尿液分析儀的質(zhì)量控制

1、尿液化學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展趨勢(shì)雙擊自動(dòng)滾屏發(fā)布者：admin 發(fā)布時(shí)間：2009-6-3 閱讀：171次臨床泌尿系統(tǒng)，肝臟以及糖尿病等多種疾病均可導(dǎo)致尿成分的改變。由于尿液標(biāo)本容易采集，所以尿液檢驗(yàn)已廣泛應(yīng)用于臨床疾病的輔助診斷，疾病進(jìn)展監(jiān)測(cè)、治療效果或并發(fā)癥的監(jiān)測(cè)，以及對(duì)無(wú)癥狀人群進(jìn)行的先天性或遺傳性疾病的篩查。尿液檢驗(yàn)一般分為肉眼評(píng)價(jià)，理化檢查及沉查檢查。檢測(cè)方法有定性、半定量、定量與形態(tài)學(xué)檢查，檢測(cè)成分涉及到常規(guī)化學(xué)，特殊化學(xué)，細(xì)胞形態(tài)學(xué)與病原微生物等。其中尿液干化學(xué)分析由于其操作方便、測(cè)定迅速、結(jié)果準(zhǔn)確、可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，并且對(duì)大批量標(biāo)本能進(jìn)行過(guò)篩試驗(yàn)，因此目前廣泛應(yīng)用于臨床。一、尿液干化學(xué)分析的

2、發(fā)展史。自從1956年阿爾弗來(lái)德，弗瑞(Alfred Free)博士發(fā)明了Clinistix尿液分析史上第一個(gè)試紙條測(cè)試方法，尿液的化學(xué)分析開(kāi)始向干化學(xué)方法轉(zhuǎn)變。當(dāng)時(shí)有人采用單一干化學(xué)試帶法測(cè)定尿中蛋白質(zhì)和糖，利用肉眼觀察試帶中顏色的變化與標(biāo)準(zhǔn)板進(jìn)行比較，得出相應(yīng)的值。尿液干化學(xué)分析儀的出現(xiàn)給臨床實(shí)驗(yàn)室尿液分析帶來(lái)一個(gè)飛躍。到了80年代中期，由于計(jì)算機(jī)技術(shù)的迅速發(fā)展和廣泛使用，尿液分析儀的自動(dòng)化才得到迅猛發(fā)展，由半自動(dòng)發(fā)展到全自動(dòng)，測(cè)試項(xiàng)目由八項(xiàng)發(fā)展到十一項(xiàng)。測(cè)定速度最高可達(dá)300-500個(gè)標(biāo)本/小時(shí)，這使得常規(guī)檢測(cè)更為普及，更加方便。二、尿液干化學(xué)分析儀的分類 。尿液干化學(xué)分析儀按測(cè)試項(xiàng)目可

3、分為8-12個(gè)項(xiàng)目的尿液分析儀：8項(xiàng)尿液分析儀：代表儀器有日本或國(guó)產(chǎn)的MA-4210，測(cè)試項(xiàng)目包括尿蛋白、尿溏、尿PH、尿膽紅質(zhì)、尿膽原、尿潛血和尿亞硝酸鹽；9項(xiàng)尿液分析儀：代表儀器有德國(guó)RL-9型，測(cè)試項(xiàng)目包括上述8項(xiàng)與尿白細(xì)胞；10項(xiàng)尿液分析儀：代表儀器有德國(guó)的Miditron型，美國(guó)的Clinitek型或國(guó)產(chǎn)的FA-100等，測(cè)試項(xiàng)目為上述9項(xiàng)與尿比重；11項(xiàng)尿液分析儀：代表儀器有韓國(guó)Vriscan300型或國(guó)產(chǎn)的FA-100等，測(cè)試項(xiàng)目為上述10項(xiàng)與尿維生素C，由于增加了維生素C反應(yīng)膜塊，所以可及時(shí)發(fā)現(xiàn)因維生素C干擾所出現(xiàn)的葡萄糖、潛血、膽紅質(zhì)的結(jié)果偏差。尿液干化學(xué)分析儀按自動(dòng)化程度可

