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1、微微 生生 物物的概念的概念 微生物(microorganism):是 于自然界癿一大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、肉眼直接看不見,借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍,甚至數(shù)萬倍才能觀察到癿微小生物。 微微生物的種類生物的種類 真核細(xì)胞型微生物細(xì)胞核有核膜和核仁,細(xì)胞器完整,如真菌。 原核細(xì)胞型微生物僅有原始核,無核膜、核仁。細(xì)胞器很 善。DNA和RNA同時(shí) 。有細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。 非細(xì)胞型微生物是最小癿一類微生物。無典型癿細(xì)胞結(jié)構(gòu),只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。核酸類型為DNA或RNA。 屬之。 總結(jié)總結(jié) 三型八大類(三菌四體一三型八大類(三菌四體一 ) 真核:真核
2、:真菌真菌 原核:原核:細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。 非細(xì)胞非細(xì)胞: 第一單元 細(xì)菌的形態(tài)細(xì)菌的形態(tài) 細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu) 細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu) 細(xì)菌的染色細(xì)菌的染色 細(xì)菌癿結(jié)構(gòu)與生理 細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖細(xì)菌的代謝細(xì)菌的代謝 細(xì)菌的人工培養(yǎng)細(xì)菌的人工培養(yǎng) 第第一節(jié)一節(jié) 細(xì)細(xì)菌的菌的大大小及形態(tài)小及形態(tài) 1. 細(xì)菌癿大?。洪L(zhǎng)度 癿大?。洪L(zhǎng)度 :微米(m) :納米(nm) 2.細(xì)菌癿形態(tài): 球菌球菌 桿菌桿菌 菌菌 細(xì)菌癿群體形態(tài) 菌落菌落:?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)菌在適當(dāng)?shù)墓腆w培養(yǎng)基表面或內(nèi)部單個(gè)細(xì)菌在適當(dāng)?shù)墓腆w培養(yǎng)基表面
3、或內(nèi)部, ,經(jīng)過一經(jīng)過一 段時(shí)間培養(yǎng)后,生長(zhǎng)繁殖出數(shù)量巨大的菌體,形成肉眼可段時(shí)間培養(yǎng)后,生長(zhǎng)繁殖出數(shù)量巨大的菌體,形成肉眼可見、有一定形態(tài)的群體。見、有一定形態(tài)的群體。 可用于細(xì)菌的分離、純化、計(jì)數(shù)和鑒定。可用于細(xì)菌的分離、純化、計(jì)數(shù)和鑒定。 菌苔菌苔: :各各“菌落菌落”相互連接形成一片。相互連接形成一片。 第二節(jié):細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)及特殊結(jié)構(gòu)第二節(jié):細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)及特殊結(jié)構(gòu) 基本基本 細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核體細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核體結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu) 特殊特殊 結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu) 莢膜、莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽胞層、鞭毛、菌毛、芽胞 細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)及特殊結(jié)構(gòu)細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)及特殊結(jié)構(gòu) 細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)細(xì)菌
4、的基本結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁細(xì)胞壁 重點(diǎn):重點(diǎn):G+ 菌與菌與G- 菌細(xì)胞壁的比較菌細(xì)胞壁的比較 脂脂多糖多糖 外外 膜膜蛋白蛋白磷磷脂脂 菌特有 外外膜膜 革革蘭氏蘭氏 菌細(xì)胞壁菌細(xì)胞壁 內(nèi)壁層(肽聚糖)內(nèi)壁層(肽聚糖) G+ 菌與菌與G- 菌細(xì)胞壁的比較菌細(xì)胞壁的比較 革蘭氏陽性 厚 15-80nm 多 40%-95% 革蘭氏 薄 10-15nm 少 10%-20% 厚度 肽聚糖 脂類 少 1%-4% 多 11%-22% 磷壁酸 磷脂 外膜蛋白脂多糖 有 無 無 無 有 有 外膜 無 有 由于肽聚糖結(jié)構(gòu)不同,G+ 菌對(duì)青霉素敏感,而菌對(duì)青霉素敏感,而G- 菌不敏感。菌不敏感。 細(xì)細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型(細(xì)菌
5、菌細(xì)胞壁缺陷型(細(xì)菌L L型型) 細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型(bacterial L form):細(xì)胞壁受損后仍能生長(zhǎng) 和 癿細(xì)菌。 革蘭陽性菌肽聚糖層受損后,原生質(zhì)僅被一層細(xì)胞膜包住原生質(zhì) 體。 革蘭 菌肽聚糖層受損后尚有外膜保護(hù)原生質(zhì)球。 無論其原為革蘭陽性或 菌,形成L L型大多染成革蘭 。 細(xì)菌L型在高滲癿培養(yǎng)基上生長(zhǎng)后形成煎蛋型癿菌落。 油煎蛋樣菌落油煎蛋樣菌落 (典型(典型L型菌落)型菌落) 細(xì)菌癿基本結(jié)構(gòu)細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核體 細(xì)胞膜:不真核細(xì)胞生物膜基本相同。 細(xì)胞質(zhì):有各種酶系統(tǒng)、核糖體、質(zhì)粒、包含物等。 核糖體:不真核細(xì)胞丌同,抗菌素作用部位 質(zhì)粒: 外遺傳物質(zhì),不遺傳變異有關(guān)
6、核體: 露的雙鏈DNA堆積而成,無核膜和核仁,又稱擬核。 第三節(jié):細(xì)菌癿特殊結(jié)構(gòu) 莢莢膜膜: 化化學(xué)組成學(xué)組成:多糖或多肽 功功能:能:抗吞噬作用、粘附作用、抗有害物質(zhì)損傷作用。 鞭鞭毛毛:化化學(xué)組成:學(xué)組成:鞭毛蛋白 功能:功能:運(yùn)動(dòng) 、與致病有關(guān)、鑒定分類細(xì)菌。 菌毛菌毛:化學(xué)組成:化學(xué)組成:菌毛蛋白 功能:功能:與致病有關(guān)、性菌毛與遺傳變異有關(guān)。 芽胞芽胞:為細(xì)菌休眠形式 功能:功能:對(duì)外界的抵抗力增加,可發(fā)芽成繁殖體有致病性。 第四節(jié):細(xì)菌癿染色 1,革蘭氏染色法(革蘭氏染色法(原理為細(xì)胞壁的肽聚糖的厚度) 2 2, 染色法染色法 3 3,特殊染色法,特殊染色法 (1 1) 抗酸染色法
