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文檔簡介

1、 不需洗滌的ELISA 替代技術(shù)AlphaLISAAlphaLISA 技術(shù)整個過程中不需要洗滌，操作非常簡單，靈敏度高，可完全取代傳統(tǒng)的ELISA 技術(shù)。并且，AlphaLISA 動態(tài)范圍寬（3-4個數(shù)量級），親和范圍大（高低親和力的抗體均可應(yīng)用），抗干擾能力強，易于實現(xiàn)自動化。該技術(shù)尤其適合于進行稀有的Biomarker 和生物治療物的檢測，以及通量很大樣品的檢測。很多高通量檢測公司，如諾和諾德、GSK 、諾華、Amgen 、Sorono 等都采用了AlphaLISA 進行檢測，以取代繁瑣的ELISA 技術(shù)。AlphaLISA 技術(shù)是建立在高靈敏度的AlphaScreen 技術(shù)上的。Alph

2、aScreen ，即Amplified Luminescent Proximity HomogeneousAssay ，其利用作為供體和受體的微珠來進行檢測生物分子的相互作用。微珠表面覆蓋了一層水凝膠，作為生物連接的功能基團。當生物分子存在相互作用時，這種相互作用會將供體和受體微珠拉近，從而激發(fā)級聯(lián)放大的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生極大增強了的信號。具體來說，在激光（波長為680 nm）的照射下，供體微珠上的光敏劑將周圍環(huán)境中的氧氣轉(zhuǎn)化為更為活躍的單體氧。單體氧擴散至受體微珠，與其上的化學(xué)發(fā)光劑反應(yīng)，進一步激活了同樣在受體微珠上的熒光基團，使之發(fā)出熒光，波長為520620 nm。單體氧的半衰期為4 Sec，

3、在溶液中的擴散距離為200 nm左右。如果生物分子不存在特異的相互作用，單體氧無法擴散到受體微珠，則不會有熒光信號產(chǎn)生。AlphaLISA 技術(shù)在AlphaScreen 的基礎(chǔ)之上，使受體微珠的能量最終傳遞到稀土元素銪（Eu ）上，發(fā)射波長非常尖銳，為615nm ，從而大大減少了檢測樣品中雜質(zhì)的干擾，可直接檢測血清和體液中的生物分子，完全取代傳統(tǒng)的ELISA 技術(shù)，同時提高了靈敏度和線性范圍，可進行稀有樣品的檢測。AlphaScreen 技術(shù)的特征和優(yōu)勢均相AlphaScreen 是一種“混合后測量”的檢測方法，不需要分離和洗滌步驟非放射性AlphaScreen 不需要特殊的試劑和處理方法，它們是進行放射性檢測所必需的靈敏（低背景）AlphaScreen

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