健憶液對(duì)老年大鼠神經(jīng)、內(nèi)分泌及血液流變性的影響

1、    健憶液對(duì)老年大鼠神經(jīng)、內(nèi)分泌 及血液流變性的影響        摘要目的探討中藥健憶液益智抗衰老的作用及其機(jī)理。方法用21月齡大鼠作為衰老模型，6月齡大鼠為青年對(duì)照組，應(yīng)用健憶液進(jìn)行治療，檢測(cè)血漿皮質(zhì)醇、血液流變學(xué)及腦內(nèi)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的含量。結(jié)果健憶液能使老年大鼠皮質(zhì)醇含量下降；血液粘度改善；腦組織多巴胺(DA)、去甲腎上腺素(NE)、5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)含量升高，5-羥色胺(5-HT)含量降低，以至5-HT/NE、5HT/DA、5HT/5-HIA

2、A比值降低。給藥組與模型組比較差異有顯著性(P<0.05)，而與6月齡組比較差異無(wú)顯著性。結(jié)論健憶液具有延緩衰老的作用，其抗衰老作用可能與改善大鼠下丘腦-垂體-腎上腺軸功能衰退和血液流變性有關(guān)。關(guān)鍵詞健憶液抗衰老藥皮質(zhì)醇血液流變學(xué)神經(jīng)遞質(zhì)下丘腦-垂體-腎上腺軸中分類(lèi)號(hào)R925文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A EFFECTS OF “JIANYI ORAL LIQUID” ON THE NERVOUS, INTERNALSECRETION AND BLOOD RHEOLOGY IN OLD RATSWang JianyiJiang GuorongRen Guangrong(Institute of Tradi

3、tional Chinese Medicine,Suzhou,215003)AbstractObjectiveTo study the effect and mechanism of “Jianyi Oral Liquid(JYOL) in improving memory and preventing senility.MethodsThe experiment used 21-month old rats as models for aged and 6-month old rats as young cotrol group.They were treated with JYOL and

4、 subsequently the plasma cortisol,blood rheology,brain monoamine neurotransmitters were measured and the ratios of neurotransmitters were calculated.ResultsJYOL improved blood viscosity increased dopamina(DA),norepinephrine(NE),5-hydroxyindole dcefic acid (5-HIAA) and reduced 5-hydroxytryptamine(5-H

5、T) in brain tissue.Hence the ratios of 5-HT/NE,5-HT/DA,and 5-HT/5-HIAA were lowered JYOL decreased plasma Cortisol levels.There was a significant difference between the old model group and the group treated with JYOL.There was no significant difference,however,between the group treated with JYOL and

6、 the group of 6-month old rats.ConclusionsJYOL can benefit the brain,prevent senility and its function of anti-senility may be related to improving the deficiency of the hypothalamic-pituitary-adrenal and the blood rheology of old rats.KeywordsJianyi Oral LiquidAnti-AGING DRUGS(TCD)cortisolblood rhe

7、ologyNeurotransmitter hypothalamic-Pituitary-adrenal.隨著社會(huì)人口老齡化，人體衰老及衰老引起的疾病日益增加，而以學(xué)習(xí)記憶衰退為代表的智力障礙以及老年性癡呆是臨床常見(jiàn)疾病。為尋找有效的防衰老、益智健腦的藥物，我們應(yīng)用古方“讀書(shū)丸”等加味制成“健憶口服液”，對(duì)衰老模型大鼠進(jìn)行治療，測(cè)定腦內(nèi)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)；檢測(cè)血漿皮質(zhì)醇以及血液粘度，探討中藥健憶液益智抗衰老的作用機(jī)理。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康老年SD大鼠50只，21月齡，體重520620g，隨機(jī)分為老年模型組(組)、老年模型加健憶液小劑量組(組)、老年模型加健憶液大劑量組(組)、老年模型加腦

8、復(fù)康組(組)；6月齡青年對(duì)照組(組)10只，體重220280g。大鼠均為雄性，由蘇州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2藥物健憶液由生地黃15g、北五味12g、菖蒲5g、遠(yuǎn)志5g、川芎5g、地骨皮10g、生葛根10g、丹參10g組成，由我院制劑室經(jīng)水提及醇提濃縮成每毫升含2g生藥的口服液。健憶液小劑量組8g*kg-1、大劑量組16g*kg-1、腦復(fù)康組0.32g*kg-1，每日一次，連續(xù)灌胃1月。1.3檢測(cè)指標(biāo)1.3.1皮質(zhì)醇含量測(cè)定：動(dòng)物用戊巴比妥鈉麻醉后頸動(dòng)脈取血，采用北京北方生物技術(shù)研究所提供的放射免疫分析試劑盒測(cè)定皮質(zhì)醇含量，操作步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。1.3.2腦組織5-HT、5-HIAA、NE