7、抗酸染色法 一般對(duì)細(xì)胞壁中含有豐富蠟質(zhì)的細(xì)菌(如結(jié)核分支桿菌)染一般對(duì)細(xì)胞壁中含有豐富蠟質(zhì)的細(xì)菌(如結(jié)核分支桿菌)染色。色。 (2 2) 芽孢、莢膜和鞭毛的染色法芽孢、莢膜和鞭毛的染色法 第第五節(jié):五節(jié):細(xì)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖菌的生長(zhǎng)繁殖 1,繁殖方式:二 2 2,細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖,細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖 遲遲 ,對(duì)數(shù)期,對(duì)數(shù)期, 期,衰亡期期,衰亡期 生長(zhǎng)曲線四個(gè)時(shí)期特點(diǎn): 遲遲 代謝活躍, 幵積累所需酶系統(tǒng) ;RNA含量明顯增多,但DNA的量無變化; 細(xì)菌數(shù)幵丌增加 對(duì)數(shù)期 致病力最強(qiáng),其形態(tài)、染色特性及生理活性均較典型,對(duì)抗 菌 等的作用較為敏感。 新繁殖的活菌數(shù)不死菌數(shù)大致平衡 ,營(yíng)養(yǎng)的消 耗
8、、代謝產(chǎn)物的蓄積、抗生素的產(chǎn)生等。 期 衰亡期 死菌數(shù)超過活菌數(shù),如丌秱植到新的培養(yǎng)基,最終可全部 , 此期細(xì)菌的菌體變形戒自溶,染色丌典型,難以進(jìn)行鑒定 。 第六節(jié):第六節(jié): 細(xì)細(xì)菌的代謝菌的代謝 一、細(xì)菌的基本代謝過程一、細(xì)菌的基本代謝過程 二、細(xì)菌的二、細(xì)菌的 代謝產(chǎn)物及其作用代謝產(chǎn)物及其作用 熱原質(zhì);毒素;侵襲性酶類;色素;細(xì)菌素;抗生素;維生素?zé)嵩|(zhì);毒素;侵襲性酶類;色素;細(xì)菌素;抗生素;維生素 三、細(xì)菌的分解代謝與生化反應(yīng)三、細(xì)菌的分解代謝與生化反應(yīng) 氧化發(fā)酵試驗(yàn);氧化酶試驗(yàn);過氧化氫酶試驗(yàn);氧化發(fā)酵試驗(yàn);氧化酶試驗(yàn);過氧化氫酶試驗(yàn);VPVP試驗(yàn);甲基紅試驗(yàn);試驗(yàn);甲基紅試驗(yàn);
9、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn);吲哚試驗(yàn);硫化氫試驗(yàn);尿素酶試驗(yàn)。枸櫞酸鹽利用試驗(yàn);吲哚試驗(yàn);硫化氫試驗(yàn);尿素酶試驗(yàn)。 第七節(jié):細(xì)菌的人工培養(yǎng)第七節(jié):細(xì)菌的人工培養(yǎng) 基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基:選擇培養(yǎng)基:分離細(xì)菌。鑒別培養(yǎng)基:鑒別培養(yǎng)基:鑒別細(xì)菌。厭氧培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基:混濁、沉淀、菌膜 半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基: 0.5%瓊脂,作穿刺試驗(yàn),檢測(cè)運(yùn)動(dòng)性(鞭毛有無)。 固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基:看菌落形態(tài)。 第2單元 細(xì)菌癿 正常菌群 細(xì)菌癿致病性 細(xì)菌癿耐藥性 第1節(jié) 正常菌群 一、正常菌群的概念一、正常菌群的概念 在動(dòng)物體各部分正常寄居而對(duì)動(dòng)物在動(dòng)物體各部分
10、正常寄居而對(duì)動(dòng)物無害無害的細(xì)菌稱的細(xì)菌稱為正常菌群為正常菌群 二、動(dòng)物體內(nèi)正常菌群的分布二、動(dòng)物體內(nèi)正常菌群的分布 體表,消化道,呼吸道,泌尿生殖道體表,消化道,呼吸道,泌尿生殖道 三、正常菌群的生理作用三、正常菌群的生理作用 生物頡頏作用;營(yíng)養(yǎng)作用;免疫作用生物頡頏作用;營(yíng)養(yǎng)作用;免疫作用 第2節(jié):細(xì)菌癿致病性 定性定性 細(xì)菌是否有致病性,經(jīng)典的依據(jù)是細(xì)菌是否有致病性,經(jīng)典的依據(jù)是 法則法則 - -特殊的病原菌應(yīng)在同一疾病中特殊的病原菌應(yīng)在同一疾病中 - -此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種 ,在健康者不,在健康者不 (分離)(分離) (病原)病原) - -此純培養(yǎng)
11、物接種易感動(dòng)物,能導(dǎo)致同樣病癥此純培養(yǎng)物接種易感動(dòng)物,能導(dǎo)致同樣病癥 (接種)(接種) - -自實(shí)驗(yàn)自實(shí)驗(yàn) 的動(dòng)物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng)的動(dòng)物體內(nèi)能重新獲得該病原菌的純培養(yǎng) (再分離)(再分離) 定量定量 就某種病原菌而言,其致病性一般通過測(cè)定就某種病原菌而言,其致病性一般通過測(cè)定LD50LD50以及以及ID50ID50來來定量。定量。 1.1.半數(shù)致死量(半數(shù)致死量(medianmedian lethallethal dose,dose, LD50LD50) 是指能使接種的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在是指能使接種的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在 需的微生物量或毒素量。需的微生物量或毒素量。 后一定時(shí)限內(nèi)后一定時(shí)限內(nèi) 一半
12、所一半所 2.2.半數(shù)半數(shù) 量(量(medianmedian infectiousinfectious dose,dose, ID50ID50) 某些病原微生物只能某些病原微生物只能 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、雞胚或細(xì)胞,但不引致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、雞胚或細(xì)胞,但不引致 ,可用,可用ID50ID50來表示其毒力。來表示其毒力。 細(xì)菌癿毒力因子 侵襲力:侵襲力:定殖定殖 體內(nèi)增殖體內(nèi)增殖 干擾宿主防御機(jī)制干擾宿主防御機(jī)制 體內(nèi)擴(kuò)散體內(nèi)擴(kuò)散 細(xì)菌的毒力因素細(xì)菌的毒力因素 外毒素外毒素(exotoxin) 毒素毒素 內(nèi)毒素內(nèi)毒素(endotoxin) 細(xì)細(xì)菌外毒素和內(nèi)毒素的基本特性比較菌外毒素和內(nèi)毒素的基本特性比較 特特性性
13、 外外毒素毒素 內(nèi)內(nèi)毒素毒素 產(chǎn)產(chǎn)生生 由由某些革蘭某些革蘭陽陽性性菌菌或或 菌菌 由由革蘭革蘭 菌菌菌體裂解產(chǎn)生菌體裂解產(chǎn)生 毒性作用毒性作用 特異性特異性。為細(xì)胞毒素、。為細(xì)胞毒素、腸毒素腸毒素或神或神經(jīng)毒素,對(duì)特定的細(xì)胞或組織發(fā)揮經(jīng)毒素,對(duì)特定的細(xì)胞或組織發(fā)揮特定作用特定作用 全身性全身性。致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐。致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐 致熱性致熱性 對(duì)宿主不致熱對(duì)宿主不致熱 致熱性,致熱性, 宿主發(fā)熱宿主發(fā)熱 能否產(chǎn)生類毒素能否產(chǎn)生類毒素 能能,用,用 處理處理 不能不能 免疫原性免疫原性 強(qiáng)強(qiáng),刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體(抗毒,刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體(抗毒 較弱較弱,免疫應(yīng)答不足以中和毒,免疫應(yīng)答不
