生物實驗專題復習

1、生物實驗專題復習序號實驗名稱1細胞的觀察和測量2食物中主要營界成分的鑒定3探究植物細胞外界溶液濃度與質(zhì)壁分離的關系4顫藻和水綿細胞的比較觀察5探究酶的局效性6葉綠體色素的提取和分離7探究影響光合作用的因素8酵母菌的呼吸方式9觀察牛蛙的脊髓反射現(xiàn)象10小麥胚芽鞘的向光彎曲11DNA分子模型的搭建12植物細胞有絲分裂的觀察13植物細胞分化的觀察14性狀分離比的模擬試驗15果蠅唾液腺細胞染色體觀察16植物物種多樣性的倜查17培養(yǎng)基的配制18微生物的接種以及菌落和抗生素抑菌現(xiàn)象的觀察H一、DNA分子模型的搭建考點提示：1、脫氧核甘酸由哪幾部分構(gòu)成的？（一個磷酸、一個脫氧核糖、一個含氮堿基）2、含氮堿基

2、有哪幾種？脫氧核甘酸有哪幾種？（A.T.C.G及含有該四種堿基的四種脫氧核甘酸）3、每個脫氧核甘酸之間是在脫氧核糖和磷酸的部位連接。4、DNA分子的外側(cè)是磷酸和脫氧核糖，它們交替連結(jié)構(gòu)成了DNA分子的基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對。5、得出A和T配對，G和C配對，這就是堿基互補配對原則。6、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，DNA分子是向右螺旋的結(jié)構(gòu)，螺旋一周就是一個螺距，每個螺距有10個堿基對，長度為3.4納米。7、堿基對的排列順序千變?nèi)f化，可以看出DNAM有什么性？（多樣性）強調(diào)：正是由于DN冊子的多樣性，所以使我們的自然界豐富多彩。8、每個特定的DNA子都具有其特定的堿基排列順序，說明DNAa具有什么性？（

3、特異性）9、脫氧核糖和磷酸交替排列的骨架始終在外側(cè)，堿基互補配對原則始終沒變，這又體現(xiàn)了DNA分子的什么性呢？（穩(wěn)定性）10小結(jié)：DNA分子的結(jié)構(gòu)是由曲條互為平行的多核甘酸鏈構(gòu)成，方向相反,外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連成基本骨架,內(nèi)側(cè)是堿基對。堿基之間A與L配對，G與C配對，反之亦然。這就是堿基互補配對原則。堿基之間靠氫鍵連接,A和T之間兩個氫鍵，C和G之間三個氫鍵。經(jīng)螺旋后形成了一個雙螺旋的結(jié)構(gòu)。十二、植物細胞有絲分裂的觀察在完成了觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞有絲分裂實驗后，教師給學生提供了2份資料。資料一：一份“實驗報告”的部分內(nèi)容（一）解離：剪取洋蔥根尖5cm,放入盛有質(zhì)量分數(shù)為15%勺鹽酸和體

4、積分數(shù)為95%勺酒精混合液（體積比為1:1）的玻璃皿中，在室溫下解離35min。（二）染色：把根尖放在盛有0.01g/mL龍膽紫溶液的玻璃皿中染色35min。（三）漂洗：將根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗約10min。（四）制片：將根尖放在載玻片上，加一滴清水，并用鐐子把根尖弄碎，蓋上載玻片，用拇指輕輕按壓資料二：全班20個實驗小組的實驗數(shù)據(jù)匯總表（注：各小組計數(shù)50個細胞，實驗條件與觀察計數(shù)方法相同）細胞周期間期分裂期前期中期后期和末期實驗小組1計數(shù)細胞個數(shù)43412實驗小組2計數(shù)細胞個數(shù)44303全班計數(shù)細胞個數(shù)880671885計數(shù)細胞總數(shù)1000各時期細胞數(shù)的百分比88.06.71.83

5、.5(1)請改正“資料一”中的3處錯誤。(2)若已知洋蔥根尖分生區(qū)細胞的細胞周期為12.0h,請根據(jù)“資料二”，在答題卡上的餅狀圖中表示出間期、前期、中期以及后期和末期所占的時間(單位：h,精確到小數(shù)點后一位)。(3)有些因素會影響細胞周期各時期的長短，實驗過程中也會產(chǎn)生一些誤差。因而對整個實驗結(jié)果可能產(chǎn)生影響的有。取材時間根尖培養(yǎng)溫度解離時間長短載玻片厚度計數(shù)的細胞是否屬于分生區(qū)細胞細胞周期各時期區(qū)分是否準確參考答案：(1)將“5cm”改成“23mm；實驗操作步驟應改為先漂洗后染色；將“蓋上載玻片”改成“蓋上蓋玻片后，再蓋上2層吸水紙”(2)見下圖(3)州跑Q和建哈月十三、植物細胞分化的觀察

6、考點提示：1、為什么觀察植物細胞有絲分裂選材是根尖前端23毫米，而觀察植物細胞分化實驗則選擇整個根尖？2、根尖伸長區(qū)細胞的分化特點是什么？3、成熟區(qū)分化出那些不同功能的細胞？參考答案：1、根尖前端2-3mm處是分生區(qū)，有部分細胞在分裂。分生區(qū)上部的伸長區(qū)和成熟區(qū)有不斷分化成熟的細胞。2、細胞有長度上的生長，沒有寬度上的生長。3、輸送水分的導管，輸送有機物的篩管和具有根毛的表皮細胞十四、性狀分離比的模擬實驗考點提示：(1) 小桶中的小球代表什么？(2) 同一個小桶中的兩種小球的數(shù)目是否一定要相同？為什么？(3) 若將甲桶中小球數(shù)目增加一倍，是否會影響實驗結(jié)果？為什么？參考答案：(1) 小球代表生

