中藥中其他類型化學成分的提取分離技術(shù)

1、中藥中其他類型化學成分的提中藥中其他類型化學成分的提取分離技術(shù)取分離技術(shù)2掌握兒茶中鞣質(zhì)類化掌握兒茶中鞣質(zhì)類化學成分的提取分離原學成分的提取分離原理及操作技術(shù)；理及操作技術(shù)；熟悉青木香中有機酸熟悉青木香中有機酸類化學成分的提取分類化學成分的提取分離原理及操作技術(shù)；離原理及操作技術(shù)；了解丁南瓜子中南瓜了解丁南瓜子中南瓜子氨酸及決明子中蛋子氨酸及決明子中蛋白質(zhì)類化學成分提取白質(zhì)類化學成分提取分離原理及操作技術(shù)。分離原理及操作技術(shù)。知識要求知識要求3能力要求能力要求學習目標學習目標1掌握中藥中其他類掌握中藥中其他類型化學成分的提取型化學成分的提取分離技術(shù)分離技術(shù)熟練進行熟練進行兒茶中兒茶中鞣質(zhì)類化學

2、成分鞣質(zhì)類化學成分及青木香中有機及青木香中有機酸類化學成分的酸類化學成分的提取分離操作；提取分離操作；能進行能進行南瓜子中南瓜子中南瓜子氨酸及決南瓜子氨酸及決明子中蛋白質(zhì)類明子中蛋白質(zhì)類化學成分化學成分的提取的提取分離操作。分離操作。教學內(nèi)容教學內(nèi)容一一鞣質(zhì)類化學成分的提取分離技術(shù)鞣質(zhì)類化學成分的提取分離技術(shù)有機酸類化學成分的提取分離技術(shù)有機酸類化學成分的提取分離技術(shù)氨基酸類化學成分的提取分離技術(shù)氨基酸類化學成分的提取分離技術(shù)蛋白質(zhì)和酶類化學成分的提取分離技術(shù)蛋白質(zhì)和酶類化學成分的提取分離技術(shù)鞣質(zhì)類化學成分的提取分離技術(shù)鞣質(zhì)類化學成分的提取分離技術(shù)學習學習提示提示鞣質(zhì)類化學成分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)鞣質(zhì)

3、類化學成分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及提取分離知識及提取分離知識任務一任務一兒茶中鞣質(zhì)類化學成分的提取兒茶中鞣質(zhì)類化學成分的提取分離技術(shù)分離技術(shù)學習提示學習提示鞣質(zhì)類成分的結(jié)構(gòu)類型鞣質(zhì)類成分的結(jié)構(gòu)類型一一二三三鞣質(zhì)類成分的理化性質(zhì)鞣質(zhì)類成分的理化性質(zhì) 鞣質(zhì)類化學成分的提取分離與檢識鞣質(zhì)類化學成分的提取分離與檢識分分 布布生物活性生物活性經(jīng)典定義經(jīng)典定義鞣質(zhì)又稱單寧（鞣質(zhì)又稱單寧（tannin）或鞣酸）或鞣酸（tannin acid），是一類，是一類復雜的復雜的多元酚類高分子多元酚類高分子化合物，化合物，能沉淀能沉淀蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)。 鞣質(zhì)廣泛存在于鞣質(zhì)廣泛存在于植物界，約植物界，約70%以上的藥材中含以上的藥

4、材中含有鞣質(zhì)類化合物有鞣質(zhì)類化合物，在裸子植物及，在裸子植物及雙子葉植物的楊雙子葉植物的楊柳科、山毛櫸科柳科、山毛櫸科、蓼科、豆科、蓼科、豆科、薔薇科和茜草科薔薇科和茜草科中為多。中為多。鞣質(zhì)具有收斂、鞣質(zhì)具有收斂、止血作用。內(nèi)服止血作用。內(nèi)服可用于治療胃腸可用于治療胃腸道出血、潰瘍和道出血、潰瘍和水瀉等癥，外用水瀉等癥，外用于灼傷、創(chuàng)傷的于灼傷、創(chuàng)傷的創(chuàng)面，可使創(chuàng)傷創(chuàng)面，可使創(chuàng)傷表面滲出物中的表面滲出物中的蛋白質(zhì)凝固，形蛋白質(zhì)凝固，形成痂膜，保護創(chuàng)成痂膜，保護創(chuàng)面，防止細菌感面，防止細菌感染。染。鞣質(zhì)鞣質(zhì)一、一、 鞣質(zhì)類鞣質(zhì)類成分的結(jié)構(gòu)成分的結(jié)構(gòu)類型類型 縮合鞣質(zhì)縮合鞣質(zhì) 此類鞣質(zhì)一般不能水

5、解，此類鞣質(zhì)一般不能水解，但經(jīng)酸處理后可縮合成但經(jīng)酸處理后可縮合成為不溶于水的高分子化為不溶于水的高分子化合物鞣酐，又稱鞣紅。合物鞣酐，又稱鞣紅。有多元醇與沒食子酸酯有多元醇與沒食子酸酯化的產(chǎn)物。這類鞣質(zhì)具化的產(chǎn)物。這類鞣質(zhì)具有酯鍵或苷鍵結(jié)構(gòu)，易有酯鍵或苷鍵結(jié)構(gòu)，易被酸、堿、鞣酸或苦杏被酸、堿、鞣酸或苦杏仁酶水解。根據(jù)水解后仁酶水解。根據(jù)水解后的產(chǎn)物又可分為沒食子的產(chǎn)物又可分為沒食子酸和鞣花酸鞣質(zhì)兩類。酸和鞣花酸鞣質(zhì)兩類。 可水解鞣質(zhì)可水解鞣質(zhì) 復合鞣質(zhì)復合鞣質(zhì) 是逆沒食子鞣質(zhì)部是逆沒食子鞣質(zhì)部分與原花色素部分分與原花色素部分結(jié)合組成的，具有結(jié)合組成的，具有可水解鞣質(zhì)和縮合可水解鞣質(zhì)和縮合鞣質(zhì)

6、的一切特征。鞣質(zhì)的一切特征。（一）（一）. .可水解鞣質(zhì)可水解鞣質(zhì)可水解鞣可水解鞣質(zhì)分類質(zhì)分類沒食子酸鞣質(zhì)沒食子酸鞣質(zhì) 沒食子酸鞣質(zhì)水解沒食子酸鞣質(zhì)水解后產(chǎn)生沒食子酸和后產(chǎn)生沒食子酸和糖（或多元醇），糖（或多元醇），如大黃和五倍子中如大黃和五倍子中的鞣質(zhì)。的鞣質(zhì)。 逆沒食子酸鞣質(zhì)逆沒食子酸鞣質(zhì)水解后能生成逆沒食子水解后能生成逆沒食子酸和糖或同時有沒食子酸和糖或同時有沒食子酸或其他的酸生成，但酸或其他的酸生成，但有些逆沒食子酸鞣質(zhì)的有些逆沒食子酸鞣質(zhì)的原始結(jié)構(gòu)中并無逆沒食原始結(jié)構(gòu)中并無逆沒食子酸的組成，其逆沒食子酸的組成，其逆沒食子酸是由鞣質(zhì)水解所產(chǎn)子酸是由鞣質(zhì)水解所產(chǎn)生的黃沒食子酸或六羥生的黃