4、分為：半自動(dòng)尿液分析儀，這是近年來(lái)臨床實(shí)驗(yàn)室普遍使用的尿液分析儀，代表儀器有德國(guó)的Miditron、美國(guó)的Clinitek、日本或國(guó)產(chǎn)的MA-4210、日本的AM-4290、國(guó)產(chǎn)的FA-100等，檢測(cè)項(xiàng)目主要包括尿8項(xiàng)、尿9項(xiàng)、尿10項(xiàng)、尿11項(xiàng)；全自動(dòng)尿液分析儀，代表儀器有德國(guó)的Surertrom型、日本的AX-4280型、美國(guó)的Clinitek ATLAS型，檢測(cè)項(xiàng)目包括尿10項(xiàng)、尿11項(xiàng)或尿12項(xiàng)，部分還增加了可靠的濁度測(cè)定功能，對(duì)尿比重采用光析射率計(jì)算。全自動(dòng)尿液分析儀由于從加樣到最后的結(jié)果輸出全部由儀器自動(dòng)完成，并且實(shí)現(xiàn)了校對(duì)的標(biāo)準(zhǔn)化，實(shí)時(shí)質(zhì)量控制以及隨時(shí)插放急診樣品等功能，真正實(shí)現(xiàn)

5、了尿液的自動(dòng)化分析。三、尿液分析儀的分析原理進(jìn)展尿液分析儀由機(jī)械系統(tǒng)，光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。機(jī)械系統(tǒng)主要功能是將待檢試紙條傳送到位，將檢測(cè)后的試紙條排入廢物盒；光學(xué)系統(tǒng)通常包括光源、單色處理、光電轉(zhuǎn)換三部分。不同廠家其尿液分析儀的光學(xué)系統(tǒng)不盡相同，如德國(guó)寶靈曼公司的Miditron采用了可發(fā)射特定波長(zhǎng)的發(fā)光二極管（LED）作為檢測(cè)光源，兩個(gè)檢測(cè)頭上都有不同波長(zhǎng)的LED，對(duì)應(yīng)于試紙條上特定的檢測(cè)項(xiàng)目分別為紅、橙、綠（660nm，620nm，555nm）它們 相對(duì)于檢測(cè)面發(fā)60角照射在反應(yīng)區(qū)上；拜耳公司的Clinitek200以高亮度的鹵鎢燈為光源，經(jīng)光導(dǎo)纖維傳導(dǎo)到兩個(gè)檢測(cè)頭，每個(gè)檢測(cè)頭有

6、11個(gè)檢測(cè)位置(包括一個(gè)空白補(bǔ)償位置)，入射光以45O角照射在反應(yīng)區(qū)上，在反應(yīng)區(qū)的正上方也固定有一組光纖，反射光被傳導(dǎo)至濾光片輪分光（從510nm至690nm為10個(gè)波長(zhǎng)）；電路系統(tǒng)，將轉(zhuǎn)換后的電信號(hào)放大，經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換后送CPU處理計(jì)算出最終檢測(cè)結(jié)果，然后將結(jié)果輸出到屏幕顯示并送打印機(jī)打印。CPU不但負(fù)責(zé)檢測(cè)數(shù)據(jù)的處理，而且控制了整個(gè)機(jī)械、光學(xué)系統(tǒng)的運(yùn)作，并通過(guò)軟件實(shí)現(xiàn)了多種功能。尿液分析儀的工作原理為：在微電腦的控制下，用雙波長(zhǎng)測(cè)定試劑帶上的顏色變化。試劑帶上有數(shù)個(gè)含有各種試劑的試劑墊，各自與尿中相應(yīng)成分進(jìn)行獨(dú)立反應(yīng)，顯示不同顏色，顏色的深度與尿液中某種成分呈比例關(guān)系。試劑帶中還有另一個(gè)墊“補(bǔ)

7、償區(qū)”作為尿液本底顏色，以對(duì)有色尿及儀器變化等產(chǎn)生的誤差進(jìn)行補(bǔ)償。將沾附有尿液的試劑帶放在儀器比色槽內(nèi)，試帶上已產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)的各種試劑墊被光源照射，其反射光被接收器接收，反射光的強(qiáng)度與各個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)顏色成正比。不同強(qiáng)度的反射光再經(jīng)光電轉(zhuǎn)換器件轉(zhuǎn)換為電信號(hào)進(jìn)行處理。四、尿液干化學(xué)分析的標(biāo)準(zhǔn)化與質(zhì)量控制尿液干化學(xué)分析是由尿“浸漬條”進(jìn)行的，不同廠商提供許多種類“浸漬條”供選擇。這些“浸漬條”或試紙條為一個(gè)塑料條，上有一個(gè)或多個(gè)富含化學(xué)物質(zhì)的反應(yīng)塊，尿與試劑塊接觸后產(chǎn)生顯色反應(yīng)。較常用的試紙條包括下列項(xiàng)目：PH、亞硝酸鹽、比重、白蛋白、葡萄糖、白細(xì)胞酯酶、血/血紅蛋白、膽紅素、尿膽原。對(duì)試紙條的要求

