測定奧美拉唑的流動注射化學(xué)發(fā)光新方法

1、測定奧美拉唑的流動注射化學(xué)發(fā)光新方法         11-01-06 10:15:00     作者：楊云，李銀環(huán)    編輯：studa20【摘要】  目的 建立測定奧美拉唑的流動注射化學(xué)發(fā)光新方法。方法 當(dāng)將奧美拉唑注入到高錳酸鉀與魯米諾反應(yīng)的合并流中時(shí)，可檢測到強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光信號，結(jié)合流動注射技術(shù)對實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果 在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，即混合管長度：150cm，反應(yīng)介質(zhì)的堿度：0.15mol/L NaOH，魯米諾的

2、濃度：7.0×10-5mol/L，高錳酸鉀的濃度：2.0×10-5mol/L以及試劑流速：2.8mL/min，奧美拉唑濃度在2.0×10-81.0×10-5g/mL范圍內(nèi)與相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度具有線性關(guān)系;對濃度為1.0×10-7g/mL和1.0×10-6g/mL奧美拉唑溶液進(jìn)行11次平行測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.0%和2.6%;該方法的檢出限為3×10-9g/mL。結(jié)論 該方法簡單、快速、靈敏，適用于藥物制劑中奧美拉唑的含量測定。 【關(guān)鍵詞】  奧美拉唑;化學(xué)發(fā)光;流動注射;藥物ABSTRACT: Objectiv

3、e To develop a new flowinjection chemiluminescence (FICL) method for the determination of omeprazole. Methods Strong chemiluminescence (CL) signal was found generated when omeprazole was injected into the reaction mixture of KMnO4 and luminol. The experimental conditions that affected the CL reactio

4、n were optimized by using FI mode. Results Under the optimum experimental conditions (150cm of mixing tubing, 0.15mol/L NaOH, 7.0×10-5mol/L luminol, 2.0×10-5mol/L KMnO4 and 2.8mL/min of flow rate), CL intensity was linearly related to the concentration within the range of 2.0×10-8-1.0

5、×10-5g/mL. The detection limit was 3×10-9g/mL omeprazole, and the relative standard deviations (n=11) were 1.0% and 2.6% for 1.0×10-7g/mL and 1.0×10-6g/mL omeprazole solutions, respectively. Conclusion The proposed method is simple, rapid, sensitive, and suitable for determining

6、omeprazole content in pharmaceutical preparations.KEY WORDS: omeprazole; chemiluminescence; flowinjection; pharmaceutical奧美拉唑(omeprazole)，化學(xué)名稱為5甲氧基24甲氧基3，5二甲基2吡啶基甲基亞硫酰基1H苯并咪唑，是一種新型胃酸分泌抑制劑，為高效安全的抗消化道潰瘍藥物。奧美拉唑能特異性地作用于胃黏膜壁細(xì)胞, 降低胃黏膜壁細(xì)胞中H+K+ATP酶的活性從而抑制胃酸的分泌，已被廣泛應(yīng)用于十二指腸潰瘍、胃潰瘍和反流性食管炎的治療。目前，奧美拉唑的分析方法有分光光度法1

7、3、伏安法45、極譜法67、液相色譜法810、毛細(xì)管電泳法11和液相色譜質(zhì)譜法1213等?；瘜W(xué)發(fā)光法具有靈敏度高、線性范圍寬、儀器設(shè)備簡單等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛用于藥物的分析測定1417。利用化學(xué)發(fā)光法測定奧美拉唑的文獻(xiàn)報(bào)道僅有1篇，即張淑瓊18利用奧美拉唑?qū)α蛩徕嬤B二亞硫酸鈉化學(xué)發(fā)光反應(yīng)體系的增強(qiáng)作用，建立了測定奧美拉唑的化學(xué)發(fā)光法。該方法測定奧美拉唑的線性范圍為3.0×10-73.0×10-5g/mL，檢出限為3×10-7g/mL。本研究根據(jù)將奧美拉唑注入到高錳酸鉀與魯米諾化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的反應(yīng)混合液中時(shí)，可以產(chǎn)生強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光信號這一發(fā)現(xiàn)，結(jié)合流動注射技術(shù)，優(yōu)化了實(shí)驗(yàn)條

8、件，建立了利用這一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)測定奧美拉唑的流動注射化學(xué)發(fā)光新方法。該方法已被用于奧美拉唑腸溶膠囊中奧美拉唑的含量測定，結(jié)果與藥典方法的測定值相一致19。1 實(shí)驗(yàn)材料與方法1.1 儀器 IFFMD型流動注射化學(xué)發(fā)光分析儀(西安瑞邁電子科技有限公司)，流路如圖1所示。聚四氟乙烯管(PTFE，0.8mm i.d.)用于連接系統(tǒng)中的所有組件。蠕動泵用來輸送所有溶液，每一管道的流速為2.8mL/min。樣品注射(50mL)借助于六通閥自動完成?；瘜W(xué)發(fā)光信號用CR105型光電倍增管(北京濱松電子科技有限公司)檢測，數(shù)據(jù)獲得和處理通過IFFMD化學(xué)發(fā)光數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(西安瑞邁電子科技有限公司)完成。CRT9