7、沒食子酸或六羥基聯(lián)苯二甲酸失水轉(zhuǎn)化基聯(lián)苯二甲酸失水轉(zhuǎn)化而來。如訶子鞣質(zhì)而來。如訶子鞣質(zhì) 各種五倍子鞣質(zhì)的結(jié)構(gòu)各種五倍子鞣質(zhì)的結(jié)構(gòu)訶子鞣質(zhì)訶子鞣質(zhì)實例實例OOOOOOGGGGGZGXCOOHOHOHG Gy %含量五沒食子酰葡萄糖 X+Y+Z=0 4六沒食子酰葡萄糖 X+Y+Z=1 12七沒食子酰葡萄糖 X+Y+Z=2 19八沒食子酰葡萄糖 X+Y+Z=3 25九沒食子酰葡萄糖 20十至十一沒食子酰葡萄糖 21 OCOOHOHHOHOORCOOHR=-glc-C-glc（二）（二）. .縮合鞣質(zhì)縮合鞣質(zhì) 縮合鞣質(zhì)在中藥中分布較廣，天然鞣質(zhì)多數(shù)屬于此類，縮合鞣質(zhì)在中藥中分布較廣，天然鞣質(zhì)多數(shù)屬于此

8、類，如虎杖、四季青、兒茶、桂皮、麻黃等所含的鞣質(zhì)均屬縮合如虎杖、四季青、兒茶、桂皮、麻黃等所含的鞣質(zhì)均屬縮合鞣質(zhì)，但有些中藥中所含的鞣質(zhì)為可水解鞣質(zhì)與縮合鞣質(zhì)的鞣質(zhì)，但有些中藥中所含的鞣質(zhì)為可水解鞣質(zhì)與縮合鞣質(zhì)的混合物?；旌衔?。 縮合鞣質(zhì)的結(jié)構(gòu)比較復雜，縮合鞣質(zhì)的結(jié)構(gòu)比較復雜，一般認為它與羥基黃烷類，一般認為它與羥基黃烷類，特別是羥基黃烷特別是羥基黃烷-3-3-醇和羥基黃烷醇和羥基黃烷-3-3，4-4-二醇有密切的關(guān)系二醇有密切的關(guān)系，可以認為羥基黃烷類是縮合肉制的前體，羥基黃烷之間以碳可以認為羥基黃烷類是縮合肉制的前體，羥基黃烷之間以碳- -碳鍵縮合成鞣質(zhì)，故不能水解。羥基黃烷類主要以兒茶素

9、為碳鍵縮合成鞣質(zhì)，故不能水解。羥基黃烷類主要以兒茶素為代表，兒茶素不是鞣質(zhì)，不具有鞣質(zhì)的通性，當它們相互縮代表，兒茶素不是鞣質(zhì)，不具有鞣質(zhì)的通性，當它們相互縮合成大分子多聚物后即具有鞣質(zhì)的特性。如雙兒茶素為二聚合成大分子多聚物后即具有鞣質(zhì)的特性。如雙兒茶素為二聚物，只有部分鞣質(zhì)的性質(zhì)，仍屬于前體物，隨著聚合度的增物，只有部分鞣質(zhì)的性質(zhì)，仍屬于前體物，隨著聚合度的增加，鞣質(zhì)的性質(zhì)越顯著，真正的縮合鞣質(zhì)為三、四及五聚合加，鞣質(zhì)的性質(zhì)越顯著，真正的縮合鞣質(zhì)為三、四及五聚合物等。物等。（- -）兒茶素的結(jié)構(gòu)）兒茶素的結(jié)構(gòu)雙兒茶素的結(jié)構(gòu)雙兒茶素的結(jié)構(gòu)實例實例OOHHOHOHOHOHHOOHHOHOHOH

10、OHHHCOHOHOHOHOHHO課堂互動課堂互動鞣質(zhì)可以分為哪幾類？分類依據(jù)是什么？鞣質(zhì)可以分為哪幾類？分類依據(jù)是什么？2. 2. 去除鞣質(zhì)的方法有哪些？為何要去除存在去除鞣質(zhì)的方法有哪些？為何要去除存在于多數(shù)中藥中的鞣質(zhì)類成分？于多數(shù)中藥中的鞣質(zhì)類成分？ 二 鞣質(zhì)類化學成分的理化性質(zhì)性味性味 溶解性溶解性還原性還原性 鞣質(zhì)多為無鞣質(zhì)多為無定形固體，定形固體，有澀味和收有澀味和收斂性，能與斂性，能與蛋白質(zhì)結(jié)合蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶于水成不溶于水的化合物。的化合物。如在鞣質(zhì)的如在鞣質(zhì)的水溶液中加水溶液中加入明膠可產(chǎn)入明膠可產(chǎn)生混濁或沉生混濁或沉淀。淀。 鞣質(zhì)可溶于水和鞣質(zhì)可溶于水和乙醇中，形成膠乙醇

11、中，形成膠體溶液，也可溶體溶液，也可溶于丙酮、醋酸乙于丙酮、醋酸乙酯、乙醚和乙醇酯、乙醚和乙醇的混合溶液，不的混合溶液，不溶于極性小的有溶于極性小的有機溶劑和無水乙機溶劑和無水乙醚、氯仿、苯、醚、氯仿、苯、石油醚、二硫化石油醚、二硫化碳、四氯化碳等。碳、四氯化碳等。鞣質(zhì)具有還原性，鞣質(zhì)具有還原性，在空氣中尤其在堿在空氣中尤其在堿性條件下極易被氧性條件下極易被氧化。鞣質(zhì)的水溶液化。鞣質(zhì)的水溶液長時間放置或與稀長時間放置或與稀酸共煮，因氧化、酸共煮，因氧化、聚合作用可生成水聚合作用可生成水不溶性沉淀，所以，不溶性沉淀，所以，一些中藥針劑在滅一些中藥針劑在滅菌貯藏過程中易析菌貯藏過程中易析出沉淀。出

12、沉淀。三三 鞣質(zhì)類化學成分的的提取分離與鞣質(zhì)類化學成分的的提取分離與檢識檢識鞣鞣質(zhì)質(zhì)類類化化學學成成分分的的提提取取分分離離與與檢檢識識提取提取 檢識檢識 分離分離 醋酸鉛沉淀法三氯化鐵反應和鐵氰化鉀反應 生物堿及重金屬鹽反應 明膠沉淀法生物堿沉淀法 （一）提?。ㄒ唬┨崛∫蝼焚|(zhì)含有多個酚羥基使其具有較強極性及不穩(wěn)定性，導致它易因鞣質(zhì)含有多個酚羥基使其具有較強極性及不穩(wěn)定性，導致它易與金屬離子生成縮合物而不易被提取出，因此一般選用玻璃或不與金屬離子生成縮合物而不易被提取出，因此一般選用玻璃或不銹鋼的容器進行提取。總鞣質(zhì)的提取可利用丙酮銹鋼的容器進行提取?？傳焚|(zhì)的提取可利用丙酮- -水（水（5:5

13、5:5）（7:37:3）作溶劑來提取可水解鞣質(zhì)。用上述溶劑于室溫冷浸或滲漉）作溶劑來提取可水解鞣質(zhì)。用上述溶劑于室溫冷浸或滲漉提取中藥粗粉，提取液濃縮至一定程度，依次用乙醚或氯仿、醋提取中藥粗粉，提取液濃縮至一定程度，依次用乙醚或氯仿、醋酸乙酯和正丁醇萃取，乙醚或氯仿可去除親脂性雜質(zhì)及色素等，酸乙酯和正丁醇萃取，乙醚或氯仿可去除親脂性雜質(zhì)及色素等，醋酸乙酯和正丁醇部位即含鞣質(zhì)粗品。醋酸乙酯和正丁醇部位即含鞣質(zhì)粗品。 （二）分離（二）分離Piaion HP-20和和MCl-gel CHP-20經(jīng)常被用于一經(jīng)常被用于一些鞣質(zhì)異構(gòu)體的些鞣質(zhì)異構(gòu)體的分離，均用不同分離，均用不同比例的甲醇比例的甲醇-水