9、及DA的測(cè)定參照王孝媛等1的方法。1.3.3大鼠血液流變學(xué)測(cè)定：大鼠麻醉后頸動(dòng)脈取血，分別抗凝，用普利生LBY-N6A自清洗旋轉(zhuǎn)式粘度計(jì)(北京)；CX4大型全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó))；CA-530血液分析儀(瑞典)；全液體纖維蛋白原免疫比濁法測(cè)定試劑盒(上海)等，測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。1.3.4本文實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用F檢驗(yàn)和SNK法進(jìn)行兩兩比較。2結(jié)果2.1健憶液對(duì)老年大鼠血漿皮質(zhì)醇的影響結(jié)果表明老年組大鼠皮質(zhì)醇含量最高，與小劑量組及腦復(fù)康組比較差異有顯著性，與6月齡組、大劑量組比較差異無(wú)顯著性。各用藥組之間比較差異亦無(wú)顯著性(見(jiàn)表1)。表1各組大鼠血漿皮質(zhì)醇含量的比較(x±s)組別大鼠(只)劑量

10、(g*kg-1)皮質(zhì)醇(g*L-1)組10等容積8.46±4.25組9等容積12.42±2.46組1086.86±4.38*組101610.63±3.40組100.326.30±2.25*     各組與組比較*P<0.05*P<0.01各組與組比較P<0.05P<0.01各組與組比較P<0.05P<0.01各組與組比較P<0.05P<0.01(下同)2.2健憶液對(duì)老年大鼠大腦皮質(zhì)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響結(jié)果表明5-HT含量老年組最高，與其它各組間差異有非常顯著

11、性；而6月齡組與各給藥組之間差異無(wú)顯著性。老年組NE、DA及5-HIAA含量均有下降，致使5-HT/NE、5-HT/DA及5-HT/5-HIAA比值老年組最高，與6月齡組比較差異有高度顯著性。各給藥組上述比值降低，與老年組比較差異有非常顯著性，而與6月齡組比較差異均無(wú)顯著性(見(jiàn)表2) 表2各組大鼠大腦皮質(zhì)5-HT、5-HIAA、NE、DA含量和5-HT/5-HIAA、5-HT/NE、5-HT/DA比值比較(<"0 (881 bytes)" src="/med/cano/201003/20100317193515484" 12 14>±

12、;s)組別大鼠5-HT5-HIAANEDA5-HT/5-HIAA5-HT/NE5-HT/DA(只)(mg*g-1組織濕重)100.18±0.04*0.53±0.060.19±0.020.39±0.040.34±0.08*0.97±0.19*0.47±0.11*100.26±0.030.49±0.050.18±0.020.36±0.030.53±0.061.45±0.150.75±0.09100.19±0.03*0.55±0.090.17

13、±0.030.37±0.050.34±0.06*1.09±0.12*0.56±0.10*100.18±0.03*0.55±0.100.19±0.030.40±0.040.35±0.09*0.96±0.12*0.47±0.08*100.16±0.03*0.39±0.07*0.15±0.02*0.32±0.050.43±0.091.06±0.15*0.51±0.10*   

14、0; 2.3健憶液對(duì)老年大鼠血液流變學(xué)的影響21月齡的老年大鼠與6月齡青年大鼠的各項(xiàng)血液流變學(xué)指標(biāo)相比較均明顯升高(P<0.05)。健憶液大小劑量組均能降低21月齡大鼠的全血粘度、血漿粘度、纖維蛋白原、紅細(xì)胞壓積、血沉及血沉方程K值等指標(biāo)，使之接近6月齡大鼠的水平，且作用優(yōu)于腦復(fù)康組，各項(xiàng)指標(biāo)與老年組大鼠相比差異有顯著性。(見(jiàn)表3) 表3各組大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較(<"0 (881 bytes)" src="/med/cano/201003/20100317193515484" 12 14>±s)組(n=10)組(n=