7、物產(chǎn)生的配子。(2) 一定要相同，因為小球所代表的含不同基因的配子的數(shù)量應該是相同的。(3) 不會影響實驗結(jié)果。因為每次抓取某種小球的幾率不會改變。練習：甲、乙兩位同學分別用小球做遺傳定律模擬實驗。甲每次分別從I、n小桶中隨機抓取一個小球并記錄字母組合；乙每次分別從出、IV小桶中隨機抓取一個小球并記錄字母組合。將抓取的小球分別放回原來小桶后并多次重復。分析下列敘述錯誤的是：A甲、乙重復100次實驗后，統(tǒng)計的Dd、AB組合的概率均約為50%B實驗中每只小桶內(nèi)兩種小球必須相等，但卜n桶小球總數(shù)可不等C乙同學的實驗可模擬非同源染色體上非等位基因自由組合的過程D甲同學的實驗模擬的是遺傳因子的分離和配子

8、隨機結(jié)合的過程十五、果蠅唾液腺細胞染色體觀察考點提示：1、果蠅唾腺巨型染色體是大約10004000多條同源染色線精確配對聚集而成的多線染色體，這是染色體多次復制，但細胞只生長、不分裂的結(jié)果。染色體長達0.5mm,粗細是一般體細胞染色體的100200倍左右，其上有深淺間隔、寬窄不等的染色帶，果蠅4對唾腺染色體上已確定了6000多條染色帶，它們寬窄、疏密、順序、數(shù)目恒定，有種的特異性，同種個體的是相同的，不同的種則不一樣，因此果蠅多線染色體可以建立染色帶及間帶分布圖，它們的表現(xiàn)和遺傳學圖大致平行，多數(shù)遺傳學家認為這些橫紋與基因有對應關系，所以果蠅唾腺染色體是研究染色體結(jié)構(gòu)畸變，基因定位及基因表達(

9、mRNA合成)的良好材料。2、解離：在唾腺上加0.4%NaCl溶液，使細胞充分吸水膨脹，壓片時染色體易分散。兩分鐘后吸去NaCl溶液，滴加2滴1mol/LHCl,處理2分鐘，這樣粘附在唾腺上的脂肪體容易剔除，也有利于細胞分離和染色體伸展，便于壓片。之后反復用清水把HCl洗凈，以免影響染色。3、染色：醋酸洋紅染液染色15分鐘4、壓片：加上蓋片，覆上吸水紙，再以拇指垂直向下壓片十六、物種多樣性的調(diào)查1、動物物種多樣性的調(diào)查例：某種鼠的種群密度調(diào)查在調(diào)查動物的種群密度時，一般多采用標志重捕法(捉放法)。就是在一個有比較明確界限的區(qū)域內(nèi)，捕捉一定數(shù)量的動物個體進行標志，然后放回，經(jīng)過一個適當時期(標志

10、個體與未標志個體重新充分混合分布)后,再進行重捕。根據(jù)重捕樣本中標志者的比例，估計該區(qū)域的種群總數(shù)，可計算出某種動物的種群密度。標志重捕法的前提是，標志個體與未標志個體在重捕時被捕的概率相等。在標志重捕法中，標志技術極為重要，在操作中應注意以下幾點：1 .標志物和標志方法必須對動物的身體不會產(chǎn)生對于壽命和行為的傷害。2 .標志不能過分醒目。3 .標志符號必須能夠維持一定的時間，在調(diào)查研究期間不能消失。標志重捕法的應用比較廣泛，適用于哺乳類、鳥類、爬行類、兩棲類、魚類和昆蟲等動物。方法：標志重捕法過程：捕捉一部分個體，標記、計數(shù)（P）后放回原環(huán)境一段時間后進行重捕，計數(shù)總捕獲數(shù)（Ni）和重捕中標

11、記個體數(shù)（Pi）。求種群數(shù)量（N）:N:P=Ni：Pi說明:應盡量防止種群內(nèi)有遷入或遷出的個體。2、植物物種都樣性的調(diào)查方法：樣方法實驗過程一、材料用具皮尺（或卷尺），尼龍繩，木檄子，鋼筆（或圓珠筆），計錄本等。二、方法步驟及結(jié)果記錄1 .確定調(diào)查對象：本探究所調(diào)查的種群是植物或活動性弱的動物。2 .選取樣方：選取樣方注意隨機，樣方面積可大可小（0.25平方米到10平方米）三、觀察現(xiàn)象1、計數(shù)2、計算辛普森多樣性指數(shù)四、實驗結(jié)論辛普森多樣性指數(shù)大，物種多樣性程度高。練習：標志（記）重捕法”是動物種群密度調(diào)查中的一種常用取樣調(diào)查法：在被調(diào)查種群的生存環(huán)境中，捕獲一部分個體（M）全部進行標記后釋放