14、水和乙醇和乙醇-丙酮作丙酮作為洗脫劑。為洗脫劑。常用常用Sephadex L-H-20分分離水解鞣離水解鞣質(zhì)，主要質(zhì)，主要用于不同用于不同聚合度鞣聚合度鞣質(zhì)的分離。質(zhì)的分離。鞣鞣質(zhì)質(zhì)的的去去除除方方法法 凝凝膠膠柱柱色色譜譜法法大大孔孔吸吸附附樹樹脂脂色色譜譜鞣質(zhì)除在中藥鞣質(zhì)除在中藥五倍子、地榆五倍子、地榆中含量較高為中含量較高為有效成分外，有效成分外，多數(shù)情形下為多數(shù)情形下為無效成分，因無效成分，因此在提取分離此在提取分離過程中須將它過程中須將它除去。除去。鞣質(zhì)的去除方法鞣質(zhì)的去除方法利用蛋白質(zhì)與鞣質(zhì)利用蛋白質(zhì)與鞣質(zhì)在水溶液中形成鞣在水溶液中形成鞣酸蛋白的原理而除酸蛋白的原理而除去鞣質(zhì)。樣品

15、水溶去鞣質(zhì)。樣品水溶液加液加4%明膠水溶液，明膠水溶液，至沉淀完全，過濾，至沉淀完全，過濾，濾液減壓濃縮至小濾液減壓濃縮至小體積，加體積，加35倍量乙倍量乙醇，使過量明膠沉醇，使過量明膠沉淀，濾去沉淀。淀，濾去沉淀。中性和堿式醋酸鉛在中性和堿式醋酸鉛在水或稀醇溶液中能與水或稀醇溶液中能與許多物質(zhì)生成難溶的許多物質(zhì)生成難溶的鉛鹽或絡鹽。試液中鉛鹽或絡鹽。試液中加入飽和醋酸鉛水溶加入飽和醋酸鉛水溶液可使鞣質(zhì)產(chǎn)生沉淀，液可使鞣質(zhì)產(chǎn)生沉淀，從而除去鞣質(zhì)。操作從而除去鞣質(zhì)。操作中要注意脫鉛處理。中要注意脫鉛處理。（方法有：硫化氫脫（方法有：硫化氫脫鉛法、硫酸鈉脫鉛法鉛法、硫酸鈉脫鉛法及離子交換樹脂法等）

16、及離子交換樹脂法等）生生物物堿堿沉沉淀淀法法醋醋酸酸鉛鉛沉沉淀淀法法明明膠膠沉沉淀淀法法樣品水溶液加入樣品水溶液加入生物堿（如生物堿（如1.5%吡啶）水溶液至吡啶）水溶液至沉淀完全，過濾，沉淀完全，過濾，濾液用氯仿振搖，濾液用氯仿振搖，除去過量的生物除去過量的生物堿即得（注意水堿即得（注意水溶液中其他成分溶液中其他成分可 否 被 氯 仿 提可 否 被 氯 仿 提出）。出）。課堂互動課堂互動 用前述知識說明兒茶中各種化學成分的特用前述知識說明兒茶中各種化學成分的特點和性質(zhì)，并分析生產(chǎn)工藝中如何提取各種點和性質(zhì)，并分析生產(chǎn)工藝中如何提取各種不同的鞣質(zhì)類成分。不同的鞣質(zhì)類成分。 知識鏈接（凝膠色譜）

17、知識鏈接（凝膠色譜） 以多孔凝膠作為固定相的柱色譜形式稱為凝膠色譜。以多孔凝膠作為固定相的柱色譜形式稱為凝膠色譜。（一）凝（一）凝膠色譜原膠色譜原理理凝膠色譜原理是分子篩原理。因凝膠顆粒具三維凝膠色譜原理是分子篩原理。因凝膠顆粒具三維 的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，在水中可膨脹并有許多一定大小的的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，在水中可膨脹并有許多一定大小的網(wǎng)眼。當溶液通過凝膠顆粒時，溶液中分子直徑網(wǎng)眼。當溶液通過凝膠顆粒時，溶液中分子直徑小于網(wǎng)眼的成分可進入凝膠內(nèi)部，而分子直徑大小于網(wǎng)眼的成分可進入凝膠內(nèi)部，而分子直徑大于網(wǎng)眼的成分則被排阻在凝膠顆粒之外，按分子于網(wǎng)眼的成分則被排阻在凝膠顆粒之外，按分子由大到小的順序流出。因此凝膠

18、色譜又稱為分子由大到小的順序流出。因此凝膠色譜又稱為分子排組色譜、凝膠過濾色譜、凝膠滲透色譜等。排組色譜、凝膠過濾色譜、凝膠滲透色譜等。（二）基本（二）基本構(gòu)成要素構(gòu)成要素（三）（三）類型類型凝膠色譜的基本構(gòu)成要素有固定相、流動相凝膠色譜的基本構(gòu)成要素有固定相、流動相以及被分離成分的溶液。以及被分離成分的溶液。凝膠色譜一般按選用的流動相不同分為兩類。凝膠色譜一般按選用的流動相不同分為兩類。以水溶液為流動相的叫凝膠過濾色譜以水溶液為流動相的叫凝膠過濾色譜(GFC)(GFC)；以有機溶劑為流動相的叫凝膠滲透色譜以有機溶劑為流動相的叫凝膠滲透色譜(GPC)(GPC)。（四）操（四）操作技術(shù)作技術(shù)1

19、1凝膠的預處理凝膠的預處理2 2裝柱裝柱3 3上樣上樣4 4洗脫洗脫5 5收集收集 凝凝膠膠色色譜譜基基本本構(gòu)構(gòu)成成要要素素固定相固定相（1 1）種類）種類 固定相是多孔凝膠（固定相是多孔凝膠（G G）。主要有葡聚糖凝膠（）。主要有葡聚糖凝膠（sephadex Gsephadex G）和羥丙基葡聚糖凝膠和羥丙基葡聚糖凝膠(sephadex LH-20)(sephadex LH-20)。后者為。后者為G-25G-25經(jīng)羥基化處理經(jīng)羥基化處理得到的產(chǎn)物。最常用的是葡聚糖凝膠。得到的產(chǎn)物。最常用的是葡聚糖凝膠。 （2 2）葡聚糖凝膠的結(jié)構(gòu)）葡聚糖凝膠的結(jié)構(gòu) 葡聚糖凝膠也稱交聯(lián)葡聚糖凝膠，是由葡聚糖和

20、甘油基通過醚葡聚糖凝膠也稱交聯(lián)葡聚糖凝膠，是由葡聚糖和甘油基通過醚橋相互交聯(lián)而成的多孔性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)式如下：橋相互交聯(lián)而成的多孔性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)式如下：OOOOOOCH2OHOHOHOCH2OOHOHOOCH2CH2CHOHCH2OOHOHOHOOHOHCH2OOCH2OHOHOHOCH2OHOOHCH2CHOHCH2OO 凝凝膠膠色色譜譜基基本本構(gòu)構(gòu)成成要要素素固定相固定相（3 3）葡聚糖凝膠的性質(zhì)）葡聚糖凝膠的性質(zhì) 葡聚糖分子內(nèi)含有大量羥基而具有極性，在水中即膨脹成凝葡聚糖分子內(nèi)含有大量羥基而具有極性，在水中即膨脹成凝膠粒子，是一種水不溶性的白色球狀顆粒，由于醚鍵的不活潑性，膠粒子，

21、是一種水不溶性的白色球狀顆粒，由于醚鍵的不活潑性，因而具有較高的穩(wěn)定性。不溶于水和鹽溶液，在堿性和弱酸性溶因而具有較高的穩(wěn)定性。不溶于水和鹽溶液，在堿性和弱酸性溶液中性質(zhì)穩(wěn)定，但在酸性溶液中高溫加熱能促使糖甙鍵水解。和液中性質(zhì)穩(wěn)定，但在酸性溶液中高溫加熱能促使糖甙鍵水解。和氧化劑接觸會分解，長期不用宜加防腐劑。氧化劑接觸會分解，長期不用宜加防腐劑。（4 4）葡聚糖凝膠的型號）葡聚糖凝膠的型號 1 1）型號：凝膠的商品型號用吸水量來表示。如）型號：凝膠的商品型號用吸水量來表示。如G-25G-25型號中型號中G G代表葡聚糖凝膠，后面的阿拉伯數(shù)值表示該型號的干凝膠代表葡聚糖凝膠，后面的阿拉伯數(shù)值表

