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文檔簡介
1、腸毒清口服液對全身性炎性反應(yīng)綜合癥大鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性的影 光度。 淋巴細(xì)胞增殖活性的的檢測法檢測脾淋巴細(xì)胞增殖情況。末次給藥后第天處死大鼠,無菌取脾,常規(guī)制成淋巴細(xì)胞懸液,用含有小牛血清的調(diào)細(xì)胞濃度為×,取細(xì)胞懸液接種于孔培養(yǎng)板中,實驗孔加入(終濃度為),對照孔加。各組設(shè)個復(fù)孔,將培養(yǎng)板置于 , 培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)結(jié)束前取出加入,繼續(xù)培養(yǎng)后取出加入含 的, 過夜,次晨于酶標(biāo)儀處測值,并計算刺激指數(shù)():實驗孔對照孔。
2、 統(tǒng)計學(xué)處理采用分析,計量資料用方差分析或檢驗,檢驗水準(zhǔn)。 結(jié)果動物癥狀、體征組大鼠滅菌后一般狀況沒有明顯的變化,模型組大鼠后出現(xiàn)呼吸加粗、加快、心率加快、肛溫明顯增加,表示造模成功。 后出現(xiàn)腹部包塊、口鼻血性分泌物等。解剖后可見腹腔內(nèi)不同程度的臟器粘連,肺部充血明顯,治療組情況相似,中劑量和高劑量較輕。 抗氧化指標(biāo)各組大鼠和差異無統(tǒng)計學(xué)
3、意義;低劑量組總明顯低于組和模型組(); 高劑量組 明顯低于組和模型組(),見表。 表 各組大鼠抗氧化指標(biāo) (±)組別 () 總()()(酶活力單位)組 ± ± ± ±模型組 ± ± ± ±低劑量組 ± ±± ±高劑量組 ± ± ± ±:,與組比較; :,與模型組比較。
4、160; 淋巴細(xì)胞增殖活性除高劑量組之外其余試驗組大鼠都大于組,模型組大于低劑量組和高劑量組,但都沒有統(tǒng)計學(xué)意義,組與高劑量組接近,見表。 表 各組大鼠計算結(jié)果 (±)組別組±模型組±低劑量±中劑量±高劑量±討論腹膜是人體內(nèi)面積最大的上皮組織,受到感染或非感染因素刺激時,易于誘發(fā)。夏肖萍等研究顯示注射,能有 效 誘 導(dǎo) 大 鼠 發(fā) 生,且 多 次 試 驗 結(jié) 果 均 相似。因此本次試驗用造模 。各試驗組大鼠在給藥期
5、間表現(xiàn)不同程度的發(fā)熱、呼吸加粗等癥狀,隨著給藥時間的延長,高劑量組大鼠肛溫逐漸趨于正常。 總 、是動物體內(nèi)主要的抗氧化酶,它們的含量和活性影響機(jī)體內(nèi)的活性氧自由基水平及脂質(zhì)過氧化終末代謝產(chǎn)物; 是衡量機(jī)體總抗氧化能力的指標(biāo),它的高低代表機(jī)體的總抗氧化能力。抗氧化的活性越高,說明機(jī)體清除氧自由基的能力越強(qiáng),從而降低了因?qū)е碌难踝杂苫逊e引起的膜脂質(zhì)的過氧化。試驗過程中試驗組大鼠注 射造 模,由 于導(dǎo) 致 動 物 總、均低于組,從而使得脂質(zhì)過氧化的代謝產(chǎn)
6、物在體內(nèi)堆積,隨著給藥濃度的增加,機(jī)體總、逐漸趨于正常組,因此高劑量組的水平接近組,提示高劑量的腸毒清口服液可以清除因?qū)е碌难踝杂苫亩逊e,防止脂質(zhì)過氧化,這與大黃等可以清除血漿、肝臟等組織中的氧自由基等報道一致。 研究表示 的反應(yīng)需要機(jī)體整個免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié),而脾臟是人體最大的外周免疫器官,其產(chǎn)生的抗體在機(jī)體的防御和免疫應(yīng)答中具有重要的意義。淋巴細(xì)胞增殖能力的強(qiáng)弱變化可作為判斷免疫反應(yīng)能力的一個重要指標(biāo),本試驗通過用在體外刺激淋巴細(xì)胞增殖活性,觀察中藥腸毒清口服液對的治療作用,研究發(fā)現(xiàn)試驗組的都大于組,而治療組的均小于模型
