執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試免疫學(xué)免疫防治

1、魯東大學(xué)魯東大學(xué)王曉通王曉通天然被動免疫天然被動免疫天然主動免疫天然主動免疫人工被動免疫人工被動免疫人工主動免疫人工主動免疫第一節(jié)第一節(jié) 主動免疫和被動免疫主動免疫和被動免疫動物在感染某種病原微生物耐過后產(chǎn)生的對該病原體再次動物在感染某種病原微生物耐過后產(chǎn)生的對該病原體再次侵入的抵抗力稱為天然主動免疫侵入的抵抗力稱為天然主動免疫動物通過母體胎盤、初乳或卵黃從母體獲得某種特異動物通過母體胎盤、初乳或卵黃從母體獲得某種特異性抗體，從而獲得對某種病原體的免疫力，稱為天然性抗體，從而獲得對某種病原體的免疫力，稱為天然被動免疫。被動免疫。采用人工方法向機體輸入由別人或動物產(chǎn)生的免疫采用人工方法向機體輸入

2、由別人或動物產(chǎn)生的免疫效應(yīng)物，如免疫血清、淋巴因子等，使機體立即獲效應(yīng)物，如免疫血清、淋巴因子等，使機體立即獲得免疫力人工被動免疫得免疫力人工被動免疫接種抗原而獲得的免疫力人工主動免疫接種抗原而獲得的免疫力人工主動免疫 第二節(jié)第二節(jié) 疫苗的特征與制備疫苗的特征與制備疫苗如何起作用疫苗如何起作用?它們?nèi)绾紊L繁殖它們?nèi)绾紊L繁殖?它們?nèi)绾伪皇褂盟鼈內(nèi)绾伪皇褂?v指抗原疫苗 給無免疫個體接種v優(yōu)點：v - 長期保護v - 花費少v - 平安性高理想疫苗：有免疫原性提供長期保護 - 加強間隔長沒有反響原性，必須有免疫原性(免疫原性，是指可以刺激機體形成特異抗體或致敏淋巴細(xì)胞的才能。反響原性又稱抗原性

3、，是指能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反響)穩(wěn)定疫苗接種：保護個體保護群體 群體保護可以鏟除疾病有宏大的花費節(jié)省好處v測試免疫原性v衡量免疫原性v臨床實驗放射免疫參加指示劑酶聯(lián)免疫參加底物和 顏色改變v血清轉(zhuǎn)換率：指的是血清抗體免疫成功率，是指接種某種疫苗后能檢查到血清抗體的人數(shù)占總?cè)藬?shù)的百分比。v血清保護： - 接種疫苗后產(chǎn)生保護抗體接種者的百分率v幾何平均滴度：GMT=個體滴度的對數(shù)接種者人數(shù)一期臨床：安康人群的首次實驗20個左右的志愿者疫苗是否平安？疫苗是否有免疫原性？三期臨床：100-1000個人疫苗是否平安？疫苗是否有保護性？ - 疫苗的免疫原性與現(xiàn)存疫苗的比較？ -

4、 保護效果怎么樣？不同批次間是否有相似效果？二期臨床：50-200個安康志愿者什么是最好的： - 配方？ - 劑量？ - 規(guī)程？ - 方法？不同人群是如何被影響的？副反響監(jiān)控 四期臨床：上市后實驗副反響監(jiān)控補中數(shù)據(jù) - 新適應(yīng)癥 - 比較實驗 - 新規(guī)程v疫苗接種v疫苗接種副反響v疫苗存儲與發(fā)放v皮下 - 麻腮風(fēng)、水痘v肌肉 - 甲肝、乙肝、白百破v口服 - 脊灰v部分反響v - 在注射部位疼痛v - 紅斑v - 腫脹v全身反響v - 發(fā)熱v - 不適v注射危險由于技術(shù)差v超敏反響v - 使用腎上腺素v - 被接種者在附近觀察30分鐘v急性發(fā)熱疾病v懷孕v - 接種預(yù)防狂犬病除外減毒活疫苗：弱