12、，經(jīng)過一段時間后進行重捕，根據(jù)重捕中標記個體數(shù)（m）占總捕獲數(shù)（n）的比例，估計該種群的數(shù)量（N）。某研究機構(gòu)對我國北方草原一種主要害鼠布氏田鼠進行了調(diào)查。調(diào)查樣方總面積為2hm（1hm=10000m2）,隨機布設100個鼠籠，放置l夜后，統(tǒng)計所捕獲的鼠數(shù)量、性別等，進行標記后放歸；3日后進行重捕與調(diào)查。所得到的調(diào)查數(shù)據(jù)如下表。捕釐，只確數(shù)/只雌性T悻額雌T悻數(shù)323214ris至41?(1)假定重捕取樣中標記比例與樣方總數(shù)中標記比例相等，寫出樣方中種群總數(shù)(N)的計算公式。(2)該草地布氏田鼠的平均種群密度為只/hm。事實上田鼠在被捕捉過一次后更難捕捉，上述計算所得的平均種群密度與實際種群密

13、度相比可能會偏。(3)綜合兩次捕獲情況，該田鼠種群的性別比例(孕/為。(4)在上述調(diào)查的同時，還對樣方中布氏田鼠的洞口數(shù)進行了調(diào)查(假設樣方中只有這一種鼠)，平均每100m2有3.6個洞口，洞口數(shù)與田鼠數(shù)的比例關系為。答案：(1)N=Mn/m(2)144高(3)8/9(或32/36)(4)2.5:1實驗目的: 實驗原理: 基藍染料, 越快。十七、水質(zhì)污染對生物的影響認識水質(zhì)污染對生物體存活的影響。污水中的需氧細菌數(shù)量與有機物含量成ML,需氧細菌能氧化分解亞甲使它從藍色變成無色。若水樣中需氧細菌越多，亞甲基藍染液被分解褪色得合成洗滌劑是一類普遍使用的生活用品，屬低毒有機物。它不易被分解，排入水體

14、或攝入生物體內(nèi)可逐步蓄積，當蓄積量超過一定程度時，就會污染水質(zhì)并影響人體健康。實驗材料:儀器試劑:0.01%水蚤、放置1天的洗碗水、河水、自來水顯微鏡、載玻片、蓋玻片、吸管、試管、試管架、量杯、吸水紙、秒表、亞甲基藍染液、清水滴瓶、2%1衣粉溶液實驗步驟：1 .水質(zhì)有機物污染與需氧細菌數(shù)量的關系：取放置一天的洗碗水、河水、自來水各5mL分別注入標有1、2、3編號的試管中，在每支試管中各加5滴0.01%亞甲基藍染液。把試管放在溫暖處。30分鐘后觀察各試管內(nèi)水樣變色情況，并記錄結(jié)果。2 .合成洗滌劑污染對生物的影響：取4支試管，分別編號4、5、6、7,按下列順序加入相應物質(zhì)和水蚤。然后每隔10分鐘

15、觀察1次，連續(xù)3次，比較各試管內(nèi)水蚤活動情況，并記錄每支試管內(nèi)水蚤死亡數(shù)目。3 .無機離子對生物的影響：（1）取載玻片一滴清水一吸水蚤一鏡檢（低）一記錄（每分心搏數(shù)，重復3次，求平均值）一正常值（2）滴加1%KCl溶液1-2滴一對側(cè)引流一重復1次一鏡檢（低）一記錄（水蚤活動狀況和心搏變化情況）實驗結(jié)果：1.水質(zhì)有機物與污染與需氧細菌數(shù)量的關系：試管編R水樣0.01%亞甲基藍染液（滴）放置時間（分鐘）實驗現(xiàn)象實驗結(jié)果及分析1洗碗水5302河水5303自來水5302.合成洗滌劑污染對生物的影響:試管編R加2%fc衣粉溶液數(shù)量水蚤存活及活動情況水蚤（只）清水(ml)10分鐘后20分鐘后30分鐘后45

16、10055105滴651025滴7555ml練習：1 .做實驗用的水樣需放置一天的原因是讓水中的細菌充分繁殖。2 .污水中的有機物含量越高，則污水中的好氧細菌數(shù)量越多,后者能氧化分解亞甲基藍染料,使它從藍色變?yōu)闊o色。3 .用放置太久的洗碗水做水質(zhì)污染實驗時，不能使0.01%亞甲藍溶液褪色，其合理解釋是（）A溶解氧太低，好氧細菌已死亡B亞甲藍溶液濃度太低C好氧細菌大量繁殖D溶解氧太多十八、培養(yǎng)基的配制與滅菌儀器和試劑燒杯（500ml、50ml）、三角燒瓶（250ml）、量筒、玻璃棒、玻璃漏斗、酒精燈、培養(yǎng)皿、牛皮紙、紗繩、托盤天平、滅菌鍋、牛肉膏、蛋白月東、NaCl、瓊脂、10%NaOH、10%

17、鹽酸、精密pH試紙、超凈工作臺實驗方法1 .根據(jù)培養(yǎng)基配方稱取各種原料成分，加入到500ml燒杯的少量自來水中溶解（其中牛肉膏可用50ml燒杯稱量，并用少許水加熱溶解后再加入到本燒杯中）,定容至200ml,用酒精燈加熱至沸騰后加入瓊脂2g（長條狀瓊脂需用剪刀剪成小段），繼續(xù)加熱至瓊脂完全熔化（加熱過程中要用玻璃棒不斷攪拌，以防瓊脂沉淀在杯底被燒焦），然后用熱水補足蒸發(fā)損失的水，使最后容積為200ml,用精密pH試紙測試培養(yǎng)基pH,并用滴管吸取12滴10%鹽酸或10%氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至7.27.4。2 .將完全熔化的上述培養(yǎng)基趁熱倒入250ml的三角燒瓶中（注意不要把培養(yǎng)基沾在瓶口上，可通過一個

