高二生物人教版選修3課件：專(zhuān)題1 12 基因工程的基本操作程序

1、專(zhuān)題11.2基因工程的基本操作程序目標(biāo)導(dǎo)航1.結(jié)合教材圖16，整體把握并說(shuō)出基因工程的基本操作程序。2.理解獲取目的基因的途徑及基因表達(dá)載體的構(gòu)建。3.理解目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法、檢測(cè)與鑒定目的基因的方法。1預(yù)習(xí)導(dǎo)學(xué) 挑戰(zhàn)自我，點(diǎn)點(diǎn)落實(shí) 2 課堂講義 重點(diǎn)難點(diǎn)，個(gè)個(gè)擊破3 對(duì)點(diǎn)練習(xí) 即時(shí)訓(xùn)練，體驗(yàn)成功預(yù)習(xí)導(dǎo)學(xué) 挑戰(zhàn)自我，點(diǎn)點(diǎn)落實(shí)一、目的基因的獲取(閱讀P811)1.基因工程的基本操作程序(1) 的獲取。(2)的構(gòu)建。(3)將目的基因?qū)?。(4)目的基因的 。目的基因基因表達(dá)載體受體細(xì)胞檢測(cè)與鑒定5 1.2 基因工程的基本操作程序2.目的基因的獲取(1)目的基因主要是指 的基因，也可以是一

2、些具有的因子。(2)常見(jiàn)方法從基因文庫(kù)中獲取基因文庫(kù)的種類(lèi)編碼蛋白質(zhì)調(diào)控作用基因組文庫(kù)cDNA文庫(kù)6 1.2 基因工程的基本操作程序利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因a原理： 。b條件： 、DNA模板、四種脫氧核苷酸。c過(guò)程：目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在 作用下進(jìn)行延伸，如此重復(fù)循環(huán)多次。d結(jié)果：每一次循環(huán)后，目的基因的量可以，即成指數(shù)形式擴(kuò)增(約為2n，n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù))。DNA雙鏈復(fù)制引物Taq酶引物DNA聚合酶增加一倍7 1.2 基因工程的基本操作程序人工合成法：如果基因比較小， 又已知，可借助用化學(xué)方法直接人工合成。核苷酸序列DNA合成儀8 1.2 基因

3、工程的基本操作程序二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建(閱讀P11)1.基因表達(dá)載體的功能使目的基因在受體細(xì)胞中 ，并且可以遺傳給下一代，使目的基因能夠 和發(fā)揮作用。2.基因表達(dá)載體的構(gòu)成穩(wěn)定存在表達(dá)啟動(dòng)子首端RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄尾端RNA聚合酶終止子標(biāo)記轉(zhuǎn)錄目的基因9 1.2 基因工程的基本操作程序3.基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程一般用同一種 酶分別切割載體和目的基因，再用酶把兩者連接。限制DNA連接10 1.2 基因工程的基本操作程序三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(閱讀P1113)1.轉(zhuǎn)化的概念目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)的過(guò)程。2.轉(zhuǎn)化的方法(1)導(dǎo)入植物細(xì)胞 法：將目的基因?qū)腚p子葉植物和祼子植物。

4、法：將目的基因?qū)雴巫尤~植物常用的方法。 法：我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的一種方法。維持穩(wěn)定和表達(dá)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化基因槍花粉管通道11 1.2 基因工程的基本操作程序(2)導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞方法： 技術(shù)。常用受體細(xì)胞：。(3)導(dǎo)入微生物細(xì)胞第一步：首先用 處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞。第二步：將 溶于緩沖液中與 細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收 ，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。顯微注射受精卵Ca2重組表達(dá)載體DNA分子感受態(tài)感受態(tài)DNA分子12 1.2 基因工程的基本操作程序四、目的基因的檢測(cè)與鑒定(閱讀P1315)1.分子水平檢測(cè)(連線)13 1.2 基因工程的基本操作程

