沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查驗證方案

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上1.概述:培養(yǎng)基是微生物試驗的基礎(chǔ)，直接影響微生物試驗結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。供試品微生物限度檢查中所使用的培養(yǎng)基應(yīng)進行適用性檢查。2.驗證目的：本次驗證的目的是確認(rèn)沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查用的RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基、木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基、三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基的質(zhì)量，以及其制備程序、保存條件等是否滿足微生物限度檢查用要求。3.驗證依據(jù)：中國藥典2015年版四部“1106非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：微生物控制菌檢查”、“9203藥品微生物實驗室質(zhì)量管理指導(dǎo)原則”。4.驗證項目：RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基、木糖賴氨酸脫

2、氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基、三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查。5.適用范圍：成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)進行培養(yǎng)基適用性檢查。6.驗證周期：除另有規(guī)定外，在實驗室中，若采用已驗證的配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基且過程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗可以只進行一次。如果培養(yǎng)基的制備過程未經(jīng)驗證，那么每一滅菌批培養(yǎng)基均要進行適用性檢查試驗。7.驗證小組人員及職責(zé)：7.1驗證小組人員:小組人員職務(wù)姓 名簽字所在部門職 務(wù)組 長質(zhì)量部質(zhì)量總監(jiān)組 員質(zhì)量控制實驗室QC主任組 員質(zhì)量控制實驗室微生物QC7.2驗證人員職責(zé)及要求7.2.1按驗證方案及相關(guān)文件實施驗證。7.2.2認(rèn)真觀察并做好驗證

3、原始記錄。7.2.3對實施驗證的結(jié)果負(fù)責(zé)。7.3驗證中各部門的職責(zé)7.3.1驗證領(lǐng)導(dǎo)組職責(zé)7.3.1.1制訂驗證總計劃，負(fù)責(zé)全公司驗證工作的管理。7.3.1.2確定驗證項目及驗證項目負(fù)責(zé)人。7.3.1.3負(fù)責(zé)驗證方案的批準(zhǔn)工作。7.3.1.4負(fù)責(zé)驗證資料及結(jié)果的審核工作。7.3.1.5負(fù)責(zé)驗證報告的批準(zhǔn)工作。7.3.2驗證項目小組職責(zé)7.3.2.1負(fù)責(zé)驗證方案的起草工作。7.3.2.2參與驗證方案的討論、確認(rèn)工作。7.3.2.3負(fù)責(zé)驗證方案的實施。7.3.2.4負(fù)責(zé)驗證結(jié)果的分析、統(tǒng)計、報告工作。7.3.2.5參與驗證結(jié)果的評價工作。7.3.3質(zhì)量部職責(zé)7.3.3.1負(fù)責(zé)公司驗證日常管理工作。

4、7.3.3.2負(fù)責(zé)驗證方案的審核工作。7.3.3.3負(fù)責(zé)驗證過程中儀器、儀表、計量器具的校驗工作。7.3.3.4負(fù)責(zé)檢驗儀器及檢驗方法的驗證。7.3.3.5負(fù)責(zé)驗證中各項檢測工作，提供驗證的檢驗記錄、檢驗報告，對驗證過程中的各項檢驗工作負(fù)責(zé)。7.3.3.6負(fù)責(zé)對驗證人員的培訓(xùn)、考核工作。7.3.3.7負(fù)責(zé)驗證資料和報告的審核工作。7.3.3.8負(fù)責(zé)驗證文件回收、歸檔管理工作。 8.合格標(biāo)準(zhǔn)：8.1被檢固體培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的比值應(yīng)在0.5-2范圍內(nèi)，且菌落形態(tài)大小應(yīng)與對照培養(yǎng)基上的菌落一致；8.2被檢液體培養(yǎng)基管與對照培養(yǎng)基管比較，試驗菌應(yīng)生長良好。9.驗證實施條件

5、9.1驗證方案培訓(xùn)：在驗證實施前，應(yīng)對參與驗證的人員進行驗證方案以及與驗證相關(guān)的文件進行培訓(xùn)，確保相關(guān)人員掌握了驗證的相關(guān)要求與知識。9.2微生物限度檢測室：檢驗所使用的檢測室應(yīng)經(jīng)過HVAC系統(tǒng)確認(rèn)，并符合要求。9.3檢驗用水：驗證過程使用的純化水其制備系統(tǒng)應(yīng)經(jīng)過確認(rèn)并符合要求，純化水質(zhì)量應(yīng)經(jīng)過檢驗并符合中國藥典2015年版二部的要求。9.4檢驗儀器設(shè)備：驗證涉及的檢驗儀器（設(shè)備）與檢驗方法，應(yīng)經(jīng)過技術(shù)監(jiān)督局校驗合格或者公司確認(rèn)/驗證合格。9.5驗證菌種：驗證所使用的菌種，其種類與傳代次數(shù)應(yīng)符合中國藥典的相關(guān)要求。菌種情況見附件2:菌種確認(rèn)。 10.驗證過程10.1菌液制備取經(jīng)30-35培養(yǎng)1