22、示該型號的干凝膠1g1g所吸所吸收水量的收水量的1010倍值。即倍值。即G-25G-25型號每克干凝膠的吸水量為型號每克干凝膠的吸水量為2.5g2.5g。商品型號有商品型號有G-10G-10、G-15G-15、G-25G-25、G-50G-50、G-75G-75、G-100G-100、G-200G-200等。等。 2 2）不同型號的性能及應用：型號數(shù)字越大，吸水量越大，凝）不同型號的性能及應用：型號數(shù)字越大，吸水量越大，凝膠體積膨脹越大，孔隙也越大，可用于大分子物質(zhì)的分離；反之，膠體積膨脹越大，孔隙也越大，可用于大分子物質(zhì)的分離；反之，用于小分子物質(zhì)的分離。用于小分子物質(zhì)的分離。 G G型凝膠

23、用于流動相為水的色譜分離；另外，型凝膠用于流動相為水的色譜分離；另外，LHLH型凝膠應用范型凝膠應用范圍更廣，極性、親水性和親脂性流動相中均可應用。圍更廣，極性、親水性和親脂性流動相中均可應用。 凝凝膠膠色色譜譜基基本本構(gòu)構(gòu)成成要要素素流動相流動相（1 1）基本要求）基本要求 流動相必須是能夠溶解試劑的溶劑；不能破壞凝膠的穩(wěn)定性；流動相必須是能夠溶解試劑的溶劑；不能破壞凝膠的穩(wěn)定性；能潤濕凝膠使其膨脹；粘度要低，能保持一定的流動性。能潤濕凝膠使其膨脹；粘度要低，能保持一定的流動性。（2 2）種類）種類 1 1）極性溶劑和親水性溶劑：水和各種水溶液。）極性溶劑和親水性溶劑：水和各種水溶液。 2

24、2）親脂性溶劑：各種親脂性有機溶劑。如氯仿、四氫呋喃、）親脂性溶劑：各種親脂性有機溶劑。如氯仿、四氫呋喃、甲苯等。甲苯等。（3 3）選擇原則）選擇原則 分離水溶性樣品選擇極性溶劑和親水性溶劑；分離脂溶性成分離水溶性樣品選擇極性溶劑和親水性溶劑；分離脂溶性成分選擇親脂性溶劑。分選擇親脂性溶劑。 凝凝膠膠色色譜譜的的操操作作技技術(shù)術(shù) 凝膠的預處理凝膠的預處理 將干凝膠用選好的流動相（溶劑）充分浸泡膨脹后備用。將干凝膠用選好的流動相（溶劑）充分浸泡膨脹后備用。 一般選擇直徑為一般選擇直徑為2.5cm2.5cm的柱子。凝膠裝入柱中后，放出溶劑，的柱子。凝膠裝入柱中后，放出溶劑，在用溶劑不斷流洗柱子，使

25、凝膠沉集、柱床穩(wěn)定。并始終保持一在用溶劑不斷流洗柱子，使凝膠沉集、柱床穩(wěn)定。并始終保持一定的液面。定的液面。 把需要分離的成分溶于選好的溶劑中，上樣前為防止破壞柱床把需要分離的成分溶于選好的溶劑中，上樣前為防止破壞柱床表面，要在柱床表面放一張濾紙。上樣方法同一般柱色譜。表面，要在柱床表面放一張濾紙。上樣方法同一般柱色譜。 洗脫劑和浸泡凝膠所用的溶劑相同。洗脫劑和浸泡凝膠所用的溶劑相同。 分段收集，定性檢查，合并同一組分，再行精制。分段收集，定性檢查，合并同一組分，再行精制。裝柱裝柱 上樣上樣 洗脫洗脫 收集收集 鞣鞣質(zhì)質(zhì)類類的的檢檢識識生物堿及重生物堿及重金屬鹽反應金屬鹽反應 三氯化鐵反三氯化

26、鐵反應和鐵氰化應和鐵氰化鉀反應鉀反應 由于鞣質(zhì)結(jié)構(gòu)中含有大量酚由于鞣質(zhì)結(jié)構(gòu)中含有大量酚羥基，因此在鞣質(zhì)的水溶液羥基，因此在鞣質(zhì)的水溶液中加入三氯化鐵能產(chǎn)生綠色、中加入三氯化鐵能產(chǎn)生綠色、藍色或沉淀；鞣質(zhì)與鐵氰化藍色或沉淀；鞣質(zhì)與鐵氰化鉀的氨溶液反應產(chǎn)生深紅色鉀的氨溶液反應產(chǎn)生深紅色并很快變成棕色。并很快變成棕色。鞣質(zhì)可與生物堿及重金屬鞣質(zhì)可與生物堿及重金屬鹽作用生成不溶于水的沉鹽作用生成不溶于水的沉淀。如與醋酸鉛、醋酸銅、淀。如與醋酸鉛、醋酸銅、濃重鉻酸鉀。還可與堿土濃重鉻酸鉀。還可與堿土金屬的氫氧化物如氫氧化金屬的氫氧化物如氫氧化鈣溶液生成沉淀。鈣溶液生成沉淀。（三）檢識任務一任務一 兒茶中

27、鞣質(zhì)類化學成分的提取分離技術(shù)兒茶中鞣質(zhì)類化學成分的提取分離技術(shù)學習目標學習目標一一二三三兒茶中兒茶素與（兒茶中兒茶素與（- -）表兒茶素）表兒茶素的提取分離技術(shù)的提取分離技術(shù)必備知識四 課堂互動一一 學習目標學習目標2掌握兒茶中鞣質(zhì)類掌握兒茶中鞣質(zhì)類化合物的提取、分化合物的提取、分離及鑒定技術(shù)。離及鑒定技術(shù)。熟悉兒茶中鞣質(zhì)類熟悉兒茶中鞣質(zhì)類化合物的結(jié)構(gòu)及性化合物的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。質(zhì)。了解兒茶中鞣質(zhì)類了解兒茶中鞣質(zhì)類化合物的存在及生化合物的存在及生物活性。物活性。知識要求知識要求3能力要求能力要求1掌握兒茶中鞣質(zhì)類掌握兒茶中鞣質(zhì)類化學成分的提取分化學成分的提取分離原理及操作技術(shù)離原理及操作技術(shù)。熟練

28、進行兒茶中熟練進行兒茶中鞣質(zhì)類化合物的鞣質(zhì)類化合物的提取、分離及鑒提取、分離及鑒定操作。定操作。學會兒茶中鞣質(zhì)學會兒茶中鞣質(zhì)類化合物的色譜類化合物的色譜鑒定技術(shù)。鑒定技術(shù)。學習目的學習目的二 兒茶中鞣質(zhì)類化學成分的提取分離技術(shù) 本品為豆科植物兒茶本品為豆科植物兒茶(Acacia catechu (L.F.) (Acacia catechu (L.F.) Willd)Willd)的去皮枝、干的干燥煎膏。冬季采收枝、干，的去皮枝、干的干燥煎膏。冬季采收枝、干，除去外皮，砍成大塊，加水煎煮，濃縮，干燥。在我除去外皮，砍成大塊，加水煎煮，濃縮，干燥。在我國主要分布在云南、廣西等地。具有收濕生肌斂瘡等國