8、應(yīng)與尿分析儀以及校準(zhǔn)帶（液）組成標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)系統(tǒng)，理應(yīng)是配套的。因?yàn)楦鲀x器組成的檢測(cè)系統(tǒng)中方法不一定相同，試帶量的標(biāo)準(zhǔn)也有不同。如要選用其他廠家生產(chǎn)的代用試帶，應(yīng)先了解其方法是否與儀器配套試帶一致。同時(shí)要做對(duì)比試驗(yàn)，認(rèn)為無(wú)顯著差異才能選用。 尿液化學(xué)分析推薦使用的尿標(biāo)本為混合均勻的第一次晨尿（濃循8小時(shí)）不離心，保存于15-25，應(yīng)在采集后2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)。如標(biāo)本不能立即運(yùn)送和檢測(cè)。采集后應(yīng)置冰箱（2-8），尿的組分如膽紅素和尿膽原不穩(wěn)定，細(xì)菌可消輕葡萄糖，如尿放置不用，其PH會(huì)改變。尿液化學(xué)分析一定要用質(zhì)控品做質(zhì)量控制，質(zhì)控要有記錄，單項(xiàng)可暫以上下相差一檔作為在控，相差一檔以上為失控。由于試帶的專

9、一性與傳統(tǒng)手工檢測(cè)有不同之處，最常見(jiàn)的有以下特點(diǎn)：蛋白質(zhì)膜塊只對(duì)白蛋白敏感，對(duì)球蛋白不敏感，對(duì)本蛋白不反應(yīng)； 葡萄糖膜塊只對(duì)葡萄糖產(chǎn)生反應(yīng)，對(duì)乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反應(yīng)；酮體膜塊對(duì)乙酰乙酸最敏感，丙酮次之，對(duì)- 羥丁酸不反應(yīng)；隱血膜塊不但對(duì)完整和破損RBC均有反應(yīng)，而且對(duì)游離Hb也反應(yīng)；WBC膜塊只對(duì)中性粒細(xì)胞有反應(yīng)，而對(duì)淋巴細(xì)胞無(wú)反應(yīng)；膽紅素及尿膽原膜塊靈敏度比手工法低得多（Hawison）；比重膜塊只能反映尿中陽(yáng)離子多少與比重計(jì)結(jié)果不一，對(duì)嬰兒等低比密尿則不敏感。這些特點(diǎn)要造成尿化學(xué)法一定的假陽(yáng)性和假陰性，因此屬過(guò)篩試驗(yàn)，原則上陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)以傳統(tǒng)手工法復(fù)檢，這是質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)，通過(guò)復(fù)

10、檢還可發(fā)現(xiàn)許多藥物或其它干擾。按CCCLS文件規(guī)定，尿蛋白的確證試驗(yàn)為磺基水楊酸法。尿葡萄糖的確證試驗(yàn) 是葡萄糖氧化酶定量法或班氏定性法，尿膽紅素的確證試驗(yàn)為Hawison法,尿WBC、RBC的確證試驗(yàn)是尿沉渣顯微鏡檢查。對(duì)于其陽(yáng)性結(jié)果與尿顯微鏡檢查不一致的也應(yīng)復(fù)查，為此尿沉渣鏡檢不能廢除而應(yīng)加強(qiáng)。 液分析儀的質(zhì)量控制尿液分析儀的質(zhì)量控制一、嚴(yán)格按規(guī)定的要求操作1嚴(yán)格按廠家要求安裝、使用和保養(yǎng)。2每天測(cè)定標(biāo)本前先用校驗(yàn)帶監(jiān)測(cè)儀器性能， 使用校檢帶時(shí)應(yīng)注意： 試劑帶架必須清潔、干燥；校檢帶不可浸尿或蘸水；不可用手摸校驗(yàn)帶；校驗(yàn)帶應(yīng)保存在專用盒內(nèi)，避光防潮；當(dāng)儀器對(duì)校驗(yàn)帶測(cè)定的結(jié)果與預(yù)測(cè)