14、足以中和毒素)素) 性性 毒性程度毒性程度 高高,往往致死,往往致死 弱弱,很少致死,很少致死 耐熱性耐熱性 通常不耐熱通常不耐熱 極為耐熱極為耐熱 化化學(xué)性質(zhì)學(xué)性質(zhì) 蛋蛋白質(zhì)白質(zhì) 脂脂多糖多糖 癿類型(區(qū)分概念) 隱隱 染染 是是指病原體侵入指病原體侵入 后,僅引起機(jī)體發(fā)生特異性免疫應(yīng)答,后,僅引起機(jī)體發(fā)生特異性免疫應(yīng)答, 不不出現(xiàn)或只出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀、體征。出現(xiàn)或只出現(xiàn)不明顯的臨床癥狀、體征。 但但往往是傳染往往是傳染源。源。 染染 顯顯 指病原體侵入指病原體侵入 后,由于毒力強(qiáng)、后,由于毒力強(qiáng)、 數(shù)量多,加之機(jī)體數(shù)量多,加之機(jī)體 的免疫病理反應(yīng),導(dǎo)致組織損傷,生理功能發(fā)生改變,并出的
15、免疫病理反應(yīng),導(dǎo)致組織損傷,生理功能發(fā)生改變,并出 現(xiàn)一系列臨床癥狀和體征?,F(xiàn)一系列臨床癥狀和體征。 帶菌狀態(tài)帶菌狀態(tài) 顯性或隱顯性或隱 染后,病原菌在體內(nèi)繼續(xù)留存一段時(shí)間,與機(jī)染后,病原菌在體內(nèi)繼續(xù)留存一段時(shí)間,與機(jī) 體免疫力處于相對(duì)平衡狀態(tài),稱為帶菌狀態(tài)。處于帶菌狀態(tài)體免疫力處于相對(duì)平衡狀態(tài),稱為帶菌狀態(tài)。處于帶菌狀態(tài) 的動(dòng)物稱為帶菌者。的動(dòng)物稱為帶菌者。 第3節(jié):細(xì)菌癿耐藥性 略(藥理詳細(xì)講解) 第三單元 細(xì)菌 癿 樣本的樣本的 細(xì)菌的分離鑒定細(xì)菌的分離鑒定 第1節(jié) 樣本癿 (了解) 1 1,無菌操作,無菌操作 2 2,根據(jù)不同疾病或同一疾病不同時(shí)期,根據(jù)不同疾病或同一疾病不同時(shí)期 不同
16、的標(biāo)本不同的標(biāo)本 3 3, 部位不要使用部位不要使用 劑劑 4 4,樣本要新鮮,樣本要新鮮, 5 5,大多樣樣品可冷藏,大多樣樣品可冷藏/ /凍輸送,糞便樣本常加入甘油緩沖凍輸送,糞便樣本常加入甘油緩沖液液 6 6,對(duì)疑似烈性傳染病或人畜共患病標(biāo)本,要嚴(yán)格按相關(guān)生,對(duì)疑似烈性傳染病或人畜共患病標(biāo)本,要嚴(yán)格按相關(guān)生物安全規(guī)定進(jìn)行。物安全規(guī)定進(jìn)行。 7 7,做好標(biāo)記。,做好標(biāo)記。 第2節(jié) 細(xì)菌癿分離鑒定(了解) 一、常規(guī)細(xì)菌學(xué)檢測(cè)一、常規(guī)細(xì)菌學(xué)檢測(cè) 細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)檢查細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)檢查 分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)生化試驗(yàn) 敏感試驗(yàn)敏感試驗(yàn) 二、血清學(xué)檢測(cè)二、血清學(xué)檢測(cè) 抗原檢測(cè)抗原檢測(cè) 抗體檢測(cè)抗體
17、檢測(cè) 三、三、 檢測(cè)檢測(cè) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCRPCR 核酸雜交技術(shù)核酸雜交技術(shù) 第4單元 與滅菌 基本概念基本概念 物理滅菌法物理滅菌法 化學(xué)化學(xué) 滅菌滅菌 第1節(jié) 基本概念(掌握區(qū)分) 滅菌滅菌(sterilization)(sterilization) 殺滅物體上所有微生物殺滅物體上所有微生物的的 , 芽胞、霉菌孢子在內(nèi)的全部芽胞、霉菌孢子在內(nèi)的全部 病原微生物和非病原微生物。病原微生物和非病原微生物。 (disinfection)(disinfection) 殺滅物體上病原微生物的殺滅物體上病原微生物的 ,僅要求達(dá)到消除傳染性僅要求達(dá)到消除傳染性的目的,而對(duì)非病的目的,而對(duì)
18、非病 原微生物及其芽胞、孢子并不嚴(yán)格要求全部殺死。原微生物及其芽胞、孢子并不嚴(yán)格要求全部殺死。 防腐防腐(antisep(antisepsis) sis) 或抑制或抑制物品上微生物生物品上微生物生 長(zhǎng)繁殖的長(zhǎng)繁殖的 ,微生物不一定,微生物不一定 。 無菌無菌(asepsis)(asepsis) 意為不意為不 活的微生物活的微生物。采取防。采取防 止或杜絕任何微生物進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體或其他物體的止或杜絕任何微生物進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體或其他物體的 ,稱為無菌法。以無菌法進(jìn)行的操作稱為無,稱為無菌法。以無菌法進(jìn)行的操作稱為無菌技術(shù)或無菌操作。菌技術(shù)或無菌操作。 第2節(jié):物理滅菌法 溫溫 度度 輻射輻射 干干 燥燥
19、 物理因素物理因素 超聲波超聲波 微微 波波 濾過除菌濾過除菌 溫度滅菌 1. 低溫:意義:保存菌種、毒種、 等 2. 干熱滅菌法 a,火焰滅菌法 :火焰直接燒灼,如接種環(huán) . b,熱空氣滅菌法 :滅菌溫度需160維持2 h 。 3. 濕熱滅菌法 a,煮沸滅菌 : 用于飲水。 b,巴氏 法:低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原菌 (1) 低溫維持巴氏 法 636530min (2) 高溫瞬時(shí)巴氏 法 717215s (3) 超高溫巴氏 法 13212s c,流通蒸汽滅菌法 d,間歇滅菌法 (反復(fù)多次流通蒸汽) e,高壓蒸汽滅菌法:121.3溫度下維持1520min 。 輻射 濾過除菌 濾過除菌濾過除菌
20、:通過機(jī)械阻留作用將液體或空氣中的細(xì)菌等微 生物除去的 。但濾過除菌常不能除去 、霉形體、 支原體以及細(xì)菌L型等小顆粒。主要用于不耐高溫的營(yíng)養(yǎng) 液、血清、抗菌素、空氣等除菌。 第第3 3節(jié)節(jié) 化化學(xué)學(xué) 滅菌法滅菌法(藥理詳細(xì)講解)藥理詳細(xì)講解) 一、常用一、常用 劑的種類及應(yīng)用劑的種類及應(yīng)用 劑劑 二、影響二、影響 劑的因素劑的因素 含氯含氯 劑的性質(zhì)、濃度和作劑的性質(zhì)、濃度和作 用時(shí)間用時(shí)間 溫度和酸堿度溫度和酸堿度 細(xì)菌的種類、數(shù)量和狀態(tài)細(xì)菌的種類、數(shù)量和狀態(tài)有機(jī)物有機(jī)物 過氧化物類過氧化物類 酚類酚類堿類堿類醛類醛類醇類醇類 含碘含碘 劑劑 季銨鹽類季銨鹽類 第第五單元五單元 主主要的動(dòng)
21、物病原菌要的動(dòng)物病原菌 球菌球菌 腸桿菌科腸桿菌科 巴氏桿菌科及相關(guān)屬巴氏桿菌科及相關(guān)屬 革蘭氏革蘭氏 需氧桿菌需氧桿菌 革蘭氏陽性無芽孢桿菌革蘭氏陽性無芽孢桿菌 革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌分支桿菌分支桿菌 螺旋體螺旋體支原體支原體 真菌真菌 革蘭氏陽性菌和革蘭氏 菌癿分類 ,白結(jié)核,芽孢球菌除淋膜, 若問芽孢菌有何,炭氣腫疽破三梭, 這些細(xì)菌均陽性,其他細(xì)菌 注解:注解: 李:李氏桿菌李:李氏桿菌 丹毒:丹毒桿菌丹毒:丹毒桿菌白:白喉白:白喉 結(jié)核:結(jié)核桿菌結(jié)核:結(jié)核桿菌淋:淋: 膜:腦膜炎球菌膜:腦膜炎球菌炭:炭疽桿菌炭:炭疽桿菌 氣腫疽:氣腫疽氣腫疽:氣腫疽破:破傷風(fēng)梭菌破
22、:破傷風(fēng)梭菌 多。 第一節(jié):球菌 考點(diǎn): (1)鏈球菌屬豬鏈球菌(溶血性、形態(tài)、培養(yǎng)、病 變、 ) (2)蜂房球菌 (培養(yǎng)) 鏈球菌在血平板上癿溶血現(xiàn)象分為 型溶血鏈球菌 在菌落周圍形成不透明的草綠色 溶血環(huán),紅細(xì)胞未溶解,血紅蛋白變成綠色。致 病力不強(qiáng),多為機(jī)會(huì)致病菌。 型溶血鏈球菌 菌落周圍形成完全透明的溶血環(huán), 紅細(xì)胞完全溶解。這 動(dòng)物各種疾病。 致病力強(qiáng),常引起人及 型溶血鏈球菌 致病菌。 菌落周圍無溶血現(xiàn)象。一般為非 記憶口訣:記憶口訣:綠、綠、全、全、無無 豬鏈球菌:形態(tài)、培養(yǎng)、病變、 形態(tài):鏈狀 培養(yǎng):營(yíng)養(yǎng)要求復(fù)雜。在血液瓊脂平板上形成灰白色、表面光滑、邊緣整齊、直徑0.5-0.