5、毒苗保存于冰箱冷凍室(0以下)凍結(jié)保存溶解后盡快使用防止反復(fù)凍融假設(shè)距使用時間較短者(1-2天)置于2-15陰暗、枯燥的環(huán)境絕大部分疫苗：在冰箱+2到+8貯存不能冰凍一活疫苗一活疫苗弱毒疫苗：大多人工致弱弱毒疫苗：大多人工致弱異源疫苗：異源疫苗是用具有共同保護異源疫苗：異源疫苗是用具有共同保護性抗原的不同病毒制備成的疫苗性抗原的不同病毒制備成的疫苗 如：火雞皰疹病毒如：火雞皰疹病毒HVT接種預(yù)防接種預(yù)防雞馬立克氏病雞馬立克氏病毒力減弱的方法毒力減弱的方法: :v長時間在體外連續(xù)培養(yǎng)傳代：長時間在體外連續(xù)培養(yǎng)傳代：v在高于最適生長溫度條件下培養(yǎng)在高于最適生長溫度條件下培養(yǎng): :炭疽炭疽 v在含有

6、特殊物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)在含有特殊物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng): :卡介苗卡介苗 v在特殊氣體條件下培養(yǎng)在特殊氣體條件下培養(yǎng): : v通過非易感動物通過非易感動物: :豬丹毒通過豚鼠豬丹毒通過豚鼠370代后，又通代后，又通過雞過雞42代選育而成；豬瘟兔化弱毒代選育而成；豬瘟兔化弱毒 v通過基因工程的方法通過基因工程的方法: :去除毒力基因或用點突變，偽去除毒力基因或用點突變，偽狂犬基因缺失苗狂犬基因缺失苗 優(yōu)點：優(yōu)點：毒力弱或沒有毒力，但仍然保持著原有的抗毒力弱或沒有毒力，但仍然保持著原有的抗原性，可用較少的免疫劑量即或誘導(dǎo)產(chǎn)生堅原性，可用較少的免疫劑量即或誘導(dǎo)產(chǎn)生堅實的免疫力，實的免疫力，一般不須使用佐

7、劑，免疫期長，不影響動物一般不須使用佐劑，免疫期長，不影響動物產(chǎn)品的品質(zhì)產(chǎn)品的品質(zhì)有些弱毒病毒疫苗可刺激機體細(xì)胞產(chǎn)生干擾有些弱毒病毒疫苗可刺激機體細(xì)胞產(chǎn)生干擾素，對抵抗其他病毒強毒的感染也是有益的素，對抵抗其他病毒強毒的感染也是有益的缺點缺點許多弱毒株的致弱機制不明，有返強的危險許多弱毒株的致弱機制不明，有返強的危險研制周期長，有一定的偶爾性研制周期長，有一定的偶爾性運輸貯存不方便，一般需要凍干和低溫保存運輸貯存不方便，一般需要凍干和低溫保存v病原微生物經(jīng)理化方法滅活后，仍然保持免疫原病原微生物經(jīng)理化方法滅活后，仍然保持免疫原性，接種后使動物產(chǎn)生特異性抵抗力，這種疫苗性，接種后使動物產(chǎn)生特異性

8、抵抗力，這種疫苗稱為滅活疫苗稱為滅活疫苗killed vaccineskilled vaccines或死疫苗。或死疫苗。v目前所使用的滅活疫苗有組織滅活苗、油佐劑目前所使用的滅活疫苗有組織滅活苗、油佐劑滅活疫苗和氫氧化鋁膠滅活疫苗等。滅活疫苗和氫氧化鋁膠滅活疫苗等。滅活的方法滅活的方法最常用的是甲醛最常用的是甲醛0.4%溶液，滅活機制：溶液，滅活機制：作用于蛋白質(zhì)的氨基和酰胺基，以及核酸的嘌呤和作用于蛋白質(zhì)的氨基和酰胺基，以及核酸的嘌呤和嘧啶上的非氫鍵氨基團，形成交聯(lián)，使其構(gòu)造固嘧啶上的非氫鍵氨基團，形成交聯(lián)，使其構(gòu)造固定并喪失活力。定并喪失活力。其它的滅活劑還包括丙酮、乙醇、氧化乙烯等其它的

9、滅活劑還包括丙酮、乙醇、氧化乙烯等等。等。v優(yōu)點：研制周期短、使用平安和易于保存。優(yōu)點：研制周期短、使用平安和易于保存。v缺點：接種劑量大，免疫期較短，需參加適缺點：接種劑量大，免疫期較短，需參加適當(dāng)?shù)淖魟┮栽鰪娒庖咝Ч?，接種時反響較大，當(dāng)?shù)淖魟┮栽鰪娒庖咝Ч?，接種時反響較大，對肉品品質(zhì)有影響。對肉品品質(zhì)有影響。1.1.多糖蛋白結(jié)合疫苗多糖蛋白結(jié)合疫苗polysaccharide polysaccharide conjugate vaccinesconjugate vaccines是將多糖與蛋白載體如白喉、破傷風(fēng)或霍亂類是將多糖與蛋白載體如白喉、破傷風(fēng)或霍亂類毒素結(jié)合制成疫苗，這樣多糖抗原轉(zhuǎn)變

