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文檔簡介
1、生物選修一必記知識總結(jié)by碉堡生物傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用1、果酒發(fā)酵利用的微生物為【酵母菌】,果醋發(fā)酵的利用的微生物是【醋酸菌】2、醋酸菌在氧氣和糖源均充足時,將葡萄糖分解成醋酸;在【缺乏糖源】,但氧氣充足時,將酒精分解醋酸3-在果酒發(fā)酵過程中,前期【有氧】一一【使酵母菌大量繁殖】;后期【無氧】一一讓酵母菌進行酒精發(fā)酵;在果醋的發(fā)酵過程中,一直需要通入【氧氣】4、使用發(fā)酵裝置制酒時,應該【關(guān)閉】充氣口;制醋時,應將充氣口連接【氣泵】,輸入【氧氣】5、榨汁前應先洗干凈葡萄再除去枝梗一一【防止雜菌污染】6、葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時,需留有大約【1/3】的空間一一【保證排氣口能正常排氣】7-發(fā)酵過程中,需及時
2、【排氣】一一避免發(fā)酵瓶【炸裂】8、果酒制作的初期,發(fā)酵液中【酵母菌】數(shù)目增多,后期不再增多;在果醋制作的任何階段,只要條件適宜,發(fā)酵液中醋酸菌數(shù)目可以不斷增多,在發(fā)酵液表面形成【菌膜】9、果酒制作完成后,可用【酸性的重銘酸鉀溶液】檢驗【酒精】是否存在,酸性的重銘酸鉀溶液遇酒精從【橙黃色】變【灰綠色】10、多種微生物參與豆腐的發(fā)酵過程中,其中起主要作用的是【毛霉】11、毛霉等微生物能產(chǎn)生【蛋白酶】和【脂肪酶】,其中蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解成【肽和氨基酸】,脂肪酶能將脂肪分解成【甘油和脂肪酸】12、發(fā)酵選擇的豆腐含水量應約為170%】一一【用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形】13、加鹽腌制的目的一一【
3、析出豆腐的水分,使其形成體";抑制微生物的生長】14、加鹽腌制的方法:逐層加鹽,隨著層數(shù)增加而【增加】鹽的用量,接近瓶口表面鋪厚些一一【越接近瓶口微生物越多,故需增加鹽的用量來抑制其他微生物的生長】15、腐乳制作的后期加入的酒精一般控制在【12%】一一【含量過高使腐乳成熟期延長;過低則雜菌繁殖快,豆腐易腐敗】16、各種風味的腐乳主要區(qū)別在于加入的【香辛料】,香辛料使腐乳具有一定的【風味/香味】17、封瓶口時,最好將瓶口通過【酒精燈火焰】一一【防止瓶口被污染】Page1生物選修一必記知識總結(jié)by碉堡生物18、制作泡菜所用到的微生物是【乳酸菌】,乳酸菌是【異養(yǎng)厭氧菌】,在【無氧】條件下,
4、將葡萄糖分解成乳酸19、配制鹽水時按照清水與鹽的質(zhì)量比為【4:1】的比例配制鹽水20、鹽水需煮沸冷卻,鹽水煮沸的目的是【消除雜菌】;冷卻的目的是【防止過高溫度燙死乳酸菌】21、為縮短時間,在冷卻的鹽水中加入少量【陳泡菜液】一一【增加乳酸菌的數(shù)量】22、泡菜的制作過程中,要營造【無氧】環(huán)境,故發(fā)酵壇壇蓋邊沿的水槽中需注滿水23、在發(fā)酵的過程中,亞硝酸鹽的含量是【先增加后下降】24、發(fā)酵過程中,壇口出現(xiàn)【白色菌膜】,這層白色菌膜為【酵母菌】、形成的原因一一【接近壇口,氧氣充足,且發(fā)酵液營養(yǎng)豐富,造成酵母菌大量繁殖】25、從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時間內(nèi),泡菜液逐漸變酸。這段時間內(nèi)泡菜壇中【乳酸菌
5、不斷增加,其他雜菌含量逐漸降低】一一【乳酸菌比其他雜菌更耐酸】26、亞硝酸鹽含量的測定方法一一【比色法】27、在【鹽酸酸化】的條件下,【亞硝酸鹽】與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后,與N-1-泰基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成【玫瑰紅色】染料28、亞硝酸鹽溶液的濃度不同,呈現(xiàn)的【顏色深淺不一】。將發(fā)生顯色反應后的樣品與已知濃度的【標準液】進行【目測】比較,可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量29、亞硝酸鹽含量測定實驗中所用試劑、藥品的作用:試劑、藥品作用對氨基苯磺酸溶液與亞硝酸鹽發(fā)生重氮反應N-1-奈基乙二胺鹽酸鹽溶液與重氮反應的產(chǎn)物結(jié)合,形成玫瑰紅色染料,作為測定亞硝酸鹽含量的指示劑氫氧化鈉溶液【中和過多的
6、酸】,制造【弱堿】環(huán)境提取劑增大亞硝酸鹽的溶解度,利于泡菜中亞硝酸鹽的提取氫氧化鋁乳液【吸附樣品濾液中的雜質(zhì)】,使泡菜汁澄清透明,以便使后續(xù)的顯色反應更明顯微生物的培養(yǎng)與應用1、常見碳源:CO2、糖類、脂肪酸、牛肉膏、蛋白陳2、常見氮源:N2、俊鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白月東Page2生物選修一必記知識總結(jié)by碉堡生物3、培養(yǎng)基的種類劃分標準種類特點物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基添加凝固劑【瓊脂】化學成分天然培養(yǎng)基含化學成分不明確的【天然物質(zhì)】(血清等)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確(用化學成分已知的化學物質(zhì))用途選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì),以抑制不需要的微生物生長,促進所需
