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文檔簡介
1、 實驗一 神經干動作電位坐骨神經干動作電位的記錄、觀察一、 實驗目的1. 學習電生理實驗方法。2. 觀察蛙坐骨神經干復合動作電位的波形,并了解其產生的基本原理。二、實驗原理神經干在受到有效刺激后,可以產生動作電位,標志著神經發(fā)生興奮。如果在神經干另一端引導傳來的興奮沖動,可以引導出雙相的動作電位,如果在兩個引導電極之間將神經麻醉或損壞,則引導出的動作電位即為單相動作電位。神經細胞的動作電位是以“全或無"方式產生的。坐骨神經干是以由很多不同類型的神經纖維組成的,所以,神經干的動作電位是復合動作電位。復合動作電位的幅值在一定刺激強度下是隨刺激強度的變化而變化的三、實驗
2、材料(1) 動物蟾蜍(2) 器械常用手術器械、蛙板、毀髓針、玻璃解剖針、神經屏蔽盒、大頭針、任氏液、燒杯、培養(yǎng)皿。RM6240B生理信號記錄儀。四、實驗步驟1、連接實驗裝置:按下圖所示連接屏蔽盒與微機生物信號采集處理系統(tǒng)。地0123456刺激通道2通道12、雙毀髓:左手握蟾蜍,背部向上。用食指按壓其頭部前端,拇指壓住軀干的背部,使頭向前俯;右手持毀髓針,由兩眼之間中線向后方劃觸,觸及兩耳后腺之間的凹陷處即是枕骨大孔的位置。將毀髓針由凹陷處垂直刺入枕骨大孔,然后針尖向前刺入顱腔,在顱腔內攪動,以毀腦組織。再將毀髓針退至枕骨大孔,針尖轉向后方,與脊柱平行刺入椎管,以搗毀脊髓。脊髓徹底搗毀時,可看到
3、蟾蜍后肢突然蹬直,然后癱軟,此時的動物為雙毀髓動物。3、剝制后肢標本:左手持手術鑷提起兩前肢之間背部的皮膚,右手持手術剪橫向剪斷皮膚,然后往后肢方向撕剝皮膚。剪開腹壁肌肉,用手術鑷提起內臟,翻向頭部,在看清支配后肢的脊神經發(fā)出部位后,于其前方剪斷脊柱。4、分離兩后肢:將去皮的后肢腹面向上置于解剖盤上,右手持金冠剪縱向剪開脊柱,再剪開恥骨聯合,使兩后肢完全分離。 5、剝離蟾蜍一側后肢的坐骨神經。坐骨神經下行至腘窩處分為兩支:內側為脛神經,走行表淺;外側為腓神經。沿脛、腓神經走向分離至踝部,盡量將神經干標本剝離長一些,要求上自脊神經發(fā)出部位,下沿腓神經與脛神經一直分離到踝關節(jié)附近,剪斷側支。將神經
4、干周圍的組織盡量剔除干凈(剝離時切勿損傷神經干)結扎坐骨神經干的脊柱端及脛、腓神經的足端,游離神經干。然后將坐骨神經干標本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中,穩(wěn)定興奮性5 min。 6、 動作電位的引導 進入實驗模塊:“實驗” 肌肉神經神經干動作電位 彈出刺激器對話框,并處于示波狀態(tài) 在刺激器對話框中選擇同步觸發(fā)。點擊“開始刺激”鍵 ,屏幕上出現一屏“動作電位”波形,以后每點擊“開始刺激”鍵一次,波形即刷新一次。根據波形幅度可調節(jié)位于屏幕上顯示通道右側的靈敏度。參數調節(jié)后,應再次點擊“開始刺激”鍵,以刷新波形??捎谩癙gUp”與“PgDn”翻頁查找波形。選擇理想的波形用“保存當前畫面”命令將其保存為正式
5、文件。當然也可用保存命令將全部臨時文件保存為正式文件。測量坐骨神經干的閾強度、最適刺激強度:調整刺激強度從0V遞增,測量復合動作電位幅度,求得閾強度、最適刺激強度。在最適刺激強度下,觀察動作電位形狀,測量其時程及幅度(正向波及負向波幅度)。.2 神經損傷對復合動作電位的影響在記錄電極間用鑷子夾傷神經干,記錄動作電位。觀察復合動作電位有何變化。五、實驗注意事項:(1)制作標本過程中應盡量減少對神經的牽拉;(2)要經常保持標本濕潤;(3)神經干應與每個使用的電極密切接觸。并且扎主神經的細線應該盡量避免與測量區(qū)接觸,以防由于濕潤導電而影響實驗結果。(4)實驗結束后神經屏蔽盒應洗凈、擦干;六、實驗結果(1)這是剛產生興奮時的波形(2)增大刺激強度后,獲得最適刺激強度為0.735v。七、實驗結果分析本次實驗過程中,神經的分離是最關鍵的一步,必須保持其組織
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