10、成為毒素結(jié)合制成疫苗，這樣多糖抗原轉(zhuǎn)變成為T T細(xì)胞信賴性抗原，能誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞信賴性抗原，能誘導(dǎo)產(chǎn)生IgGIgG和記憶淋巴和記憶淋巴細(xì)胞。細(xì)胞。如人的肺炎鏈球菌的多種血清型莢膜多糖蛋白載體如人的肺炎鏈球菌的多種血清型莢膜多糖蛋白載體疫苗。疫苗。v是將細(xì)菌外毒素經(jīng)甲醛脫毒，使其失去致病是將細(xì)菌外毒素經(jīng)甲醛脫毒，使其失去致病性而保存免疫原性的制劑，如破傷風(fēng)類毒素、性而保存免疫原性的制劑，如破傷風(fēng)類毒素、白喉類毒素、肉毒類毒素等等。白喉類毒素、肉毒類毒素等等。3.3.亞單位疫苗亞單位疫苗subunit vaccinesubunit vaccine利用微生物的某種外表構(gòu)造成分抗原利用微生物的某種外表構(gòu)

11、造成分抗原制成不含有核酸、能誘發(fā)機體產(chǎn)生抗體的制成不含有核酸、能誘發(fā)機體產(chǎn)生抗體的疫苗，稱為亞單位疫苗疫苗，稱為亞單位疫苗 。亞單位疫苗是將致病菌主要的保護性免疫原存亞單位疫苗是將致病菌主要的保護性免疫原存在的組分制成的疫苗在的組分制成的疫苗微生物的免疫原性構(gòu)造成分包括細(xì)菌的莢膜、微生物的免疫原性構(gòu)造成分包括細(xì)菌的莢膜、鞭毛和病毒的囊膜、膜粒、衣殼蛋白等。鞭毛和病毒的囊膜、膜粒、衣殼蛋白等。v用基因工程技術(shù)將具有免疫保護力的蛋白質(zhì)基用基因工程技術(shù)將具有免疫保護力的蛋白質(zhì)基因克隆，并進展表達，以獲得亞單位疫苗的方因克隆，并進展表達，以獲得亞單位疫苗的方法法v常用的表達表達系統(tǒng)有大腸桿菌、酵母和病

12、常用的表達表達系統(tǒng)有大腸桿菌、酵母和病毒等等。毒等等。重組載體的構(gòu)重組載體的構(gòu)建建重組質(zhì)粒的表達如大重組質(zhì)粒的表達如大腸桿菌中腸桿菌中概念：概念：基因工程重組活載體疫苗基因工程重組活載體疫苗recombinant recombinant living vectored vaccinesliving vectored vaccines是用基因工程是用基因工程技術(shù)將保護性抗原基因轉(zhuǎn)移到載體中使之表技術(shù)將保護性抗原基因轉(zhuǎn)移到載體中使之表達的活疫苗。達的活疫苗。有多種可用于活載體的疫苗：如痘病毒、腺病毒有多種可用于活載體的疫苗：如痘病毒、腺病毒和皰疹病毒。和皰疹病毒。v基因缺失疫苗基因缺失疫苗gene

13、 deleted vaccinesgene deleted vaccines是是用基因工程技術(shù)將強毒株毒力相關(guān)基因切除用基因工程技術(shù)將強毒株毒力相關(guān)基因切除構(gòu)建的活疫苗構(gòu)建的活疫苗 v該類疫苗平安性好、不易返祖；其免疫接該類疫苗平安性好、不易返祖；其免疫接種與強毒感染相似，機體可對病毒的多種種與強毒感染相似，機體可對病毒的多種抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答；免疫力堅實，免疫期抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答；免疫力堅實，免疫期長。長。v如：偽狂犬病毒的如：偽狂犬病毒的tKtK基因缺失疫苗基因缺失疫苗v核酸疫苗核酸疫苗(nucleic acid vaccines)(nucleic acid vaccines)包括包括 DNA