29、主要分布在云南、廣西等地。具有收濕生肌斂瘡等作用。作用。（一）設(shè)備、儀器及藥品（一）設(shè)備、儀器及藥品 滲漉筒、普通漏斗、錐形瓶、減壓濃縮裝置、滲漉筒、普通漏斗、錐形瓶、減壓濃縮裝置、玻璃棒、紗布、新鮮兒茶心材粉末、丙酮、醋酸玻璃棒、紗布、新鮮兒茶心材粉末、丙酮、醋酸乙酯乙酯（二）兒茶中（二）兒茶中（-）表兒茶素與兒茶素的提取與）表兒茶素與兒茶素的提取與分離流程分離流程 1.兒茶中（兒茶中（-）表兒茶素的提取與分離）表兒茶素的提取與分離h2.兒茶素的提取與分離兒茶素的提取與分離加入5倍量的85%乙醇，水浴20min 過濾，殘渣用23倍（二）兒茶中主要有效成分的提取分離（二）兒茶中主要有效成分的提

30、取分離 （一）兒茶中主要化學成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)（一）兒茶中主要化學成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)三三 必備知識必備知識（一）兒茶中主要化學成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)（一）兒茶中主要化學成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì) 兒茶中主要含有酚酸性成分。包括兒茶素、兒茶中主要含有酚酸性成分。包括兒茶素、（-）表兒茶素、兒茶鞣酸、對苯二甲酸甲酯等。）表兒茶素、兒茶鞣酸、對苯二甲酸甲酯等。此外，還含有較多的多聚糖，如由半乳糖、阿拉伯此外，還含有較多的多聚糖，如由半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖及葡萄糖醛酸組成的二聚糖、三聚糖、糖、鼠李糖及葡萄糖醛酸組成的二聚糖、三聚糖、六聚糖等。六聚糖等。（- -）表兒）表兒 茶素茶素 類白色粉末，熔點類白

31、色粉末，熔點242242，溶于水（易溶于，溶于水（易溶于熱水）、甲醇、乙醇、冰醋酸等，不溶于苯、熱水）、甲醇、乙醇、冰醋酸等，不溶于苯、氯仿、石油醚。氯仿、石油醚。（+ +）兒）兒茶素茶素 （- -）兒）兒茶素茶素 類白色粉末，溶于熱水、甲醇、乙醇、冰醋類白色粉末，溶于熱水、甲醇、乙醇、冰醋酸等，不溶于苯、氯仿、石油醚。酸等，不溶于苯、氯仿、石油醚。白色針狀結(jié)晶，熔點白色針狀結(jié)晶，熔點212216212216，溶于熱水、，溶于熱水、甲醇、乙醇、冰醋酸等，微溶于冷水，幾乎甲醇、乙醇、冰醋酸等，微溶于冷水，幾乎不溶于苯、氯仿、石油醚。不溶于苯、氯仿、石油醚。OOHHOHOHOHHOOHHOHOHO

32、HOHH（- -）表）表兒茶素兒茶素（+ +）兒）兒茶素茶素（- -）兒）兒茶素茶素OOHHOHOHOHHOH（二）兒茶中主要有效成分的提取分離（二）兒茶中主要有效成分的提取分離 從兒茶中提取分離鞣質(zhì)類成分是根據(jù)兒茶中的各種鞣質(zhì)類成分的溶解性特點選擇合適的提取溶劑，去油溶劑，結(jié)晶溶劑，逐步達到分離目的的。 四四 課課 堂堂 互互 動動 用前述知識說明兒茶中各種化學成分的特點和性質(zhì)，并分析生產(chǎn)工藝中用如何提取各種不同的鞣質(zhì)類成分。有機酸類化學成分的提取分離技術(shù)有機酸類化學成分的提取分離技術(shù)學習學習提示提示有機酸類化學成分的結(jié)構(gòu)、性有機酸類化學成分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及提取分離知識質(zhì)及提取分離知識任務二任

33、務二青木香中有機酸類化學成分的青木香中有機酸類化學成分的提取分離技術(shù)提取分離技術(shù)學習提示學習提示有機酸類成分的結(jié)構(gòu)類型有機酸類成分的結(jié)構(gòu)類型一一二三三有機酸類成分的理化性質(zhì)有機酸類成分的理化性質(zhì) 有機酸類化學成分的提取分離有機酸類化學成分的提取分離分分 布布生物活性生物活性定義定義有機酸是分子中有機酸是分子中含有羧基（含有羧基（-COOH）的一類）的一類酸性有機化合物酸性有機化合物分布廣泛，普遍分布廣泛，普遍存在于植物的花存在于植物的花、葉、莖、果實、葉、莖、果實、種子、根等部、種子、根等部分。在植物體內(nèi)分。在植物體內(nèi)除有少數(shù)以游離除有少數(shù)以游離狀態(tài)存在外，一狀態(tài)存在外，一般都與鈣、鉀、般都與

34、鈣、鉀、鎂等金屬離子或鎂等金屬離子或生物堿結(jié)合成鹽生物堿結(jié)合成鹽。近年來發(fā)現(xiàn)很多藥材近年來發(fā)現(xiàn)很多藥材中含有的有機酸類成中含有的有機酸類成分都具有一定的生物分都具有一定的生物活性。如茵陳蒿中綠活性。如茵陳蒿中綠原酸有利膽、抗菌作原酸有利膽、抗菌作用；土槿皮中的土槿用；土槿皮中的土槿皮酸有很好的抗真菌皮酸有很好的抗真菌作用；大風子油中的作用；大風子油中的脂肪酸是治療麻風病脂肪酸是治療麻風病的有效成分；金銀花的有效成分；金銀花中的異綠原酸有抗菌中的異綠原酸有抗菌的作用等等。大量研的作用等等。大量研究結(jié)果顯示，有機酸究結(jié)果顯示，有機酸有多種生物活性。有多種生物活性。有機酸有機酸脂肪族有機酸脂肪族有機

35、酸 芳香族有機酸芳香族有機酸一 有機酸類成分的結(jié)構(gòu)類型CCH2COOHCH2HOCOOHCOOH(CH2)12COOH 檸檬酸檸檬酸大風子油酸 COOHOHOHOHOCOOHOH135 綠原酸 檸檬酸檸檬酸大風子油酸大風子油酸 綠原酸綠原酸 主要來源于檸檬主要來源于檸檬（CitruslimonCitruslimon(L.)Burm.f(L.)Burm.f）是蕓香科小喬木或枝條開是蕓香科小喬木或枝條開展的灌木展的灌木 有預防感冒、刺激造血有預防感冒、刺激造血和抗癌等作用和抗癌等作用 主要來源于大風子科主要來源于大風子科(Flacourtiaceae)(Flacourtiaceae)大風大風子屬子

36、屬(Hydnocarpus)(Hydnocarpus)的幾的幾種喬木籽中獲得的黃色種喬木籽中獲得的黃色或褐黃色液體或褐黃色液體 有攻毒，殺蟲等作用有攻毒，殺蟲等作用 主要來源于菊科植物主要來源于菊科植物茵陳茵陳（AremisiacapillalisThuAremisiacapillalisThunb.nb.）早春采集的嫩莖葉）早春采集的嫩莖葉 有清熱利濕等作用有清熱利濕等作用二 有機酸類化學成分的理化性質(zhì)性狀性狀 溶解性溶解性酸性酸性含含8 8個碳原個碳原子以下的子以下的低級脂肪低級脂肪酸和不飽酸和不飽和脂肪酸和脂肪酸在常溫時在常溫時多為液體，多為液體，較高級的較高級的飽和脂肪飽和脂肪酸、多元

37、酸、多元酸和芳香酸和芳香酸多為固酸多為固體體。 低級脂肪酸多易溶于水或低級脂肪酸多易溶于水或乙醇，隨分子中所含碳原乙醇，隨分子中所含碳原子數(shù)目的增多，對水的溶子數(shù)目的增多，對水的溶解度即迅速降低，解度即迅速降低，4 4個碳個碳原子以上的酸僅微溶于水；原子以上的酸僅微溶于水；分子中極性集團越多，在分子中極性集團越多，在水中的溶解度越大。多元水中的溶解度越大。多元酸比一元酸易溶于水，含酸比一元酸易溶于水，含羥基數(shù)目多的有機酸水溶羥基數(shù)目多的有機酸水溶性大；芳香族的酸類難溶性大；芳香族的酸類難溶于水，而易溶于乙醇和乙于水，而易溶于乙醇和乙醚中；芳香酸易升華，也醚中；芳香酸易升華，也能隨水蒸氣蒸餾。能