18、漏斗注入三角燒瓶中），用兩層牛皮紙扎緊瓶口后，置于滅菌鍋中于1.05kg/cm2、121c下滅菌1530min。與此同時，還需將洗凈干燥的培養(yǎng)皿若干套用牛皮紙包扎后一起滅菌。3.待滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50c左右時（或臨用前加熱熔化冷至50c左右時），在啟動的超凈工作臺上打開三角燒瓶的包裝紙，并用酒精燈火焰燒瓶口后，將培養(yǎng)基分別倒入滅過菌的培養(yǎng)皿中備用（如培養(yǎng)皿出現(xiàn)冷凝水，需將培養(yǎng)皿倒置在3037c溫箱內(nèi)干燥）。牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基是一種應用最廣泛和最普通的細菌基礎培養(yǎng)基，有時又稱為通用培養(yǎng)基。它含有牛肉膏、蛋白月東和NaCl。其中牛肉膏為微生物提供碳源和能源，蛋白月東主要提供氮源，而NaCl提供

19、無機鹽。在配制固體培養(yǎng)基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96c時溶化，一般實際應用時在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化，以免瓊脂燒焦。瓊脂在40c時凝固，通常不被微生物分解利用。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細菌，因此，要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或微堿性，以利于細菌的生長繁殖。培養(yǎng)基配制的一般過程：1 .稱量按培養(yǎng)基配方依次準確稱取各成分于燒杯中。2 .溶化在上述燒杯中先加入少于所需要的水量，放石棉網(wǎng)上加熱，用玻棒攪勻，待藥品完全溶解后再補充水分到所需量。若配制固體培養(yǎng)基，將稱好的瓊脂加入已溶化的藥品中，再加熱融化。3 .調(diào)pH先用精密pH試紙測量培養(yǎng)基的原始pH值。若偏酸，可用滴

20、管逐滴加入10%NaOH,邊加邊攪拌，隨時用pH試紙檢測，直至pH達到所需范圍。若偏堿，則用10%HCl進行調(diào)節(jié)。pH值不要調(diào)過頭，以避免回調(diào)而影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子濃度。4 .分裝按實驗要求將配制好的培養(yǎng)基趁熱分裝于試管或三角瓶內(nèi)，不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。5 .加棉塞培養(yǎng)基分裝完畢，在試管口或三角瓶口塞上棉塞（或泡沫塑料塞及試管帽等），以防止外界微生物進人培養(yǎng)基內(nèi)造成污染，并保證有良好的通氣性能。6 .包扎加塞后在三角瓶或試管（試管須先扎成捆）雙層報紙，用一道繩扎好，以防滅菌時冷凝水沾濕棉塞。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱、組別、配制日期等。7 .滅菌將包扎好的培養(yǎng)基按各自

21、所需的滅菌時間和溫度進行高壓蒸汽滅菌或其他方法滅菌。如因特殊情況不能及時滅菌，則應放人冰箱內(nèi)作短期保存。8 .無菌檢查將滅菌培養(yǎng)基放人37c溫箱中培養(yǎng)2428h,以檢查滅菌是否徹底。滅菌是殺滅物體上所有微生物的過程。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細菌芽胞在內(nèi)的全部微生物。高溫蒸汽滅菌法屬于熱力滅菌中的濕熱法，是一種最有效的滅菌方法。它是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋（如右圖）內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生高溫蒸汽。該方法中滅菌的溫度取決于蒸氣的壓力。在一個大氣壓下，蒸氣的溫度是100C。如果蒸氣被限制在密閉的容器中，隨著壓力升高，蒸氣的溫度也相應升高。在1.05kg/cm2蒸氣

22、壓下，溫度達至ij121.3C,維持1530min,導致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。同一溫度下濕熱的滅菌效力、比干熱大得多，可殺滅包括細菌芽胞在內(nèi)的所有微生物。火焰滅菌直接用火焰灼燒滅菌，迅速徹底。對于接種環(huán)，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進行滅菌。此外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也采用通過火焰而達到滅菌的目的。超凈工作臺簡介：超凈工作臺是一種局部凈化設備，即利用空氣潔凈技術使一定操作區(qū)內(nèi)的空間達到相對的無塵、無菌狀態(tài)。一般用于細胞及微生物培養(yǎng)的接種過程。練習：1、細菌培養(yǎng)基常在121c壓力鍋中滅菌，如果只是在100c的溫度下將細菌培養(yǎng)基滅菌，以下哪一種生物仍會

23、存活A.大腸桿菌C.枯草芽抱桿菌2、不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。 生物營養(yǎng)的描述中，不正確的是A.氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素C.無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)B. 一種青霉D.沙門氏菌卜列有關一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微B.碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)D.水是該微生物的營養(yǎng)要素之一3、某組織培養(yǎng)實驗室的愈傷組織被真菌嚴重污染，為查找污染原因設計了4個實驗，實驗條件除圖示外共他均相同。下列各圖表示實驗結(jié)果，據(jù)圖可得出的初步結(jié)論是埼，普天時理府后舞體卻板滅鼻時閾片in培養(yǎng)幕聞將施用WA.污染主要不是培養(yǎng)基滅菌時間短造成的B.污染主要來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織C.調(diào)節(jié)培養(yǎng)基

