抗氧化、輔助改善記憶和緩解體力疲勞等保健作用，對多種致癌、促癌物有抑制作用，對正常細胞無毒害作用，是一種特殊功能的天然綠色類產(chǎn)品，應(yīng)用于保健食品的市場潛力巨大。3 結(jié)論富硒金針菇總糖提取的最佳條件：浸提溫度為80，浸提時間為3 h，浸提次數(shù)為3 次。金針菇子實體菌蓋、菌柄

12、糖的含量分別為40.31%、48.99%。金針菇子實體菌蓋、菌柄總氨基酸含量分別為50.4、28.17 mg/g，游離氨基酸含量分別為56.12、35.36 mg/g。利用金針菇富硒，可以使硒與金針菇多糖等生理活性物質(zhì)協(xié)同增效，有效提高其營養(yǎng)和保健效用。在中國隨著人們生活水平的不斷提高，人們對于自身的保健也越來越重視，所以對富硒金針菇的需求也越來越大。目前，該富硒研究已取得了較大進展，特別是富硒能力、利用發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)及栽培的研究較多。但對富硒機理、營養(yǎng)代謝及富硒藥理活性等的研究還不夠深入，而有機硒的測定、富硒食用菌的硒含量標準的探討等方面也需要進一步深入研究。4 討論試驗已證實，金針菇多糖具有

13、抗菌活性、免疫活性和抗腫瘤作用2- 15。硒是人體必需的微量元素，缺乏硒，人體易發(fā)生各種疾病。食物中含有人體必需的硒能降低癌的發(fā)病率，改善心臟病患者狀況，并對身體機能產(chǎn)生有益影響2。金針菇菌絲具有較高的富硒轉(zhuǎn)化能力，富硒菌絲體內(nèi)硒的有機化程度高，一定量Na2SeO3 對金針菇菌絲生長以及可溶性蛋白、氨基酸與多糖含量的增加均有促進作用2-15。富硒金針菇菌絲具雙重營養(yǎng)保健功能，可直接顯示抗菌活性和免疫活性，這為直接利用菌絲體提供了可能。因而在生產(chǎn)時可簡化工藝，降低成本，以利于開發(fā)利用。培養(yǎng)富硒金針菇菌絲后的剩余培養(yǎng)液和殘渣可飼養(yǎng)蚯蚓，硒對蚯蚓生長和提高蚓激酶產(chǎn)率均有促進作用2-15?？衫冒l(fā)酵液

14、和富硒菌絲中含有的多種人體必需氨基酸（包括硒蛋氨酸）、蛋白質(zhì)（含硒蛋白）、硒核酸、硒多糖、維生素、微量元素等營養(yǎng)成分配制營養(yǎng)型飲料、口服液和營養(yǎng)食品添加劑。利用富硒金針菇子實體中的多種人體必需氨基酸等營養(yǎng)成分，使產(chǎn)品的營養(yǎng)成分更加全面合理，且風味和口感獨特。金針菇不僅能開發(fā)系列食品還滿足不同層次消費者的需求，更能提高金針菇的附加值。發(fā)展金針菇生產(chǎn)的重要途徑是深加工和多層次開發(fā)。隨著各種提取工藝的提高和分子生物學研究的不斷深入展，利用富硒金針菇子實體具有的生理活性物質(zhì)功能成分的特點，可研制專用功能性保健食品，以提高人體免疫功能，達到防病和治病的目的。今后將繼續(xù)開展金針菇子實體用富硒、富碘、富鋅等

15、方面的研究，明確金針菇及其產(chǎn)物的生物活性成分和主要功能，這必將大大推動人們利用金針菇這一寶貴資源，進一步開發(fā)出新藥和新型功能食品。參考文獻1 秦小明,余娟,寧恩創(chuàng).金針菇子實體多糖成分的初步研究J.食用菌學報,2005,12(2):27-31.2 胡國元,周華武,李偉偉.富硒金針菇菌絲體多糖的分離和分析J.食用菌學報,1999(3):44-46.3 林琳,謝必峰,施巧琴.富硒金針菇的深層培養(yǎng)及其特性J.中國食用菌,1997,16(2):36-38.4 胡文軍,傅庭治,曹幼琴.硒在金針菇菌體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化J.中國食用菌,1997,16(3):30-33.5 楊梅,杏鮑菇菌絲深層培養(yǎng)及氨基酸分析研究

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