38、隨水蒸氣蒸餾。有機酸中含羧基，具有機酸中含羧基，具有一般羧酸的性質(zhì)，有一般羧酸的性質(zhì)，可生成酯、酰胺、?？缮甚?、酰胺、酰鹵等衍生物；能和堿鹵等衍生物；能和堿金屬、堿土金屬結(jié)合金屬、堿土金屬結(jié)合成鹽，其一價金屬鹽成鹽，其一價金屬鹽易溶于水，不溶于有易溶于水，不溶于有機溶劑和高濃度的乙機溶劑和高濃度的乙醇，二價、三價金屬醇，二價、三價金屬鹽較難溶于水，如有鹽較難溶于水，如有機酸的鉛鹽、鈣鹽。機酸的鉛鹽、鈣鹽。常用于有機酸的提取常用于有機酸的提取和分離。和分離。檢識檢識有機酸類化學成分的檢識溴酚溴酚藍試藍試驗驗 色譜檢識色譜檢識 pHpH試試紙試紙試驗驗 有機酸溶液可使pH試紙呈酸性反應。 薄層色

39、譜 展開劑 ：正丁醇 冰醋酸 水（4 1 5）正丁醇 乙醇 水（4 1 5）異戊醇 三甲基吡啶 水（10 2 1）正丁醇 吡啶 二氧六環(huán) 水（14 4 1 1）顯色劑 0.05%溴酚藍的乙醇溶液噴霧，于藍色背景上呈黃色斑點。 將含有機酸的提取液滴在濾紙上，再滴加0.1%溴酚藍試劑，立即在藍色的背景上顯黃色斑點。紙色譜 吸附劑： 聚酰胺（100目）淀粉 水（5 1 5）鋪板展開劑 95%乙醇氯仿 甲醇（1 1）顯色劑 0.05%溴酚藍水溶液吸附劑 硅膠 石膏 水（10 2 30）濕法鋪板，晾干后于105干燥半小時。展開劑 95%乙醇濃氨水 水（10 16 12） 醋酸乙酯 甲醇 濃氨水（90 5

40、 3） 苯 甲醇 醋酸（95 8 4）顯色劑 0.05%溴酚藍水溶液三三 有機酸類化學成分的的提取分離有機酸類化學成分的的提取分離有有機機酸酸類類化化學學成成分分的的的的提提取取分分離離水或堿水水或堿水提取提取-酸沉酸沉淀法淀法 鉛鹽或鈣鹽鉛鹽或鈣鹽沉淀法沉淀法 有機溶劑提有機溶劑提取法取法 有機酸在中藥中一般以鹽的形式存在，故可用水或稀堿水提取（10%氫氧化鈉），提取液經(jīng)酸化后，如所生成的游離有機酸在水中溶解度較低，即有沉淀析出。也可用適當?shù)挠袡C溶劑萃取，有機酸溶于有機溶劑中。 利用有機酸的二價或三價金屬鹽較難溶于水的性質(zhì)，在含有有機酸的水溶液中加入醋酸鉛、堿式醋酸鉛或氫氧化鈣，可產(chǎn)生有機酸

41、的鉛鹽或鈣鹽的沉淀。再將所得的鉛鹽或鈣鹽的沉淀懸浮于乙醇中，分別按常法脫鉛、脫鈣（用硫酸），即可得粗品有機酸。 根據(jù)游離有機酸易溶于有機溶劑，難溶于水，而有機酸鹽則易溶于有機溶劑的性質(zhì)，可先用適宜的有機溶劑提取，提取液再用堿水萃取，有機酸成鹽而轉(zhuǎn)入堿水中，分出堿層、酸化，再用有機溶劑萃取，可得到較純的總有機酸。任務二任務二 青木香中有機酸類化學成分的提取分離技術(shù)青木香中有機酸類化學成分的提取分離技術(shù) 學習目標學習目標一一二青木香中有機酸類化學成分的提取分離技術(shù)青木香中有機酸類化學成分的提取分離技術(shù) 必備知識必備知識三三一一 學習目標學習目標2掌握青木香中馬兜掌握青木香中馬兜鈴酸的提取、分離鈴酸

42、的提取、分離及鑒定技術(shù)。及鑒定技術(shù)。熟悉青木香中馬兜熟悉青木香中馬兜鈴酸的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。鈴酸的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。了解青木香中馬兜了解青木香中馬兜鈴酸的存在及生物鈴酸的存在及生物活性。活性。知識要求知識要求3能力要求能力要求1掌握青木香中馬兜掌握青木香中馬兜鈴酸的提取分離原鈴酸的提取分離原理及操作技術(shù)。理及操作技術(shù)。熟練進行青木香熟練進行青木香中馬兜鈴酸的提中馬兜鈴酸的提取、分離及鑒定取、分離及鑒定操作。操作。學會青木香中馬學會青木香中馬兜鈴酸的色譜鑒兜鈴酸的色譜鑒定技術(shù)。定技術(shù)。學習目的二 青木香中有機酸類化學成分的提取分離技術(shù)青木香中有機酸類化學成分的提取分離技術(shù) 青 木 香 為 馬 兜 鈴 科 馬

43、 兜 鈴 屬 植 物 馬 兜 鈴青 木 香 為 馬 兜 鈴 科 馬 兜 鈴 屬 植 物 馬 兜 鈴（Aristolochia debilisAristolochia debilis）的干燥根。青木香中含有多）的干燥根。青木香中含有多種硝基菲酸類成分，統(tǒng)稱為馬兜鈴酸。經(jīng)藥理與臨床試種硝基菲酸類成分，統(tǒng)稱為馬兜鈴酸。經(jīng)藥理與臨床試驗證明有興奮吞噬細胞的作用，可提高抗生素及化療藥驗證明有興奮吞噬細胞的作用，可提高抗生素及化療藥物的治療效果，并且毒性很低，治療劑量僅為毒性劑量物的治療效果，并且毒性很低，治療劑量僅為毒性劑量的的11。（一）設(shè)備、儀器及藥品（一）設(shè)備、儀器及藥品索氏提取器、冷凝器、圓底燒

44、瓶、橡皮管、水浴、索氏提取器、冷凝器、圓底燒瓶、橡皮管、水浴、減壓濃縮裝置、普通漏斗、紗布、減壓濃縮裝置、普通漏斗、紗布、pH試紙、比色試紙、比色卡、玻璃棒、分液漏斗、青木香粗粉、乙醇、碳卡、玻璃棒、分液漏斗、青木香粗粉、乙醇、碳酸氫鈉、鹽酸、丙酮、青木香粗粉酸氫鈉、鹽酸、丙酮、青木香粗粉（二）青木香中馬兜鈴酸的提取（二）青木香中馬兜鈴酸的提取 1馬兜鈴酸的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)馬兜鈴酸的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì) 馬兜鈴酸為黃白色針狀結(jié)晶，能與硫酸作用產(chǎn)生綠馬兜鈴酸為黃白色針狀結(jié)晶，能與硫酸作用產(chǎn)生綠色。熔點色。熔點287287292292（分解）（分解）. .微溶于水微溶于水, ,可溶于可溶于乙醇、氯仿、乙醚