24、pH不能解決污染問題D.調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問題4、氯苯化合物是重要的有機化工原料，因不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列 實驗方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物 SP1菌，培養(yǎng)基配方如表 1.米|*口凈域1號培升附口號培哪郎 川9喟抻工用】裊1培養(yǎng)基的綱成液林協(xié)養(yǎng)茶幽白殊牛肉片竄茸M化M葬館水【時1。席5g5呷5(1,IL口號*SOmg冤3?ILIII號*_一現(xiàn)遭坦IL(1)配制n號固體培養(yǎng)基時，除添加n號液體培養(yǎng)基成分外，還應添加1%的O(2)培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)PH的先后順序是。(3)從用途上來說，I號培養(yǎng)基和n號培養(yǎng)基分別屬于培養(yǎng)基和培養(yǎng)基。在n號培養(yǎng)基中，為SP1菌提

25、供氮源的成分是。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，SP1的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為2)。從(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的出號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線(如圖圖2可知SP1菌在培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是蠟時阿C)解析：本題主要考查微生物相關知識。尸_-掌SCmg/L箱索固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂；I號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株,配置培養(yǎng)基時應先調(diào)PH后滅菌；屬于通用培養(yǎng)基，n號培養(yǎng)基是為選擇出SP1菌株屬于選擇培養(yǎng)基，n號培養(yǎng)基成分中含N物質(zhì)為硝酸俊，則應由它為SP1菌株提供氮源;在惡劣環(huán)境下一些菌體會形成芽抱休眠體，來度過不良環(huán)境；SP1菌株是以氯苯為碳源，當氯

26、苯消耗盡菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生長。答案：(1)瓊脂(2)先調(diào)PH,后滅菌(3)通用選擇硝酸俊(4)芽抱(5) 20mg/L氯苯氯苯最早耗盡十九、微生物的接種以及菌落和抗生素抑菌現(xiàn)象的觀察材料選擇大腸桿菌、枯草桿菌、滕黃八疊球菌等細菌菌種及其懸液儀器和試劑接種環(huán)、無菌滴管、無菌玻璃刮鏟、鐐子、記號筆、直尺、酒精燈、牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基、分別浸過不同濃度抗生素和無菌水的圓紙片實驗方法一、接種和菌落觀察1 .將菌種和接種用具置于啟動的超凈工作臺上510min。2 .點燃酒精燈，打開菌種試管封口后將管口在火焰上燒一下，并將試管口置于火焰附近，然后灼燒接種

27、環(huán)，將接種環(huán)于菌種試管培養(yǎng)基無菌落處冷卻后刮取少許菌苔，將菌苔用劃線法涂布在牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基表面。注意轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，在三個方向上劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落(圖123)。3 .倒置培養(yǎng)皿，于37c下培養(yǎng)23d后觀察和比較各種細菌菌落的形態(tài)。二、抗生素對微生物的抑制作用1 .用三支無菌滴管分別吸取上述三種細菌的懸浮液12滴，滴于三個平板培養(yǎng)基表面，然后分別用三個無菌玻璃刮鏟涂勻。2 .用無菌鐐子將分別浸過不同濃度的某種抗生素和無菌水的圓紙片(瀝干的)均勻置于上述三個平板培養(yǎng)基表面(事先已在培養(yǎng)皿底部用記號筆做好記號)。3 .在37c恒溫箱中培養(yǎng)23d后，在培養(yǎng)皿底部用直尺測量

28、每個圓紙片周圍清晰區(qū)的寬度，并記錄。有超凈工作臺的學校，上述實驗在超凈工作臺上進行效果更好。常用的接種方法有以下幾種：1 .劃線法這是最常用的接種方法。即在固體培養(yǎng)基表面作來回直線形的移動，就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環(huán)，接種針等。2 .點接法，就是先倒好平板，讓其凝固，然后再將菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作來回左右的涂布，讓菌液均勻分布，就可長出單個的微生物的菌落。菌落介紹：菌落（colony）單個微生物在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖到一定程度形成肉眼可見有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞的群落。將分散的細胞或抱子接種到培養(yǎng)基上，在適宜條件，使其生長繁殖。由于細胞受到固體培養(yǎng)基表

29、面或深層的限制，子代菌體常以母細胞為中心聚集在一起，形成具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體。各種微生物在一定條件下形成的菌落特征（如大小、形狀、邊緣、表面、質(zhì)地、顏色等）具有一定的穩(wěn)定性，是衡量菌種純度、辨認和鑒定菌種的重要依據(jù)。菌落特征與微生物的菌體形態(tài)結(jié)構(gòu)特征密切相關。例如細菌、酵母菌不形成菌絲，其菌落僅生長在固體培養(yǎng)基表面，可用接種工具將其全部挑起，即與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密；而放線菌、霉菌的菌體大多分化為營養(yǎng)菌絲與繁殖菌絲，其營養(yǎng)菌絲深入培養(yǎng)基中吸取營養(yǎng)，故具有與培養(yǎng)基結(jié)合較緊，不易挑起等特征。抑菌圈測量介紹：抑菌圈測量是微生物分析的經(jīng)典方法。它是利用抑菌物質(zhì)在涂布特定試驗菌的瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)成球形立

30、體狀擴散，抑制試驗菌的繁殖，在抑菌物質(zhì)的周圍形成透明圈，即抑菌圈。抑菌圈越大說明該細菌對此抑菌物質(zhì)敏感性越大，反之越小。抑菌圈測量目前得到了廣泛應用，如：抗生素的效價測定；新藥的篩選；抑菌活性菌株的篩選；材料抗菌作用的研究；植物抑菌活性的篩選研究；抑菌保鮮作用的研究等等。小課題：用選擇培養(yǎng)基分離土壤中的自生固氮菌1.從土壤分離自生固氮菌的實驗步驟。(1)土壤取樣：通常從菜園土表35cm以下的土層中取土壤樣品。(2)土壤樣品稀釋：通常取土壤10g,放入無菌研缽中，注入無菌水5ml,并用無菌玻璃棒攪拌均勻，備用。上述過程在超凈臺上操作。(3)培養(yǎng)基配制：分離自生固氮茵的培養(yǎng)基，通常采用無氮培養(yǎng)基。

