實驗二食品中總氮的測定

1、.1、測定原理、測定方法、注意事項。、測定原理、測定方法、注意事項。1、蛋白質的性質和測定意義；、蛋白質的性質和測定意義；2、凱氏定氮法測定蛋白質的原理和方法摘要；、凱氏定氮法測定蛋白質的原理和方法摘要；3、熟悉凱氏定氮儀的工作原理和使用方法。、熟悉凱氏定氮儀的工作原理和使用方法。2.重點重點 1、凱氏定氮法中蛋白質原理和關鍵環(huán)節(jié)。、凱氏定氮法中蛋白質原理和關鍵環(huán)節(jié)。 3.難點難點3.1.基本知識點基本知識點實驗二實驗二 食品中總氮的測定食品中總氮的測定學習目標學習目標.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法一、概述凱氏凱氏（KjeldahKjeldah）定氮法是目前普

2、遍采用的測定有機定氮法是目前普遍采用的測定有機N N總量較為準確、方便的方法之一，總量較為準確、方便的方法之一，適用于所有食品，所以國內外應用較為廣泛。是經典的分析方法之一，也是適用于所有食品，所以國內外應用較為廣泛。是經典的分析方法之一，也是GB/T 5009.5-GB/T 5009.5-20032003食品中蛋白質的測定食品中蛋白質的測定第一法，由于該法是丹麥人道爾（第一法，由于該法是丹麥人道爾（J.KjeldahJ.Kjeldah）于于18831883年提出年提出用于測定研究蛋白質而得名。用于測定研究蛋白質而得名。凱氏定氮法是將蛋白質消化，測定其總凱氏定氮法是將蛋白質消化，測定其總N N

3、量，再換算成為蛋白質含量。食品中的含量，再換算成為蛋白質含量。食品中的含N N物物質，除蛋白質中的氮以外，還包括氨基酸、酰胺、核酸等中的氮等少量的非蛋白質含質，除蛋白質中的氮以外，還包括氨基酸、酰胺、核酸等中的氮等少量的非蛋白質含N N物質，物質，所以該法測定的蛋白質含量應稱為所以該法測定的蛋白質含量應稱為粗蛋白質。粗蛋白質。對于不同的蛋白質，它的組成和結構不同，但從分析數據可以得到近似的對于不同的蛋白質，它的組成和結構不同，但從分析數據可以得到近似的propro的元素組的元素組成百分比。成百分比。一般來說，一般來說，propro的平均含氮量為的平均含氮量為16%16%，即，即1 1份份N N

4、素相當于素相當于6.256.25份蛋白質，所以在用凱氏定份蛋白質，所以在用凱氏定氮法定量氮法定量propro時，將測得的總氮時，將測得的總氮% %乘上乘上propro的換稱參數的換稱參數K=6.25K=6.25即為該物質的即為該物質的propro含量。含量。蛋白質含蛋白質含N N量的倒數稱為蛋白質換算系數。量的倒數稱為蛋白質換算系數。元素元素C CH HO ON NS SP P百分比百分比50507 7232316160 03 30 03 3.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法一、概述但是我們必須要知道，食品種類不同，蛋白質的組成也不一但是我們必須要知道，食品種類不

5、同，蛋白質的組成也不一樣，其樣，其N N量也不相同，蛋白質換算系數差別很大，我們在測定量也不相同，蛋白質換算系數差別很大，我們在測定propro時，應該是不同的食品采用不同的換算等數。如：玉米、蕎麥為時，應該是不同的食品采用不同的換算等數。如：玉米、蕎麥為6.256.25， 花生：花生：5.465.46；大米：；大米：5.955.95；大豆及其制品：；大豆及其制品：5.715.71；面粉：；面粉：5.705.70；乳制品：；乳制品：6.386.38；凱氏定氮法凱氏定氮法（Kjeldahl determinationKjeldahl determination）有常量法、微量法有常量法、微量法及