45、、丙酮、堿水，不溶于苯、二硫乙醇、氯仿、乙醚、丙酮、堿水，不溶于苯、二硫化碳，遇碳酸鋇、醋酸鉛等重金屬溶液則產(chǎn)生沉淀。化碳，遇碳酸鋇、醋酸鉛等重金屬溶液則產(chǎn)生沉淀。 馬兜鈴酸馬兜鈴酸OOCOOHNO2OCH32.青木香中馬兜鈴酸的提取與分離流程如下：青木香中馬兜鈴酸的提取與分離流程如下： 馬兜鈴酸馬兜鈴酸（1 1）青木香中馬兜鈴酸）青木香中馬兜鈴酸A A與尿囊素的提取。與尿囊素的提取。 馬兜鈴酸馬兜鈴酸kgpHg馬兜鈴總馬兜鈴總酸常用硅酸常用硅膠拄色譜膠拄色譜進行分離，進行分離，以氯仿、以氯仿、氯仿氯仿- -丙丙酮混合液酮混合液洗脫，再洗脫，再配合薄層配合薄層色譜檢識色譜檢識可分得三可分得三種

46、馬兜鈴種馬兜鈴酸：馬兜酸：馬兜鈴酸鈴酸A A、馬兜鈴酸馬兜鈴酸及及7-7-羥基羥基馬兜鈴酸。馬兜鈴酸。（2 2）青木香中馬兜鈴總酸的提取。）青木香中馬兜鈴總酸的提取。北馬兜鈴果實中馬兜鈴酸北馬兜鈴果實中馬兜鈴酸A 的提取的提取北馬兜鈴種子中馬兜鈴北馬兜鈴種子中馬兜鈴酸酸D的提取的提取知識拓展知識拓展必備知識必備知識 馬兜鈴總酸（馬兜鈴總酸（aristolochic acidaristolochic acid） 橙黃色結(jié)晶，橙黃色結(jié)晶， 味苦，味苦，熔點熔點262262266266（分解）。不溶于水，難溶于乙醇、乙醚、（分解）。不溶于水，難溶于乙醇、乙醚、氯仿、醋酸乙酯，易溶于丙酮及堿性水溶液。

47、氯仿、醋酸乙酯，易溶于丙酮及堿性水溶液。馬兜馬兜鈴酸鈴酸（1 1）馬兜鈴酸）馬兜鈴酸A A（aristolochic acid Aaristolochic acid A）分子式分子式C17H11NO7C17H11NO7，相對分子質(zhì)量，相對分子質(zhì)量341.29341.29，帶光澤的棕色葉，帶光澤的棕色葉狀結(jié)晶（二甲基甲酰胺狀結(jié)晶（二甲基甲酰胺- -水），熔點水），熔點281281286286（分解）。（分解）。溶于乙醇、氯仿、丙酮、苯胺及堿中，微溶于水溶于乙醇、氯仿、丙酮、苯胺及堿中，微溶于水, ,幾乎不溶幾乎不溶于苯及二硫化碳于苯及二硫化碳。（2 2）馬兜鈴酸）馬兜鈴酸B B（aristolo

48、chic acid Baristolochic acid B）分子式分子式C16H9NO6C16H9NO6，相對分子質(zhì)量，相對分子質(zhì)量311.26311.26。黃色粒鯨（氯仿），。黃色粒鯨（氯仿），熔點熔點267267271271（分解）。（分解）。（3 3）馬兜鈴酸）馬兜鈴酸C C（aristolochic acid Caristolochic acid C）分子式分子式C16H9NO7C16H9NO7，相對分子質(zhì)量，相對分子質(zhì)量327.27327.27。橘紅色針晶（氯。橘紅色針晶（氯仿），熔點仿），熔點284284（分解）。（分解）。（4 4）馬兜鈴酸）馬兜鈴酸D D（aristoloch

49、ic acid Daristolochic acid D）分子式）分子式C17H11NO8C17H11NO8，相對分子質(zhì)量相對分子質(zhì)量357.29357.29。橙紅色針晶（氯仿），熔點。橙紅色針晶（氯仿），熔點271271（分解）。（分解）。北馬兜鈴果實中馬兜鈴酸北馬兜鈴果實中馬兜鈴酸A 的提取的提取北馬兜鈴種子中馬兜鈴北馬兜鈴種子中馬兜鈴酸酸D的提取的提取OOCOOHR4R1R3R2馬兜鈴酸馬兜鈴酸A、B、C、D結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)OCH3HHNO2HHHNO2HHOHNO2OCH3HOHNO2必備知識必備知識 分子式分子式C4H6N4O3C4H6N4O3，相對分子質(zhì)量，相對分子質(zhì)量158.12158.

50、12。單斜片狀結(jié)晶或棱。單斜片狀結(jié)晶或棱柱結(jié)晶（水），熔點柱結(jié)晶（水），熔點238238，1g1g尿囊素溶于尿囊素溶于190ml190ml水、水、500ml500ml乙乙醇，熱水及熱乙醇中溶解度更大。幾乎不溶于乙醚。醇，熱水及熱乙醇中溶解度更大。幾乎不溶于乙醚。尿囊素尿囊素（allantoin）HNNOOH2NOCHN尿囊素尿囊素氨基酸類化學成分的提取分離技術(shù)氨基酸類化學成分的提取分離技術(shù)學習學習提示提示氨基酸類化學成分的結(jié)構(gòu)、性氨基酸類化學成分的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及提取分離知識質(zhì)及提取分離知識任務三任務三南瓜子中南瓜子氨酸的提取分南瓜子中南瓜子氨酸的提取分離技術(shù)離技術(shù)學習提示學習提示氨基酸類成分的結(jié)

51、構(gòu)類型氨基酸類成分的結(jié)構(gòu)類型一一二三三氨基酸類化學成分的理化性質(zhì)氨基酸類化學成分的理化性質(zhì)氨基酸類化學成分的提取分離氨基酸類化學成分的提取分離 氨基酸氨基酸 氨基酸廣泛存在氨基酸廣泛存在于動植物體內(nèi)，由于動植物體內(nèi)，由于它的分子中同時于它的分子中同時含有氨基和羧基，含有氨基和羧基，所以稱為氨基酸。所以稱為氨基酸。氨基酸的活性作用氨基酸的活性作用也是多方面的，如也是多方面的，如南瓜子中南瓜子氨南瓜子中南瓜子氨酸、使君子中使君酸、使君子中使君子氨酸都有驅(qū)蟲作子氨酸都有驅(qū)蟲作用；天冬、玄參和用；天冬、玄參和棉根中天門冬素有棉根中天門冬素有鎮(zhèn)咳和平喘的作用鎮(zhèn)咳和平喘的作用。NHNH2COOHONNHO

52、OCH2CHNH2COOHNH2COCH2CHCOOHNH2 南瓜子氨酸南瓜子氨酸 使君子氨酸使君子氨酸天門冬素天門冬素 一一 氨基酸類成分的結(jié)構(gòu)類型氨基酸類成分的結(jié)構(gòu)類型 常見氨基酸以組成蛋白質(zhì)的常見氨基酸以組成蛋白質(zhì)的3030余種氨基酸為主，都屬余種氨基酸為主，都屬- -氨基羧酸，具有氨基羧酸，具有R-CHR-CH（NH2NH2）-COOH-COOH通式，多數(shù)是一元氨基一羧通式，多數(shù)是一元氨基一羧酸，也有一元氨基二羧酸、二元氨基一羧酸和含有雜環(huán)的氨基酸，也有一元氨基二羧酸、二元氨基一羧酸和含有雜環(huán)的氨基酸等。酸等。 R-CH R-CH（NH2NH2）-COOH -COOH 組成蛋白質(zhì)常見氨