7、組,尤其是高劑量組,基本趨于組的水平,表示通過腸毒清口服液的治療,大鼠的淋巴細(xì)胞增殖活性基本恢復(fù)正常,提示中藥腸毒清口服液可以通過調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)緩解,這與大黃等可以增強(qiáng)免疫的報道一致。 綜上所述,低劑量和中劑量的腸毒清口服液對基本沒有作用,可能是由于藥物的濃度較小或者是給藥的時間較短所致,高劑量的腸毒清口服液可以調(diào)節(jié)機(jī)體的抗氧化能力,可能通過增加淋巴細(xì)胞增殖活性,增強(qiáng)機(jī)體免疫,緩解導(dǎo)致的,阻止其進(jìn)一步發(fā)展為,延長給藥時間可能會使治療效果更加明顯。 參考文獻(xiàn) 吳冬梅中醫(yī)藥防治研究進(jìn)展中國中醫(yī)
8、急癥,(): 陳進(jìn)凡、吳亮中藥“腸毒清”對全身炎性反應(yīng)綜合癥患兒血清、水平的影響甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,(): 曾萍,楊鎰宇,吳偉康,等四逆湯對大鼠的早期干預(yù)中國病理生理雜志,(): 趙嘉惠,張華屏,王春芳法在檢測細(xì)胞增殖方面的探討山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,(): 李艾黎,馬冬雪,孟祥晨乳桿菌對原代淋巴細(xì)胞細(xì)胞平衡的影響細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,():,(下轉(zhuǎn)第頁)·· 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志年月第卷第期,通訊作者,:。 ·基礎(chǔ)實驗研究· 腸毒清口服液對全身性炎性反應(yīng)綜合癥大鼠脾淋巴細(xì)胞增殖活性的影響劉媛,
9、陳進(jìn)凡,楊育紅,杜玫(甘肅省中醫(yī)院檢驗科,蘭州; 甘肅省建筑職工醫(yī)院檢驗科)摘要:目的探討中藥腸毒清口服液對全身性炎性反應(yīng)綜合癥()的大鼠抗氧化能力、脾淋巴細(xì)胞增殖活性的影響,從而為中藥腸毒清口服液治療提供實驗依據(jù)。方法將只雄性大鼠隨機(jī)分為組()。用腹腔注射酵母多糖懸濁液造模型,對照組和實驗組分別給予和不同濃度腸毒清口服液灌胃。末次給藥后第天處死,檢測大鼠抗氧化能力、淋巴細(xì)胞增殖活性等。結(jié)果治療組和模型組均出現(xiàn)一般情況的惡化;各組大鼠、隨著藥物濃度的增加逐漸趨于組,但是無統(tǒng)計學(xué)意義();實驗組總與明顯低于組()。結(jié)論高劑
10、量的腸毒清口服液可能通過增強(qiáng)機(jī)體免疫,緩解。 關(guān)鍵詞:全身炎性反應(yīng)綜合征; 淋巴細(xì)胞增殖活性; 大鼠; 腸毒清口服液:文獻(xiàn)標(biāo)識碼:文章編號:(),(,; ,):()(),()():; ,;
11、60; ; 近年來,國內(nèi)外對全身性炎性反應(yīng)綜合癥()和多器官功能衰竭()的研究正在深入,從的機(jī)制和治療發(fā)展趨勢來看,的防治并不是僅僅在某個發(fā)病機(jī)制環(huán)節(jié)上實行單純的阻斷,而是需要整個免疫調(diào)節(jié)。有研究表示大黃、白頭翁、厚樸均有抑菌和提高免疫力的作用,丹參可以減輕組織或器官的炎癥損傷,筆者精選大黃、白頭翁、厚樸、枳實、丹參、水蛭等味藥組成的復(fù)方制劑,采用現(xiàn)代工藝研制成腸毒清口服液,通過建立動物模型利用六經(jīng)辨認(rèn)進(jìn)行實驗研究探討腸毒清口服液對于的防治作用。 材料與方法實驗動物普通級大鼠只,周齡,
12、體重,雄性,恒溫室內(nèi)飼養(yǎng),正常光照時間:,無飲食飲水限制。 實驗試劑及器材腸毒清口服液(甘肅省中醫(yī)院)、酵母多糖、液體石蠟、培養(yǎng)液、刀豆蛋白()、十二烷基硫代硫酸鈉()、(四氮噻唑藍(lán))、(超氧化物歧化酶)試劑盒、(谷胱甘肽過氧化物酶)試劑盒、(丙二醛)試劑盒、(總抗氧化能力)試劑盒等、生物安全柜、培養(yǎng)箱、高壓滅菌器、干燥箱等。 動物模型的建立將酵母多糖和液體石蠟混合,磁力攪拌器攪拌混勻制成懸濁液,水浴滅菌,制成濃度為的酵母多糖石蠟懸液(),冷卻后放