6、改良法，其原理基本相同，只是所使用的樣品數量和儀器不同。及改良法，其原理基本相同，只是所使用的樣品數量和儀器不同。而改良的常量法主要是催化劑的種類、硫酸和鹽類添量不同，一而改良的常量法主要是催化劑的種類、硫酸和鹽類添量不同，一般采用硫酸銅、二氧化鈦或硒、汞等物質代替硫酸銅。般采用硫酸銅、二氧化鈦或硒、汞等物質代替硫酸銅。有些樣品中含有難以分解的含有些樣品中含有難以分解的含N N化合物，如：蛋白質中含有化合物，如：蛋白質中含有色氨酸、賴氨酸、組氨酸、酪氨酸、脯氨酸等，單純以硫酸銅作色氨酸、賴氨酸、組氨酸、酪氨酸、脯氨酸等，單純以硫酸銅作催化劑，催化劑，1818小時或更長時間也難經分解，單獨用汞化

7、合物，小時或更長時間也難經分解，單獨用汞化合物， 在在短時間內即可，但它有毒性。短時間內即可，但它有毒性。下面主要介紹下面主要介紹微量凱氏定氮法。微量凱氏定氮法。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法二、原理蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和硫酸銅、硫酸鉀一同加熱消化，使蛋白質分解，蛋白質是含氮的有機化合物。食品與硫酸和硫酸銅、硫酸鉀一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以硫酸或鹽酸標準滴分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以硫酸或鹽酸標準滴定溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即

8、為蛋白質的含量。定溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質的含量。凱氏定氮法凱氏定氮法（化學）（化學）反機理如下：反機理如下：1、2CH3CHCOOH+13H2SO4=（NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2O NH22、（、（NH4）2SO4+2NaOH=2NH3+Na2SO4+2H2O3、2NH3+2H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O4、(NH4)2B4O7+HCL+5H2O=2NH4CL+4H3BO3反應（反應（1 1）、）、(2)(2)在凱氏瓶內完成，反應（在凱氏瓶內完成，反應（3 3）在凱氏蒸餾裝置中進行。）在凱氏蒸餾裝置中進行。為了加速消化，可以加入為了加

9、速消化，可以加入CuSOCuSO4 4作催化劑，作催化劑，K K2 2SOSO4 4以提高溶液的沸點。收集氨可用硼酸溶液，以提高溶液的沸點。收集氨可用硼酸溶液，滴定則用強酸。滴定則用強酸。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法三、方法摘要Kjeldahl determination測定蛋白質含量主要分三個步驟：測定蛋白質含量主要分三個步驟：（一）消化樣品中的有機物和含樣品中的有機物和含N N有機化合物，經濃有機化合物，經濃H H2 2SOSO4 4加熱消化，加熱消化，H H2 2SOSO4 4使有機物脫水，炭化為碳；使有機物脫水，炭化為碳；碳將碳將H H2 2SOSO

10、4 4還原為還原為SOSO2 2，而本身則變?yōu)?，而本身則變?yōu)镃OCO2 2；SOSO2 2使使N N還原為還原為NHNH3 3，而本身則氧化為，而本身則氧化為SOSO3 3，而消化過程，而消化過程中所生成的新生態(tài)氫，又加速了氨的形成。在反應中生成物中所生成的新生態(tài)氫，又加速了氨的形成。在反應中生成物COCO2 2、H H2 2O O和和SOSO2 2、SOSO3 3逸去，而逸去，而NHNH3 3與與H H2 2SOSO4 4結合生成（結合生成（NHNH4 4）2 2SOSO4 4留在消化液中。留在消化液中。 蛋白質蛋白質+ H2SO4 CC+ H2SO4SO2+CO2SO2+N NH3+SO3

11、NH3+ H2SO4（NH4）2SO42CH3CHCOOH+13H2SO4 =（NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2O NH2脫水脫水.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法三、方法摘要（二）堿化、蒸餾（NH4）2SO4在堿性條件下，加熱蒸餾，釋放出氨。在堿性條件下，加熱蒸餾，釋放出氨。（NH4）2SO4+2NaOH=2NH3+Na2SO4+2H2O（三）吸收、滴定蒸餾過程中所放出的蒸餾過程中所放出的NHNH3 3，可用一定量的標準硼酸溶液吸收，再用標準鹽酸溶液直接滴定。，可用一定量的標準硼酸溶液吸收，再用標準鹽酸溶液直接滴定。2NH3+2H3BO3=(NH