31、在這種培養(yǎng)基上，其他類型的微生物不能生長，而自生固氮菌能利用空氣中的N2作為氮源進行生長。阿什比無氮培養(yǎng)基成分：葡萄糖10g、磷酸二氫鉀0.2g、硫酸鎂0.2g、氯化鈉0.2g、硫酸鈣5g,蒸儲水1000ml,pH7.0。培養(yǎng)基加入1%瓊脂(需用自來水流水沖洗幾天，再用蒸儲水浸泡，洗滌幾次，以除去瓊脂中的氮)制成固體培養(yǎng)基，經(jīng)高壓滅菌后備用(方法見實驗1.2)。(4)接種方法：在超凈臺上，將接種環(huán)在火焰上滅菌后冷卻，蘸取少許上述稀釋液，輕輕地點在無氮培養(yǎng)基表面，共點接1520處；也可采用劃線法接種(方法見實驗1.3)。(5)培養(yǎng)：接種后，將培養(yǎng)皿倒置，放在2830c恒溫箱中培養(yǎng)3-4do注意：

32、培養(yǎng)時間不宜過長，否則菌落會分泌含氮化合物，引起雜菌生長。(6)觀察：觀察菌落的形狀、大小和顏色。(7)鏡中(選做)：取一片酒精消毒處理過的載玻片，烘烤后冷卻，在中央滴一滴無菌水；用滅過菌的接種環(huán)從單個茵落中挑取少許菌涂在水滴中央，加一滴結(jié)晶紫液(0.1g結(jié)晶紫溶解在100ml水中制得)染色1min；另取一片載玻片傾斜30°45°,從液滴左側(cè)向右側(cè)移動，然后自右向左推移，推出一層均勻的菌膜，制成臨時涂片；讓涂片自然干燥后，在高倍鏡下觀察，被染料染成紫色的細菌是自生固氮茵。自生固氮菌通常呈桿狀或短桿狀，周圍有莢膜，常常兩個細胞連在一起。(8)純化(選做)：在超凈工作臺上用滅過

33、菌的接種環(huán)挑取單個茵落，接種在阿什比無氮試管培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后冷藏在冰箱中保存。2 .小課題影響因素的設計3 1)土壤取樣：從不同深度土層取樣，如地表以下4cm、8cm；從不同的土壤取樣，如壤土、砂質(zhì)土。(2)土壤樣品稀釋度：土壤樣品10g,注入無菌水5ml、10ml。(3)接種方法：如點接法、劃線法。二、生物實驗涉及基本技術歸納1、玻片標本的制作(1壓片法，例如洋蔥根尖細胞的有絲分裂(2裝片法，例如高倍鏡下觀察質(zhì)壁分離和復原2、研磨、過濾，例如酶、色素等3、紙層析技術，例如葉綠素的分離等4、恒溫技術，例如酶參與的生化反應等5、解離技術，例如細胞壁的破環(huán)、有絲分裂裝片的制作等6、比色技術，例如

34、還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)含量的鑒定等7、最常見的經(jīng)典的實驗方法匯總?cè)缦?在各種實驗中常常用到A.化學物質(zhì)的檢測方法(1) 淀粉碘液(2) 還原性糖班氏試劑(3)CO2Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑(4)乳酸pH試紙(5)O2余燼木條復燃(6) 無O2火焰熄滅(7) 蛋白質(zhì)雙縮脲試劑(8) 染色體龍膽紫、醋酸洋紅溶液(9)脂肪一一蘇丹出B.實驗結(jié)果的顯示方法(詳見課件)(1)光合速率一一Q釋放量或CO吸收量或淀粉產(chǎn)生量(2)呼吸速率一一Q吸收量或CO釋放量或淀粉減少量(3) 原子途徑一一放射性同位素示蹤法(4) 細胞液濃度大小一一質(zhì)壁分離(5) 細胞是否死亡一一質(zhì)壁分離、亞甲基藍溶液染色(6) 甲狀

35、腺激素作用一一動物耗氧量，發(fā)育速度等(7) 生長激素作用一一生長速度(體重變化，身高變化(8) 胰島素作用一一動物活動狀態(tài)(9) 菌量一一菌落數(shù)或亞甲基藍溶液褪色程度(10) 大腸桿菌一一伊紅-美藍瓊脂培養(yǎng)基C.實驗條件的控制方法(詳見課件)(11) 1增加水中氧氣一一泵入空氣或吹氣或放入綠色植物(12) 2減少水中氧氣一一容器密封或油膜覆蓋或用涼開水(3)除去容器中CQ一一NaOH容液或KOH容液(13) 4除去葉片中原有淀粉一一至于黑暗環(huán)境一晝夜(14) 5除去葉片中葉綠素一一酒精加熱(15) 6除去光合作用對呼吸作用的干擾一一給植株遮光(16) 7如何得到單色光一一棱鏡色散或彩色薄膜濾光

