克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)在陽性球菌藥敏實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用

1、    克林霉素誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)在陽性球菌藥敏實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用             作者：林立中，王曉飛，楊翠時(shí)間：2007-11-23 10:09:00                     【摘要】目的 探討陽性球菌中紅霉素誘導(dǎo)克林霉素耐藥性

2、的發(fā)生情況，合理指導(dǎo)臨床用藥。方法   MIC法檢測某院579株陽性球菌對克林霉素和紅霉素的耐藥情況;雙紙片法檢測可誘導(dǎo)克林霉素耐藥。結(jié)果   金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性球菌及溶血鏈球菌對紅霉素和克林霉素同時(shí)耐藥率分別占76.5%、50.8%、48.0%。在紅霉素耐藥而克林霉素敏感的菌株中，D實(shí)驗(yàn)陽性分別占65.0%、41.0%、34.0%。在紅霉素敏感株中未見克林霉素誘導(dǎo)性耐藥。結(jié)論   臨床微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)可誘導(dǎo)克林霉素耐藥性的檢測，指導(dǎo)臨床有效合理的使用抗生素。      【關(guān)

3、鍵詞】革蘭陽性球菌；紅霉素；克林霉素；D實(shí)驗(yàn)    The amplication of clisdamycin induction test in clinical microbiology susceptiability laboratories 【Abstract】 Objective   To investigate the resistance of erthromycin and clidamycin in Gram-positive coccus and help to reasonably use clindamycin. Me

4、thods   Use of MIC to detect 578 isolates randomly collected from January to September in our hospital, double antimicrobial agents detect the clidamycin induce test.Results   Co-resistance to erythromycin and clindamycin accounted for 76.5%,50.8%,48.0% in Staphylococcus aureus,c

5、oagulase-negative coccus and beta-hemolylic streptococcus.Among the 129 eryRcliS isolates,the rate of inducible resistance to clindamycin (D-test positive) was 65.0%,41.0%,34.0% respectivelly.For all the eryScliS isolates,clisdamycin induce test are negative.Conclusion   The detection of i

6、nducible clindamycin resistance must be stressed in clinical microbiology laboratory to provide good support for rational antibiotic therapy.【Key words】Gram-positive coccus;erythromycin;clindamycin;D-test大環(huán)內(nèi)酯類抗生素作用于細(xì)菌核糖體50S大亞基，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成，從而導(dǎo)致細(xì)菌死亡。靶位點(diǎn)的改變是葡萄球菌對大環(huán)內(nèi)酯類、林可霉素類、鏈陽菌素B等抗生素獲得性耐藥的主要機(jī)制，并對MLSB(大環(huán)內(nèi)

7、酯類、林可霉素類、鏈陽菌素B等抗生素)抗生素表現(xiàn)為交叉耐藥1,2。MLSB耐藥分為固有耐藥和誘導(dǎo)耐藥。若誘導(dǎo)耐藥則常規(guī)藥敏實(shí)驗(yàn)表現(xiàn)為紅霉素耐藥而克林霉素敏感，用雙紙片法進(jìn)行D實(shí)驗(yàn)時(shí)可見克林霉素抑菌圈靠近紅霉素一側(cè)出現(xiàn)彎曲的“D”形狀，盡管在缺乏誘導(dǎo)劑時(shí)細(xì)菌表現(xiàn)對克林霉素的敏感，但臨床用克林霉素治療無效。其耐藥機(jī)制可歸結(jié)為由msrA基因編碼的泵出機(jī)制，核糖體可誘導(dǎo)變異，核糖體結(jié)構(gòu)變異3。本實(shí)驗(yàn)通過雙紙片法檢測可誘導(dǎo)克林霉素耐藥的發(fā)生情況，提示可誘導(dǎo)克林霉素耐藥實(shí)驗(yàn)的必要性，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。1 材料1.1 細(xì)菌來源   收集某院2005年19月分離的陽性球菌579株（其中