14、 DNA疫疫苗和苗和RNARNA疫苗，由編碼能引起保護性免疫反響的疫苗，由編碼能引起保護性免疫反響的病原體抗原基因片段和載體構(gòu)建而成。病原體抗原基因片段和載體構(gòu)建而成。v導(dǎo)入機體的方式主要是肌肉注射，或用基因槍導(dǎo)入機體的方式主要是肌肉注射，或用基因槍將帶有基因的金粒子注入。將帶有基因的金粒子注入。v合成肽疫苗合成肽疫苗synthetic peptide vaccines )synthetic peptide vaccines )是用化學(xué)合成法人工合成病原微生物生物的保是用化學(xué)合成法人工合成病原微生物生物的保護性多肽，并將其連接到大分子載體上，再參護性多肽，并將其連接到大分子載體上，再參加佐劑制

15、成的疫苗。加佐劑制成的疫苗。v最早報道最早報道19801980成功的是口蹄疫多肽疫苗成功的是口蹄疫多肽疫苗v表位疫苗表位疫苗epitope vaccinesepitope vaccines是通過確定抗是通過確定抗原蛋白上的原蛋白上的B B細(xì)胞、細(xì)胞、THTH細(xì)胞以及細(xì)胞以及CTLCTL細(xì)胞識別的細(xì)胞識別的表位，經(jīng)人工合成，并與大分子載體連接，參表位，經(jīng)人工合成，并與大分子載體連接，參加佐劑制成；加佐劑制成；v也可通過基因工程技術(shù)表達抗原蛋白表位多肽，也可通過基因工程技術(shù)表達抗原蛋白表位多肽，或表達與大分子蛋白的交融蛋白制成。或表達與大分子蛋白的交融蛋白制成。v免疫途徑免疫途徑v 滴鼻、點眼、刺

16、種、注射、飲水、氣霧等。滴鼻、點眼、刺種、注射、飲水、氣霧等。v免疫程序免疫程序v 根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閭魅静?、動物人機體根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閭魅静?、動物人機體狀況主要是指母源及后天獲得的抗體消長情狀況主要是指母源及后天獲得的抗體消長情況以及現(xiàn)有疫況以及現(xiàn)有疫( (菌菌) )苗的性能苗的性能, ,為使動物機體為使動物機體獲得穩(wěn)定的免疫力獲得穩(wěn)定的免疫力, ,選用適當(dāng)?shù)囊呙邕x用適當(dāng)?shù)囊呙? ,安排在適安排在適當(dāng)?shù)臅r間給動物人進展免疫接種當(dāng)?shù)臅r間給動物人進展免疫接種, ,這就叫這就叫免疫程序免疫程序immune procedureimmune procedure，簡單地說是，簡單地說是免疫方案免疫方案immuni

17、zation scheduleimmunization schedule。A certain dose of vaccine (usually 0.1ml to 0.2ml) is injected in the abdominal area of each fish held with the ventral side up and the head away from the operators body. v在廣東地區(qū)普遍進展草魚土法疫苗的注射，效果非常好。v在200-300克左右注射一次，在1000克左右注射一次。v有專業(yè)性的疫苗制備、注射隊伍。v選擇已經(jīng)患爛鰓、出血、腸炎等疾病的草魚

18、。v病癥愈典型、患病種類愈多愈好。v病魚剛死亡不久或瀕臨死亡的草魚最好。v將病魚按照體重參加10倍量0 .85%的生理鹽水，用組織搗碎機搗碎，或用刀剁碎成肉漿。v用離心機在3000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，或用多層紗布進展過濾，得到濾液，放棄殘渣。v取濾液裝入大燒杯或瓶中，并放在水浴鍋或其他恒溫水浴里保溫，保溫水浴鍋的水位應(yīng)該高于濾液的液面高度。v保溫溫度：631度。v保溫時間：恒溫2小時進展滅活。v在保溫過程中逐漸參加40%福爾馬林，使福爾馬林在濾液中的濃度到達1%。一邊攪拌一邊參加福爾馬林溶液。v將已經(jīng)滅活好的疫苗濾液裝入滅菌的瓶中，封口，冰箱臨時保存。v最好在2-3天內(nèi)使用完。v需要注射的草魚最好先進展鍛煉和麻醉處理。v主要前草魚應(yīng)該停食1天，將草魚捕撈并在捆箱中保持2-3小時，并用3%左右食鹽潑灑捆箱中草魚。v或者：在桶或水泥池中，配制0.4-0.8%的食鹽水或0.05-0.2%的晶體敵百蟲溶液，將主要草魚放置其中2-3分鐘消毒和 麻醉后再進展注射。v在注射前10-20分鐘，在制備