5、序2.個(gè)體水平鑒定包括抗蟲(chóng)、抗病的 實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性及抗性程度?；蚬こ坍a(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品活性進(jìn)行比較等。接種14 1.2 基因工程的基本操作程序預(yù)習(xí)診斷判斷正誤：(1)所有的目的基因都可從基因文庫(kù)中直接獲得。()(2)利用PCR技術(shù)能合成目的基因。()(3)標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。()(4)目的基因?qū)腚p子葉植物一般采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。()15 1.2 基因工程的基本操作程序(5)一種生物的cDNA文庫(kù)可以有許多種，但基因組文庫(kù)只有一種。()(6)基因表達(dá)載體中需要含有起始密碼、終止密碼、目的基因、標(biāo)記基因。()(7)常用卵細(xì)

6、胞作為動(dòng)物的受體細(xì)胞。()(8)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入了目的基因是目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。()(9)檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA是檢測(cè)目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步。()一、目的基因的獲取課堂講義 重點(diǎn)難點(diǎn)，個(gè)個(gè)擊破1.幾種獲取目的基因方法的比較方法基因文庫(kù)的構(gòu)建PCR技術(shù)擴(kuò)增 人工合成基因組文庫(kù)部分基因文庫(kù)(如cDNA文庫(kù))17 1.2 基因工程的基本操作程序過(guò)程18 1.2 基因工程的基本操作程序優(yōu)點(diǎn)操作簡(jiǎn)單專(zhuān)一性強(qiáng)可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因?qū)Ｒ恍詮?qiáng)，可產(chǎn)生自然界中不存在的新基因缺點(diǎn)工作量大、盲目性大、專(zhuān)一性差操作過(guò)程較麻煩，技術(shù)要求過(guò)高需要嚴(yán)格控制溫度、技

7、術(shù)要求高適用范圍小19 1.2 基因工程的基本操作程序2.PCR技術(shù)與DNA復(fù)制的比較比較項(xiàng)目DNA復(fù)制PCR技術(shù)區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高溫下變性解旋場(chǎng)所細(xì)胞內(nèi)(主要在細(xì)胞核內(nèi))細(xì)胞外(主要在PCR擴(kuò)增儀中)酶解旋酶、DNA聚合酶耐熱的DNA聚合酶溫度細(xì)胞內(nèi)溫和條件控制溫度，需90 95 高溫結(jié)果合成DNA分子合成DNA片段或基因20 1.2 基因工程的基本操作程序聯(lián)系(1)模板：均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)原料：均為四種脫氧核苷酸(3)酶：均需DNA聚合酶(4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶從引物的3端開(kāi)始連接脫氧核苷酸21 1.2 基因工程的基本操作程序思維激活1.基因組文

8、庫(kù)和部分基因文庫(kù)有什么區(qū)別？答案基因組文庫(kù)包含一種生物的全部基因，部分基因文庫(kù)只包含一種生物的一部分基因。2.怎樣從基因文庫(kù)中得到我們所需的目的基因呢？答案根據(jù)目的基因的有關(guān)信息，例如，根據(jù)基因的核苷酸序列、功能、在染色體上的位置、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA以及基因表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性來(lái)獲取目的基因。22 1.2 基因工程的基本操作程序3.PCR過(guò)程中需要解旋酶嗎？所需要的DNA聚合酶應(yīng)具有什么特點(diǎn)？答案PCR過(guò)程中，DNA雙鏈解開(kāi)是在高溫下完成的，不需要解旋酶；由于PCR過(guò)程溫度較高，所以需要能耐高溫的DNA聚合酶。4.什么樣的基因適合用DNA合成儀直接人工合成？答案基因比較小，核苷酸序列又已知。 2

9、3 1.2 基因工程的基本操作程序應(yīng)用示例1.下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是()從基因文庫(kù)中獲取目的基因利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因反轉(zhuǎn)錄法通過(guò)DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成A B C D24 1.2 基因工程的基本操作程序問(wèn)題導(dǎo)析 (1)PCR利用的是 原理，將雙鏈DNA之間的打開(kāi)，變成DNA，作為聚合反應(yīng)的模板。(2) 則是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，先反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)的單鏈DNA，再合成雙鏈的DNA。則均不需要模板。答案DDNA雙鏈復(fù)制氫鍵單鏈反轉(zhuǎn)錄法、25 1.2 基因工程的基本操作程序一題多變 判斷正誤：(1)目的基因可以從自然界已有物種直接分離，也