12、4)2B4O7+5H2O(NH4)2B4O7+HCL+5H2O=2NH4CL+4H3BO3硼酸溶液僅呈極微弱的酸性，在此反應中并不影響所加的指示劑的變色反應，但具有吸收硼酸溶液僅呈極微弱的酸性，在此反應中并不影響所加的指示劑的變色反應，但具有吸收氨的作用，所以采用之作吸收劑。氨的作用，所以采用之作吸收劑。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法四、儀器1 1、凱氏燒瓶、凱氏燒瓶500mL500mL或或250mL250mL 2 2、龍科、龍科AA凱氏定氮儀凱氏定氮儀3 3、扭力天平、扭力天平 4 4、分析天平、分析天平5 5、5 5mLmL移液管移液管 6 6、溫度可以控

13、制的電爐、溫度可以控制的電爐7 7、小漏斗、小漏斗 8 8、滴定管、滴定管9 9、250250mLmL錐形瓶錐形瓶 1010、玻璃珠、玻璃珠.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法四、儀器.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法四、儀器.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法五、試劑1 1、硫酸銅、硫酸銅 ( (CuSOCuSO4 45H5H2 2O)O)。2 2、硫酸鉀。、硫酸鉀。3 3、濃硫酸、濃硫酸 ( (密度為密度為1.84191.8419g/L)g/L)。4 4、硼酸溶液、硼酸溶液 (20 (20g/L)g/L)

14、。5 5、氫氧化鈉溶液、氫氧化鈉溶液 ( (350g/L)350g/L)。 6 6、鹽酸標準滴定溶液、鹽酸標準滴定溶液 c(HCl)=0.01mol/L c(HCl)=0.01mol/L 或或 硫酸標準滴定溶液硫酸標準滴定溶液 c(1/2Hc(1/2H2 2SOSO4 4)=0.0500mol/L )=0.0500mol/L 。7 7、混合指示液：、混合指示液：1 1份甲基紅乙醇溶液份甲基紅乙醇溶液 (1 (1g/L) g/L) 與與5 5份溴甲酚綠乙醇溶液份溴甲酚綠乙醇溶液(1(1g/L) g/L) 臨用時混合。臨用時混合。 ( (也可用也可用2 2份甲基紅乙醇溶液份甲基紅乙醇溶液(1(1g

15、/L)g/L)與與1 1份次甲基藍乙醇溶液份次甲基藍乙醇溶液(1(1g/L)g/L)臨用時混合臨用時混合) )。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法六、分析步驟（一）（一）試樣處理 1 1、稱樣、稱樣 ( (約相當氮約相當氮30mg30mg40mg)40mg)（1 1）固體試樣：稱取固體試樣：稱取0.10g0.10g1.00g1.00g（2 2）半固體試樣半固體試樣：稱取稱取1.00g1.00g5.00g5.00g（3 3）液體試樣：吸取液體試樣：吸取10.00mL10.00mL25.00mL25.00mL 2 2、消化準備、消化準備 將試樣移入洗凈、烘干、容積為將

16、試樣移入洗凈、烘干、容積為100mL100mL或或500mL500mL的凱氏燒的凱氏燒瓶內瓶內 ，加入硫酸銅、硫酸鉀及，加入硫酸銅、硫酸鉀及8-10mL8-10mL硫酸，加入硫酸，加入2 2粒粒3 3粒玻璃珠，稍搖粒玻璃珠，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以4545角斜支于有小孔的石棉網上。角斜支于有小孔的石棉網上。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法六、分析步驟（一）（一）試樣處理 3 3、消化、消化 將準備好的凱氏燒瓶以將準備好的凱氏燒瓶以4545斜放于溫控電爐上（先墊上石棉網），開始用微火小斜放于溫控電爐上（先墊上石棉網），開始用微火

17、小心加熱，（小心瓶內泡沫沖出而影響結果?。?，待內容物全部炭化心加熱，（小心瓶內泡沫沖出而影響結果?。?，待內容物全部炭化, ,泡沫完全停止，瓶內有白煙泡沫完全停止，瓶內有白煙冒出后，升至中溫，白煙散盡后升至高溫，加強火力冒出后，升至中溫，白煙散盡后升至高溫，加強火力, ,并保持瓶內液體微沸并保持瓶內液體微沸, ,（為加快消化速度（為加快消化速度, ,可分數次加入可分數次加入10mL30%10mL30%過氧化氫溶液，但必須將燒瓶冷卻數分鐘以后加入?。┻^氧化氫溶液，但必須將燒瓶冷卻數分鐘以后加入?。? ,經常轉動燒瓶，經常轉動燒瓶，觀察瓶內溶液顏色的變化情況，當燒瓶內容物的顏色逐漸轉化成藍綠色澄清透