23、75mm的細(xì)小菌落。 病變:可致豬腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、 、心內(nèi)膜炎、多發(fā)性漿膜炎、 和局部膿仲。 :標(biāo)本的 : 檢驗(yàn) : (一)直接檢查: 可直接涂片,革蘭氏染色鏡檢。 (二)分離培養(yǎng): 在涂片前先接種血平板,3724-48h。觀察菌落形態(tài)和溶血情況。然后涂片染色鏡檢。 (三)細(xì)菌鑒定:菌落形態(tài)、溶血特性、細(xì)菌形態(tài)、生化特性。如定群、定型,則要作血清學(xué)試驗(yàn)。PCR。 蜂房球菌(培養(yǎng)特性)蜂房球菌(培養(yǎng)特性) 歐洲幼蟲腐臭病病原為蜂房球菌。一種蜜蜂幼蟲病害。歐洲幼蟲腐臭病病原為蜂房球菌。一種蜜蜂幼蟲病害。 培養(yǎng)特性:培養(yǎng)特性:高營(yíng)養(yǎng)厭氧,最適溫度高營(yíng)養(yǎng)厭氧,最適溫度34 C. 第第2 2節(jié)節(jié) 腸桿菌
24、科腸桿菌科 考點(diǎn): 大腸埃希氏菌、沙門氏菌特征、流行特征、病理特點(diǎn)。大腸埃希氏菌、沙門氏菌特征、流行特征、病理特點(diǎn)。 大腸埃希氏菌、沙門氏菌鑒別要領(lǐng)大腸埃希氏菌、沙門氏菌鑒別要領(lǐng) 大大腸埃希氏菌腸埃希氏菌 沙沙門氏菌門氏菌 病病原特性原特性 麥 瓊脂上形成紅色菌落,伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬光澤菌落;致病菌株在綿羊血平板上呈型溶血;生化特性:糖發(fā)酵試驗(yàn)(大多發(fā)酵乳糖);IMViC試驗(yàn)+-; 麥 瓊脂上形成無色透明小菌落。生化特性:IMViC試驗(yàn):-+-+;多數(shù)菌株H2S陽性。 注:麥 培養(yǎng)基是專門檢測(cè)大腸和 H2S 記憶口訣:記憶口訣: 黑黑 沙門的培養(yǎng)基,所以看到麥 就要想到大腸和沙門。
25、流行癥狀流行癥狀 消化道傳染(幼畜致?。?消化道傳染(青、幼動(dòng)物) 病理特征病理特征 仔豬黃、白?。?仔豬水腫?。?腸道外 (腹膜炎等)雞白?。浑u傷寒 麥麥 瓊脂上形成紅色菌落(大腸)瓊脂上形成紅色菌落(大腸) 伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬光澤菌落伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生黑色帶金屬光澤菌落 (大腸桿菌)(大腸桿菌) 麥麥 瓊脂培養(yǎng)基:發(fā)酵乳糖(大腸桿菌);瓊脂培養(yǎng)基:發(fā)酵乳糖(大腸桿菌); 不發(fā)酵乳糖(沙門氏菌)不發(fā)酵乳糖(沙門氏菌) 第第3 3節(jié)節(jié) 巴巴氏桿菌科及相關(guān)屬氏桿菌科及相關(guān)屬 考點(diǎn):以下四種菌的病原特征、流行癥狀、病理考點(diǎn):以下四種菌的病原特征、流行癥狀、病理 。 巴氏桿菌屬(Paste
26、urella 多殺巴氏桿菌病 里氏桿菌屬(Riemerella) 鴨疫里氏桿菌病 放線桿菌屬(Actinobacillus) 豬傳染性胸膜 桿菌屬(Haemophilus) 豬副豬 桿菌病 病病原特征原特征 流流行癥狀、病理行癥狀、病理 球桿狀或短桿狀菌,兩 -急性型呈 性敗血癥迅速死 端鈍圓,病料涂片用瑞氏染色或美藍(lán)染色時(shí), 可見典型的兩極著色。 亡,如牛 性敗血癥、豬肺疫、 巴巴氏桿菌屬氏桿菌屬 (多殺性巴氏桿菌)多殺性巴氏桿菌) 禽霍亂、兔巴氏桿菌病等; -慢性型則呈現(xiàn)萎縮性鼻炎(豬、 在血瓊脂平板上培養(yǎng)24h, 羊)、關(guān)節(jié)炎及局部化膿性炎癥等。 長(zhǎng)成水滴樣小菌落。 里里氏桿菌屬氏桿菌屬
27、 (鴨疫里氏桿菌)(鴨疫里氏桿菌) 菌體呈桿狀或橢圓形, 染色可見兩極著色。在巧克力或胰蛋白胨大 豆瓊脂(TSA)平板上, CO2培養(yǎng)箱或蠟燭缸中。 雛鴨傳染性漿膜炎 放線桿菌屬放線桿菌屬 新鮮病料呈兩極染色; 豬是本菌專一宿主。引起豬的傳染 需添加V因子;可產(chǎn)生穩(wěn)定的溶血,金黃色葡 性胸膜 。 (胸膜(胸膜菌)菌) 放線桿放線桿 萄球菌可增強(qiáng)其溶血圈 (CAMP試驗(yàn)陽性) 桿菌屬桿菌屬 桿菌)桿菌) 美蘭染色呈兩極染色; 生長(zhǎng)需要X因子和V因子。 時(shí)將可疑菌落接種鮮血平板再 接 菌培養(yǎng),越靠近 菌越大, (副豬(副豬 呈現(xiàn)“ 現(xiàn)象”。 巧克力平板生長(zhǎng) 第4節(jié) 革蘭氏 需氧桿菌 考點(diǎn):三種菌的
28、病原特征、流行癥狀、病理 ,重點(diǎn)為布魯氏菌。 布魯氏菌屬布魯氏菌屬-布魯氏菌布魯氏菌 菌屬菌屬-鼻疽鼻疽 波氏菌屬波氏菌屬-支支 菌菌 敗血波氏菌敗血波氏菌 一、布氏桿菌屬(布氏桿菌)一、布氏桿菌屬(布氏桿菌) 病原特 球桿狀,無鞭毛,不形成芽孢。革蘭氏 。胞內(nèi)寄生菌,專 征 性需氧。生長(zhǎng)緩慢。赤蘚糖醇可刺激某些菌株生長(zhǎng)。 染色法染成紅色。 流行特 易感動(dòng)物較多,可經(jīng)皮膚、結(jié)膜、消化道、呼吸道等途徑 。 點(diǎn) 馬爾他布氏桿菌( )豬布氏桿菌 布氏桿菌 鼠布氏桿菌犬布氏桿菌綿羊布氏桿菌。 癥狀病 生殖系統(tǒng)。故病畜主要表現(xiàn)為 炎、 炎、乳腺炎、 理特點(diǎn) 炎等。孕期動(dòng)物對(duì)布氏桿菌最敏感, 后常引起 。
29、 病原學(xué)檢查:形態(tài)、染色 血清學(xué)檢查:凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 反應(yīng)檢測(cè):不宜作早期 。布氏桿菌水解素注射,觀察紅腫反應(yīng)。 二、二、 菌屬菌屬-鼻疽鼻疽 菌菌 鼻疽 菌舊名鼻疽假單胞菌,為馬、騾、驢等單蹄獸鼻單蹄獸鼻 疽疽的病原,也能 人,其他家畜和多種野生動(dòng)物, 是一種 共患的重要病原。 1. 形態(tài)與染色:革蘭氏 2. 培養(yǎng)及生化特性:專性需氧 3.致病性及毒力因子: 動(dòng)物,人可 。雄性豚鼠感 染可至典型 4.微生物學(xué) 炎,稱為 反應(yīng)。 : 反應(yīng)(反應(yīng)原為鼻疽菌素);生物 安全等級(jí)3級(jí);血清學(xué)檢查 三、波氏桿菌:支 敗血波氏菌 最初從犬中分離,可 多種哺乳動(dòng)物 1. 形態(tài)與染色:革蘭氏 2.