10、可人工合成。()(2)目的基因就是指編碼蛋白質(zhì)的基因。()(3)真核生物的基因中含有內(nèi)含子，因此常用反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因。()(4)利用DNA合成儀可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。()26 1.2 基因工程的基本操作程序二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化1.基因表達(dá)載體的構(gòu)建步驟(1)一般用同一種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，使其產(chǎn)生相同的末端。(2)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，再加入適量DNA連接酶，形成一個(gè)重組DNA分子(重組質(zhì)粒)。構(gòu)建過(guò)程如圖：27 1.2 基因工程的基本操作程序特別提醒：該過(guò)程把三種工具(兩種工具酶、一種載體)全用上了，是最核心、最關(guān)鍵的一步，在體外進(jìn)行。28 1.2

11、 基因工程的基本操作程序2.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法比較細(xì)胞類(lèi)型方法說(shuō)明特點(diǎn)植物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法目的基因插入到Ti質(zhì)粒的TDNA上通過(guò)農(nóng)桿菌進(jìn)入植物細(xì)胞插入到植物細(xì)胞中的染色體DNA上目的基因表達(dá)經(jīng)濟(jì)、有效，適合于雙子葉植物和裸子植物基因槍法目的基因包裹在微小的金?；蜴u粒表面用基因槍高速射入到受體細(xì)胞或組織中目的基因表達(dá)成本較高，是單子葉植物中常用的基因轉(zhuǎn)化方29 1.2 基因工程的基本操作程序植物細(xì)胞花粉管通法含目的基因的溶液滴加在柱頭上(或用含目的基因的溶液處理花粉粒)花粉粒吸入目的基因授粉目的基因表達(dá)簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)動(dòng)物細(xì)胞顯微注射技術(shù)目的基因片段受精卵的核內(nèi)受精卵經(jīng)胚胎早

12、期培養(yǎng)一段時(shí)間后移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物最為有效的將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法30 1.2 基因工程的基本操作程序微生物細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞法Ca2處理微生物細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞將基因表達(dá)載體在緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合一定溫度下促使感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、有效31 1.2 基因工程的基本操作程序歸納提煉32 1.2 基因工程的基本操作程序思維激活1.結(jié)合教材P13資料卡分析，用花粉管通道法導(dǎo)入受體細(xì)胞的目的基因是否需要和載體結(jié)合？試分析原因。答案需要。因?yàn)槟康幕蛑挥泻洼d體結(jié)合成基因表達(dá)載體才容易在受體細(xì)胞中穩(wěn)定維持和表達(dá)。2.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用了農(nóng)桿菌的什么特性？答案

13、農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的TDNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。33 1.2 基因工程的基本操作程序3.為什么動(dòng)物的體細(xì)胞一般不作為受體細(xì)胞？答案動(dòng)物體細(xì)胞全能性受到限制，不能發(fā)育為一個(gè)新個(gè)體。4.為什么微生物細(xì)胞適合作為基因工程的受體細(xì)胞？但若通過(guò)基因工程生產(chǎn)人的糖蛋白，從細(xì)胞器的功能分析是否可用大腸桿菌作為受體細(xì)胞呢？答案微生物細(xì)胞具有繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少的優(yōu)點(diǎn)。不可以，糖蛋白上的糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體上加工完成的，而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體存在于真核細(xì)胞中，大腸桿菌是原核生物，細(xì)胞中不含有這兩種細(xì)胞器。34 1.2 基因工程的基本操作程序5

