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1、1教教 案案 編編 制制授課內(nèi)容:Rh血型系統(tǒng)授課學(xué)時(shí):1學(xué)時(shí)重點(diǎn)內(nèi)容:Rh血型抗原與抗體及臨床意義; 交叉配血熟習(xí)內(nèi)容:Rh血型鑒定方法。了解內(nèi)容:其它紅細(xì)胞血型系統(tǒng) 二二.Rh.Rh血型系統(tǒng)血型系統(tǒng)Rh 血型系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)1941-1945年 確定了人體紅細(xì)胞上含有Rh系統(tǒng)的六種抗原,即D、d;E、e;C、c。D和d;E和e;C和c表現(xiàn)為對(duì)偶關(guān)系,但d抗原只是推測(cè)。Rh血型的定義Rh血型的遺傳學(xué)說(shuō)及命名4.Rh.Rh抗原抗原 Rh抗原有40多種, 與臨床關(guān)系最密切:D、E、C、c、e 5種,D的抗原性最強(qiáng)。 我國(guó)Rh頻率約占人群中的0.34%二二.Rh.Rh血型系統(tǒng)血型系統(tǒng)醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 Rh

2、血型的 D變異型D變異型包括弱D型(Du)和不完全D型(partial D)9 .Rh.Rh系統(tǒng)抗體系統(tǒng)抗體 多是通過(guò)外來(lái)RBCRBC免疫刺激后產(chǎn)生,即。這些抗體均為IgGIgG。 D D抗原是非ABOABO紅細(xì)胞抗原中免疫性最強(qiáng)的抗原,可以引起抗D D的產(chǎn)生,抗D D與D D紅細(xì)胞產(chǎn)生嚴(yán)重的溶血反應(yīng)。. . Rh血型鑒定醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 111.Rh血型鑒定及方法學(xué)評(píng)價(jià): Rh抗體屬IgG不能在鹽水介質(zhì)中與RBC發(fā)生凝集。 (1).低離子強(qiáng)度鹽水試驗(yàn) 原理: 降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度可減少RBC外圍的離子云 促進(jìn)IgG分子在兩個(gè)RBC之間搭橋使之結(jié)合, 能縮短抗原與抗體的反應(yīng)時(shí)間,并提高其靈敏度。1

3、2(2).抗人球蛋白法:又稱Coombs試驗(yàn)直接法:可檢查受檢者的RBC是否已被不完全抗體致敏;間接法:可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。13(3).酶介質(zhì)法: 原理: 木瓜酶或菠蘿酶可以破壞RBC表面的唾液酸, 使RBC膜失去電荷,縮小RBC間的距離; 酶可以部分地改變RBC結(jié)構(gòu),使某些隱蔽的 抗原得以暴露,增強(qiáng)凝集性(4).聚凝胺法: 本法用于臨床配血是切實(shí)可行的。 2 .Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 3.Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陰性的原因16.RH.RH血型的臨床意義:血型的臨床意義: 1.與輸血關(guān)系: RhRh第一次接受RhRh血液不溶血,產(chǎn)生抗體 RhRh

4、第二次接受Rh血液產(chǎn)生大量的抗體,溶血 2.與新生兒溶血病的關(guān)系:17三、其它紅細(xì)胞血型系統(tǒng)MNSsU血型系統(tǒng) 有40個(gè)抗原,基因表達(dá)產(chǎn)物為MN唾液酸糖蛋白、Ss唾液酸糖蛋白P血型系統(tǒng) Kell血型系統(tǒng)Kidd血型系統(tǒng)Lewis血型系統(tǒng)18【原理原理 (principleprinciple) 】(鹽水法)(五)(五). .交叉配血交叉配血無(wú)凝集 無(wú)凝集1000-2000 rpm 1-2min 觀察。室溫5min后室溫鹽水介質(zhì)天然IgMIgM類血型抗體對(duì)應(yīng)的紅細(xì)胞抗原凝集獻(xiàn)血員血清 主次 病人血清病人病人2%RBC獻(xiàn)血員2%RBC病人血清獻(xiàn)血員2%RBC病人病人2%RBC獻(xiàn)血員血清19【報(bào)告方式