30、培養(yǎng)及生化特性: 3. 致病性及毒力因子:犬傳染性支 炎 4.微生物學(xué) :細(xì)菌學(xué)檢查;血清學(xué)檢查。 第第5 5節(jié)節(jié) 革革蘭氏陽性無芽孢桿菌蘭氏陽性無芽孢桿菌 考點(diǎn):李氏桿菌的病原特征、流行癥狀、病理考點(diǎn):李氏桿菌的病原特征、流行癥狀、病理 。 李氏桿菌屬李氏桿菌屬-產(chǎn)單核細(xì)菌李氏桿菌產(chǎn)單核細(xì)菌李氏桿菌 可引起人和動(dòng)物的李氏桿菌病??梢鹑撕蛣?dòng)物的李氏桿菌病。 1.1.形態(tài)與染色:形態(tài)與染色: 革蘭氏陽性,無芽孢革蘭氏陽性,無芽孢2.2.培養(yǎng)及生化特性:培養(yǎng)及生化特性: 培養(yǎng)基上長(zhǎng)成培養(yǎng)基上長(zhǎng)成露滴狀小菌落露滴狀小菌落, 型溶血,型溶血,2525 C C培養(yǎng),周培養(yǎng),周 生鞭毛,有運(yùn)動(dòng)性,生鞭毛
31、,有運(yùn)動(dòng)性,半固體明膠穿刺半固體明膠穿刺沿穿刺線呈沿穿刺線呈 長(zhǎng)。長(zhǎng)。 3.3.致病性及毒力因子:致病性及毒力因子: 生生 多種動(dòng)物多種動(dòng)物 4.4.微生物學(xué)微生物學(xué) ,敗血癥,敗血癥, : 等等 增菌后分離培養(yǎng);動(dòng)物試驗(yàn):小鼠;血清學(xué)鑒定增菌后分離培養(yǎng);動(dòng)物試驗(yàn):小鼠;血清學(xué)鑒定 第6節(jié) 革蘭氏陽性產(chǎn)芽孢桿菌 考點(diǎn):炭疽芽孢桿菌及產(chǎn)氣莢膜桿菌的病原特點(diǎn)、癥狀、病考點(diǎn):炭疽芽孢桿菌及產(chǎn)氣莢膜桿菌的病原特點(diǎn)、癥狀、病 理理 。 芽孢桿菌屬芽孢桿菌屬-炭疽芽孢桿菌炭疽芽孢桿菌 梭菌屬梭菌屬-產(chǎn)氣莢膜桿菌產(chǎn)氣莢膜桿菌 炭炭疽芽孢桿菌疽芽孢桿菌 產(chǎn)產(chǎn)氣莢膜氣莢膜梭菌梭菌 病病原原特特點(diǎn)點(diǎn) 菌菌體平直、
32、呈體平直、呈竹竹節(jié)狀節(jié)狀,明膠明膠穿穿刺培養(yǎng),呈刺培養(yǎng),呈倒倒 ,表表面面液化呈漏斗狀。菌落邊緣液化呈漏斗狀。菌落邊緣呈呈卷卷發(fā)樣發(fā)樣。串串珠反應(yīng)珠反應(yīng)。 舊舊名:魏氏梭菌菌名:魏氏梭菌菌。落。落多為圓形、多為圓形、光光滑、隆起、灰白色的滑、隆起、灰白色的圓圓屋頂樣屋頂樣; 血血平板上,多數(shù)菌株有平板上,多數(shù)菌株有雙雙層溶血環(huán)層溶血環(huán), 內(nèi)內(nèi)環(huán)完全溶血,外環(huán)環(huán)完全溶血,外環(huán) 全溶血。全溶血。本本菌最突出的生化特性是對(duì)牛乳培菌最突出的生化特性是對(duì)牛乳培養(yǎng)養(yǎng)基的基的“暴暴烈發(fā)酵烈發(fā)酵” 癥狀及癥狀及病理診病理診斷斷 癥狀:癥狀:七竅七竅 : 細(xì)菌學(xué)檢測(cè):病原特點(diǎn)細(xì)菌學(xué)檢測(cè):病原特點(diǎn) 血清學(xué)檢測(cè):(
33、)血清學(xué)檢測(cè):()AscoliAscoli 沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng):用加熱抽提待檢:用加熱抽提待檢炭疽菌體多糖抗原與已知抗炭疽菌體多糖抗原與已知抗體進(jìn)行的沉淀試驗(yàn)。體進(jìn)行的沉淀試驗(yàn)。 ()() 間接血凝試驗(yàn)間接血凝試驗(yàn) ()協(xié)同凝()協(xié)同凝集試驗(yàn)集試驗(yàn) ()()串珠熒光抗體串珠熒光抗體檢查檢查 ()瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)()瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 癥狀:腸道疾病。癥狀:腸道疾病。本菌分為本菌分為5 5個(gè)型:個(gè)型: A A型:人氣性壞疽和型:人氣性壞疽和 ; ;動(dòng)動(dòng)物物氣性壞疽和腸毒血癥氣性壞疽和腸毒血癥 B B型:羔羊痢疾;動(dòng)物腸毒血癥和壞型:羔羊痢疾;動(dòng)物腸毒血癥和壞死性腸炎死性腸炎 C C型:綿羊猝狙;動(dòng)物腸毒血癥
34、和壞型:綿羊猝狙;動(dòng)物腸毒血癥和壞死性腸炎;人壞死性腸炎死性腸炎;人壞死性腸炎 D D型:動(dòng)物腸毒血癥型:動(dòng)物腸毒血癥 E E型:犢牛、羔羊腸毒血癥型:犢牛、羔羊腸毒血癥 :病原特點(diǎn):病原特點(diǎn) 菌落邊緣卷發(fā)樣菌落邊緣卷發(fā)樣 竹節(jié)狀竹節(jié)狀 串珠反應(yīng)串珠反應(yīng) 雙層溶血環(huán)雙層溶血環(huán) 第7節(jié) 分枝桿菌屬 考點(diǎn):兩種菌的病原特點(diǎn)、癥狀、病理考點(diǎn):兩種菌的病原特點(diǎn)、癥狀、病理 。 牛分枝桿菌牛分枝桿菌 副結(jié)核分枝桿菌副結(jié)核分枝桿菌 牛牛分枝桿菌分枝桿菌 副副結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌 病病原特原特點(diǎn)點(diǎn) 革革蘭氏陽性菌,細(xì)胞壁蘭氏陽性菌,細(xì)胞壁有有特殊的糖脂,不易著特殊的糖脂,不易著色色,而,而抗抗酸染色為紅
35、酸染色為紅色色; 專專性需氧菌,性需氧菌,對(duì)對(duì)營(yíng)養(yǎng)要營(yíng)養(yǎng)要求求嚴(yán) 格 ,嚴(yán) 格 , 二氏培養(yǎng)二氏培養(yǎng)基基上上才能生長(zhǎng),但生長(zhǎng)才能生長(zhǎng),但生長(zhǎng)緩慢。緩慢。 菌落粗糙,呈菌落粗糙,呈顆粒、結(jié)顆粒、結(jié)節(jié)或花菜樣,乳白色或節(jié)或花菜樣,乳白色或米黃色。米黃色。 分枝桿菌可被制成分枝桿菌可被制成免疫免疫佐劑佐劑(卡介苗卡介苗)得到普)得到普遍應(yīng)用。遍應(yīng)用。 抗抗酸染色酸染色陽陽性性;在病料和培養(yǎng)基上在病料和培養(yǎng)基上成成叢排列叢排列;生長(zhǎng)及其緩慢。生長(zhǎng)及其緩慢。 癥狀癥狀 胞內(nèi)寄生。引起牛結(jié)核胞內(nèi)寄生。引起牛結(jié)核病,病灶干酪樣壞死病,病灶干酪樣壞死 胞內(nèi)寄生,間歇性腹瀉,增生性腸胞內(nèi)寄生,間歇性腹瀉,增生性
36、腸炎。炎。 反應(yīng)反應(yīng) 反應(yīng)反應(yīng) 菌落菌落 第第8 8節(jié)節(jié) 螺螺旋體旋體 豬痢短螺旋體豬痢短螺旋體 1.1.形態(tài)與染色:形態(tài)與染色: 2 2- -4 4個(gè)彎曲;個(gè)彎曲; 2.2. 培養(yǎng)及生化特性:嚴(yán)格厭氧;培養(yǎng)及生化特性:嚴(yán)格厭氧; 3.3. 致病性及毒力因子:致病性及毒力因子:引起豬痢疾引起豬痢疾,又名血痢、黑痢。,又名血痢、黑痢。 4.4. 微生物學(xué)微生物學(xué) 第第9 9節(jié)節(jié) 支支原體原體 支支原體,是一類無細(xì)胞壁的細(xì)菌,是目前已知能在無生命的培養(yǎng)基中原體,是一類無細(xì)胞壁的細(xì)菌,是目前已知能在無生命的培養(yǎng)基中 繁繁殖的殖的最最小小微微生物。生物。 病病原特征:原特征: (1 1) )無無細(xì)胞壁
37、細(xì)胞壁,細(xì)胞柔軟,細(xì)胞柔軟,多多形性形性,能能通通過細(xì)菌濾器過細(xì)菌濾器 (2)(2)在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖,形成在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖,形成“煎荷包蛋狀煎荷包蛋狀”菌落菌落 (3)(3)含有含有DNADNA和和RNARNA (4)(4)以二以二 或芽生方式繁殖或芽生方式繁殖 (5)(5)對(duì)青霉素有抵抗力對(duì)青霉素有抵抗力 致病性: 雞毒支原體雞毒支原體 禽慢性呼吸道疾病、火雞傳染性禽慢性呼吸道疾病、火雞傳染性 豬支原體豬支原體 豬氣喘病豬氣喘病 牛支原體牛支原體 牛傳染性胸膜牛傳染性胸膜 ,又稱牛肺疫,又稱牛肺疫 第第1010節(jié)節(jié) 真菌真菌 一、白僵菌一、白僵菌 引起家蠶的白僵病。引起家蠶的白僵