11、值不符時(shí)，應(yīng)再以另一校驗(yàn)帶（參考校驗(yàn)帶） 重新測(cè)試。校驗(yàn)不合格的儀器不準(zhǔn)使用。二、用質(zhì)控人工尿液進(jìn)行質(zhì)量控制開(kāi)機(jī)后，當(dāng)校驗(yàn)帶測(cè)定結(jié)果在規(guī)定范圍時(shí)，再用試紙條對(duì)質(zhì)控人工尿液進(jìn)行測(cè)定。其結(jié)果符合要求時(shí)再進(jìn)行尿標(biāo)本檢測(cè)，人工尿液配制方法見(jiàn)表1 。質(zhì)控期望值見(jiàn)表2表1  尿液化學(xué)檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)控人工尿液的配制表2 人工尿液質(zhì)控期望值由于人工尿液的化學(xué)成分總是不如自然尿液，有時(shí)會(huì)帶來(lái)較大誤差， 故條件許可時(shí)，應(yīng)制備以正常人尿?yàn)楸镜?、再加入各有關(guān)成分的尿質(zhì)控物。也可利用質(zhì)控人工尿液對(duì)技術(shù)人員進(jìn)行技術(shù)考核，即將參考尿液與待檢尿標(biāo)本一起送檢，進(jìn)行單盲試驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果與靶值在一個(gè)“” 或不足一個(gè)“” 屬合格

12、，但靶值為一個(gè)“”，而測(cè)定為“” 者判為不合格，測(cè)定誤差在“2 ” 以上的為不合格應(yīng)幫助查找原因，作出糾正。三、尿液分析儀應(yīng)該和鏡檢相結(jié)合無(wú)論尿液分析儀還是尿沉渣分析儀都不能代替尿常規(guī)檢查，它們只能作為過(guò)篩試驗(yàn)，因?yàn)槟蛞悍治鰞x無(wú)法觀察尿液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、巨噬細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、細(xì)菌、精子、結(jié)晶等有形成分，即使尿十項(xiàng)或十一項(xiàng)分析儀對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞的檢查也只限在化學(xué)檢查范圍內(nèi)，且尿分析儀所受的干擾因素很多，與實(shí)際鏡檢有一定差距，因此，當(dāng)尿分析儀檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)異常時(shí)，應(yīng)結(jié)合顯微鏡檢查報(bào)告結(jié)果，并以顯微鏡結(jié)果為準(zhǔn)，因?yàn)檫@些有形成分對(duì)腎臟和尿路疾患的診斷和鑒別診斷，疾病的嚴(yán)重程度及預(yù)后有著

13、重要作用，不可忽視。（一） 尿分析儀過(guò)篩標(biāo)準(zhǔn)的確定過(guò)篩的概念：儀器和試劑帶符合實(shí)驗(yàn)要求，在檢驗(yàn)人員相對(duì)穩(wěn)定條件下，制定一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)可視為尿沉渣成分在正常范圍內(nèi)，可免除進(jìn)一步顯微鏡檢查為過(guò)篩試驗(yàn)。下面對(duì)尿分析儀過(guò)篩的標(biāo)準(zhǔn)介紹如下：首先用規(guī)范化的方法做尿沉渣顯微鏡檢查取尿液10 ml ，離心5 分鐘棄去上清液，留沉渣02 ml 搖勻，取20l 加蓋玻片鏡檢。先用低倍鏡觀察全片，然后轉(zhuǎn)高倍鏡，檢查10 個(gè)高倍視野， 如果白細(xì)胞0 5 ；紅細(xì)胞0 3 ；透明管型在20 個(gè)低倍視野下為0 1 ，那么尿質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)可確定為陰性，按3表對(duì)照分析。表3 質(zhì)控尿液干化學(xué)法與鏡檢對(duì)照分析（二） 確定干化學(xué)過(guò)篩標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題1白細(xì)胞（1） 尿液必須新鮮（以免白細(xì)胞破壞）。注意由于尿液在膀胱貯留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或者標(biāo)本存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，或者由于其他原因引起白細(xì)胞破壞后酯酶釋放到尿液中，鏡檢陰性，從而造成假陰性。另外尿分析儀的檢測(cè)只與完整的粒細(xì)胞起反應(yīng)，不與淋巴