7、的微生物生長鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品4、無菌技術(shù)項目概念常用方法應用范圍使用較為【溫和的物理和化學方法】殺死物體表面或內(nèi)部的【部分】微生物(不包括芽抱和抱子)煮沸消毒法:在100c下煮沸56min般物口口巴氏消毒法:在7075c煮沸30min或在80c煮15min一些/、耐圖溫的液體,如牛奶化學藥劑消毒法用【酒精】擦拭手、用氯氣消毒水源等紫外線消毒法:30W紫外燈照射30min接種室、接種箱或超凈工作臺火菌使用【強烈的理化方法】殺死體內(nèi)外【所有】的微生物(包括芽抱和抱子)灼燒火菌:用酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒接種環(huán)、接種針或其他金屬用具干熱火菌:1601
8、70c卜-滅菌12h玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)、金屬用具等高壓蒸汽火菌:100kPa、121c條件卜,火菌1530min培養(yǎng)基及容器5、實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進行清潔和【消毒】6、將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行【滅菌】7-實驗操作應在【酒精燈火焰】附近進行一一【避免周圍環(huán)境微生物的污染】8、待培養(yǎng)基冷卻至150c左右】時,在【酒精燈火焰】附近倒平板一一【溫度高,水蒸氣多;溫度低,培養(yǎng)基尹始凝固(瓊脂在140c左右】凝固),倒出來的培養(yǎng)基不均勻】9、估計培養(yǎng)基已冷卻到50c左右的簡便方法一一【可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手即可】10、在
9、【酒精燈火焰】旁邊取下裝有培養(yǎng)基的錐形瓶的瓶塞一一【防止環(huán)境中的微生物污染】11、倒平板前使【錐形瓶的瓶口】通過【火焰】一一【殺死錐形瓶口的微生物】12、將培養(yǎng)基平板【倒置】一一【防止蓋子上面的冷凝的水滴落在培養(yǎng)基上面,污染培養(yǎng)基】Page3生物選修一必記知識總結(jié)by碉堡生物13、常見接種方法:【平板劃線法】和【稀釋涂布平板法】14、接種環(huán)蘸取菌液前要在【酒精燈火焰】上【灼燒】一一【避免接種環(huán)上的微生物污染培養(yǎng)物】15、每次劃線前,接種環(huán)要【灼燒】一一【殺死上次結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種,使每次劃線的菌種均來自上次劃線的末端】16、在第二次及以后劃線時,總是從上一次的【末端】開始劃線一一【將聚集
10、的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落】17、接種環(huán)在接種結(jié)束要【灼燒】一一【殺死接種環(huán)上的菌種,避免細菌污染環(huán)境和感染操作者】18、實驗后,所用過的培養(yǎng)基、培養(yǎng)液等都需要統(tǒng)一進行【高壓蒸汽滅菌】后再丟棄一一【防止造成環(huán)境污染】19、平板劃線法與稀釋涂布平板法對比項目平板劃線法稀釋涂布平板法優(yōu)點可以觀察菌落特征,對混合菌進行分離可以計數(shù),可以觀察菌落特征缺點不能計數(shù)吸收量少,較麻煩,平板不十燥效果小好,容易曼延20、菌種的保藏保臧力法適用范圍做法特點臨時保藏法適用于【頻繁使用】的菌種將菌種接種到【試管的斜面培養(yǎng)基】上,在合適的溫度卜.培養(yǎng)。當菌落長成后,將試管放入4C的冰箱中保藏保存時間不長,菌種易【
11、被污染】或【產(chǎn)生變異】甘油管藏法適用于【長期保存】的菌種在3mL的甘油瓶中,裝入1mL甘油后【滅菌】。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在-20C的冷凍冰箱中保藏可長期保存菌種21、篩選分解尿素的細菌時,培養(yǎng)基的氮源為【尿素】一一只有能合成H尿酶】的微生物才能分解尿素,而缺乏月尿酶的微生物由于不能分解尿素,會【因缺乏氮源而無法生長繁殖】22、在土壤中分離分解尿素的細菌時,以【牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基】為對照組,以【尿素】為唯一【氮源】的培養(yǎng)基作為實驗組,用來【判斷選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用】23、在土壤中分離分解尿素的細菌時,還需設(shè)置【兩個空白對照】,即【不涂布菌液的培養(yǎng)基