38、病。 1.1. 生長(zhǎng)發(fā)育周期及形態(tài)特征生長(zhǎng)發(fā)育周期及形態(tài)特征 2.2. 白僵菌的代謝產(chǎn)物白僵菌的代謝產(chǎn)物 3.3. 分生孢子的生存力與抵抗力分生孢子的生存力與抵抗力 二、蜜蜂球囊菌變種(蜜蜂病原)二、蜜蜂球囊菌變種(蜜蜂病原) 醫(yī)幫醫(yī)幫 第六單元 基本特性 的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu) 的基本結(jié)構(gòu)的基本結(jié)構(gòu) 的化學(xué)組成的化學(xué)組成的分類的分類 的增殖的增殖 的培養(yǎng)的培養(yǎng) 及其特點(diǎn)及其特點(diǎn) 的細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng) 后產(chǎn)生的細(xì)胞病后產(chǎn)生的細(xì)胞病變、包含體及空斑變、包含體及空斑 的的 的檢測(cè)的檢測(cè) 急急 持續(xù)持續(xù) 染染 染染 1、 癿結(jié)構(gòu) 的概念: 形體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,僅含有1種核酸DNA或RNA,具有超 級(jí)寄生性,且
39、必須在電子顯微鏡下才能觀察到的一類非細(xì)胞形態(tài)的微生物。 大小與形態(tài)大小與形態(tài) 大小:測(cè)量大小:測(cè)量 的的 為為納米納米(nm)(nm) , 痘痘 最大最大,約,約300nm300nm; 圓環(huán)圓環(huán) 最小最小,約,約17nm17nm。 與細(xì)菌的區(qū)別與細(xì)菌的區(qū)別 微生物微生物 人工培養(yǎng)基上上癿生長(zhǎng) 二等 DNADNA和RNARNA 核糖體 對(duì)抗生素癿敏感性 對(duì)干擾素癿敏感性 細(xì)菌 含含1 1種種 露 囊膜 DNA/RNA, 芯髓芯髓 組組: 雙股雙股/單股,單股, (核酸核酸) 分段分段/不分段不分段 核衣殼核衣殼 (基本結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu)) 衣殼衣殼 殼粒殼粒 多肽多肽 粒子粒子 (形態(tài)亞形態(tài)亞 ) (
40、結(jié)構(gòu)亞結(jié)構(gòu)亞 ) 囊膜:有纖突囊膜:有纖突 (非基本結(jié)構(gòu)非基本結(jié)構(gòu)) 纖突 殼粒 衣殼 殼 囊膜 顆粒結(jié)構(gòu)模式圖 芯髓 核衣 2、 癿化學(xué)組成 核酸 蛋白質(zhì) 脂質(zhì) 碳水化合物 (1 1)核酸核酸: 1 1,決定決定 的遺傳和變異。的遺傳和變異。 2 2, 只含一種只含一種核酸,核酸, 體的芯髓。體的芯髓。 3 3,核酸類型,核酸類型多樣化多樣化:?jiǎn)喂?、雙股、分節(jié)段、不分節(jié)段。:?jiǎn)喂?、雙股、分節(jié)段、不分節(jié)段。 4 4, 核酸更易受宿主細(xì)胞的影響而發(fā)生核酸更易受宿主細(xì)胞的影響而發(fā)生 突變和重組突變和重組。 5 5,有些,有些 去除囊膜和衣殼,去除囊膜和衣殼, 露的露的DNADNA或或RNARNA,
41、也能,也能 細(xì)胞,這樣的核酸稱為細(xì)胞,這樣的核酸稱為 性核酸性核酸。 核酸線狀、分節(jié)段核酸線狀、分節(jié)段 核核酸雙股環(huán)狀酸雙股環(huán)狀 (2)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 1.1.非非結(jié)構(gòu)蛋白結(jié)構(gòu)蛋白:指由指由 組編碼的,在組編碼的,在 或或 表達(dá)調(diào)控過程中具有一定功能,表達(dá)調(diào)控過程中具有一定功能, 但但不結(jié)合于不結(jié)合于 顆粒中的蛋白質(zhì)。顆粒中的蛋白質(zhì)。 2 2. . 結(jié)構(gòu)蛋白結(jié)構(gòu)蛋白:系指:系指 一個(gè)形態(tài)成一個(gè)形態(tài)成 有有 性性 的的 顆粒所必需的蛋白質(zhì)。是顆粒所必需的蛋白質(zhì)。是 衣殼衣殼 的全部成分和囊膜的主要成分。的全部成分和囊膜的主要成分。 蛋白質(zhì)的作用:蛋白質(zhì)的作用: 1,保護(hù)保護(hù) 素的破壞。素的破壞。2
42、,參與參與 胞的親嗜性。胞的親嗜性。 核酸核酸,使其免受核酸酶或其它理化因,使其免受核酸酶或其它理化因 細(xì)胞的過程,決定細(xì)胞的過程,決定 對(duì)宿主細(xì)對(duì)宿主細(xì) 3,抗原性抗原性:誘導(dǎo)特異性抗體、致敏淋巴細(xì)胞。:誘導(dǎo)特異性抗體、致敏淋巴細(xì)胞。 (三)脂類、糖類三)脂類、糖類 主要主要 于囊膜于囊膜中,中,脂溶劑可去除囊膜脂溶劑可去除囊膜,使,使 喪失活性。喪失活性。 來來自宿主細(xì)胞自宿主細(xì)胞,與囊膜,與囊膜 的吸附和穿入宿主細(xì)的吸附和穿入宿主細(xì) 胞的作用有關(guān)。胞的作用有關(guān)。 3、 癿分類 國(guó)際國(guó)際 分類分類委員會(huì)委員會(huì)(InternationalInternational committeecomm
43、ittee onon taxonomytaxonomy ofof es,es, ICTVICTV),是國(guó)際公認(rèn)的),是國(guó)際公認(rèn)的 分類分類 與命名的權(quán)威機(jī)構(gòu)。與命名的權(quán)威機(jī)構(gòu)。 19611961年年LoLooperoper建議,以建議,以 核酸作為核酸作為 分類的首要標(biāo)準(zhǔn)分類的首要標(biāo)準(zhǔn), 從此從此 分類開始形成較合理的框架。分類開始形成較合理的框架。 其命名與細(xì)菌不同,不再采用拉丁文雙名法,而是采用英其命名與細(xì)菌不同,不再采用拉丁文雙名法,而是采用英文或英語化的拉丁文,只用單名文或英語化的拉丁文,只用單名 科下科下設(shè)屬,有的科還分亞科,設(shè)屬,有的科還分亞科,科和屬是科和屬是 。 分類的最主要分
44、類的最主要 第第2 2節(jié)節(jié) 的增殖的增殖 是嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生微生物,培養(yǎng)是嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生微生物,培養(yǎng) 必須必須 使用細(xì)胞。根據(jù)使用細(xì)胞。根據(jù) 的不同選用敏感動(dòng)物(的不同選用敏感動(dòng)物(動(dòng)物動(dòng)物 接種接種)、雞胚()、雞胚(雞胚接種雞胚接種)或離體細(xì)胞進(jìn)行分離)或離體細(xì)胞進(jìn)行分離 培養(yǎng)(培養(yǎng)(細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng))。)。 1、 癿培養(yǎng) 及其優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 動(dòng)物接種 (1) 不需要復(fù)雜的儀器 ; (2) 技術(shù)簡(jiǎn)單; (3) 易 (1) 差異大 (2) 價(jià)格貴 (3) 數(shù)量有限 (4) 需要 畜舍 雞胚接種 技術(shù)簡(jiǎn)單、來源充沛、價(jià)格低 很多 不能適應(yīng), 廉、數(shù)量可大,不需特殊 主要是哺乳動(dòng)物的病毒。