5、報(bào)告方式】1.如兩管均無(wú)凝集,則報(bào)告:病人XX(X型)血清獻(xiàn)血者XX(X型)紅細(xì)胞 有或無(wú)凝集溶血病人XX(X型)紅細(xì)胞獻(xiàn)血者XX(X型)血清 有或無(wú)凝集溶血 (XX配血法)2. 任何一管或兩管有凝集或溶血: 立即復(fù)查血型或查明其他原因如實(shí)報(bào)告,并與病室 聯(lián)系,決不能隨便輸血。20鹽水法鹽水法評(píng)價(jià) 安全輸血包括檢測(cè)ABO相合與否,也包括免疫性抗體的檢測(cè)。最初的交叉配血以鹽水介質(zhì)為主,而鹽水介質(zhì)實(shí)驗(yàn)只能發(fā)現(xiàn)ABO不配合,不能檢出IgG抗體,所以血庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)不要求鹽水介質(zhì)實(shí)驗(yàn)的配血,而要求在血清學(xué)配合實(shí)驗(yàn)中使用能展示ABO不配合和在37有活性的、有臨床意義重要抗體的方法。從安全輸血的角度和今后發(fā)展趨勢(shì)

6、分析,鹽水介質(zhì)法將會(huì)和其他技術(shù)聯(lián)合運(yùn)用。21凝聚胺法凝聚胺法 【原理原理】 紅細(xì)胞膜表面的唾液酸帶有的大量的負(fù)電荷,可避免其發(fā)生自發(fā)凝聚,使紅細(xì)胞保持最大的表面面積,增加氧的轉(zhuǎn)移能力和氣體擴(kuò)散。紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)內(nèi),陽(yáng)離子被紅細(xì)胞的負(fù)電荷吸引,紅細(xì)胞被擴(kuò)散的雙層離子云圍繞,形成zeta電位,它決定紅細(xì)胞之間的排斥作用。醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 22凝聚胺法步驟凝聚胺法步驟 Polybrene技術(shù)首先利用低離子介質(zhì)(LIM),介質(zhì)的離子強(qiáng)度是影響抗體結(jié)合紅細(xì)胞原能力的重要理化條件之一,正負(fù)離子相互作用力-即靜電力顯著影響抗體與紅細(xì)胞的反應(yīng)。減低介質(zhì)的離子強(qiáng)度,減少了紅細(xì)胞周圍的陽(yáng)離子云,從而促進(jìn)帶正電荷的

7、lgG與帶負(fù)電荷的紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng),以促進(jìn)紅細(xì)胞和血清(血漿)中的抗體結(jié)合。其后,加入凝聚胺(Polybrene)試劑。凝聚胺是一種高價(jià)陽(yáng)離子季胺鹽多聚物,溶解后能產(chǎn)生很多正電荷,可以中和紅細(xì)胞膜表面的唾液酸帶有的負(fù)電荷,使紅細(xì)胞的zeta電位降低,紅細(xì)胞之間距離減少,使紅細(xì)胞發(fā)生凝聚。最后,加入復(fù)懸液(Resuspending)。復(fù)懸液有中和Polybrene的作用。使正常紅細(xì)胞可逆性的非特異性凝聚散開。如果是抗體致敏的紅細(xì)胞被凝聚胺凝集,則凝集不可逆,為陽(yáng)性結(jié)果。23Discussion: 1.是不是交叉配血結(jié)果陰性,就一定不會(huì)出現(xiàn)輸血反應(yīng)?醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 24.Rh.Rh抗原抗原 Rh抗原

8、有40多種, 與臨床關(guān)系最密切:D、E、C、c、e 5種,D的抗原性最強(qiáng)。 我國(guó)Rh頻率約占人群中的0.34%二二.Rh.Rh血型系統(tǒng)血型系統(tǒng)醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 Rh血型的 D變異型D變異型包括弱D型(Du)和不完全D型(partial D)26(2).抗人球蛋白法:又稱Coombs試驗(yàn)直接法:可檢查受檢者的RBC是否已被不完全抗體致敏;間接法:可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。2 .Rh血型鑒定可能出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因醫(yī)學(xué)全在線網(wǎng)站 28.RH.RH血型的臨床意義:血型的臨床意義: 1.與輸血關(guān)系: RhRh第一次接受RhRh血液不溶血,產(chǎn)生抗體 RhRh第二次接受Rh血液產(chǎn)生大量的抗體,溶血 2.與新生兒溶血病的關(guān)系:29【報(bào)告方式報(bào)告方式】1.如兩管均

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