14、.用于構(gòu)建基因表達(dá)載體的質(zhì)粒為什么必須具有啟動(dòng)子和終止子？啟動(dòng)子和終止子與起始密碼和終止密碼是一回事嗎？答案導(dǎo)入到受體細(xì)胞的目的基因的表達(dá)需要調(diào)控序列，因此在插入目的基因的部位之前需有啟動(dòng)子，之后需有終止子。不是一回事，啟動(dòng)子和終止子都在DNA上，在遺傳信息轉(zhuǎn)錄時(shí)起作用。啟動(dòng)子是啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的開(kāi)始，終止子是DNA分子上決定轉(zhuǎn)錄停止的一段DNA序列，其組成單位都是脫氧核苷酸。而起始密碼子和終止密碼子都是mRNA上三個(gè)相鄰堿基。起始密碼子決定翻譯的開(kāi)始，終止密碼子決定翻譯的停止。35 1.2 基因工程的基本操作程序應(yīng)用示例2.農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物，能在自然條件下感染植物，因而在植物基因工程

15、中得到了廣泛的運(yùn)用。下圖為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的示意圖，試回答下列問(wèn)題：36 1.2 基因工程的基本操作程序(1)一般情況下農(nóng)桿菌不能感染的植物是_，利用農(nóng)桿菌自然條件下感染植物的特點(diǎn)，能實(shí)現(xiàn)_。具體原理是在農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在TDNA片段，它具有可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞_上的特點(diǎn)，因此只要將攜帶外源基因的DNA片段插入到_ (部位)即可。解析一般農(nóng)桿菌不能感染的植物是單子葉植物，可感染雙子葉植物和裸子植物。利用其感染性，可實(shí)現(xiàn)目的基因?qū)胫参锛?xì)胞。真正可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上的是農(nóng)桿菌TDNA片段，因此目的基因必須插入到該部位才能成功。單子葉植物將目的基因?qū)胫参锛?xì)

16、胞染色體的DNATDNA片段(內(nèi)部)37 1.2 基因工程的基本操作程序(2)根據(jù)TDNA這一轉(zhuǎn)移特點(diǎn)，推測(cè)該DNA片段上可能含有控制_(酶)合成的基因。解析 根據(jù)TDNA這一轉(zhuǎn)移特點(diǎn)，可以推測(cè)該DNA片段能控制合成DNA連接酶、限制酶以實(shí)現(xiàn)與雙子葉植物細(xì)胞染色體DNA的整合。DNA連接酶、限制酶38 1.2 基因工程的基本操作程序(3)圖中c過(guò)程中，能促進(jìn)農(nóng)桿菌向植物細(xì)胞轉(zhuǎn)移的物質(zhì)是_ 類(lèi)化合物。解析 植物細(xì)胞受傷后可產(chǎn)生酚類(lèi)物質(zhì)，促進(jìn)農(nóng)桿菌向植物細(xì)胞轉(zhuǎn)移。酚39 1.2 基因工程的基本操作程序(4)植物基因工程中除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外，還可采取_。(至少寫(xiě)出兩種)解析 植物基因工程中除了農(nóng)桿

17、菌轉(zhuǎn)化法之外，還有基因槍法和花粉管通道法等。基因槍法、花粉管通道法40 1.2 基因工程的基本操作程序一題多變 判斷正誤：(1)獲得上述轉(zhuǎn)基因植物的核心步驟是a。()(2)上題圖中過(guò)程b可以用Ca2處理細(xì)菌。()(3)用含有重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌去感染植物細(xì)胞，從而把目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，在這個(gè)過(guò)程中所有細(xì)胞都導(dǎo)入了目的基因。()(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用的受體細(xì)胞是花粉細(xì)胞。()41 1.2 基因工程的基本操作程序(5)在過(guò)程a中只需要DNA連接酶的參與。()(6)用含有重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌去感染植物細(xì)胞，要經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)才能獲得表現(xiàn)出新性狀的植物。()(7)因病毒能夠侵染正常細(xì)胞，有的

18、病毒還能將自己的核酸整合到宿主細(xì)胞的染色體上，所以動(dòng)植物病毒也可作為基因工程的載體。()42 1.2 基因工程的基本操作程序三、目的基因的檢測(cè)與鑒定43 1.2 基因工程的基本操作程序思維激活1.目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是什么？如何檢測(cè)？答案目的基因是否插入受體細(xì)胞的染色體DNA上，這是其能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。檢測(cè)方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。44 1.2 基因工程的基本操作程序2.什么是基因探針？如何檢測(cè)目的基因是否開(kāi)始發(fā)揮功能？答案基因探針是用放射性同位素標(biāo)記的目的基因的單鏈DNA片段。從轉(zhuǎn)基因生物中提取mRNA，用標(biāo)記的目的基因作探針，與mRNA雜交，如果顯示出雜