15、9)組(n=10)組(n=10)組(n=10)全血粘度高切(150s-1)10.3±1.44*12.7±1.609.8±2.5*9.7±1.40*9.9±2.90*全血粘度低切(10s-1)18.5±3.80*27.9±6.1620.9±6.43*18.0±8.21*21.7±5.56*血漿粘度(120s-1)1.44±0.33*1.93±0.131.57±0.34*1.54±0.32*1.90±0.23纖維蛋白原(g/L)0.27±0

16、.52*0.38±0.050.29±0.07*0.28±0.06*0.33±0.06紅細(xì)胞壓積(%)46.4±5.34*54.1±3.6448.9±3.78*47.4±5.93*49.1±3.84*血沉(mm/h)1.13±0.35*1.75±0.461.25±0.46*1.12±0.35*1.19±0.41*血沉方程K值5.67±1.60*12.08±2.806.46±2.01*5.66±3.88*6.06

17、7;2.94*     3討論 中醫(yī)衰老學(xué)說(shuō)認(rèn)為：衰老是生命過(guò)程中腎中精氣不斷衰減，陰陽(yáng)虧損，元?dú)獠蛔?，臟腑功能減退的生理病理變化的結(jié)局?，F(xiàn)代研究表明：中醫(yī)的“腎”與內(nèi)分泌，尤其是與下丘腦-垂體-腎上腺軸的功能密切相關(guān)。有資料表明老年人皮質(zhì)醇的分泌量與排泄率均比年輕人減少30%，但血清皮質(zhì)醇濃度及晝夜變化仍保持相對(duì)不變，這與老年人皮質(zhì)醇代謝緩慢有關(guān)2。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：老年組大鼠血漿皮質(zhì)醇含量略有增高，與6月齡組比較差異無(wú)顯著性，推測(cè)這與老年大鼠激素代謝緩慢及降解率降低有關(guān)。由于血中皮質(zhì)醇含量升高，可負(fù)反饋抑制下丘腦-垂體-腎上腺軸的功能3。實(shí)驗(yàn)大鼠應(yīng)

18、用健憶液后，血漿皮質(zhì)醇含量下降，其機(jī)理可能是藥物能提高大鼠對(duì)激素代謝、降解和排泄。但由于老年大鼠腎上腺皮質(zhì)的器質(zhì)性衰退，分泌激素的功能難以在短期內(nèi)恢復(fù)。用藥后血漿皮質(zhì)醇含量仍較低。但健憶液大劑量組皮質(zhì)醇含量升高，提示隨著用藥劑量加大，用藥時(shí)間延長(zhǎng)，腎上腺皮質(zhì)激素的分泌可能會(huì)逐漸增加。大腦及下丘腦內(nèi)存在大量DA和5-HT能神經(jīng)末梢，它們對(duì)高級(jí)活動(dòng)如情感、學(xué)習(xí)、記憶起重要作用4。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：老年大鼠大腦皮質(zhì)DA含量明顯降低，5-HT含量明顯升高，NE、5-HIAA則有所下降，以至5-HT/5-HIAA5-HT/NE、5-HT/DA的比值明顯升高。由此可以認(rèn)為：老年鼠腦內(nèi)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)DA、NE

19、等的降低，必將影響腺垂體的功能，進(jìn)而又使腎上腺功能下降。健憶液則能降低老年鼠腦組織5-HT含量，DA、NE、5-HIAA升高，使5-HT/5-HIAA、5-HT/NE、5-HT/DA等比值下降。NE在老年人下丘腦變化也有相同趨勢(shì)。一般認(rèn)為：遞質(zhì)與其主要代謝產(chǎn)物比值(T/M)降低意味著遞質(zhì)更新率增高或說(shuō)明神經(jīng)元活性增強(qiáng)45。由此提示健憶液對(duì)大鼠DA能及5-HT能神經(jīng)元可能有激活作用，從而改善衰老動(dòng)物下丘腦-垂體-腎上腺軸功能衰退達(dá)到益智健腦抗衰老的作用。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：老年大鼠全血粘度、血漿粘度、紅細(xì)胞壓積和纖維蛋白原等均明顯升高，呈血瘀樣改變。健憶液能夠明顯降低老年大鼠全血粘度和血漿粘度，使之接近6月齡大鼠水平；而降低血細(xì)胞比容與纖維蛋白元含量，可能是其降低血液粘度的途徑之一。這些作用