8、金黃色葡萄球菌272株，凝固酶陰性球菌132株，溶血鏈球菌175株）。1.2 抗菌藥物紙片   紅霉素、克林霉素購于杭州天和微生物試劑有限公司。Mic法所用微生物生化、藥敏卡購于湖南天地人生物試劑有限公司。1.3 培養(yǎng)基   Mueller-Hinton(M-H)瓊脂培養(yǎng)基購于上海博塞科技發(fā)展有限公司。1.4 質(zhì)控菌株   金黃色葡萄球菌ATCC25932、金黃色葡萄球菌ATCCBAA977（陽性對照），金黃色葡萄球菌ATCCBAA-976（陰性對照）。2  方法2.1  利用MIC測定法規(guī)4  

9、; 采用獲衛(wèi)生部批準(zhǔn)的湖南天地人公司生產(chǎn)的生化藥敏實(shí)驗(yàn)卡進(jìn)行。2.2  雙紙片擴(kuò)散法5,6   據(jù)2004年NCCLS推薦在MH瓊脂平板上，分別貼紅霉素(15g/片)和克林霉素（2g/片）紙片。兩種紙片距離分別選用15mm、26mm，35培養(yǎng)1618h。用常規(guī)法取2紙片邊緣距離，若靠近紅霉素紙片處克林霉素紙片抑菌圈縮小或呈“D”形狀，則顯示為誘導(dǎo)型耐藥。2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法   利用SAS8.2軟件對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行2檢驗(yàn)。3 結(jié)果見表1。對克林霉素未進(jìn)行“D”實(shí)驗(yàn)?zāi)退幝逝c“D”實(shí)驗(yàn)后合計(jì)耐藥率進(jìn)行2檢驗(yàn)，P0.05，差異有顯著性。表1 &

10、#160; 紅霉素、克林霉素藥敏結(jié)果及D試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分布（略）注：ESCLS 紅霉素、克林霉素均敏感；ERCLR 紅霉素、克林霉素均耐藥；ERCLS 紅霉素耐藥、克林霉素敏感    紙片間距分別為15mm和26mm時(shí)誘導(dǎo)克林霉素耐藥的發(fā)生情況分布見表2。表2   兩紙片間距誘導(dǎo)克林霉素耐藥的發(fā)生情況分布（略）在15mm和26mm時(shí),陽性檢出率經(jīng)2檢驗(yàn)，P0.05,D實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異無顯著性。4  討論本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示金黃色葡萄球菌可誘導(dǎo)克林霉素耐藥的發(fā)生率為65%，較凝固酶陰性球菌（41%）和溶血鏈球菌（34%）高，由579株陽性球菌對克林霉素

11、耐藥性的分布情況可知，紅霉素敏感株中未出現(xiàn)克林霉素誘導(dǎo)耐藥，而紅霉素耐藥株中，克林霉素耐藥株也較多，且固有耐藥株占大部分，誘導(dǎo)耐藥株也有相當(dāng)比例?？傮w耐藥性與固有耐藥性之間的差異有顯著性意義，故有進(jìn)行“D”實(shí)驗(yàn)的必要性。紙片擴(kuò)散法測定時(shí)，抑菌圈結(jié)果于兩紙片間距在15mm時(shí)較26mm略明顯；但差異無顯著性；D實(shí)驗(yàn)被用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢測紅霉素對克林霉素的誘導(dǎo)耐藥性，簡單易行。能很好的避免不恰當(dāng)?shù)氖褂每肆置顾貙?dǎo)致治療的失敗。目前微量稀釋法和機(jī)器法藥敏尚不能檢出此種誘導(dǎo)耐藥，如不做實(shí)驗(yàn)，則不能正確報(bào)告。所以臨床微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)克林霉素誘導(dǎo)耐藥性的檢測，以保證克林霉素耐藥性檢出的準(zhǔn)確性，指導(dǎo)臨床醫(yī)生合理使用抗生素?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 趙先穎，徐元宏，江曉平.醫(yī)院感染葡萄球菌菌種變遷與耐藥近況.中國微生態(tài)學(xué)雜志，2003，1：40-43.2 李智山.葡萄球菌醫(yī)院感染及耐藥譜分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2004，14(6)：691-693.3 沈定霞，羅燕平，徐雅萍，等.葡萄球菌對紅霉素和克林霉素的誘導(dǎo)耐藥性研究.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005，18(4)：400-403.4 NCCLS.Performance standards for antimicr