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醫(yī)院檢驗中心Bcl-2測定操作規(guī)程(1)試劑1) RatBcl-2單抗CatNO22072)羊抗鼠IgG(H+L)-FITCCatNO08193)含 1蔗糖的PBS (內(nèi)含 0 01 NaN3)4)透膜試劑CatNO2388(2)方法1)在測定管和對照管中加5 10 10 5 細胞(或實體組織、骨髓細胞等到),離心,棄上層2)各加 100ul透膜試劑I,輕輕混勻,室溫 18 25,15 分鐘3)各加 PBS 蔗溶液 4ml, 300g離心 5分鐘,棄上層4)各加 100ul透膜劑 II,輕輕混勻, 室瘟 18 25,5 分鐘5)輕輕搖勻1 2秒6)測定管加10ulRatBcl-2單抗工作液(原液放在低溫冰箱中, 用時用 PBS 蔗糖 1: 10稀釋),輕輕混勻,室溫1825,15分鐘7)測定管加4mlPBS 蔗糖, 300g離心 5分鐘,棄上層8)各加 30ul單抗鼠IgG-FITC工作液(用PBS 蔗糖 1: 20稀釋),室溫18 25暗處放置15分鐘9)各加 4mlPBS- 蔗糖, 300g離心 5分鐘,棄上層10)加 PBS 蔗糖 600ul,在 FCM 儀上計數(shù)10000個以

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