36、(17) 8血液抗凝一一加入檸檬酸鈉(18) 9線粒體提取一一細胞勻漿離心(10)滅菌方法微生物培養(yǎng)的關鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酉精消毒；整個接種過程都在實驗室無菌區(qū)進行。D.實驗中控制溫度的方法(1)還原糖鑒定：加熱煮沸(2)酶促反應：水浴保溫(3)用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱(4)細胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)：恒溫培養(yǎng)三、生物學中常用的試劑和藥品1 .染料及染色劑(1)染料：按染色對象分為胞核染料(龍膽紫、醋酸洋紅)，脂肪染料(蘇丹出)等。(2)染色劑：染料溶解在溶劑中而成的溶液。如醋酸洋紅液

37、、龍膽紫溶液、亞甲基藍溶液(活體染色)、紅墨水等。2 .掌握幾種制劑的作用(1) 2,4-D生長素類似物：有雙重性，低濃度促進生長；高濃度抑制生長；培育無籽果實。(2)秋水仙素：a.誘發(fā)基因突變。b.使染色體加倍，培育多倍體。c.單倍體育種，培育純種。(3) 0.9%生理鹽水(維持紅細胞、口腔上皮細胞形態(tài))，10%KN由液(植物細胞質(zhì)壁分離和自動復原)，20%k酸溶液(對根尖解離)，丙酮、酒精(溶解色素)，層析液(分離色素)，龍膽紫溶液、醋酸洋紅液(根尖細胞染色體染色)，30滯糖溶液(植物細胞質(zhì)壁分離和復原)(4)紫外線：一定劑量可作為能量、保溫，高劑量可導致細胞基因突變。3、動手實驗和教材中

38、用到的或提到的試劑試劑用途結(jié)果碘液鑒定淀粉藍色班氏試劑鑒定可溶性還原糖1紅黃色雙縮月尿試劑鑒定蛋白質(zhì)紫色反應蘇丹出鑒定脂肪染成橘黃色班氏試劑測定尿糖紅黃色伊紅和美藍鑒別大腸桿菌菌落呈紫黑色醋酸洋紅溶液染色體著色染成紅色龍膽紫溶液染色體著色染成紫色秋水仙素人工誘導多倍體染色體加倍硫酸二乙酸人工誘變發(fā)生基因突變亞硝酸人工誘變發(fā)生基因突變泰乙酸生長素類似物2,4D生長素類似物聚乙二醇誘導動物細胞融合NaCl溶液溶解DNAHCl溶液和卡諾固定液解離、固定植物細胞FeCl3溶液催化劑（提供Fe+）NaO即口HCl溶液調(diào)節(jié)pHH2CO/NaHCO血液中的緩沖物質(zhì)NaHPO/NazHPO血液中的緩沖物質(zhì)Ca

39、CO防止葉綠體中色素破壞SiO2充分研磨葉片內(nèi)酮溶解葉綠體中色素層析液分離葉綠體中色素蔗糖溶液植物細胞質(zhì)壁分離實驗檸檬酸鈉血液抗凝劑瓊脂制作固態(tài)培養(yǎng)基酒精（95%溶解細胞中的某些物質(zhì)胰蛋白酶使動物細胞分散可溶性淀粉溶液和淀粉酶溶液加碘液溫度對酶活性影響的實驗牛肉膏、蛋白月東和NaCl、瓊脂制備培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)基高考生物實驗設計專題復習實驗設計題圖解一、實驗設計的題型1、設計實驗方案型：給出實驗用具、材料、藥品、實驗目的，或只給實驗目的，實驗器材自選，設計實驗方案。2、改錯型：分析已有實驗設計方案中不科學性，并提出改進。3、補充完善型：對已有的實驗設計進行補充和完善。4、分析原因型：對已有的實驗設

40、計方案的某些步驟、結(jié)果等進行分析。1、設計實驗型例：蠶豆染色體2N=12,其根尖在19c條件下，一個細胞周期所占的時間為19.3小時。為了證實煙草浸出液能引起真核細胞染色體結(jié)構(gòu)畸變，老師需要在課前制作植物根尖細胞臨時裝片進行觀察?，F(xiàn)有100粒正待萌發(fā)的蠶豆種子、實驗藥品及各種實驗器材，請你幫助老師完成上述實驗的課前準備。1)實驗原理：2)為了得到更多的蠶豆根尖材料，可以采取什么方法？3)主要的實驗步驟，第一步，第二步4)本實驗的材料在煙草浸出液中培養(yǎng)，至少要有培養(yǎng)小時，才可觀察到染色體畸變現(xiàn)象。2、改錯型例：為證明“唾液淀粉酶對淀粉有消化作用”，某同學制訂了下列實驗方案：(1)實驗目的(略)(

41、2)實驗材料和用具(略)(3) 實驗方法和步驟：取2支試管，編號為A和B,各注人2ml漿糊 用涼開水漱口后，用小燒杯收集唾液 向A試管內(nèi)加人2ml唾液 向2支試管中各滴加2滴碘液將2支試管振蕩后放在37c水中恒溫10min,同時取出2支試管，觀察試管內(nèi)溶液顏色的變化(4) 結(jié)論：唾液中含有淀粉酶能將淀粉分解成麥芽糖問：該實驗的方法和步驟以及結(jié)論有沒有錯誤？如果有請指出并改正。3、補充完善型例：光和葉綠體是光合作用的重要條件，淀粉是光合作用的主要產(chǎn)物。要驗證光合作用需要光和葉綠體，請根據(jù)提供的實驗材料和用具，補充完整實驗步驟和實驗結(jié)果，并分析回答有關問題：一.材料用具：銀邊天竺葵，黑紙板，白紙板