18、明后，觀察瓶內溶液顏色的變化情況，當燒瓶內容物的顏色逐漸轉化成藍綠色澄清透明后，再繼續(xù)加熱再繼續(xù)加熱0.5h0.5h1h1h。然后取下并使之冷卻。然后取下并使之冷卻。 （若凱氏燒瓶壁粘有碳化粒時，進行搖動或待瓶中內容物冷卻數分（若凱氏燒瓶壁粘有碳化粒時，進行搖動或待瓶中內容物冷卻數分鐘后，用過氧化氫溶液沖下，繼續(xù)消化至透明為止）。鐘后，用過氧化氫溶液沖下，繼續(xù)消化至透明為止）。4 4、定容定容 將消化好并冷卻至室溫的樣品消化液加入將消化好并冷卻至室溫的樣品消化液加入20mL蒸餾水搖蒸餾水搖勻放冷，小心轉移到勻放冷，小心轉移到100mL容量瓶中，再用蒸餾水少量多次洗滌凱氏燒容量瓶中，再用蒸餾水少

19、量多次洗滌凱氏燒瓶，并將洗液一并轉入容量瓶中，瓶，并將洗液一并轉入容量瓶中，直至燒瓶洗至中性直至燒瓶洗至中性，表明銨鹽無損地，表明銨鹽無損地移入容量瓶中，充分搖勻后，移入容量瓶中，充分搖勻后，靜置至室溫靜置至室溫，加水至刻度線定容，混勻備，加水至刻度線定容，混勻備用。用。同樣條件下做一試劑空白試驗。同樣條件下做一試劑空白試驗。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法六、分析步驟（一）（一）試樣處理 .實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法六、分析步驟（二）（二）蒸餾1 1、水蒸汽發(fā)生器的準備：、水蒸汽發(fā)生器的準備：按要求安裝好定氮裝置，保按要求安

20、裝好定氮裝置，保證管路密閉不漏氣。于水蒸氣發(fā)生瓶內裝水至證管路密閉不漏氣。于水蒸氣發(fā)生瓶內裝水至2/3處，加處，加甲基紅指示劑甲基紅指示劑3滴及滴及3mL5mL硫酸硫酸，以保持水呈酸性，以保持水呈酸性（防止水中含有（防止水中含有N，加硫酸使成為（，加硫酸使成為（NH4）2SO4形式固定形式固定下來，蒸餾中不會被蒸發(fā)），開通電源加熱煮沸水蒸氣發(fā)下來，蒸餾中不會被蒸發(fā)），開通電源加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內的水。生瓶內的水。2 2、清洗凱氏定氮儀：、清洗凱氏定氮儀：打開進氣口，關閉廢液出口，接打開進氣口，關閉廢液出口，接通冷凝水，空蒸通冷凝水，空蒸5 min10min，沖冼定，沖冼定N儀、樣杯、堿杯儀、

21、樣杯、堿杯和內室。分別關閉進氣口（注意不要同時關閉所有進氣和內室。分別關閉進氣口（注意不要同時關閉所有進氣口！），使廢液自動倒吸于定氮儀外室，再由樣杯加入少口?。?，使廢液自動倒吸于定氮儀外室，再由樣杯加入少量水，沖冼再次，當廢液全部吸入外室后，再放排液口，量水，沖冼再次，當廢液全部吸入外室后，再放排液口，并使其敞開。并使其敞開。3 3、吸收液準備：、吸收液準備：在在250mL錐形瓶中加入錐形瓶中加入10mL(20g/L)硼酸溶液和硼酸溶液和1滴滴3滴混合指示劑，放置冷凝器的下端，并滴混合指示劑，放置冷凝器的下端，并使冷凝管下端插入液面下。使冷凝管下端插入液面下。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食

22、品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法六、分析步驟 ）（二）（二）蒸餾4 4、蒸餾準備：、蒸餾準備：準確吸取準確吸取10mL試樣處理液試樣處理液，由樣杯（小漏斗），由樣杯（小漏斗）流入定氮儀內室（反應室），并用流入定氮儀內室（反應室），并用10mL水沖洗樣杯（小漏斗）使水沖洗樣杯（小漏斗）使流入定氮儀內室（反應室內）流入定氮儀內室（反應室內）【但內室中溶液總體積不超過內室的但內室中溶液總體積不超過內室的2/3（約（約50mL）】，塞緊棒狀玻塞，加水至杯口，塞緊棒狀玻塞，加水至杯口1cm2cm，以防，以防漏氣，關閉排液口，迅速由堿杯緩緩加入漏氣，關閉排液口，迅速由堿杯緩緩加入10mL氫氧化鈉溶液氫氧化