6、8-24h的乙型副傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌的新鮮培養(yǎng)物1ml加入9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍遞增稀釋至10-6-10-8，約為100cfu/ml的菌懸液備用。10.2實驗操作10.2.1RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基：新鮮配制10ml/支的對照RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基5支，121滅菌15min，備用。取4支，分別接種乙型副傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌各2支，接種菌液1ml（100cfu）；另一支不接種菌作為空白對照；被檢培養(yǎng)基同法操作。置3035，培養(yǎng)18h-24h，觀察結(jié)果。10.2.2木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基：新鮮配制對照木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基，121滅菌15min，冷卻

7、至60傾注平皿，35培養(yǎng)箱預(yù)培8h后備用。取3個無菌木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基平板，涂布接種乙型副傷寒沙門菌2皿，接種液0.1ml（不大于100cfu），另一平板不接種作為空白對照，涂布均勻后于3035倒置培養(yǎng)18-48h。被檢培養(yǎng)基同法操作。 10.2.3三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基：新鮮配制對照三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基，121滅菌15min，冷卻至60傾注平皿，35培養(yǎng)箱預(yù)培8h后備用。取3個無菌三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基平板，涂布接種乙型副傷寒沙門菌2皿，接種菌液0.1ml（不大于100cfu），另一平板不接種菌作為空白對照，涂布均勻后于3035倒置培養(yǎng)18-24h。被檢培養(yǎng)基同法操作。10.3.檢查結(jié)果：見附件

8、5：沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果11.異常情況與偏差處理：當(dāng)出現(xiàn)偏差時，應(yīng)按偏差處理管理規(guī)程進行處理。12.驗證結(jié)果評定、結(jié)論與建議驗證小組組長負(fù)責(zé)收集各項驗證、試驗記錄，根據(jù)驗證、試驗結(jié)果對驗證效果進行綜合評審，起草驗證報告、做出驗證結(jié)論。對驗證結(jié)果的評審應(yīng)包括以下內(nèi)容：12.1驗證試驗是否有遺漏？12.2驗證實施過程中對驗證方案有無修改？修改原因、依據(jù)以及是否經(jīng)過批準(zhǔn)？12.3驗證記錄是否完整？12.4驗證試驗結(jié)果是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求？偏差及對偏差的說明是否合理？是否需要進一步補充試驗？13.附件13.1 附件1:驗證實施條件確認(rèn)13.2 附件2:培養(yǎng)基確認(rèn)13.3 附件3:菌種確認(rèn)13.

9、4 附件4:菌液濃度確定13.5 附件5:沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果13.6 附件6:驗證結(jié)果審批表附件1： 設(shè)施設(shè)備驗證確認(rèn)設(shè)施設(shè)備名稱驗證報告編號驗證結(jié)果實驗室HVAC系統(tǒng)純化水系統(tǒng)LDZX-40A型立式自控電熱壓力蒸汽滅菌器PSH-500A型生化培養(yǎng)箱303AS-2型電熱恒溫隔水式培養(yǎng)箱SW-CJ-1C型雙人凈化工作臺確認(rèn)結(jié)論： 確認(rèn)人： 確認(rèn)日期：附件2： 培養(yǎng)基確認(rèn)培養(yǎng)基名稱來源批號有效期至RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基RV沙門菌增菌液體對照培養(yǎng)基木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂對照培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂對照培養(yǎng)基確認(rèn)結(jié)論： 確認(rèn)人： 確認(rèn)日期：附件3

10、： 菌種確認(rèn)培養(yǎng)基名稱來源批號乙型副傷寒沙門菌 CMCC(B) 26003大腸埃希菌 CMCC(F) 44102確認(rèn)結(jié)論： 確認(rèn)人： 確認(rèn)日期：附件4：菌液濃度確定10-310-410-510-610-7123123123123123乙型副傷寒沙門菌皿1皿2大腸埃希菌皿1皿2結(jié)論： 根據(jù)要求，菌數(shù)要控制在每1ml中含菌數(shù)在100cfu，因此，我們確定菌液制備濃度為： 乙型副傷寒沙門菌: 大腸埃希菌： 檢驗人檢驗時間 年 月 日- 年 月 日復(fù)核人復(fù)核時間 年 月 日附件5：沙門菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果培養(yǎng)基驗證菌株皿號測試特性觀察時間被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基檢查結(jié)果RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基（3035，18h-24h）乙型副傷寒沙門菌1促生長能力18h2金黃色葡萄球菌3抑制能力24h4空白524h木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基（3035，18h-48h）乙型副傷寒沙門菌1促生長能力+指示特性18h2空白318h三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基（3035，18h-24h）乙型副傷寒沙門菌1指示能力18h2空白318h檢驗人檢驗時間 年 月 日- 年 月 日復(fù)核人復(fù)核時間 年 月 日 驗證對象驗證開始日期驗證結(jié)束日期評審意見（在方框中打）1、驗證實驗有否遺漏 遺漏