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認(rèn)證信息

認(rèn)證類型：個人認(rèn)證

認(rèn)證主體：雷**（實(shí)名認(rèn)證）

IP屬地：湖北

IP屬地：湖北 上傳時間：2022-02-26 格式：DOC 頁數(shù)：3 大小：16.50KB 積分：18 舉報 版權(quán)申訴

1、【論文集】談大鼠非酒精性脂肪肝實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷摹菊撐募拷?#160;   關(guān)鍵詞：  非酒精性脂肪性肝炎；動物模型；動物實(shí)驗(yàn)    目前，非酒精性脂肪性肝炎的發(fā)病率為1.24.81，隨著人民物質(zhì)生活的改善，非酒精性脂肪性肝病的發(fā)病率將逐年上升。在某些地區(qū)脂肪肝已超過病毒性肝炎而成為第一大肝病。非酒精性脂肪性肝炎已成為隱源性肝酶升高的最常見原因，也幾乎是至少60的病因迄今不明的肝硬化病例的基礎(chǔ)病因2。本課題采用了高脂飲食復(fù)制非酒精性脂肪性肝炎的動物模型，觀察非酒精性脂肪性肝炎的動物模型的病理變化特點(diǎn)。  &#

2、160; 1  材料與方法    1.1  材料  雄性SD大鼠40只，體重200220 g，清潔級，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物合格證號為SCXK（鄂）2004-0007，膽固醇購于上?？党缮镌噭┯邢薰?，批號2006103，豬油、雞蛋黃自備。    1.2  動物分組及處理  SD大鼠40只，隨機(jī)分為兩組各20只。除正常對照組外，全部給予高脂飲食復(fù)制非酒精性脂肪性肝炎模型。高脂飲食由普通飼料加15豬油，8蛋黃粉，2膽固醇組成。在造模第4周、8周、18周分別處死模型

3、組動物各2只，觀察其病理模型形成情況。第18周末將大鼠用2戊巴比妥鈉（45 mg/kg）腹腔注射，麻醉后下腔靜脈取血，將血標(biāo)本離心后用于血脂檢測；取肝左葉，用10中性福爾馬林溶液固定，石蠟包埋切片，作肝組織病理學(xué)觀察。    1.3  觀察指標(biāo)及檢測    1.3.1  一般項(xiàng)目  觀察動物的體重、飲食、毛發(fā)、活動情況、肝/體重比等。    1.3.2  血脂檢測  于動物處死前，采取各組動物血液分離血清，采用OLYMPUS AU2700全自動生化分析儀檢

4、測，采用貝克曼生化試劑盒。    1.3.3  病理學(xué)觀察  取新鮮肝組織左葉，用10中性福爾馬林固定，石蠟包埋5m切片，HE染色作肝組織病理學(xué)觀察，了解肝組織脂肪變性、炎癥活動程度。    1.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)方法  計(jì)量資料用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。等級資料用秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用2檢驗(yàn)。    2  結(jié)果    2.1  動物的一般情況  實(shí)驗(yàn)期間正常組動物精力充沛，靈活好動，飲食正常，皮毛

5、整潔，體重緩慢增加；模型組飲食量大，嗜睡，毛色偏黃，個體較大，體重增長較正常組較快，至8周時，模型組各動物體重較正常組平均重21，有不同程度的精神萎靡，活動減少，皮毛凌亂。    2.2  體重和肝指數(shù)  兩組大鼠體重和肝指數(shù)情況見表1。表1  各組動物體重、肝指數(shù)變化情況注：模型組較正常組體重及肝指數(shù)均顯著增加（P<0.01）    2.3  血脂  兩組大鼠TG、TC、HDLC、LDLC的影響，見表2。表2  實(shí)驗(yàn)結(jié)束時各組動物血脂情況注：模型組與正常組相比，TG、