45、 細(xì)胞培養(yǎng) 每個(gè)細(xì)胞生理特性基本一致; 對(duì) 易感性相等無 差 異;準(zhǔn)確性和重復(fù)性好可嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作;細(xì)胞培養(yǎng)本身就能顯示 的生長(zhǎng)特征;應(yīng) 設(shè)杯要求嚴(yán)格、專業(yè)技術(shù)要求嚴(yán)格 用空斑技術(shù)可進(jìn)行 的克隆化 。 2、 的細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞類型:用于細(xì)胞類型:用于 分離與培養(yǎng)的細(xì)胞有分離與培養(yǎng)的細(xì)胞有原代細(xì)胞原代細(xì)胞、二倍二倍 體細(xì)胞株體細(xì)胞株和和傳代細(xì)胞系傳代細(xì)胞系,一般說來,本動(dòng)物的原代細(xì)胞最,一般說來,本動(dòng)物的原代細(xì)胞最 為敏感,但不如傳代細(xì)胞方便易得。為敏感,但不如傳代細(xì)胞方便易得。 培養(yǎng)培養(yǎng) :靜置培養(yǎng);旋轉(zhuǎn)培養(yǎng);懸浮培養(yǎng);微載體培養(yǎng):靜置培養(yǎng);旋轉(zhuǎn)培養(yǎng);懸浮培養(yǎng);微載體培養(yǎng) 3 3、
46、后產(chǎn)生的細(xì)胞病變、包含體及空班后產(chǎn)生的細(xì)胞病變、包含體及空班 細(xì)胞病變(細(xì)胞病變(CPECPE) 導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞病變導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞病變 作用:計(jì)算測(cè)定作用:計(jì)算測(cè)定 力力,半數(shù)細(xì)胞 量(TCID50) 包含體包含體 是指某些是指某些 細(xì)胞產(chǎn)生的特征性的形態(tài)變化,可能細(xì)胞產(chǎn)生的特征性的形態(tài)變化,可能過固定染色而后在光學(xué)顯微鏡下檢測(cè)。過固定染色而后在光學(xué)顯微鏡下檢測(cè)。 狂犬狂犬 包涵體(包涵體(Negri body) 皰疹皰疹 的的“貓頭鷹眼貓頭鷹眼” 空斑空斑 將適當(dāng)濃度的將適當(dāng)濃度的 懸液加入單層細(xì)胞培養(yǎng)中,當(dāng)懸液加入單層細(xì)胞培養(yǎng)中,當(dāng) 吸附吸附 細(xì)胞后,再覆蓋一層融化的瓊脂。
47、細(xì)胞后,再覆蓋一層融化的瓊脂。 在細(xì)胞內(nèi)在細(xì)胞內(nèi) 后產(chǎn)后產(chǎn) 生局限生局限 灶,病灶逐漸擴(kuò)大,肉眼也能看見,此即灶,病灶逐漸擴(kuò)大,肉眼也能看見,此即空斑空斑試驗(yàn)。試驗(yàn)。 作用:純化 、對(duì) 定量(PFU)、測(cè)定血清效價(jià)、測(cè)定干擾素活性。 第3節(jié) 癿 急急 染染 病程較短,從幾天至至2-3周不等,伴有明顯的典型癥狀。 潛潛伏伏 隱 染,在 后無任何臨診癥狀而呈隱蔽經(jīng) 持續(xù)持續(xù) 染染 過的 。 亞臨床型、潛伏期型、恢復(fù)期型。 慢慢 染染 病程發(fā)展緩慢,常在 1 以上,臨診癥狀常不明顯甚至不表現(xiàn)出來。 持續(xù)持續(xù)染染 動(dòng)物長(zhǎng)期持續(xù)的 狀態(tài)。由于 的 不能殺死宿主細(xì)胞,因而兩者之間形成共生平衡,感染動(dòng)物可長(zhǎng)
48、期或終生帶毒,并經(jīng)常或反復(fù)不定期地向體外排出 ,但常缺乏或出現(xiàn)與免疫病理 反應(yīng)有 診癥狀。 遲發(fā)性臨遲發(fā)性臨床癥狀的床癥狀的急急 染染 此類 的持續(xù)性 與疾病進(jìn)程無關(guān)。 第4節(jié) 癿檢測(cè) 病料的病料的 與準(zhǔn)備與準(zhǔn)備 與與 樣本的樣本的 分離前的處理分離前的處理 的分離和鑒定的分離和鑒定 的分離和培養(yǎng)的分離和培養(yǎng)的鑒定的鑒定 的測(cè)定的測(cè)定 空斑試驗(yàn)空斑試驗(yàn)終點(diǎn)稀終點(diǎn)稀 的的 1, 病料癿 與準(zhǔn)備 樣本的樣本的 與與 分離前的處理分離前的處理 或組織樣本或組織樣本如肺臟、腦、肝、脾、淋巴結(jié)等,如肺臟、腦、肝、脾、淋巴結(jié)等, 的的 可取一小塊進(jìn)行充分研磨,加入含青、鏈霉素的可取一小塊進(jìn)行充分研磨,加入
49、含青、鏈霉素的HanksHanks液,液, 離心取上清液作為接種物;離心取上清液作為接種物; 鼻液、膿汁、乳液汁等鼻液、膿汁、乳液汁等 物或滲出液物或滲出液、糞便,應(yīng)加入高、糞便,應(yīng)加入高 濃度的抗生素,充分混勻后,置濃度的抗生素,充分混勻后,置4 4度冰箱內(nèi)處理度冰箱內(nèi)處理2424小時(shí)或小時(shí)或 過夜,離心后取上過夜,離心后取上 接種用;接種用; 拭子拭子在取樣后應(yīng)迅速將其浸泡入含有在取樣后應(yīng)迅速將其浸泡入含有2%2%犢牛血清和一定濃犢牛血清和一定濃度的青、鏈霉素的度的青、鏈霉素的HanksHanks液中,充分涮洗棉拭子,反復(fù)凍液中,充分涮洗棉拭子,反復(fù)凍融融3 3- -5 5次,離心后取上清
50、液作為接種材料。次,離心后取上清液作為接種材料。 2, 癿分離和鑒定 的分離和培養(yǎng):的分離和培養(yǎng):細(xì)胞培養(yǎng);雞胚;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng);雞胚;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 采用細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行采用細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行 分離時(shí),應(yīng)盲傳分離時(shí),應(yīng)盲傳3 3代代 形態(tài)學(xué)鑒定:形態(tài)學(xué)鑒定:電鏡電鏡 的血清學(xué)鑒定:的血清學(xué)鑒定:中和試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、免疫熒光中和試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、免疫熒光 等。等。 生物學(xué)鑒定:生物學(xué)鑒定:PCRPCR 特性的測(cè)定:特性的測(cè)定:核酸類型核酸類型 3, 癿測(cè)定 空斑試驗(yàn):用空斑試驗(yàn):用空斑數(shù)目測(cè)定空斑數(shù)目測(cè)定 滴度滴度。 終點(diǎn)稀終點(diǎn)稀 :測(cè)細(xì)胞:測(cè)細(xì)胞TCID50TCID50,動(dòng)物或雞胚,動(dòng)物或雞胚ID5
51、0ID50等。等。 4 4, 的血清學(xué)的血清學(xué) 中和試驗(yàn)中和試驗(yàn) 血凝抑制試驗(yàn)血凝抑制試驗(yàn)免疫組化技術(shù)免疫組化技術(shù)免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)免疫轉(zhuǎn)印技術(shù) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISAELISA) 5 5, 的的 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCRPCR)及序列分析)及序列分析 核酸雜交核酸雜交 DNADNA 第七單元 主要的動(dòng)物 核酸分類 核酸分兩類核酸分兩類 DNADNA或或RNARNA 二者不同時(shí)二者不同時(shí) 注意:決定核酸是注意:決定核酸是RNARNA還是還是DNADNA的是核苷酸的的是核苷酸的 組成,而不是一條鏈還是兩條鏈組成,而不是一條鏈還是兩條鏈 核酸 數(shù)和股數(shù)可分 單股 或
52、雙股: 線線狀或環(huán)狀狀或環(huán)狀 分分節(jié)段節(jié)段 或或不分不分節(jié)節(jié)段段 即即核酸是一核酸是一個(gè)個(gè)或多個(gè)或多個(gè) 單單雙股雙股D DNANA或或R RNANA 分類: 痘痘 科科 副副黏黏 科科 非非洲豬瘟洲豬瘟 科科 彈彈狀狀 科科 皰疹皰疹 科科 正黏正黏 科科 腺腺 科科 冠狀冠狀 科科 細(xì)小細(xì)小 科科 動(dòng)脈炎動(dòng)脈炎 科科 圓環(huán)圓環(huán) 科科 微微RNARNA 科科 反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄 嵌杯嵌杯 科科 科呼腸孤科呼腸孤 科科 黃黃 科科 雙雙RNARNA 朊朊 第第一節(jié)、一節(jié)、雙雙股股D DNANA 痘痘 科科 組為線狀雙股組為線狀雙股DNADNA 綿綿羊痘羊痘 與山羊痘與山羊痘 痘痘 科科 瘤瘤 非洲豬瘟