53、基酸的結(jié)構(gòu)組成蛋白質(zhì)常見氨基酸的結(jié)構(gòu) 組組成成蛋蛋白白質(zhì)質(zhì)常常見見氨氨基基酸酸的的結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)一元氨基一羧酸一元氨基一羧酸類類 (R= ) 二元氨基一二元氨基一羧酸類羧酸類(R=(R=）一元氨基二一元氨基二羧酸類羧酸類(R= ) 如 甘氨酸（GLY） R=H ；丙氨酸（ALA） R= CH3；絲氨酸（SER） R= CH2OH；半胱氨酸（CYST） R= CH2SH；磺丙氨酸（CYA） R= CH2SO3H；苯丙氨酸（PHEN）；酪氨酸（TYR） ； -氨基丁酸(ABA) R=CH2CH3；酥氨酸(THR) ； 蛋氨酸(MET) R= CH2CH2SCH3；正纈氨酸(NOV) R= CH2CH2C

54、H3纈氨酸(VAL)； 異亮氨酸(ISOL) ； 亮氨酸亮氨酸(LEU) 脯氨酸（PRO） ；羥基脯氨酸（APRO） 天冬氨酸（ASP） R=CH2COOH；谷氨酸(麩氨酸)（GLU）R=CH2CH2COOH；羥基谷氨酸（HGLU）吡咯衍生物吡咯衍生物類類(R= ) 色氨酸（TRY）；，二氨基丁酸（DABA） R= CH2CH2NH2 ；組氨酸（HIST）； 鳥氨酸（ORNT） R=CH2CH2CH2NH2； 精氨酸（ARG）；賴氨酸賴氨酸 CH2(CH2)3NH2 二 氨基酸類化學成分的理化性質(zhì)性質(zhì)性質(zhì) 顯色反應顯色反應氨基酸分子氨基酸分子中既有羧基中既有羧基又有氨基，又有氨基，所以氨基酸所

55、以氨基酸為兩性物質(zhì)，為兩性物質(zhì)，既溶于酸又既溶于酸又溶于堿。氨溶于堿。氨基酸為無色基酸為無色結(jié)晶，極性結(jié)晶，極性較大，易溶較大，易溶于水，難溶于水，難溶于有機溶劑。于有機溶劑。茚三酮試驗茚三酮試驗 噴后噴后110加熱加熱至顯出顏色，一至顯出顏色，一般氨基酸呈紫色，般氨基酸呈紫色，個別氨基酸顯黃個別氨基酸顯黃色。此外，氨氣色。此外，氨氣也會出現(xiàn)此現(xiàn)象，也會出現(xiàn)此現(xiàn)象，故用茚三酮試劑故用茚三酮試劑檢查氨基酸時，檢查氨基酸時，應避免實驗室中應避免實驗室中氨氣的干擾。氨氣的干擾。1，2-萘醌萘醌-4-磺磺酸試劑（酸試劑（Folin試劑）試劑） 噴后在室溫干燥，噴后在室溫干燥，不同氨基酸產(chǎn)生不同氨基酸產(chǎn)

56、生各種不同的顏色。各種不同的顏色。吲哚醌試驗吲哚醌試驗 不同氨基酸與不同氨基酸與吲哚醌試劑產(chǎn)吲哚醌試劑產(chǎn)生不同的顏色，生不同的顏色，且不受氨氣的且不受氨氣的影響，但其靈影響，但其靈敏度不及茚三敏度不及茚三酮。酮。 三三 氨基酸類化學成分的提取氨基酸類化學成分的提取 氨基酸類成分常用離子交換法提取。根據(jù)氨基酸易溶氨基酸類成分常用離子交換法提取。根據(jù)氨基酸易溶于水，難溶于有機溶劑的性質(zhì)，提取氨基酸時，可用適量于水，難溶于有機溶劑的性質(zhì)，提取氨基酸時，可用適量水浸泡藥材，濾過，濾液減壓濃縮至水浸泡藥材，濾過，濾液減壓濃縮至1ml1ml相當相當1g1g生藥后，生藥后，加加2 2倍量倍量95%95%乙醇

57、，沉淀除去蛋白、多糖等雜質(zhì)，濾液再濃乙醇，沉淀除去蛋白、多糖等雜質(zhì)，濾液再濃縮至小體積，通過強酸型陽離子交換樹脂，然后用適當濃縮至小體積，通過強酸型陽離子交換樹脂，然后用適當濃度的氫氧化鈉（度的氫氧化鈉（1mol/L1mol/L）或氨水（）或氨水（2mol/L2mol/L）洗脫，收集與）洗脫，收集與茚三酮呈陽性反應的洗脫液，濃縮處理后，可得總氨基酸，茚三酮呈陽性反應的洗脫液，濃縮處理后，可得總氨基酸，或用或用70%70%乙醇為溶劑進行提取，再將乙醇回收至無醇味，乙醇為溶劑進行提取，再將乙醇回收至無醇味，通過強酸型陽離子交換樹脂，再用上法得總氨基酸。通過強酸型陽離子交換樹脂，再用上法得總氨基酸。

58、任務三任務三 南瓜子中南瓜子氨酸的提取分離技術(shù)南瓜子中南瓜子氨酸的提取分離技術(shù) 學習目標學習目標一一二南瓜子中南瓜子氨酸的提取分離技術(shù)南瓜子中南瓜子氨酸的提取分離技術(shù)一一 學習目標學習目標2掌握南瓜子中南瓜掌握南瓜子中南瓜子氨酸的提取、分子氨酸的提取、分離及鑒定技術(shù)。離及鑒定技術(shù)。熟悉南瓜子中南瓜熟悉南瓜子中南瓜子氨酸的結(jié)構(gòu)及性子氨酸的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)。質(zhì)。了解南瓜子中南瓜了解南瓜子中南瓜子氨酸的存在及生子氨酸的存在及生物活性。物活性。知識要求知識要求3能力要求能力要求1掌握南瓜子中南瓜掌握南瓜子中南瓜子氨酸的提取分離子氨酸的提取分離原理及操作技術(shù)。原理及操作技術(shù)。熟練進行南瓜子熟練進行南瓜子中南瓜

59、子氨酸的中南瓜子氨酸的提取、分離及鑒提取、分離及鑒定操作。定操作。學會南瓜子中南學會南瓜子中南瓜子氨酸的色譜瓜子氨酸的色譜鑒定技術(shù)。鑒定技術(shù)。學習目的二 南瓜子中南瓜子氨酸的提取分離技術(shù) 南瓜子氨酸是從葫蘆科南瓜（南瓜子氨酸是從葫蘆科南瓜（Cucurbita moschataCucurbita moschata）的種子中分離出的一種氨基酸。南瓜子氨酸是一種堿性的種子中分離出的一種氨基酸。南瓜子氨酸是一種堿性氨基酸，可與過氯酸（氨基酸，可與過氯酸（HClO4HClO4）形成結(jié)晶性的鹽，從稀）形成結(jié)晶性的鹽，從稀乙醇溶液中析出。通過實驗表明，南瓜子氨酸對血吸蟲乙醇溶液中析出。通過實驗表明，南瓜子氨

60、酸對血吸蟲童蟲生長發(fā)育有抑制作用，并能驅(qū)絳蟲。童蟲生長發(fā)育有抑制作用，并能驅(qū)絳蟲。NHNH2COOH南瓜子氨酸南瓜子氨酸（一）設(shè)備、儀器及藥品（一）設(shè)備、儀器及藥品 強酸型陽離子交換柱色譜、弱堿型陰離子交換強酸型陽離子交換柱色譜、弱堿型陰離子交換柱色譜、減壓濃縮裝置、普通漏斗、紗布、柱色譜、減壓濃縮裝置、普通漏斗、紗布、pH試試紙、比色卡、氨水、氯酸、紙、比色卡、氨水、氯酸、95%乙醇、南瓜子乙醇、南瓜子（二）南瓜子中南瓜子氨酸的（二）南瓜子中南瓜子氨酸的 提取工藝流程提取工藝流程 pH南瓜南瓜子中子中南瓜南瓜子氨子氨酸的酸的 提取提取工藝工藝流程流程蛋白質(zhì)和酶類化學成分的提取分離技術(shù)蛋白質(zhì)和