13、入冰箱備用,臨用前 水浴及高頻攪拌后注藥。 大鼠實驗前開始禁食,但不禁水,實驗前稱重并測肛溫。 模型判斷標(biāo)準(zhǔn):注射后較注射前肛溫升高或降低、增加倍或減少、呼吸頻率超過正常值倍或動脈血二氧化碳分壓()較正常降低、心率較對照值增加。 實驗分組將大鼠隨機(jī)分為組,每組只:生理鹽水()為正常組腹腔注射()滅菌灌胃();模型組();低劑量組(低劑量腸毒清);中劑量組(中劑量腸毒清);高劑
14、量組(高劑量腸毒清),連續(xù),次天,以上各組末次給藥后在常規(guī)飼養(yǎng)條件下觀察。 抗氧化能力檢測大鼠乙醚麻醉,采血,離心分離血清, 保存待用,血清總、按各試劑盒說明操作,紫外分光光度計測吸·國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志·年月第卷第期,導(dǎo)致葉酸等維生素消耗增加,這些因素均可導(dǎo)致重癥肝炎患者體內(nèi)葉酸等維生素水平降低,提示重癥肝炎患者體內(nèi)水平增高很有可能與體內(nèi)葉酸等維生素含量不足有關(guān)。有報道在炎癥性腸病患者服用葉酸后,體內(nèi)水平明顯降低。 由于對重型肝炎的具體發(fā)病機(jī)制了解還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠,因此,重
15、癥肝炎患者血漿中的增高的原因是有待證明問題之一。中國重癥肝炎患者血漿的水平及其影響因素也需要更深入的臨床研究和調(diào)查。 參考文獻(xiàn) ,():,(): 胡曉穎,張曉光高同型半胱氨酸血癥與疾病的關(guān)系山東醫(yī)藥,(): 謝婧,劉增長急性冠脈綜合征伴高同型半胱氨酸皿癥患者血清與水平檢測及臨床意義檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,(): 耿學(xué)川,杜繼臣,李繼榮,等高同型半胱氨酸血癥與動脈粥樣硬化的關(guān)系中國老年學(xué)雜志,():,:,():,(): 楊志娜,田衛(wèi)東,宋明輝,等高同型半胱氨酸血癥與腎病綜合征的關(guān)系國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,():,:,():郭建軍重癥肝炎患
16、者同型半胱氨酸水平觀察中國誤診學(xué)雜志,():張洪波肝病患者血漿同型半胱氨酸測定的臨床意義國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,():石勝,陳健勇,黃華興,等血漿同型半胱氨酸水平與肝硬化嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析實用醫(yī)學(xué)雜志,():王雪華,梁偉,白玉賓,等中西醫(yī)結(jié)合治愈重癥乙型肝炎中醫(yī)藥學(xué)報,():梁建新,曾文鋌,朱科倫,等例慢性重型乙型肝炎患者預(yù)后相關(guān)因素分析廣東醫(yī)學(xué),():陰斌霞,王香玲,趙麗華,等重癥肝炎患者血清同型半胱氨酸水平的變化第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,():,():,():,():楊志娜,田衛(wèi)東,崔征,等血清同型半胱氨酸水平與慢性腎功能不全分期的相關(guān)性分析國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,():肖桂榮,孫新方,宋建平,等血漿葉酸、維生素和同型半胱氨酸水平對病的影響中華老年醫(yī)學(xué)雜志,():陰斌霞,王香玲,趙麗華,等重癥肝炎患者同型半胱氨酸水平觀察中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,():(收稿日期:)(上接第頁) 劉民,馬華,李柏青法檢測小鼠淋巴細(xì)胞增殖性反應(yīng)探討中國實驗動物學(xué)雜志,(): 周建軍,韓家嫻,等評價抗癌物質(zhì)活性的改良方法中國醫(yī)藥工業(yè)雜志,(): 夏肖萍,費(fèi)春榮,葉愛青葛根素對大鼠全身炎性反應(yīng)綜合征的治療作用及其機(jī)制研究浙江檢驗醫(yī)學(xué),(): 張艷艷,李福昌日糧不同硒水平對月齡肉兔生長性能、抗氧化指標(biāo)和肉質(zhì)的影響動物營養(yǎng)學(xué)報,
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