12、】一一【驗證培養(yǎng)基中是否含有雜菌】24、判斷選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落一一牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯【多于】選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)25、選擇培養(yǎng)基上生長的【不一定】是所篩選的目的菌一一【有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖】Page4生物選修一必記知識總結(jié)by碉堡生物26、以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入【酚紅指示劑】,培養(yǎng)基某種細菌,若指示劑【變紅】,則pH升高,說明該種細菌能分解尿素。27、測定微生物數(shù)量的常用方法有【稀釋涂布平板法】、【顯微鏡直接計數(shù)法】和【濾膜計數(shù)法】28、稀釋涂布平板法為增強實驗的準確性,需要設(shè)置【重復組】,保證結(jié)果準確,一般設(shè)置【3個平板】;一般選擇菌落
13、數(shù)在1303001的平板進行計數(shù)一一少于30,誤差偏大;多于300,微生物生長競爭激烈,營養(yǎng)供給不足29、在接種前,隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時間一一【檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格】30、稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比【活菌】的實際數(shù)目【少】一一【當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落】31、稀釋涂布平板法與顯微鏡直接計數(shù)法對比項目稀釋涂布平板法顯微鏡直接計數(shù)法原理當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)其表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鐐下計算一定容積的樣品中微
14、生物的數(shù)量主要用具/口加小顯微鏡、細菌計數(shù)板計數(shù)依據(jù)培養(yǎng)基上的菌落數(shù)菌體本身優(yōu)點計數(shù)的是活菌計數(shù)方便,操作簡單缺點操作較復雜,有一定的誤差死菌、活國都計算在內(nèi)32、濾膜計數(shù)法一一將已知體積的水過濾后,將濾膜放于【伊紅一美藍培養(yǎng)基】上培養(yǎng),在該培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)【黑色】,可根據(jù)培養(yǎng)基上【黑色菌落的數(shù)目】,計算出水樣中【大腸桿菌】的數(shù)量33、從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液加入【計數(shù)板】進行計數(shù)前,應【將試管輕輕振蕩幾次】再吸取酵母菌培養(yǎng)液進行計數(shù)34、計數(shù)實驗前應該對【計數(shù)板】、【吸管】等器具進行【滅菌】處理35、如果計數(shù)時一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以數(shù)清,應采取的措施是【適當稀釋】36、
15、計數(shù)時要獲得較為準確的數(shù)值,減少誤差,應【多次計數(shù),求平均值】37、纖維素酶是一種【復合酶】,至少包括三種組分:【Ci酶】、【Cx酶】和【葡萄糖甘酶】38、篩選纖維素分解菌需在【富含纖維素】的環(huán)境,用【無菌】小鐵鏟去【表層土】,迅速鏟取土壤裝入無菌信封,密封。39、纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為【液體培養(yǎng)基】一一【液體選擇培養(yǎng)基篩選的同時,又能增加纖維素分解菌的濃度,液體培養(yǎng)基便于稀釋涂布平板】Page5生物選修一必記知識總結(jié)by碉堡生物,【提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用40、振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中【溶解氧】的含量,同時可以【使菌體與培養(yǎng)液充分接觸】41、纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基為【固體培養(yǎng)基】;挑選菌落時,
16、通過【剛果紅染色法】,挑選產(chǎn)生【透明圈】的菌落42、如果鑒別培養(yǎng)基中觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說明【可能】獲得了分解纖維素的微生物一一【有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈】43、剛果紅染色法的比較方法【先培養(yǎng)微生物】,再加入【剛果紅】進行顏色反應在【倒平板時】就加入剛果紅優(yōu)點顯示出顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用操作簡便,不,存在菌落混雜的問題缺點操作繁瑣,加入剛果紅會使菌落之間發(fā)生【混雜】由于纖維素粉、瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使產(chǎn)生淀粉酶的微生物也形成【透明圈】;有些微生物具有【降解色素】的能力,它們在長時間的培養(yǎng)過程中會降解剛果