23、鈉溶液(400g/L)，夾緊螺旋夾，通入蒸汽開始蒸餾。，夾緊螺旋夾，通入蒸汽開始蒸餾。5 5、蒸餾：、蒸餾：關閉排液口，蒸汽進入反應室（內室），關閉排液口，蒸汽進入反應室（內室），NH3通過冷通過冷凝管進入接收瓶被硼酸吸收，蒸餾凝管進入接收瓶被硼酸吸收，蒸餾5 min，移開接收瓶，使冷凝管，移開接收瓶，使冷凝管下端離開液面，再蒸餾下端離開液面，再蒸餾1min，然后，用少量水沖冼冷凝管下端外，然后，用少量水沖冼冷凝管下端外部，洗液一并聚集于硼酸溶液中。部，洗液一并聚集于硼酸溶液中。 6 6、收尾：、收尾：關閉進氣口，停止送氣，廢液將自動倒吸入外室，關閉進氣口，停止送氣，廢液將自動倒吸入外室，待倒

24、吸完全時，將樣杯中的蒸餾水分數次放入，沖冼內室，待洗液待倒吸完全時，將樣杯中的蒸餾水分數次放入，沖冼內室，待洗液全部吸入外室后，再打開排液口，放凈廢液。全部吸入外室后，再打開排液口，放凈廢液。按上述步驟，換下一試樣蒸餾按上述步驟，換下一試樣蒸餾。同時準確吸取同時準確吸取10mL試劑空白試劑空白消化液按以上操作作空白試驗。消化液按以上操作作空白試驗。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法六、分析步驟（三）（三）滴定取下接收瓶取下接收瓶，以硫酸或鹽酸標準滴定溶液以硫酸或鹽酸標準滴定溶液(0.05mol/L)滴定至滴定至灰色或藍紫色灰色或藍紫色為終點。為終點。.實驗二實驗二

25、 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法六、結果計算試樣中蛋白質的含量按下式進行計算試樣中蛋白質的含量按下式進行計算：式中：式中：XX試樣中蛋白質的含量，試樣中蛋白質的含量，g/100gg/100g或或g/100mLg/100mL； V V1 1試樣消耗硫酸或鹽酸標準滴定液的體積，試樣消耗硫酸或鹽酸標準滴定液的體積，mLmL； V V2 2試劑空白消耗硫酸或鹽酸標準滴定液的體積，試劑空白消耗硫酸或鹽酸標準滴定液的體積，mLmL； c c硫酸或鹽酸標準滴定溶液的濃度，硫酸或鹽酸標準滴定溶液的濃度，mol/Lmol/L； 0.01401.0mL 0.01401.0mL硫酸硫酸 c(1/2

26、Hc(1/2H2 2SOSO4 4)=1.000mol/L)=1.000mol/L或鹽酸或鹽酸 c(HCl)=1.000mol/Lc(HCl)=1.000mol/L標準滴標準滴定溶液相當的氮的質量，定溶液相當的氮的質量，g g； m m樣品的質量或體積，樣品的質量或體積，g g或或mLmL； F F氮換算為蛋白質的系數。氮換算為蛋白質的系數。 一般食物為一般食物為6.256.25；乳制品為；乳制品為6.386.38；面粉為；面粉為5.705.70；玉米、高粱為；玉米、高粱為6.246.24；花生為；花生為5.465.46；米為米為5.955.95；大豆及其制品為；大豆及其制品為5.715.71

27、；肉與肉制品為；肉與肉制品為6.256.25；大麥、小米、燕麥、裸麥為；大麥、小米、燕麥、裸麥為5.835.83；芝；芝麻、向日葵為麻、向日葵為5.305.30。 計算結果保留三位有效數字。計算結果保留三位有效數字。100100/100140. 021FmcVVX.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法七、說明1 1、本法適用于食品中蛋白質的測定。、本法適用于食品中蛋白質的測定。不適用于添加無機含氮物質、有機非蛋白質含氮物不適用于添加無機含氮物質、有機非蛋白質含氮物質的食品測定。質的食品測定。2 2、所用試劑要用無氨蒸餾水配制。、所用試劑要用無氨蒸餾水配制。3 3、樣品