42、，吸管，適宜濃度的酒精，碘液，回形針，打孔器。二.方法步驟：第一步：第二步：將黑紙板用回形針夾在綠色部位上，然后把植株放在陽光下照射4-6h第三步：剪下此葉片，用打孔器分別在A,B,C部位各取幾個小圓片第四步：把取下的葉圓片放入裝有酒精溶液的試管中，熱水浴加熱，脫色，清水中漂洗第五步：將三種小圓片放在白紙板上，用吸管吸取碘液，分別滴在其上三.預期結(jié)果：A,B,C為驗證pH值對唾液淀粉酶活性的影響，實驗如下：(1)操作步驟：在15號試管中分別加入0.5%的淀粉液2ml;加完淀粉液后，向各試管中加入相應的緩沖液3.00ml,使各試管中反應液的pH值依次穩(wěn)定在5.00,6.20,6.80,7.40,

43、8.00;分別向15號試管中加入0.5%唾液1ml,然后進行37c恒溫水??；反應過程中，每隔1min從第3號試管中取出1滴反應液，滴在比色板上，加1滴碘液顯色，待呈橙黃色時，立即取出5支試管，加碘液顯色并比色，記錄結(jié)果。(2)結(jié)果見表12-1:表12-：實嗑結(jié)果記錄表試管編號處理12345FH5.CO6.206.807.40S,00結(jié)果(額包時+橙黃咆十+*""表示/色程度.請回答：(1)實驗過程為什么要選擇37c恒溫？(2)3號試管加碘液后出現(xiàn)橙黃色，說明什么？(3)如果反應速度過快，應當對唾液做怎樣的調(diào)整?(4)該實驗得出的結(jié)論是什么？二、實驗設計的基本方法1、明確實驗

44、目的和要求2、搞清實驗原理3、確定實驗思路4、設計實驗步驟5、觀察實驗現(xiàn)象、記錄數(shù)據(jù)6、預測實驗結(jié)果及分析7、實驗結(jié)論8、做出實驗評價三、實驗設計原則可操作性原則實驗設U-原則f物質(zhì)等最單T星原則底件相同設置對照原則平行重復性原則隨機性原則1、對照的原則（有對照組和實驗組）1）意義：有了“對照”可排除干擾因素，提高可信度2）教你一招：“編號”實驗處理會用“適量”一詞對照組會用“等量”一詞設置對照原則有比較才有鑒別，對照是實驗控制的手段之一，通過設置對照實驗，可以消除無關因子對結(jié)果的影響，證明實驗的客觀性，具有說服力和可信度。因而，一個實驗通常分：實驗組和對照組，分完組之后要注意編號。對照實驗的

45、類型1 .空白對照：指不做處理的對照組。2 .相互對照：指不另設對照組，而是幾個實驗組相互對比對照。如：在“植物胚芽鞘向光性”實驗中就運用到此對照原則。利用若干組燕麥胚芽的不同條件處理的實驗組之間的對照，說明了生長素與植物生長彎曲的關系。3 .自身對照：指實驗與對照在同一對象上進行，不另設對照組。如：“植物質(zhì)壁分離和復原實驗”就是典型的自身對照，關鍵是觀察實驗前后的動態(tài)變化。4 .條件對照：給實驗組某種處理，給對照組另一種條件的處理。例如“動物激素飼喂小動物”的實習實驗，采用等組實驗法，其實驗設計方案是:甲組：飼喂甲狀腺激素（實驗組）；乙組：飼喂甲狀腺抑制劑（條件對照組）；丙組：不飼喂藥劑（空

46、白對照組）；該實驗即設置了條件對照，又設置了空白對照，通過比較、對照、更能充分說明實驗變量甲狀腺激素有促進動物的生長發(fā)育。例題講解胰高血糖素對小白鼠和人具有相同的生理作用。為驗證“胰高血糖素具有升高血糖的生理作用”，請以小白鼠為實驗對象設計實驗步驟，預測和解釋實驗應出現(xiàn)的結(jié)果，寫出實驗結(jié)論。（一）實驗材料和用具：正常實驗小白鼠2只，生理鹽水，用生理鹽水配制的適宜濃度的胰高血糖素溶液，班氏試劑，注射器，試管，燒杯等。（二）實驗步驟：（實驗提示：采用腹腔注射給藥，給藥劑量不作實驗設計要求；給藥1小時后，用注射器在小鼠膀胱處穿刺取尿液。）（1）確定1只鼠為實驗鼠，腹腔注射胰高血糖素溶液；另一只鼠為對

47、照鼠，腹腔注射等量生理鹽水。（2）將兩支試管分別編號為1號和2號，各加入等量的班氏試劑。（3）給藥1小時后，對兩只小白鼠采尿液，實驗鼠尿液放入1號試管內(nèi)，對照鼠尿液放入2號試管內(nèi)。（4）將兩支試管搖勻后，放入盛有開水的燒杯內(nèi)加熱煮沸，觀察兩支試管溶液顏色的變化。（三）實驗結(jié)果的預測、解釋和結(jié)論：1 號試管中應該出現(xiàn)紅黃色沉淀，實驗鼠尿液中有葡萄糖；2號試管中仍為藍色溶液，表明對照鼠尿液中無葡萄糖。實驗結(jié)論：實驗鼠血糖升高，超過一定數(shù)值而出現(xiàn)糖尿，是胰高血糖素具有升高血糖的生理作用所引起的。2、單一變量的原則1）實驗變量、反應變量和無關變量2）只能進行單因子對比研究3）其余因子均需進行不變量控制，主要體現(xiàn)在實驗過程同條件控制4）同條件指：實驗組與對照組所