19、交帶，則表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA，意味著目的基因開(kāi)始發(fā)揮功能。45 1.2 基因工程的基本操作程序3.檢測(cè)目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)的方法是什么？其原理是什么？答案抗原抗體雜交法。原理是抗原能與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合。4.檢測(cè)棉花中導(dǎo)入的抗蟲(chóng)基因是否表達(dá)的最簡(jiǎn)便的方法是什么？答案用葉片飼養(yǎng)棉鈴蟲(chóng)，觀察棉鈴蟲(chóng)是否死亡。46 1.2 基因工程的基本操作程序應(yīng)用示例3.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過(guò)鑒定和檢測(cè)才能知道。下列屬于目的基因檢測(cè)和鑒定的是()檢測(cè)受體細(xì)胞的染色體上是否有目的基因檢測(cè)受體細(xì)胞是否有致病基因檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA檢測(cè)目的基因是否翻譯出

20、了蛋白質(zhì)A BC D47 1.2 基因工程的基本操作程序問(wèn)題導(dǎo)析 (1)目的基因的檢測(cè)首先檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的 上是否插入了目的基因。(2)其次檢測(cè)目的基因是否。(3)最后檢測(cè)目的基因是否 。答案CDNA轉(zhuǎn)錄出了mRNA翻譯出了蛋白質(zhì)48 1.2 基因工程的基本操作程序一題多變 判斷正誤：(1)如果檢測(cè)出標(biāo)記基因表達(dá)的性狀，說(shuō)明載體已導(dǎo)入受體細(xì)胞。()(2)檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)是目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。()(3)DNA探針用來(lái)檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入。()(4)鑒定轉(zhuǎn)化的基因是否成功表達(dá)，在分子水平上可應(yīng)用的方法是抗原抗體雜交。()49 1.2 基因工程的基本操作程序課堂小結(jié)目

21、的基因的獲取利用PCR技術(shù)擴(kuò)增人工合成基因表達(dá)載體目的基因檢測(cè)與鑒定50 1.2 基因工程的基本操作程序?qū)c(diǎn)練習(xí) 1.基因工程的基本操作程序有：使目的基因與載體相結(jié)合；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；檢測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求；提取目的基因。正確的操作順序是()A BC D51 1.2 基因工程的基本操作程序解析基因工程的主要操作步驟順序是：目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)和鑒定。答案C52 1.2 基因工程的基本操作程序2.如圖為基因表達(dá)載體的模式圖，若結(jié)構(gòu)X是表達(dá)載體所必需的，則X最可能是 ()A氨芐青霉素抗性基因B啟動(dòng)子C限制酶DDNA連接酶53

22、1.2 基因工程的基本操作程序解析啟動(dòng)子是該表達(dá)載體所必需的，功能是啟動(dòng)插入基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。氨芐青霉素抗性基因可以作為標(biāo)記基因，但不是必須用它作標(biāo)記基因。限制酶和DNA連接酶都不是表達(dá)載體所需要的。答案B54 1.2 基因工程的基本操作程序3.下列關(guān)于基因表達(dá)載體導(dǎo)入微生物細(xì)胞的敘述中，不正確的是()A常用原核生物作為受體細(xì)胞，是因?yàn)樵松锓敝晨?，且多為單?xì)胞，遺傳物質(zhì)相對(duì)較少B受體細(xì)胞所處的一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)稱(chēng)為感受態(tài)C感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子需要適宜的溫度和酸堿度D感受態(tài)細(xì)胞吸收重組表達(dá)載體DNA分子的液體只要調(diào)節(jié)為適宜的pH即可，沒(méi)必要用緩沖液55 1.2 基因工程的基本操作程序解析將基因表達(dá)載體導(dǎo)入微生物細(xì)胞時(shí)，需在一定條件(如適宜的溫度、pH等)下，將基因表達(dá)載體和感受態(tài)的