28、消化應在毒櫥內進行。消化過程中應注意轉動凱氏燒瓶，利用冷凝的酸液將附在、樣品消化應在毒櫥內進行。消化過程中應注意轉動凱氏燒瓶，利用冷凝的酸液將附在瓶壁上的炭粒沖下，以促進消化完全。瓶壁上的炭粒沖下，以促進消化完全。4 4、樣品消化時，如泡沫太多，可加少量辛醇或液體石醋去泡，防止樣品溢出。、樣品消化時，如泡沫太多，可加少量辛醇或液體石醋去泡，防止樣品溢出。5 5、樣品消化液不易澄清透明時，可將凱氏燒瓶冷卻，加入過氧化氫、樣品消化液不易澄清透明時，可將凱氏燒瓶冷卻，加入過氧化氫2 2 mLmL3 3mLmL后再加熱。后再加熱。6 6、為了加速氧化分解，常用催化劑是硫酸銅，有時也選用硒粉。硫酸銅也是

29、蒸餾時樣品、為了加速氧化分解，常用催化劑是硫酸銅，有時也選用硒粉。硫酸銅也是蒸餾時樣品堿化的指示劑。堿化的指示劑。7 7、消化時硫酸與硫酸鉀作用生成硫酸氫鉀，可提高沸點（硫酸沸點為、消化時硫酸與硫酸鉀作用生成硫酸氫鉀，可提高沸點（硫酸沸點為330330，添加硫酸鉀，添加硫酸鉀后可達后可達400400），加快消化速度。），加快消化速度。8 8、蒸餾裝置要嚴防氨逸出。蒸餾過程中不得中途間斷，以免樣品液從反應室吸出。、蒸餾裝置要嚴防氨逸出。蒸餾過程中不得中途間斷，以免樣品液從反應室吸出。9 9、操作過程中要嚴防酸、堿污染硼酸吸收液，否則會造成較大的測定誤差。、操作過程中要嚴防酸、堿污染硼酸吸收液，否

30、則會造成較大的測定誤差。1010、在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的、在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%10%。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法八、樣品的分解條件在消化過程中為了加速分解過程，縮短消化時間，常加入下列物質：在消化過程中為了加速分解過程，縮短消化時間，常加入下列物質：（一一）K2SO4或或Na2SO41、作用K2SO4 或或Na2SO4是常用的增溫劑，提高消化液沸點。是常用的增溫劑，提高消化液沸點。在消化過程中溫度起著重要的作用，消化溫度一般控制在在消化過程中溫度起著重要的作用，

31、消化溫度一般控制在360360410410間。間。低于低于360360，消化不易完全，特別是雜環(huán)氮化物，不易分解，使結果偏低，高于，消化不易完全，特別是雜環(huán)氮化物，不易分解，使結果偏低，高于410410則容則容易引氮的損失。易引氮的損失。H2SO4的沸點僅為的沸點僅為330330。K2SO4 沸點：沸點：400400；在消化過程中，隨著在消化過程中，隨著H2SO4的不斷分解，水分不斷蒸發(fā)，的不斷分解，水分不斷蒸發(fā)，K2SO4濃度逐漸升高，則沸點濃度逐漸升高，則沸點升高，加速對有機物的分解作用。升高，加速對有機物的分解作用。.實驗二實驗二 食品中總氮測定食品中總氮測定凱氏定氮法凱氏定氮法八、樣品

32、的分解條件（一一）K2SO4或或Na2SO42、加入量溫度高低取決于加入的溫度高低取決于加入的K2SO4多少，若少（小于多少，若少（小于0.30.3g/mLg/mLK2SO4）則消化時間長則消化時間長。H2SO4：K2SO4=1：1時時，則可大大縮短消化時間，則可大大縮短消化時間。消化中若消化中若H2SO4消耗過多，則會影響鹽的濃度，一般消耗過多，則會影響鹽的濃度，一般在凱氏瓶口插一小漏斗，以減少在凱氏瓶口插一小漏斗，以減少H2SO4的損失的損失。K2SO4+ H2SO4=2KHSO4 2KHSO4=K2SO4+H2O+SO3K2SO4 與與H2SO4的用量比值不宜過大，當的用量比值不宜過大，當K2SO4超過