9、70熒光分光光度計(jì)(上海分析儀器廠)用來繪制熒光光譜和化學(xué)發(fā)光光譜。圖1 流動注射化學(xué)發(fā)光流路示意圖Fig.1 Schematic diagram of CL flow systema：奧美拉唑溶液;b：魯米諾溶液;c：高錳酸鉀溶液;L：混合管;P：蠕動泵;V：注射閥;F：流通池;PMT：光電倍增管;HV：高壓;PC：計(jì)算機(jī);W：廢液。1.2 試劑和溶液 奧美拉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(5.00×10-4g/mL)的配制：準(zhǔn)確稱取50.0mg奧美拉唑標(biāo)準(zhǔn)品(中國藥品生物制品檢定所提供)，用少量水溶解后，轉(zhuǎn)移至100mL棕色容量瓶中，用水定容至標(biāo)線，搖勻。儲于4冰箱中，使用時(shí)用水逐級稀釋至所需濃度。

10、魯米諾儲備液(1.0×10-2mol/L)的配制：準(zhǔn)確稱取1.77g魯米諾(陜西師范大學(xué)合成)，用1mol/L的氫氧化鈉溶液50mL溶解后，用二次水定容至1L容量瓶中，室溫下放置1周后使用。高錳酸鉀儲備液(2.0×10-2mol/L)的配制：稱取3.16g高錳酸鉀(西安化學(xué)試劑廠)，溶解于1L沸水中，玻璃纖維過濾，室溫下放置2周后使用。除魯米諾外，其它所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。1.3 實(shí)驗(yàn)方法 準(zhǔn)確移取一定量的奧美拉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣品溶液于50mL容量瓶中，加水至標(biāo)線，搖勻，作為試液。按照圖1所示流路，管道(a，b和c)分別連接奧美拉唑溶液、魯米諾溶液和高錳酸鉀溶液

11、。魯米諾溶液首先通過Y型混合器與高錳酸鉀溶液在線混合反應(yīng)。待基線穩(wěn)定后，50mL奧美拉唑溶液借助于六通閥自動注入到魯米諾溶液與高錳酸鉀溶液的合并流中，產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號。以相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度對奧美拉唑進(jìn)行定量。2 結(jié)果與討論2.1 實(shí)驗(yàn)條件的選擇 以2.0×10-7g/mL奧美拉唑溶液對實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化，優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)參數(shù)包括混合管長度、反應(yīng)介質(zhì)的堿度、魯米諾和高錳酸鉀的濃度，以及試劑流速。高錳酸鉀可在堿性溶液中氧化魯米諾產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。為了降低背景信號，獲得最大的靈敏度，在高錳酸鉀溶液與魯米諾溶液的匯合點(diǎn)與進(jìn)樣閥之間連接一混合管(0.8mm i.d.)，使高錳酸鉀溶液與魯米諾溶液充分混合并反

12、應(yīng)?？疾旎旌瞎艿拈L度在20250cm范圍內(nèi)對化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的影響。結(jié)果表明，隨著混合管長度的增長，背景信號逐漸降低，但化學(xué)發(fā)光信號無明顯變化;當(dāng)混合管長度為150cm時(shí)，信噪比有最大值，因此選擇混合管長度為150cm。高錳酸鉀與魯米諾之間的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)須在堿性條件下進(jìn)行。在反應(yīng)中，反應(yīng)介質(zhì)的堿度通過改變魯米諾溶液中氫氧化鈉的濃度加以調(diào)節(jié)?？疾炝藲溲趸c濃度在0.010.20mol/L范圍內(nèi)對化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的影響。如圖2所示，相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度隨著氫氧化鈉濃度的增大而增大;當(dāng)氫氧化鈉濃度為0.15mol/L時(shí)，相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度值達(dá)到最大;當(dāng)氫氧化鈉濃度高于0.15mol/L時(shí)，相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度逐漸降低

13、。因此，選擇0.15mol/L的氫氧化鈉。觀察魯米諾濃度在1.0×10-51.0×10-4mol/L范圍內(nèi)對化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的影響，結(jié)果見圖3。當(dāng)魯米諾濃度在1.0×10-57.0×10-5mol/L范圍內(nèi)，相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度隨著魯米諾濃度的增大而增大;當(dāng)魯米諾濃度高于7.0×10-5mol/L時(shí)，相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度隨著魯米諾濃度的增大而降低。因此，選擇魯米諾的濃度為7.0×10-5mol/L。圖3 魯米諾濃度對相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度的影響Fig.3 Effect of luminol concentration on the relative CL intensity實(shí)驗(yàn)條件：2.0×10-7g/mL奧美拉唑，0.15mol/L NaOH，2.0×10-5mol/L KMnO4，混合管長度150cm，試劑流速2.8mL/min。對高錳酸鉀濃度在5.0×10-66.0×10-5mol/L范圍內(nèi)對化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的影響進(jìn)行考察。結(jié)果顯示(圖4)，當(dāng)高錳酸鉀濃度為2.0×10-5mol/L時(shí)，反應(yīng)有最大的相對化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度;高于或低于2.0×10-5mol/L高錳酸鉀均導(dǎo)致相對