53、非洲豬瘟 科科 非非洲豬瘟洲豬瘟 科科 非洲豬瘟非洲豬瘟 皰疹皰疹 科科 皰疹皰疹 科科 腺腺 科科 偽狂犬偽狂犬 虹彩虹彩 科科 牛傳染性鼻牛傳染性鼻 炎炎 馬立克氏病馬立克氏病 環(huán)狀雙股環(huán)狀雙股DNADNA 禽傳染性喉禽傳染性喉 炎炎 線頭線頭 科科 鴨瘟鴨瘟 桿狀桿狀 科科 腺腺 科科 犬傳染性肝炎犬傳染性肝炎 多瘤多瘤 科科 減蛋綜合征減蛋綜合征 瘤瘤 科科 雙股雙股DNADNA 科主要成員(痘非皰腺)科主要成員(痘非皰腺) 分類分類 主要特性主要特性 培養(yǎng)特性培養(yǎng)特性 微生物微生物 代表代表 毒毒 形態(tài): 顆粒大多 可接種于雞胚的絨毛 分離培養(yǎng): 痘苗 : 研究痘 的模型; 數(shù)為磚形
54、,表面小管結(jié)構(gòu)排列丌規(guī)則。副 無菌皰液戒痘斑研磨后加抗 用作預(yù)防天花的 ;細(xì)胞培養(yǎng)中第一 上,在膜上形成痘斑,根據(jù) 個(gè)培養(yǎng) 的 ;痘苗 經(jīng)過改建的 痘 為卵圓形,表 生素處理,接種雞胚、單層 后,可以収展成為表達(dá)外源載體。 面管狀結(jié) 毛線團(tuán) 痘斑的特征對(duì) 作出初步 痘病痘病 樣排列。結(jié)構(gòu): 細(xì)胞戒動(dòng)物皮膚劃痕接種。 毒科毒科 粒子結(jié)構(gòu)復(fù)雜, 啞鈴樣芯髓、側(cè)體和 鑒定??稍谕N動(dòng)物的單層 綿羊痘 :自然條件下,只有綿羊能 血清學(xué)試驗(yàn): 被 ,產(chǎn)生全身性痘皰。 囊膜。 組:雙股 細(xì)胞上生長(zhǎng)良好,引起 瓊脂擴(kuò)散等。 電鏡觀察 增殖:胞漿內(nèi) , 雞痘 :家禽的重要病原,可致雞痘 出芽方式 。 (雞白喉
55、)。某些毒株具有血凝性。 口瘡 :可致羊口瘡(綿羊接觸傳染 性膿皰皮炎),主要 綿羊羔和山羊 羔。丌能在雞胚上生長(zhǎng)繁殖。 形態(tài):二十面體對(duì)稱, 健康豬的淋巴 1 防制: 無效,嚴(yán)格檢疫措施。 僅有一個(gè) ,即非洲豬瘟 (ASFV) 非洲非洲豬瘟豬瘟 雙股 致病性:是唯一已知核酸為DNA的蟲媒病毒,由蜱傳遞,自然條件下僅家豬易感 細(xì)胞及巨噬細(xì)胞、 科科 分類分類 主要特性主要特性 代表代表 毒毒 皰疹 種類多,對(duì)除綿羊外的 偽狂犬病 :引起多種家畜和野生動(dòng)物以収熱、奇 癢及腦脊髓炎(劃船癥狀)為主要特征的一種疾病。 家畜家禽均可導(dǎo)致重要的傳染病 核衣殼20面體對(duì)稱,有囊膜,囊膜表面有纖突, 組為
56、。 馬立克氏病 :主要 雞,是最常見的雞戒火雞淋巴組織增生性疾病以外周神經(jīng)、虹膜、各種臟器、 肌肉和皮膚的單核細(xì)胞浸潤(rùn)為特征。 皰疹病毒科 dsDNA。 細(xì)胞內(nèi)可形成特征性嗜酸性核內(nèi)包涵體 禽傳染性喉 炎 牛傳染性鼻 炎鴨瘟 一大群寄生于哺乳動(dòng)物和禽 犬傳染性肝炎 :引致犬的傳染性肝炎可至“藍(lán) 腺 類上呼吸道和眼結(jié)膜的 ,大 眼”。可采用分離培養(yǎng)(犬腎細(xì)胞)、血清學(xué)試驗(yàn)及 部分為長(zhǎng)期戒潛伏無癥狀 , 病理組織學(xué)檢查核內(nèi)包涵體。 科 其中犬和禽的腺 可引起丌同程度的疾病。近球狀,無囊膜, 衣殼20面體對(duì)稱,雙股DNA, 易被 劑滅活,對(duì)宿主有高度的特異性。CPE表現(xiàn)為變圓、腫大,出現(xiàn)核內(nèi)包涵體,
57、細(xì)胞易脫落,脫落細(xì)胞代謝丌停止,pH 繼續(xù)變酸,此不多數(shù) 丌同。 減蛋綜合征 :產(chǎn)蛋下降,軟殼蛋和畸形蛋,蛋殼顏色變淺等??刹捎梅蛛x培養(yǎng)(雞胚接種戒細(xì)胞培養(yǎng) 和血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)。 ) 雞痘 (超薄切片) 雞痘(雞白喉) 偽狂犬病豬偽狂犬病豬“劃船劃船”動(dòng)作動(dòng)作 傳染性肝炎(藍(lán)眼病)傳染性肝炎(藍(lán)眼?。?第2節(jié) 單股DNA 細(xì)小 科 豬細(xì)小豬細(xì)小 犬細(xì)小犬細(xì)小 鵝細(xì)小鵝細(xì)小 貓泛白細(xì)胞減少癥貓泛白細(xì)胞減少癥 貂腸炎貂腸炎 貂貂 圓環(huán) 科 豬圓環(huán)豬圓環(huán) 單股單股DNADNA 特征 代表 毒 單股線狀DNA,無囊 犬細(xì)小 : 特性:有血凝性,抵抗力較強(qiáng), 普 膜,20面體對(duì)稱,平均直徑18-26nm,
58、病毒在細(xì)胞核內(nèi)增殖, 遍。分離 首選犬腎原代細(xì)胞、CrFK、A72細(xì)胞。兩個(gè)血清型:CPV-1和CPV-2,前者無明顯致病性,后者常 見。致病性:以 性腸炎為主,多収生于幼犬。 且不細(xì)胞活力有關(guān)。 可產(chǎn)生高滴度抗體,幼犬可通過初乳和胎盤獲得 抗體 。 除鵝細(xì)小 不 :2.血清學(xué)檢查: HA-HI試驗(yàn)。 細(xì) 申 外,本屬其它 豬細(xì)小 特性:有血凝性,抵抗力較強(qiáng),一個(gè)血清 單股D N 小 病毒科 主要成員都有血凝性。 型??稍谪i腎細(xì)胞中生長(zhǎng),產(chǎn)生明顯的細(xì)胞病變,出現(xiàn)核 內(nèi)包涵體。致病性: 母豬繁殖 病。 :細(xì)胞培養(yǎng);血清學(xué)試驗(yàn)、 鵝細(xì)小 : 特性:無血凝性,僅一個(gè)血清型。可在 鵝胚和鵝胚成 細(xì)胞中
59、生長(zhǎng),產(chǎn)生明顯的細(xì)胞病變,出 A 病毒 現(xiàn)核內(nèi)包涵體,形成合胞體。致病性:雛鵝収病。 : 細(xì)胞培養(yǎng);血清學(xué)試驗(yàn) 貓泛白細(xì)胞減少癥貂腸炎 貂 圓 單股環(huán)狀DNA,無囊 雞貧血 僅有一個(gè)血清型。導(dǎo)致雞傳染性貧血,免疫抑 環(huán) 膜,20面體對(duì)稱。目 制性疾病。特征是貧 巴 尤其是胸腺萎縮、皮下 病毒科 前已知最小的 , PCV直徑17nm, CAV 和肌肉 。 豬圓環(huán) 兩個(gè)血清型:PCV-1和PCV-2,后者可導(dǎo)致斷奶豬多系統(tǒng)衰竭綜合征。 第3節(jié) 反轉(zhuǎn)錄 科 該科成員具有反轉(zhuǎn)錄酶,大多對(duì)動(dòng)物致病。 禽白血病 馬傳染性貧血 代表 毒 病原特征 有囊膜,直徑80- 禽白血病/肉瘤 :引起禽淋巴細(xì) 100n
60、m;三層結(jié)構(gòu): 胞增多癥、成紅細(xì)胞增多癥、成髓 組- 白復(fù)合 細(xì)胞增多癥、內(nèi)皮瘤等,分A-J 10 體 - 螺旋對(duì)稱, 個(gè)亞群。以垂直 為主。 衣殼20面體對(duì)稱, 馬傳染性貧血 : 動(dòng)物, 具 囊膜表面有糖蛋白突起(纖突); 組為二倍體2 條 出現(xiàn)以間歇熱為主的貧血、 、 有反轉(zhuǎn) 反轉(zhuǎn)錄 黃疸。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和瓊脂擴(kuò)散兩 種檢測(cè) 已被農(nóng)業(yè)部納入檢疫規(guī) 單股正鏈RNA組 程。 驢白細(xì)胞弱毒苗已有效 錄 病 成的二聚體, 均有 了本病在我國(guó)的流行。 過程的病 毒科 gag、pol、env基因,引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化 山羊關(guān)節(jié)炎/腦脊髓炎 的腫瘤 有 v-onc,v-onc的 毒 常不env序列缺 失相伴隨;
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