粗糙脈胞菌順序四分子分析ppt課件

1、實驗六實驗六粗糙脈胞菌順序四分子分析粗糙脈胞菌順序四分子分析實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康膌1.了解粗糙脈胞菌的生活周期及特性；了解粗糙脈胞菌的生活周期及特性；l2.學習粗糙脈胞菌的培育方法和雜交技術(shù)；學習粗糙脈胞菌的培育方法和雜交技術(shù)；l3.學習順序四分子的遺傳學分析方法，進展學習順序四分子的遺傳學分析方法，進展有關(guān)基因與著絲點間隔的計算和作圖。有關(guān)基因與著絲點間隔的計算和作圖。實驗資料實驗資料l1 1粗糙鏈孢霉野生型菌株，粗糙鏈孢霉野生型菌株，Lys+Lys+，分生孢，分生孢子粉紅色；子粉紅色；l2 2粗糙鏈孢霉賴氨酸缺陷型菌株，粗糙鏈孢霉賴氨酸缺陷型菌株，Lys-Lys-，分生孢子白色。分生孢子白色。

2、 實驗原理實驗原理l本實驗用賴氨酸缺陷型與野生型雜交，得到的子囊本實驗用賴氨酸缺陷型與野生型雜交，得到的子囊孢子分別為孢子分別為4個黑色的個黑色的+和和4個灰色的個灰色的-。l黑色孢子為野生型，賴氨酸缺陷型孢子成熟遲，在黑色孢子為野生型，賴氨酸缺陷型孢子成熟遲，在野生型孢子成熟變黑時，還未變黑，而呈淺灰色；野生型孢子成熟變黑時，還未變黑，而呈淺灰色；l根據(jù)黑色孢子和灰色孢子在子囊中的陳列順序，可根據(jù)黑色孢子和灰色孢子在子囊中的陳列順序，可知合子在減數(shù)分裂時，基因知合子在減數(shù)分裂時，基因Lys和著絲粒之間發(fā)生和著絲粒之間發(fā)生交換的情況，最終可有兩大類型的子囊出現(xiàn)，即第交換的情況，最終可有兩大類型

3、的子囊出現(xiàn)，即第一次分裂分別子囊和第二次分裂分別子囊。一次分裂分別子囊和第二次分裂分別子囊。實驗原理實驗原理第一次分裂分別子囊第一次分裂分別子囊第二次分裂分別子囊第二次分裂分別子囊AAaa或或aaAAAaAaaAaAAaaAaAAa實驗原理實驗原理l第一次分裂分別構(gòu)成的子囊為非交換型子囊；第一次分裂分別構(gòu)成的子囊為非交換型子囊；l第二次分裂分別構(gòu)成的子囊為交換型子囊；第二次分裂分別構(gòu)成的子囊為交換型子囊；l第二次分裂分別子囊的出現(xiàn)，是由于有關(guān)的基因和第二次分裂分別子囊的出現(xiàn)，是由于有關(guān)的基因和著絲粒之間發(fā)生了一次交換的結(jié)果。著絲粒之間發(fā)生了一次交換的結(jié)果。l染色體上兩個基因座之間的間隔越遠，那

4、么它們之染色體上兩個基因座之間的間隔越遠，那么它們之間發(fā)生交換的頻率越高。因此，第二次減數(shù)分裂分間發(fā)生交換的頻率越高。因此，第二次減數(shù)分裂分別的子囊越多，闡明基因和著絲粒間的間隔越遠。別的子囊越多，闡明基因和著絲粒間的間隔越遠。實驗原理實驗原理第二次分裂分別子囊數(shù)第二次分裂分別子囊數(shù) 1/2 1/2子囊總數(shù)子囊總數(shù) 100% 100% 著絲粒與基因間的重組率著絲粒與基因間的重組率 = =MII 1/2 MI + MII 100% 100% 重組率重組率 = =或：或：基因與著絲粒間間隔圖距：基因與著絲粒間間隔圖距： 重組率去掉重組率去掉% %即為圖距，單位為厘摩即為圖距，單位為厘摩cMcM。實

5、驗步驟實驗步驟l1.菌種活化菌種活化l2.雜交接種雜交接種l3.培育培育 l4.壓片察看壓片察看實驗步驟實驗步驟l4.壓片察看：壓片察看：l將附有子囊果的濾紙條放入將附有子囊果的濾紙條放入3%來蘇爾溶液來蘇爾溶液10min，殺死孢子，以防止污染實驗室；，殺死孢子，以防止污染實驗室；l取一載玻片，滴取一載玻片，滴12滴滴3%來蘇爾溶液，然來蘇爾溶液，然后用接種針挑出子囊果放在載玻片上；后用接種針挑出子囊果放在載玻片上；l蓋上另一載玻片，用手指壓片，將子囊果蓋上另一載玻片，用手指壓片，將子囊果壓破；壓破；l置顯微鏡下察看置顯微鏡下察看實驗結(jié)果實驗結(jié)果l可察看到一個子囊果中散出可察看到一個子囊果中散出3040個子囊；個子囊；l察看子囊孢子的陳列情況；察看子囊孢子的陳列情況；實驗結(jié)果實驗結(jié)果l察看一定數(shù)目的子囊果，記錄每個雜交型察看一定數(shù)目的子囊果，記錄每個雜交型完好子囊的類型，并計算出完好子囊的類型，并計算出Lys基因與著絲基因與著絲粒間的間隔。粒間的間隔。l1. 填表填表l2. 列出計算公式及結(jié)果列出計算公式及結(jié)果l3. 繪制顯微鏡下察看到的雜交子囊的圖繪制顯微鏡下察看到的雜交子囊的圖留意！留意！l本次實驗察