福安特抗小鼠移植性腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究Ⅲ

1、福安特抗小鼠移植性腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究    【摘要】  目的  評(píng)價(jià)福安特注射液對(duì)小鼠S180和3LL瘤株的抗腫瘤活性作用，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法  采用荷瘤小鼠作為移植性腫瘤實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。同性別，體重1719g，接種腫瘤后隨機(jī)分組，每組10只。實(shí)驗(yàn)設(shè)正常對(duì)照組，環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組，福安特高、中、低劑量組，共5組。每天定時(shí)給藥，正常對(duì)照組每天注射等量生理鹽水，連續(xù)14天。結(jié)果  福安特可影響S180和3LL腫瘤的生長(zhǎng)速度，瘤體積縮小，瘤體重量減輕，抑瘤效果較明顯，抑瘤率分別達(dá)41.57%和4239%。結(jié)論 

2、 福安特對(duì)S180和3LL荷瘤小鼠具有一定抗腫瘤活性作用。        【關(guān)鍵詞】  福安特  動(dòng)物模型  抗腫瘤活性        Experimental study for Fu-an-te on transplantable carcinomas in mouse               【Abstrac

3、t】  Objective  To evaluate the anti-tumour-activity effect of Fu-an-te injection for S180 and 3LL，provide a evidence for clinical application.Methods  Use tumour load mouse as transplantable carcinomas animal model. Same sex，weight 1719g，randomly divide group after inoculate tumour ce

4、ll，10 mouse in every group，the experiment including 5 groups： normal control group，positive group and 3 doses of the new drug were chosen for each pharmacodynamic research then. Give the drug on time for every group，and normal control group with equate water，series for 14 days in the formula pharmco

5、dynamic tests.Results  Fu-an-te  can affect tumour growth speed for  S180  and 3LL. The volume of tumour was  reducing，weight was light and growth inhibition effect on transplantable tumour was in evidence. The inhibition rate for tumour can reach at 41.57% and 42.39%. Concl

6、usion  Fu-an-te have a good anti-tumour-activity effect for S180 and 3LL.        【Key words】   Fu-an-te  animal model  anti-tumor-activity         流行病學(xué)調(diào)查表明，近年來(lái)無(wú)論在世界范圍還是在中國(guó)國(guó)內(nèi)，惡性腫瘤的發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢(shì)。惡性腫瘤已成為常見(jiàn)病和多發(fā)病。由于惡性腫瘤在

7、臨床表現(xiàn)的多樣性，而臨床治療上，常規(guī)應(yīng)用的化療藥物又普遍存在毒副反應(yīng)大、療效不穩(wěn)定、復(fù)發(fā)率高等問(wèn)題。因此，尋找一種低毒、療效穩(wěn)定、使用方便且具有廣譜抗腫瘤活性的藥物成為抗腫瘤藥物研究和臨床中亟待解決的問(wèn)題。目前，腫瘤預(yù)防研究的主要研究目標(biāo)之一是尋找高效、低毒的藥物。作為福安特注射液主要成分的熊果酸，1990年就被日本列為最有希望的腫瘤預(yù)防藥物之一1。熊果酸（ursolic acid，UA）又名烏索酸、烏蘇酸，屬三萜類化合物，抗腫瘤活性是熊果酸最主要的藥理作用，同時(shí)也具有其它廣泛的生物活性，包括抗癌、對(duì)肝損傷的保護(hù)作用、抗菌消炎和抗病毒等作用2。近年來(lái)研究表明熊果酸可以對(duì)抗致癌物如B（）P、黃曲

8、霉素B1誘發(fā)的基因突變，抑制TPA對(duì)二甲基苯并蒽（DMBA）誘導(dǎo)的小鼠皮膚癌的促癌作用，因而認(rèn)為熊果酸不僅具有抗突變、抗促癌物作用，對(duì)多種惡性腫瘤細(xì)胞也有抑制生長(zhǎng)的作用。此外，熊果酸還可誘導(dǎo)F9畸胎瘤細(xì)胞成為內(nèi)胚層細(xì)胞及抗血管生成。因此，熊果酸的抗腫瘤活性越來(lái)越引起人們的注意3。Lee 等用熊果酸進(jìn)行了6種癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒試驗(yàn)，結(jié)果表明熊果酸對(duì)P-388、L-1210白血病細(xì)胞和A-549人肺腺癌細(xì)胞有顯著的細(xì)胞毒作用，其ED50均小于4mg/L4。黃鏡等對(duì)蘆筍有效成分熊果酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明熊果酸可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，能抑制致癌物與促癌物的致癌作用，表明熊果酸有抗瘤作用，其作用機(jī)制是抗

9、增殖和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡5。        目前有關(guān)熊果酸的研究主要集中于體外細(xì)胞學(xué)試驗(yàn)和作用機(jī)制研究。有關(guān)活體動(dòng)物的體內(nèi)試驗(yàn)則未見(jiàn)報(bào)道。本研究所用福安特注射液的主要成分為熊果酸，通過(guò)使用小鼠動(dòng)物模型對(duì)移植性3LL和S180所進(jìn)行的活體動(dòng)物抗腫瘤活性試驗(yàn)，初步評(píng)價(jià)該藥物對(duì)這兩種小鼠移植性腫瘤的抗腫瘤活性作用，為本藥的藥效學(xué)評(píng)價(jià)和進(jìn)一步臨床應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。        1  材料與方法        1.1