17、紀而形成明顯的【透明圈】44、為確定分離得到的是纖維素分解菌,還需要進行【發(fā)酵產(chǎn)生纖維素酶的實驗】一一通過微生物發(fā)酵,看能否產(chǎn)生【纖維素酶】,再通過鑒定纖維素酶水解【濾紙】等【纖維素】產(chǎn)生的【葡萄糖】,來鑒定纖維素酶的產(chǎn)生酶的研究與應用1、果膠是由【半乳糖醛酸】聚合而成的不溶于水的一種【高分子化合物】2、果膠是植物細胞壁和胞間層的主要組成成分之一,果膠酶能夠分解果膠,瓦解植物的細胞壁及胞間層。3、在果汁中加入果膠酶可以提高水果的【出汁率】、使果汁變得【澄清】4、固定化細胞技術(shù)常用方法主要有【包埋法】、【化學結(jié)合法】、【物理吸附法】5、【包埋法】多用于【細胞的固定】;【化學結(jié)合法】和【物理吸附法
18、】多用于【酶的固定】6、固定化酶是將【水溶性】的酶與【不溶于水】的載體結(jié)合,使酶固定在載體上。7、固定化酶的優(yōu)點:穩(wěn)定性好,既【能與反應物接觸】,又【容易與產(chǎn)物分離】;可以【反復利用】;一定程度上避免了高溫、強酸、強堿和有機溶劑等對【酶活性】的影響,從而【提高催化效率、降低生產(chǎn)成本、提高產(chǎn)品質(zhì)量】。Page6生物選修一必記知識總結(jié)by碉堡生物8、固定化酶的反應柱裝置是由:【反應柱】、【固定化酶】和【分布著小孔的篩板】組成。其中分布著小孔的篩板的作用是:【使酶顆粒無法通過,反應溶液可自由出入】9、固定化酵母細胞用【包埋法】固定化,選用【海藻酸鈉】作載體包埋酵母細胞。10、活化酵母細胞應選擇足夠大
19、的容器一一【酵母細胞活化時體積會增大】11、將剛?cè)芑玫暮T逅徕c溶液【冷卻至室溫】,再與酵母細胞混合一一【溫度過高會把酵母細胞殺死】12、影響固定化酵母細胞實驗成敗的關(guān)鍵步驟是【配置海藻酸鈉溶液】一一【海藻酸鈉濃度過低,形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞數(shù)目較少;海藻酸鈉濃度偏高,則形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形】。DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)不同濃度的NaCl溶液中DNA和蛋白質(zhì)的溶解度差異DNA蛋白質(zhì)溶解規(guī)律溶解度V/d1溶解度溶/析(O,14m0l/Lg口濃度(3Na濃度物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液析出溶解物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液溶解部分發(fā)生鹽析沉淀2、DNA不溶于【酒精
20、】溶液。3、在【沸水浴】中DNA遇【二苯胺】會出現(xiàn)【藍色】反應,二苯胺試劑要【現(xiàn)配現(xiàn)用】。4、DNA粗提取實驗通常選用【雞血】作為實驗材料,不選用【哺乳動物成熟紅細胞】一一哺乳動物成熟紅細胞無【細胞核和細胞器】,不含【DNA5、使用植物細胞作為實驗材料,則要加入【洗滌劑】和【食鹽】然后進行攪拌和充分研磨,收集研磨液一一洗滌劑的作用是【瓦解細胞膜,從而釋放DNA】。6、沉淀DNA時用【冷酒精】一一體積分數(shù)為195%】的【4C】冷酒精可抑制核酸水解酶的活性,防止DNA降解,降低分子運動,使DNA易形成【沉淀】析出,低溫還有利于增加DNA分子的柔韌性,減少斷裂。Page7生物選修一必記知識總結(jié)by碉
21、堡生物7、DNA粗提取實驗中三次過濾第一次過濾第二次過濾第三次過濾過濾前加入的物質(zhì)蒸儲水蒸儲水NaCl溶液紗布上細胞膜、核膜等殘片DNA不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)溶液中含DNA的核物質(zhì)溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)DNA過濾的目的去除細胞膜、核膜等雜質(zhì)去除溶于0.14mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)去除不溶于2mol/LNaCl溶液的雜質(zhì)8、DNA合成的方向總是從子鏈的【5'端】向【3'端】延伸9、PCR的反應條件:一定的緩沖液、DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的【引物】、四種脫氧核甘酸、【耐熱的DNA聚合酶】以及能嚴格控制溫度變化的溫控設(shè)備10、凝膠色譜法:大分子蛋白質(zhì)路程【較短】,移動【快】,小分子蛋白質(zhì)路程【較長】,移動【慢】11、電泳:常見的電泳有【瓊脂糖凝膠電泳】和【SDS-聚丙烯酰胺電泳】;SDS-聚丙烯酰胺電泳中SDS所帶負電荷量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,使電泳遷移率完全取決于【分子的大小】12、蛋白質(zhì)的提取和分離一般分四步:【樣品處理】、【粗分離(
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