6、TC、HDLC、LDLC差異有顯著性（P<0.01） 2.4  肝臟病理學(xué)變化    2.4.1  肉眼觀察  正常組大鼠肝臟形態(tài)正常，18周時無一例出現(xiàn)異常。模型組大鼠造模4周起肝臟外形稍飽滿圓鈍，質(zhì)地較脆，色紅；812周肝臟體積增大，包膜緊張，色澤灰黃，切面油膩；18周時，模型組動物肝臟明顯增大，包膜緊張，邊緣較鈍，質(zhì)地略軟，色變黃，表面呈花斑狀，觸之似泥塊并有油膩感，部分大鼠肝臟有黃白色的局灶性脂肪沉積。    2.4.2  光鏡觀察  正常組肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)

7、胞以中央靜脈為中心呈放射狀排列。無肝細(xì)胞腫脹及脂肪變。模型組肝組織HE染色顯示：造模4周后大鼠肝臟即有輕微的肝細(xì)胞脂肪變性，標(biāo)本還出現(xiàn)匯管區(qū)及小葉內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤和散在的點(diǎn)狀壞死（圖1）。造模8周大鼠多呈中度脂肪變，且炎癥活動積分明顯高于造模48周大鼠，可見到小葉內(nèi)炎癥，炎癥細(xì)胞主要以單核細(xì)胞為主，炎癥程度明顯加重（圖2）。造模18周大鼠呈中重度的大泡性脂肪變，脂滴分布密度增大，可見大部分肝細(xì)胞漿含大脂滴，部分脂滴形成大空泡，將細(xì)胞核擠壓至一邊，且以中央靜脈周圍為甚；肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，肝細(xì)胞排列不規(guī)整，并伴大量肝細(xì)胞腫脹，部分呈氣球樣變，匯管區(qū)炎癥尚輕微（圖3）。   

8、; 3  討論國內(nèi)外學(xué)者們根據(jù)脂肪肝的病因，設(shè)計(jì)出多種造模方式，如高脂飼料喂養(yǎng)，酒精損害，毒物損傷（CCl4、乙硫氨酸），復(fù)合因素（乙醇-高脂飲食-CCl4）等3。各種動物模型的形成機(jī)制及病理改變各異，實(shí)驗(yàn)者可根據(jù)研究目的選擇合適的動物模型，理想的動物模型應(yīng)與人類疾病特征相似，病變有一定發(fā)展過程，同時形成率高，死亡率低，重復(fù)性好，造模方法簡便易行4。本研究根據(jù)上述要求，針對國內(nèi)外已有能誘發(fā)脂肪肝模型的高脂飼料配方進(jìn)行了改良59，加大其中膽固醇及豬油所占比例，延長其造模時間為18周。該實(shí)驗(yàn)研究表明，本模型具有以下特點(diǎn)：體重明顯增加，至8周時，體重較正常組平均重21，18周時模型組動物體

9、重及肝指數(shù)均較正常組顯著增加（P<0.01）；血清TC和TG升高，模型組與正常組相比，TG、TC、HDLC、LDLC差異有顯著性（P<0.01）；肝組織學(xué)病變以肝細(xì)胞脂肪變性為主，伴有匯管區(qū)和小葉內(nèi)炎癥，甚至碎屑樣壞死，造模組4周后大鼠出現(xiàn)了輕度的肝脂肪變，造模8周大鼠多呈中度脂肪變。造模18周大鼠呈中重度的大泡性脂肪變；成功率高，18周非酒精性脂肪肝的復(fù)制率達(dá)100。顯示了該1  【參考文獻(xiàn)】  1 Harrison SA，Kadakia S，Lang KA，et al.Nonalcoholic steatohepatitis:What we know in

10、the new millennium.Am J Gastroenterol，2002，97:2714-2724.2 Dliverjames.非酒精性脂肪性肝炎.國際內(nèi)科雙語雜志：中英文，2003，3（2）:85-86.3 Adams LA，Angulo P，Lindor KD.Nonalcoholic fatty liver disease.CMAJ，2005，172:899-905.4 Koteish A，Diehl AM.Animal models of steatohepatitis.Best Pract Res Clin Gastroenterol，2002，16:679-690.5

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