10、  材料        1.1.1  動(dòng)物  C57BL/6J、KM小鼠由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，體重：1822g，雌性，合格證號(hào)：SCXK11-00-0006。        1.1.2  藥物  (1)受試藥：福安特，白色針?lè)蹌?，?guī)格：6mg/瓶。熊果酸含量6mg/瓶，熊果酸純度97.3%。由湖北省武漢利元亨藥物技術(shù)有限公司提供，批號(hào)：030806。試驗(yàn)前用生理鹽水溶解。(2)陽(yáng)性對(duì)照藥：環(huán)磷酰胺購(gòu)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)

11、院腫瘤醫(yī)院，由上海華聯(lián)制藥公司生產(chǎn)，滬衛(wèi)藥準(zhǔn)字（1995）第012034號(hào)，生產(chǎn)批號(hào)：030309，生產(chǎn)日期：030313，有效期至2005年3月。        1.1.3  瘤株來(lái)源  3LL（小鼠Lewis肺癌）、S180（肉瘤180）購(gòu)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所。        1.2  分組和劑量        1.2.1  動(dòng)物分組  挑選成功接種的小鼠，

12、隨機(jī)分為5組即：空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組（環(huán)磷酰胺）、福安特高劑量組、福安特中劑量組、福安特低劑量組，每組10只小鼠。        1.2.2  給藥劑量  陽(yáng)性對(duì)照組，于腫瘤細(xì)胞接種后次日腹腔注射環(huán)磷酰胺（30mg/kg）。福安特高、中、低劑量組給藥劑量分別為半數(shù)致死量LD50（22.68mg/kg）的1/5、1/10、1/20，即4.536mg/kg、2.268mg/kg、1.134mg/kg于腫瘤細(xì)胞接種后次日腹腔注射，每日1次?？瞻讓?duì)照組同時(shí)給予相同容量的蒸餾水至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。空白對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、受試藥組（

13、低、中、高劑量組），每組動(dòng)物數(shù)為10只。        1.3  方法        1.3.1  動(dòng)物腫瘤模型的建立  (1)S180動(dòng)物模型的建立：腫瘤細(xì)胞自液氮內(nèi)取出復(fù)蘇后接種于KM小鼠腋窩皮下，待瘤體長(zhǎng)至11.5cm時(shí)，處死小鼠。選擇生長(zhǎng)良好的瘤組織制備成單細(xì)胞懸液，活瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)后，每只小鼠腋窩皮下接種1×105瘤細(xì)胞懸液，動(dòng)物隨機(jī)分組，每組10只。(2)3LL動(dòng)物模型的建立：腫瘤細(xì)胞自液氮內(nèi)取出復(fù)蘇后接種于C57BL/6J小鼠

14、腋窩皮下，待瘤體長(zhǎng)至11.5cm時(shí)，處死小鼠。選擇生長(zhǎng)良好的瘤組織制備成單細(xì)胞懸液，活瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)后，每只小鼠腋窩皮下接種1×106瘤細(xì)胞懸液，動(dòng)物隨機(jī)分組，每組10只。        1.3.2  給藥方法、劑量、時(shí)間及觀察指標(biāo)  (1)選擇腹腔給藥途徑，給藥劑量隨體重變化而變化。(2)給藥時(shí)間：每天定時(shí)給藥，每日1次，連續(xù)給藥14d。試驗(yàn)前、后分別稱量體重，并計(jì)算體重增長(zhǎng)率（%）。(3)日常觀察：包括精神狀態(tài)、飲食、排泄、毛色、活動(dòng)等方面。(4)用卡尺定期測(cè)量瘤體的長(zhǎng)和寬，并計(jì)算瘤體縮小率（%）。

15、60;       1.3.3  腫瘤抑瘤率  終止治療后，各組動(dòng)物全部同時(shí)處死，取出瘤體稱瘤重。按下式計(jì)算瘤重抑制率：腫瘤抑制率%=（1-治療組平均瘤重/對(duì)照組平均瘤重）×100%。        1.4  數(shù)據(jù)處理  每批實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，包括描述性統(tǒng)計(jì)和方差分析，計(jì)算方法參見(jiàn)文獻(xiàn)6。        2  結(jié)果  

16、      在每批實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，受試動(dòng)物的精神狀況、食欲、飲水、被毛、活動(dòng)及排泄等外觀表現(xiàn)均未見(jiàn)異常。        2.1  福安特對(duì)3LL荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)速度、小鼠體重的影響以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果與正常對(duì)照組相比  經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理試驗(yàn)組間可見(jiàn)一定差異，結(jié)果見(jiàn)表13。                  

17、0;     表1  福安特對(duì)3LL荷瘤小鼠腫瘤生長(zhǎng)速度的影響                注：3LL腫瘤重量(g)            從表1可以看出，福安特中劑量組對(duì)3LL荷瘤動(dòng)物腫瘤生長(zhǎng)速度的影響略大于高、低劑量組，但均低于陽(yáng)性對(duì)照組。每批試驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性較好。    &

18、#160;                      表2  福安特對(duì)3LL荷瘤小鼠體重增長(zhǎng)的影響                注：3LL體重(g)            從表2可以看出，福安特各劑量組對(duì)3LL荷瘤動(dòng)物體重增長(zhǎng)影響不大，陽(yáng)性對(duì)照組對(duì)動(dòng)物體重增長(zhǎng)速度明顯低于受試藥組。           &#